يوصف قياس ضغط البطين الأيسر (LV) في الفئران الجنينية وحديثي الولادة. ويتم قياس الضغط عن طريق إدخال إبرة متصلة بجهاز محول مملوءة بسائل في LV تحت توجيه الموجات فوق الصوتية. يجب توخي الحذر للحفاظ على وظيفة القلب الطبيعي خلال بروتوكول تجريبي.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
قياس ضغط البطين الأيسر في وقت متأخر من الفئران الجنينية وحديثي الولادة
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
ضغط الدم يزيد بشكل كبير خلال التطور الجنيني وبعد الولادة في الحيوانات الفقارية. في الماوس، وتدفق الدم للكشف الأولى حول يوم الجنينية (E) 8.5 1. الانقباضي البطين الأيسر (LV) الضغط هو 2 مم زئبق في E9.5 و 11 مم زئبق في E14.5 2. في هذه المراحل منتصف الجنينية، والوقف غير واضحة للعيان من خلال جدار الصدر لقياس ضغط الغازية لأنه لم يتم الأضلاع والجلد وضعت تماما. يجب أن بين E14.5 والولادة (E21 تقريبا) يمكن استخدام أساليب التصوير لعرض LV. بعد الولادة، يعني زيادة الضغط الشرياني 30 حتي 70 مم زئبق من يوم بعد الولادة (P) 2 - 35 3. وراء P20، يمكن قياس الضغط الشرياني مع الحالة الصلبة القسطرة (أي ميلر أو Scisense). يجب أن تقاس قبل P20، وهذه القسطرة هي كبيرة جدا لتطوير الشرايين الماوس والضغط الشرياني مع العرف سحب القسطرة من البلاستيك تعلق على محولات ضغط السائل مملوءة 3 أو زجاج ATT بال micropipettesآلم إلى مضاعفات محولات الضغط باطل 4.
وقد أظهرت عملنا مؤخرا أن أكبر زيادة في ضغط الدم يحدث أثناء الجنينية في وقت متأخر لفترة ما بعد الولادة في وقت مبكر من الفئران 5-7. قد يكون هذا زيادة كبيرة في ضغط الدم تؤثر على العضلات الملساء الخلية (SMC) النمط الظاهري في الشرايين النامية، وتؤدي إلى أحداث mechanotransduction مهم. في الأمراض التي تصيب البشر، حيث يتم المساس الخواص الميكانيكية للشرايين النامية عن عيوب في البروتينات المصفوفة خارج الخلية (متلازمة أي مارفان (8) والتضيق فوق الصمام الأبهري 9) يجوز للتغيرات السريعة في ضغط الدم خلال هذه الفترة يسهم في النمط الظاهري المرض وشدة من خلال تعديلات في mechanotransduction الإشارات. ولذلك، فمن المهم أن تكون قادرا على قياس التغيرات في ضغط الدم خلال فترات الجنينية في وقت متأخر وحديثي الولادة في نماذج الماوس من الأمراض التي تصيب البشر.
ونحن تصف طريقة لقياس الضغط المنخفض في أواخرالجنينية (E18) في وقت مبكر وبعد الولادة (P1 - 20) الفئران. يتم إدخال إبرة تعلق على تحويل طاقة الضغط مملوءة بسائل في LV تحت توجيه الموجات فوق الصوتية. والحرص على الحفاظ على وظيفة القلب الطبيعي خلال بروتوكول تجريبي، وخاصة بالنسبة للفئران جنينية. يتم تقديم بيانات تمثيلية وتناقش قيود البروتوكول.
البروتوكول
1. الموجات فوق الصوتية ونظام الضغط
- بدء تشغيل نظام الموجات فوق الصوتية وفقا للتعليمات الشركات المصنعة (VEVO 770، Visualsonics). شغل التحقيق المناسب (سن E18 - P7 = نموذج 708، عمر> P7 = نموذج 707B) مع الماء المقطر والاتصال إلى نظام الموجات فوق الصوتية. تضع لجنة التحقيق في موقف قابل للتعديل في اتجاه تقريبي اللازمة للحصول على فترة طويلة محور LV العرض للحصول على الفأر التي شنت على منصة التصوير بحيث يتم أشار قمة LV نحو الذراع حقن.
- نظام الضغط تتكون من محول الضغط مملوءة بسائل، مكبر للصوت الجسر، وبي....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
بروتوكول المقدمة هنا يوفر طريقة لقياس الضغط المنخفض في أواخر الجنينية والفئران حديثي الولادة في وقت مبكر. القيد الرئيسي من هذا البروتوكول هو القرار الزمني للنظام الضغط. وثبط إشارة ضغط لأنها تنتقل من الوقف من خلال إبرة في محول، ويعني فقط يمكن تسجيل قيم الضغط. يمكن تصغير التخميد باستخدام إبرة أكبر ممكن، ولكن يجب أن إبرة تدخل ضمن التجويف LV عن الفئران الذين تتراوح أعمارهم مختلفة. إذ لا يمكن أن يقترب من الضغط الانبساطي كما صفر، ويمكن حساب الوقف والشرايين وبالتالي ضغط الدم الانقباضي من.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
وقد تم تمويل هذا العمل، في جزء منه، من خلال منح المعاهد الوطنية للصحة وHL087653 HL105314. وقد وضعت بعض من الأساليب في مختبر الدكتور روبرت Mecham في كلية الطب بجامعة واشنطن.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| اسم كاشف / معدات | شركة | فهرس العدد | تعليقات |
| ارتفاع نظام قرار الموجات فوق الصوتية | Visualsonics | VEVO 770 | أو غيرها من نظام الموجات فوق الصوتية المناسبة |
| ارتفاع وتيرة تحقيقات بالموجات فوق الصوتية | Visualsonics | 708 و 707B | |
| منصة التصوير وحقن ذراع | Visualsonics | التصوير ستيشن 2 | مع تخطيط القلب، والتحكم في درجة الحرارة ردود الفعل من منصة |
| محول الضغط | م الآلات | MLT 844 | |
| جسر مكبر للصوت | م الآلات | ML221 | |
| نظام الحصول على البيانات | م الآلات | ML866 | |
| بيانات تسجيل البرامج | م الآلات | LabChart | |
| حلقة الوقوف والمشبك | مختلف الموردين | لعقد محول ضغط خلال القياسات | |
| 3 في اتجاه والصمامات مع وصلات luer، قفل الذكور | كول Parmer | 30600-02 | |
| 1/16 "أنابيب Tygon معرف | كول Parmer | 06408 | |
| من الذكور والإناث ورس ث / 1/16 شوكة خرطوم " | كول Parmer | 45510-50 45510-00 | |
| 24 "أنابيب مع luer من الذكور والإناث في كل نهاية | كول Parmer | 30600-60 | |
| 3 و 10 مل الحقن | العلوم البيولوجية دينار بحريني | ||
| 30 و 25G الإبر | العلوم البيولوجية دينار بحريني | 1.5 بوصة في الطول | |
| بيغ بن مقياس ضغط الدم | رايستر | 1456-100 | |
| ملحي | مختلف الموردين | ||
| الهيبارين | مختلف الموردين | ||
| الموجات فوق الصوتية هلام | باركر | Aquasonic 100 | |
| مزيل الشعر لوسيون | ناير |
المراجع
- Ji, R. P. Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper. Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).
- Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
