وقد تم تصميم مفاعل حيوي قادر على الضغط دوري تعريض أنسجة القلب صمام ضغط الظروف الفسيولوجية والمرضية. برنامج يتيح للمستخدمين ابفيو (LabVIEW) للسيطرة على ضغط حجم والسعة والتردد. ويمكن استخدام هذا الجهاز لدراسة mechanobiology من نسيج صمام القلب او خلايا معزولة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
تصميم مفاعل حيوي لضغط الدوري السابقين فيفو دراسة صمامات القلب الأورطي
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الصمام الأبهري ، وتقع بين البطين الأيسر والشريان الأورطي ، ويسمح لتدفق الدم أحادي الاتجاه ، ومنع ارتجاعي في البطين. وتتألف منشورات صمام الشريان الأبهر من الخلايا الخلالي علقت داخل المصفوفة خارج الخلية (ECM) وتصطف مع الخلايا البطانية أحادي الطبقة. صمام يقاوم قاسية ، بيئة دينامية ويتعرض باستمرار إلى القص ، والانحناء ، والتوتر والضغط. وقد أظهرت الأبحاث الآفات كلسي في الصمامات المريضة تحدث في مناطق التوتر ميكانيكية عالية نتيجة لتعطل أو البطانية الخلالي مصفوفة الضرر 1-3. وبالتالي ، فإنه ليس من المستغرب أن الدراسات الوبائية أظهرت ارتفاع ضغط الدم ليكون عامل خطر رئيسي في ظهور مرض الصمام الأبهر 4.
خيار العلاج الوحيد المتاح حاليا للمرض هو استبدال صمام جراحية لمريضة مع صمام صمام bioprosthetic أو ميكانيكية 5. وتحسين فهم البيولوجيا صمام استجابة للضغوط المادية تساعد في الكشف عن آليات المرضية صمام. في المقابل ، يمكن أن يساعد ذلك في تطوير علاجات غير الغازية مثل التدخل الصيدلانية أو الوقائية. وقد تم تطويره من قبل العديد من المفاعلات الحيوية لدراسة mechanobiology من صمامات القلب الأصلي أو هندسيا 6-9. كما تم تطوير المفاعلات الحيوية نابض لدراسة مجموعة من الأنسجة بما في ذلك الغضروف 10 ، 11 العظام والمثانة 12. كان الهدف من هذا العمل لوضع نظام دوري الضغط التي يمكن استخدامها لتوضيح الاستجابة البيولوجية منشورات صمام الشريان الأبهر للأحمال زيادة الضغط.
يتألف النظام من غرفة الاكريليك التي ترغب في وضع العينات وانتاج ضغط الدوري ، والصمامات اللولبي VITON الحجاب الحاجز للسيطرة على توقيت دورة الضغط وجهاز كمبيوتر للتحكم في الأجهزة الكهربائية. تم رصد الضغط باستخدام محول الضغط ، وكانت مشروطة الإشارة باستخدام مكيفات تحميل الخلية. برنامج ابفيو (LabVIEW) ينظم الضغط باستخدام جهاز تمثيلي على ضخ الهواء المضغوط في النظام بسعر مناسب. تحاكي النظام الحيوي مستويات ضغط transvalvular المرتبطة صمام الشريان الأبهر ، وشهدت موجة الأسنان تنتج زيادة تدريجية في الضغط ، نموذجية من التدرج الضغط transvalvular التي موجود في جميع أنحاء صمام أثناء انبساط ، تليها انخفاض ضغط حاد في تصور فتح صمام انقباضة. يسمح البرنامج للمستخدمين ابفيو (LabVIEW) للتحكم في حجم وتواتر الضغط بصفة دورية. كان النظام قادرا على إخضاع عينات الأنسجة لظروف الضغط والفيزيولوجية المرضية. ويمكن استخدام هذا الجهاز لزيادة فهمنا لكيفية صمامات القلب الاستجابة للتغيرات في البيئة المحلية الميكانيكية.
البروتوكول
1. حصاد الأنسجة والتحضير
- وينبغي جمع صمامات الأبهر من الخنازير البالغين وزنها لا يزيد عن 120 £ على الفور بعد الموت.
- غسل الصمامات مرتين مع الفوسفات العقيمة مخزنة المالحة (PBS) والنقل إلى المختبر على الجليد.
- يجب أن يتم تنفيذ جميع الخطوات اللاحقة في ظل ظروف معقمة.
- تأكد من أن المنشورات لا تظهر أي علامة على انحطاط ، وتمزيق أو التكلس. إزالة المناشير من جذر الأبهر عن طريق قطع 1 / 3 من المسافة من الح....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ويتعرض نظام الضغط بنجاح منشورات صمام الشريان الأبهر للضغوط التي كانت ممثلة دوري للضغط الانبساطي transvalvular. ومع ذلك ، فإنه لم يكن قادرا على محاكاة الضغط الانقباضي transvalvular ، كما انخفض ضغط فقط إلى 40 مم زئبق. الضغط Transvalvular هو الفرق بين الضغط في الأبهر الصاعد والبطين الأيسر. أثناء انبساط ، وعندما يتم إغلاق صمام ، والفرق هو الضغط 80mmHg في ظل ظروف وnormotensive زئبق 90 و 100mmHg في المرحلة الأولى والمرحلة الثانية ارتفاع ضغط الدم ، على التوالي. أثناء انقباض ، عندما صمام .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
المؤلفون ممتنون لSchipke شاد وChesser دانيال لمساعدتهم في تصميم وتصنيع هذا النظام ومايلز Valtresa للمساعدة في إعداد مخطوطة.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| اسم كاشف | شركة | فهرس العدد | تعليقات (اختياري) |
| DMEM | سيغما | D5671 | |
| Dulbecco في برنامج تلفزيوني | سيغما | D5652 | |
| Anti-mycotic/antibiotic الحل | سيغما | A5955 | |
| المصل البقري الجنين | ThermoScientific | SH30070 | |
| VITON الصمامات غشاء الملف اللولبي | ماكماستر كار | 4868K11 | |
| محول الضغط | اوميغا الهندسية ، وشركة | PX302 - 200GV | |
| تحميل خلية مكيف | الظهور الالكترونيات ، وشركة | 4025-101 | |
| الحصول على البيانات (دق) وحدة | قياس الحوسبة | PMD1608 |
المراجع
- Freeman, R. V., Otto, C. M. Spectrum of calcific aortic valve disease: pathogenesis, disease progression, and treatment strategies. Circulation. 111, 3316-3326 (2005).
- Robicsek, F., Thubrikar, M. J., Fokin, A. A.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
