$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
1. تحضير الفئران للإجراء التجريبي
} ملاحظة: بالنسبة للإجراء التجريبي ، تم اختيار الفئران الذكور السليمة C57BL / 6J الذين تتراوح أعمارهم بين 12 أسبوعا ، حيث يتراوح وزن كل فأر بين 18 و 22 جراما.
- احتفظ بالفئران بشكل فردي في أقفاص في غرفة مختبرية نموذجية خالية من مسببات الأمراض المحددة (SPF) (22 ± 1 درجة مئوية ، 12 ساعة / 12 ساعة دورة الظلام / الضوء ، الرطوبة النسبية: 30-40٪) لمدة أسبوع واحد قبل إجراء CUMS.
- قسم جميع الفئران بشكل عشوائي إلى مجموعة تحكم ومجموعة نموذجية وفقا لوزن أجسامها. كل مجموعة لديها 15 فأرا.
- قبل بدء التجربة ، قم بترقيم الفئران في كل مجموعة على ذيلها باستخدام قلم تعليم.
2. تحريض الاكتئاب في الفئران
ملاحظة: للحث على الاكتئاب ، خضعت الفئران في المجموعة النموذجية ومجموعتين علاجيتين لإجهاد خفيف مزمن غير متوقع (CUMS) لمدة 21 يوما. يمكن تغيير الخطة وفقا للوضع العملي ، ولكن يجب اتباع مبدأ عدم إمكانية استخدام نفس الضغط بشكل مستمر.
- قم بتعريض الفئران يوميا لأي اثنين من الضغوطات السبعة التالية لمدة 21 يوما متتاليا. تم تصميم خطة النمذجة الخاصة بنا على النحو التالي:
- يوم الاثنين ، قم بتعريض الفئران للحرمان من الطعام (أفرغ العلف من كل قفص لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا) والحرمان من الماء (قم بإزالة زجاجة الشرب من كل قفص لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا).
- يوم الثلاثاء ، قم بتعريض الفئران لضغط ضبط النفس (كبح جماح الفئران في حوض بلاستيكي صغير لمدة 3 ساعات ، من 8:00 صباحا إلى 11:00 صباحا) والأقفاص الفارغة (قم بإزالة الحشوة في كل قفص لمدة 11 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 19:00 مساء).
- يوم الأربعاء ، قم بتعريض الفئران لأقفاص رطبة ومتسخة (صب الماء في كل قفص واتركه رطبا لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا) والأقفاص المزدحمة (ضع خمسة فئران في قفص واحد لمدة 24 ساعة ، من 8:00 صباحا إلى 8:00 صباحا).
- يوم الخميس ، قم بتعريض الفئران لإجهاد ضبط النفس والسباحة المثلجة (أجبر كل فأر على السباحة في حوض مائي زجاجي شفاف مع الماء المثلج لمدة 5 دقائق).
- يوم الجمعة ، قم بتعريض الفئران لأقفاص مبللة ومتسخة والحرمان من الطعام.
- يوم السبت ، قم بتعريض الفئران لضغوط ضبط النفس والأقفاص المزدحمة.
- يوم الأحد ، قم بتعريض الفئران لأقفاص فارغة وسباحة مثلجة.
- سجل حالة المعطف ووزن الجسم أسبوعيا حتى نهاية النمذجة (اليوم 21). احسب النتيجة الإجمالية لحالة المعطف كمجموع الدرجات من سبعة أجزاء مختلفة من الجسم: الرأس والرقبة والمعطف الظهري والمعطف البطني والكفوف الأمامية والذيل والكفوف الخلفية. تشير الدرجة الواحدة إلى معطف جيد الإعداد ، وتشير درجة الصفر إلى معطف غير مهذب.