حيوية قبل المشبكي الدوبامين في الدماغ العقدة المخططة مع شرائح Voltammetry دائرى سريع التفحص

ملخص

مسح سريع باستخدام voltammetry دوري لقياس أثار كهربائيا ديناميات الدوبامين في الدماغ قبل المشبكي في شرائح الجسم المخطط.

الملخص

وقد تركزت أبحاث مستفيضة حول الدوبامين ناقل عصبي نظرا لأهميته في آلية عمل لتعاطي المخدرات (الكوكايين والأمفيتامين مثلا) ، والدور الذي تلعبه في الأمراض النفسية (مثل الفصام واضطراب نقص الانتباه فرط النشاط) ، ومشاركتها في التنكسية اضطرابات مثل مرض باركنسون ومرض هنتنغتون. في ظل الظروف الفسيولوجية الطبيعية ، ويعرف الدوبامين لتنظيم النشاط الحركي ، والإدراك ، والتعلم ، وتؤثر العاطفي ، والغدد الصم العصبية إفراز الهرمونات. واحدة من أكبر كثافة من الخلايا العصبية الدوبامين هو ضمن المخطط ، والتي يمكن تقسيمها في المنطقتين تشريحي عصبي متميزة تعرف باسم النواة المتكئة وputamen المذنبة. الهدف هو توضيح بروتوكول عام لشريحة voltammetry دوري سريع الفحص (FSCV) ضمن المخطط الماوس. FSCV هي تقنية كهربائية محددة جيدا وإتاحة الفرصة لقياس امتصاص الدوبامين والافراج في الوقت الحقيقي في دiscrete مناطق الدماغ. وتستخدم ألياف الكربون microelectrodes (قطرها ميكرون 7 ~) في FSCV للكشف عن الأكسدة الدوبامين. ميزة استخدام FSCV التحليلية للكشف عن الدوبامين هو قرارها الزمنية معززة من 100 ميلي ثانية ، والقرار المكاني لأقل من عشرة ميكرون ، وتوفير معلومات تكميلية لmicrodialysis في الجسم الحي.

البروتوكول

1. التجريبية الضروريات

القطب التصنيع

• هناك العديد من طرق تصنيع ألياف الكربون microelectrodes مصنوعة منذ أكثر في المنزل. عادة ما تملي تفاصيل تلفيق الكهربائي هو الأسلوب الكهروكيميائية التي يتم تطبيقها على القطب (مثل amperometry مقابل FSCV). لFSCV ، يمكن إجراء microelectrodes في المنزل باستخدام ما يلي ثلاث خطوات الإجراء. للحصول على وصف أكثر اكتمالا لتصنيع ألياف الكربون القطب ، راجع مقالة إن الرب الاخيرة ^1. ومع ذلك ، نلاحظ أن أقطاب المبينة أدناه هي اسطوا....

المناقشة

بروتوكول المعروضة هنا يوضح كيفية إعداد واستخدام شرائح دماغ الفأر الاكليلية للتجارب FSCV. على الرغم من أن هذا الأسلوب هو الحصول على ومحددة لقياس ديناميكية الدوبامين ، الناقلات العصبية الأخرى مثل الأدينوزين ، وقد تم رصد بيروكسيد الهيدروجين ، بافراز ، والسيروتونين في الجسم الحي أو في المختبر مع FSCV ^{3 ، 8 -- 11.} ويمكن استخدام FSCV لرصد بعض هذه neurochemicals غيرها من التعديلات البسيطة للالموجي تطبيقها على مسرى العمل ^{3 و 11.} لأن العديد من هذه ال.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
اسم	شركة	عدد CAS
الكاشف
كلوريد البوتاسيوم	الصياد	7447407
كلوريد الصوديوم	EMD كيماويات	7647145
كلوريد المغنيسيوم	الصياد	7791186
كلوريد الكالسيوم	الصياد	10035048
بيكربونات الصوديوم	EMD كيماويات	144558
فوسفات الصوديوم ، ثنائي القاعدة	EMD الكيميائيةق	7558794
D - غلوكوز	الصياد	50997
حمض الاسكوربيك	الصياد	50817
السكروز	الصياد	57501
المواد	بائع	فهرس العدد
ألياف الكربون	Goodfellow أكدل ، والسلطة الفلسطينية
الزجاج الشعرية	نظم AM Carlsborg WA.	602000
أسلاك الفضة	A -م نظم Carlsborg WA.	787000
التنغستن القطب حفز	البلاستيك واحد ، رونوك ، VA
سلك البلاتين
تؤدي الأسلاك	سكوايرز إلكترونيات ، كورنيليوس ، OR
وكتايت اصقة الفورية 404	Hankal شركة روكي هيل CT.
موس	العالم الآلات الدقيقة شركة فلوريدا.
دينار بحريني العمود الفقري إبرة	أنظمة الطبية دينار بحريني ، Franlin بحيرة ، NJ	REF 405234
بليد الجراحية	ريشة السلامة الشائكة المحدودة. اليابان
البرنامج	بائع	فهرس العدد
TH البرمجيات	وكالة الفضاء الأوروبية ، وشركة تشيلمسفورد ، MA
صك	بائع	فهرس العدد
غمر غرفة تسجيل	عرف العلم ، ودنفر ، أول أكسيد الكربون
Neorolog التحفيز المعزل	Digitmeter ، هيرتفوردشاير ، إنجلترا
درجة الحرارة التلقائي تحكم	شركة وارنر الصك
مجهر (SZX7)	اوليمبوس
مجهر	الصياد
Vibratome نظام sectioning 3000	سانت لوهو ، MO.
مضخة نضح	مارلو واتسون المحدودة ، فالماوث كورنوال -- إنجلترا	H110708
Micropipette مجتذب	Narishige ، طوكيو ، اليابان
ChemClamp potentiostat	الشركات داغان ، مينيابوليس ، مينيسوتا.