قياس استجابة جذع الدماغ السمعي في الفئران

الملخص

المصدر: Lee, D., et. al. الظروف التجريبية المعدلة لفقدان السمع الناجم عن الضوضاء في الفئران وتقييم وظيفة السمع وتلف خلايا الشعر الخارجية. J. Vis. Exp. (2023)

يوضح هذا الفيديو قياس استجابة جذع الدماغ السمعية (ABR) في الماوس. توضع الأقطاب الكهربائية على الرأس وخلف الأذن وبالقرب من ذيل الفأر المخدر. يتم تسليم المحفزات الصوتية بكثافة مختلفة ، ويتم تسجيل الإشارات الكهربائية المتولدة كأشكال موجية.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. التقييم القائم على الاستجابة السمعية لجذع الدماغ (ABR) لعتبة السمع

1. استخدم نظام اختبار ABR تجاري مصمم خصيصا للحيوانات الصغيرة.
2. حقن خليط من التيتيتامين والزولازيبام (40 ملغم/كغ) والزيلازين (9.3 ملغم/كغ) داخل الصفاق في الفئران للتخدير العام.
   ملاحظة: يستغرق تقييم ABR ~ 2 ساعة. تأكد من توفير الدعم الحراري عبر وسادة التدفئة ووضع مرهم العين لمنع الجفاف أثناء وجود الفأر تحت التخدير.
3. قم بقياس ABR في الفأر تحت التخدير العام. ضع أقطاب الإبرة تحت الجلد (12 مم) عند الرأس ، خلف صيوان الأذن اليسرى ، والعودة بالقرب من الذيل لقياس عتبة السمع.
4. قدم المحفزات الصوتية باستخدام مكبر صوت يوضع على بعد 1 سم من الأذن اليسرى للحيوان.
5. استخدم راسم الذبذبات للتحكم في المحفزات الصوتية. اختر موجة جيبية للمنبهات و 10 ك لمقياس النافذة. أدر مقبض التردد للحصول على التردد المطلوب للمنبهات الصوتية.
6. اضبط شدة التحفيز عن طريق تدوير مقبض السعة أو AMLP على مولد الوظيفة. احصل على شدة التحفيز المطلوبة عن طريق تدوير مقبض AMLP إلى جهد مناسب ، محسوب من المعايرة.
7. اجمع قياسات ABR تحت سلسلة من شدة التحفيز ، من 10 ديسيبل لمستوى ضغط الصوت SPL إلى 100 ديسيبل SPL ، بحجم خطوة 10 ديسيبل.
   ملاحظة: قم بقياس عتبة السمع في صندوق عازل للصوت. كان من المفترض أن يكون الحد الأدنى لمستوى شدة التحفيز الذي يمكن أن يؤدي إلى موجة V يمكن تمييزها في الإشارة المجمعة هو عتبة ABR ( الشكل 1 ). تقييم ما بعد ABR ، راقب حتى يتعافى من التخدير (~ 1 ساعة).

النتائج

الشكل 1: قياس ABR للسمع. نتائج ABR التمثيلية عند 12 كيلو هرتز ، تم جمعها في اليوم الثالث عشر (أسبوع واحد بعد التعرض للضوضاء). يتم تصنيف الموجة V عند كل شدة إذا كان من الممكن تمييزها.

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول' >< فئة الجدول = 'ck-table-resize'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات < td style = 'background-color: #ffffff ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ '> 1/4 " CCP Free-field Standard Microphone Set < td style = 'background-color: #ffffff ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ '>GRAS< td style='لون الخلفية:#ffffff;الحشو:0px 3px;vertical-align:bottom;'>428158for noise exposure وحدة إدخال مكبر الصوت، AMI100DBIOPAC for hear listeny stemstem brainBio-amplifier, BIO100CBIOPAC for listening listening brain stemy)مضخم الاستجابة المستحث ERS100CBIOPAC for listening listening brain stemy-high performance data acquisition system, MP160BIOPACfor heard stem brain responseModular Extension Cable, MEC110CBIOPAC إبرة كهربائية ، أحادية القطب 12 مم TP ، EL452 < نمط = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> BIOPAC < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ > < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> لاستجابة جذع الدماغ السمعية < td style='background-color:#ffffff;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'>ROMPUN- حقن الزيلازين, محلولBayer HealthCare, LLC مضخم الصوت ، MT-1000 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '>unika < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشوة: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> للتعرض للضوضاء < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> مولد الصوت / محلل / متفرقات ، FW-02CLIO620300719for exposure noise Sound InsulationIEA Electro-Acoustic Technology for exposure noise and ABRSpeaker نمط < td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> للتعرض للضوضاء < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> وحدة المحفز ، STM100C < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> BIOPAC< td style='background-color:#ffffff;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> for listening listening brain stemyTubephone Set, OUT101BIOPAC< td style='background-color: #ffffff;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> for listening listening brain stemyZoletilVirbac< td style='background-color:#ffffff;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'>