تحريض وتقييم الاكتئاب في الفئران من خلال التعرض للإجهاد المزمن

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. تحضير الفئران للإجراء التجريبي

} ملاحظة: بالنسبة للإجراء التجريبي ، تم اختيار الفئران الذكور السليمة C57BL / 6J الذين تتراوح أعمارهم بين 12 أسبوعا ، حيث يتراوح وزن كل فأر بين 18 و 22 جراما.

1. احتفظ بالفئران بشكل فردي في أقفاص في غرفة مختبرية نموذجية خالية من مسببات الأمراض المحددة (SPF) (22 ± 1 درجة مئوية ، 12 ساعة / 12 ساعة دورة الظلام / الضوء ، الرطوبة النسبية: 30-40٪) لمدة أسبوع واحد قبل إجراء CUMS.
2. قسم جميع الفئران بشكل عشوائي إلى مجموعة تحكم ومجموعة نموذجية وفقا لوزن أجسامها. كل مجموعة لديها 15 فأرا.
3. قبل بدء التجربة ، قم بترقيم الفئران في كل مجموعة على ذيلها باستخدام قلم تعليم.

2. تحريض الاكتئاب في الفئران

ملاحظة: للحث على الاكتئاب ، خضعت الفئران في المجموعة النموذجية ومجموعتين علاجيتين لإجهاد خفيف مزمن غير متوقع (CUMS) لمدة 21 يوما. يمكن تغيير الخطة وفقا للوضع العملي ، ولكن يجب اتباع مبدأ عدم إمكانية استخدام نفس الضغط بشكل مستمر.

1. قم بتعريض الفئران يوميا لأي اثنين من الضغوطات السبعة التالية لمدة 21 يوما متتاليا. تم تصميم خطة النمذجة الخاصة بنا على النحو التالي:
   1. يوم الاثنين ، قم بتعريض الفئران للحرمان من الطعام (أفرغ العلف من كل قفص لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا) والحرمان من الماء (قم بإزالة زجاجة الشرب من كل قفص لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا).
   2. يوم الثلاثاء ، قم بتعريض الفئران لضغط ضبط النفس (كبح جماح الفئران في حوض بلاستيكي صغير لمدة 3 ساعات ، من 8:00 صباحا إلى 11:00 صباحا) والأقفاص الفارغة (قم بإزالة الحشوة في كل قفص لمدة 11 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 19:00 مساء).
   3. يوم الأربعاء ، قم بتعريض الفئران لأقفاص رطبة ومتسخة (صب الماء في كل قفص واتركه رطبا لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا) والأقفاص المزدحمة (ضع خمسة فئران في قفص واحد لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا).
   4. يوم الخميس ، قم بتعريض الفئران لإجهاد ضبط النفس والسباحة المثلجة (أجبر كل فأر على السباحة في حوض مائي زجاجي شفاف مع الماء المثلج لمدة 5 دقائق).
   5. يوم الجمعة ، قم بتعريض الفئران لأقفاص مبللة ومتسخة والحرمان من الطعام.
   6. يوم السبت ، قم بتعريض الفئران لضغوط ضبط النفس والأقفاص المزدحمة.
   7. يوم الأحد ، قم بتعريض الفئران لأقفاص فارغة وسباحة مثلجة.
2. سجل حالة المعطف ووزن الجسم أسبوعيا حتى نهاية النمذجة (اليوم 21). احسب النتيجة الإجمالية لحالة المعطف كمجموع الدرجات من سبعة أجزاء مختلفة من الجسم: الرأس والرقبة والمعطف الظهري والمعطف البطني والكفوف الأمامية والذيل والكفوف الخلفية. تشير الدرجة الواحدة إلى معطف جيد الإعداد ، وتشير درجة الصفر إلى معطف غير مهذب.