إجراء بضع الكسس على العصب الوجهي في نموذج الفأر

الملخص

المصدر: أولمستيد ، دي إن ، وآخرون ، شق العصب الوجهي في الفئران: نموذج لدراسة استجابة الخلايا العصبية الحركية للإصابة. J. Vis. Exp. (2015).

يوضح هذا الفيديو إجراء سحق العصب الوجهي في الفأر ، حيث يكشف التشريح الحاد من خلال المعالم الرئيسية عن جذع العصب الوجهي في الثقبة الورم المستقر. ثم يتم استخدام الملقط لضغط جذع العصب ، مما يؤدي إلى تلف محوري وتعطيل نقل الإشارات العصبية.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بالنماذج الحيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية في JoVE.

1. النهج الجراحي

1. محاذاة المجسم وتركيزه مع المجال الجراحي. اضبط مخروط الأنف وقم بلصقه لأسفل بحيث يتم وضعه على طول حافة المجال البصري.
2. مع استلقاء الفأر على جانبه الأيسر ، قم بلصق حافة الأذن اليمنى على مخروط الأنف ، مما يكشف المنطقة خلف الأذن حيث سيتم إجراء الشق. تأكد من أن الوريد الأذني الخلفي ينتقل أفقيا عبر الأذن. لاحظ أن الوضع الصحيح للحيوان وتسجيل الأذن أمران حاسمان من أجل العثور على العصب الوجهي بسرعة.
3. بلل الفراء على الأذن وخلفها بنسبة 70٪ من الإيثانول واحلق موقع الجراحة باستخدام شفرة حلاقة أو مشرط. ترطيب الفراء مسبقا يجعل الحلاقة أسهل في هذا الموقع التشريحي.
4. نظف الجلد بمحلول اليود ، مثل مقشر البيتادين الجراحي (7.5٪ بوفيدون اليود) ، متبوعا بنسبة 70٪ إيثانول. كرر هذا التنظيف مرتين أخريين لتطهير المنطقة تماما.
5. لتحديد مكان إجراء الشق ، تتبع الوريد الأذني الخلفي من الأذن الذيلية إلى المنطقة الخلفية لنتوء الأذن. باستخدام مقص زنبركي ، قم بعمل شق 4 مم 2-3 مم خلف النتوء.
6. قم بتشريح الدهون تحت الجلد واللفافة باستخدام تشريح حاد. تجنب القطع المباشر بالمقص لأن الأوعية الدموية أو الأنسجة العضلية يمكن أن تتلف بسهولة.
7. في حالة حدوث نزيف ، اضغط على موقع الجراحة باستخدام قطعة قطن معقمة لمدة 30 ثانية على الأقل. في حالة حدوث فقدان كبير للسوائل ، قم بحقن الفأر داخل الصفاق بما يصل إلى 0.5 مل من محلول ملحي معقم 0.9٪ باستخدام إبرة 25 أو 27 جرام.
8. استخدم العديد من المعالم الرئيسية ، العصب الإضافي للعمود الفقري ، وقناة الأذن ، والعضلة الدخمس الأمامية (الموضحة أدناه) ، لتحديد موقع العصب الوجهي. قم بتشريح هذه المعالم حتى يتم تصور فروع العصب الوجهي. سيظهر العصب كبنية بيضاء صلبة كبيرة عند الكشف عنه ، وتلتصق به طبقة من اللفافة بالهياكل الأساسية.
   1. ابحث عن العصب الإضافي الشوكي ، الذي ينتقل من الجزء الذيلي من الجمجمة لتعصيب العضلة شبه المنحرفة بمجرد تشريح الدهون تحت الجلد واللفافة. العصب الوجهي عميق إلى العصب الملحق الشوكي.
   2. ابحث عن قناة الأذن الغضروفية التي تبدو بيضاء لؤلؤية ويمكن رؤيتها منقارية للعصب الوجهي.
   3. ابحث عن بطن عضلة العضلة الأمامية في العضلة الدائية التي تقع فوق العصب الوجهي والذيلية إليه.
9. عندما يتم تصور الفروع الرئيسية للعصب الوجهي ، تتبعها ظهريا للعثور على أصلها من الثقبة القارية. باستخدام ملقط دومون ذو الرؤوس الدقيقة # 5/45 لإبقاء موقع الجراحة مفتوحا ، قم بدفع أطراف المقص الزنبركي باتباع مسار العصب ، ثم حرك الملقط ظهريا لإبقاء المنطقة المتقدمة حديثا مفتوحة.
10. تخيل جذع العصب الوجهي مع فروع الفك السفلي الوجنية والشدقية والهامشية في هذه المرحلة.
    ملاحظة: سيتم العثور على الفرع الصدغي بالقرب من الثقبة يتفرع العصب الهامشي للفك السفلي إلى الأجزاء العلوية والسفلية الأقرب إلى الفك ، وبالتالي لن تكون تلك الفروع العصبية مرئية في هذا المستوى.
    1. في حالة حدوث إصابة سحق ، استخدم ملقط Dumont # 5/45 لضغط العصب لمدة 30 ثانية باستخدام ضغط مستمر لقطع جميع المحاور ، ثم كرر هذا السحق بزاوية ثانية عمودية على موقع التكسير الأول. تجنب تطبيق كميات متغيرة من الضغط أثناء السحق لمدة 30 ثانية ، وإلا فإن الإصابة ستكون غير متسقة بين.

المواد

< فئة الشكل = نمط "الجدول" = 'العرض: 583pt;'>< td style='width:122pt ؛ '>Fisher Scientific < td style = 'width: 117pt ؛ '> 15-952 < td style = 'width: 151pt ؛ '> < td style = 'height: 46.5pt ؛ width: 193pt ؛ '> Vannas-Tübingen Spring Scissors - مستقيم / حاد / 8.5 سم / 5 مم حافة القطع < نمط td = 'العرض: 122pt ؛ '> أدوات العلوم الدقيقة < td style = 'العرض: 117pt ؛ '> 15003-08 < td style = 'width: 151pt ؛ '> التعقيم قبل الاستخدام< td style = 'الارتفاع: 31.0pt ؛ العرض: 193pt ؛ '>Dumont # 5/45 ملقط - قياسي نصائح / بزاوية 45 درجة / دوموكسل / 11 سم < نمط TD = 'العرض: 122pt;'>Fine Science Tools

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
Stereo Microscope	Leica	M60
Labeling Tape
11251-35	Sterilize before use
0.9٪ حقن كلوريد الصوديوم, USP	Hospira	0409-4888-10
Betadine, 16 oz, with dispenser	Fisher Scientific	19-027132
70٪ Ethanol
Glass Bead Sterilizer