إحداث فقدان السمع في الفئران من خلال التعرض الطويل للصوت بكميات كبيرة

الملخص

المصدر: Lee, D. et. al., تعديل الظروف التجريبية لفقدان السمع الناجم عن الضوضاء في الفئران وتقييم وظيفة السمع وتلف خلايا الشعر الخارجية. J. Vis. Exp. (2023)

يوضح هذا الفيديو إجراء فقدان السمع الناجم عن الضوضاء في الفئران. يضر الصوت عالي الحجم بخلايا الشعر في الأذن الداخلية ويعطل المسارات السمعية ، مما يؤدي إلى ضعف السمع.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بالنماذج الحيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية في JoVE.

1. تحريض فقدان السمع الناجم عن الضوضاء (NIHL) في الفئران

1. 1. للقيام بذلك، استخدم قفص مصيدة الفئران بأبعاد 14 سم × 17 سم × 24 سم. قطع أربع قطع من الألواح البلاستيكية المموجة إلى أحجام مناسبة ، مما يجعلها مناسبة للقفص (13 سم × 23 سم و 13 سم × 16 سم).
   2. لمنع الفئران من قطع أقدامها بواسطة الشبكة الشبكية ، ضع قطعتين من القطع في الأسفل وعلى الجانب الخلفي ، على التوالي. ضع القطعتين الأخريين متشابكتين بشكل عمودي مع بعضهما البعض ، لتقسيم المساحة داخل القفص إلى أرباع.
2. قم بإجراء هذه الدراسة في صندوق عازل للصوت. ضع مكبر صوت 8.5 سم أمام القفص ، وضع كل من السماعة والقفص في صندوق عازل للصوت.
3. افتح برنامج تطبيق CLIO.
4. حرك المؤشر إلى أيقونة السماعة ، ثم انقر فوق TwoSin. أدخل وقم بتغيير قيمة Freq 1 إلى 1000 هرتز ، و Freq 2 إلى 6000 هرتز ، وانقر فوق OK لبدء تشغيل الصوت.
5. ضمن علامة التبويب Leq ، قم بتغيير ديسيبل فولت (dBV) إلى ديسيبل مستوى ضغط الصوت (dBSPL). بعد ضبط الوقت على واجهة البرنامج ، انقر فوق المثلث الأخضر زر لتشغيل الصوت.
6. ضع ميكروفونا أمام السماعة على مسافة 8.5 سم لمعايرة مستوى الضوضاء ( الشكل 1). اضبط مستوى الضوضاء على 125 ديسيبل SPL-A وراقب باستمرار لمدة لا تقل عن 3 دقائق للتأكد من أن مستوى الضوضاء مستقر بدرجة كافية. استخدم مولدا ومحللا ومضخما لإنشاء الضوضاء والتحكم فيها. ( الشكل 2 )
   ملاحظة: قم بهذه الخطوة في صندوق عازل للصوت لتجنب تلف سمع المشغل.
7. ضع أربعة ذكور من الفئران C57BL / 6J في القفص (واحد لكل ربع سنة) للتعرض للضوضاء. قم بتعيين الفئران بشكل عشوائي في كل ربع سنة أثناء التعرض للضوضاء. ضع ميكروفونا في الجزء العلوي من القفص لمراقبة مستوى الضوضاء أثناء التعرض للضوضاء ( الشكل 3).
   ملاحظة: قم بهذه الخطوة في صندوق عازل للصوت لتجنب تلف سمع المشغل.
8. قم بتعريض الفئران للضوضاء بترددات 1 كيلو هرتز و 6 كيلو هرتز بشكل مستمر لمدة 6 ساعات في اليوم ، لمدة 5 أيام متتالية.

النتائج

الشكل 1: حساب الجهد من المعايرة. لكل تردد محدد ، سيتم إدخال قيمة الجهد المحدد (المحور الأفقي) في منحنى المعايرة للحصول على مستوى الصوت المقابل (المحور الرأسي).

المواد

<فئة الشكل = نمط الجدول: "العرض: 463pt ؛ '><فئة الجدول = 'ck-table-resize'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 1/4" CCP Free-field Standard Microphone SetGRAS428158for exposure noise قفص مصيدة الفئران < td style = 'العرض: 99pt ؛ '> < td style = 'width: 98pt ؛ '> < td style = 'width: 140pt ؛ '> 14 cm x 17 cm x 24 cm < td style = 'height: 15.75pt ؛ width: 126pt ؛ '> مضخم الصوت ، MT-1000 < td style = 'العرض: 99pt ؛ '>unika < td style = 'width: 98pt ؛ '> for noise exposure مولد الصوت / محلل / متفرقات ، FW-02CLIO620300719for exposure noiseSoundproof chamberIEA Electro-Acoustic Technology for exposure noise and ABRSpeakerIEA Electro-Acoustic التكنولوجيا for noise