$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. الشرح الصحيح من ITS2 تسلسل
- الوصول إلى قاعدة البيانات نسالة ITS2 طاولة العمل هنا: http://its2.bioapps.biozentrum.uni-wuerzburg.de
- يبدأ تحليل بالضغط على "علق" رمز في المقطع "أدوات". ثم اكتب أو لصق التسلسل الخاص بك في المحرر تسلسل في الجزء العلوي من الموقع. المحرر تسلسل يتحقق تلقائيا، سواء متواليات الخاص ITS2 صالحة.
- اختيار نموذج HMM مناسبة لمتواليات الخاص بك (على سبيل المثال Viridiplantae للنباتات).
- بدء عملية بالنقر على "علق".
- بواسطة تحوم فوق رمز "هجن" يمكنك عرض صورة لل5.8S و28S هجين الريباسي تأكيدا من دقة هذا الشرح HMM ل.
- انقر على علامة زائد الخضراء من تسلسل ITS2 الناتج لتحديد طريقك من التنبؤ بنية ثانوية: لتوقع هيكل دون templat معروفه، انقر على "توقع هيكل". إذا كنت ترغب في استخدام قالب خاص بك لنمذجة التماثل، انقر على زر "هيكل النموذجي."
2. الثانوية الهيكل التنبؤ
- التنبؤ
- يتم لصق تلقائيا تسلسل ITS2 المشروح في المحرر تسلسل.
- لبدء التنبؤ هيكل ثانوي مع الإعدادات الافتراضية، انقر على "توقع هياكل" الزر.
- حفظ التسلسل ITS2 الناتجة بما في ذلك هيكل الثانوي على غرار إلى تجمع البيانات من خلال النقر على علامة زائد الخضراء ومن ثم "إضافة إلى حوض السباحة". بدلا من ذلك، يمكنك إضافته إلى تجمع البيانات الخاصة بك عن طريق السحب والإسقاط (الشكل 1).
- إذا كان تسلسل لا يمكن طيها مباشرة، وتظهر على أفضل النتائج من النماذج التماثل. حفظ مناسبة معظم تسلسل هيكل خلال السحب والإفلات إلى تجمع البيانات. بدلا من ذلك، حفظ تسلسل هيكل إلى تجمع البيانات بنقرة واليمين ومن ثم النقر على "إضافة إلى حوض السباحة".
- عرف النمذجة
- نوع أو عجينة واحدة أو متعددة القوالب (مع هيكل معروف) في المحرر تسلسل العليا.
- نوع أو لصق متواليات هدف واحد أو عدة (بدون الهيكل) في المحرر أدنى تسلسل.
- انقر على "توقع أفضل قالب (ق)" لبدء النمذجة التماثل مع الإعدادات الافتراضية.
- وتظهر أفضل قالب مجموعات المستهدفة في القائمة الناتجة.
- انقاذ على غرار تسلسل هيكل (ق) من اختيارك إما عن طريق السحب والإفلات إلى تجمع البيانات أو من خلال نقرة والحق والنقر على "إضافة إلى حوض السباحة".
3. عزر البحث
- اكتب أو لصق تسلسل الاستعلام الخاص بك (ق) في المحرر تسلسل في الجزء العلوي من الموقع.
- اختيار النموذج الصحيح HMM (على سبيل المثال Viridiplantae للنباتات). 3.3. انقر على "البحث عن الحافز" لبدء العملية.
- ITS2 متواليات بزخارف هي أبرز illustraتيد في الجزء السفلي من هذا الموقع.
- انقر على أيقونة بجانب رأس تسلسل لعرض أبرز الزخارف في هيكل الثانوية.
4. بحث وتصفح
- البحث
- اكتب إما اسم الأصناف أو معرف بنك الجينات (GI) في حقل البحث في الجزء العلوي من الموقع.
- ويدعم البحث عن طريق اسم الأصناف من قبل صندوق حية للبحث في الظهور.
- يمكنك إجراء بحث متعددة بفواصل فصل الاستعلامات.
- انقر على زر "بحث" لتنفيذ البحث.
- تظهر قائمة النتائج الخاصة بك في علامة تبويب جديدة.
- انقر على اسم العمود لفرز النتائج وفقا لعمود خاص. يمكنك أيضا إضافة أو إزالة الأعمدة التي تختارها مع القائمة العمود. يمكن إدخالها في القائمة عمود مع الضغط على أيقونة السهم الظهور ضمن اسم العمود.
- انقر على "عرض التفاصيل" لعرض تفاصيل عن هيكل التسلسل.
- حفظ تسلسل هيكل (ق) من اختيارك إما عن طريق السحب والإفلات إلى تجمع البيانات أو من خلال نقرة والحق والنقر على "إضافة إلى حوض السباحة".
- لحفظ النتائج إلى ملف خارجي، انقر على "حفظ التحديد" أو "حفظ جميع".
- تصفح
- تصفح قاعدة البيانات ITS2 من خلال التنقل من خلال هيكل شجرة تشبه في الجهة اليسرى من الموقع.
- انقر على علامة زائد لعرض أصناف من مستوى أدنى.
- انقر على اسم الأصناف لفتح علامة تبويب جديدة تحتوي على كل تسلسل هيكل من الأصناف.
- انقر على "عرض التفاصيل" لعرض تفاصيل عن زوج تسلسل هيكل.
- حفظ تسلسل هيكل (ق) من اختيارك إما عن طريق السحب والإفلات إلى تجمع البيانات أو من خلال نقرة والحق والنقر على "إضافة إلى حوض السباحة".
- لحفظ النتائج إلى ملف خارجي، انقر على "حفظ التحديد" أو "حفظ جميع".
5. ITS2 انفجار
- اكتب أو الصق سلاسل الاستعلام واحدة أو متعددة في المحرر تسلسل. قد متواليات الخاص بك أن تكون إما سلاسل النكليوتيد عادي أو أزواج تسلسل هيكل. يمكنك أيضا كتابة الهياكل الثانوية عدة دون سلسلة واحدة. عن طريق التحقق من مربع "تسلسل متواليات XXFASTA" وتستخدم هذه الهياكل في وقت لاحق كما الاستعلامات الفردية.
- لبدء الانفجار مع الإعدادات الافتراضية، انقر على "الانفجار". تبعا لطبيعة الاستعلام الخاص بك، إما BLASTN مشترك أو ITS2 BLAST تسلسل هيكل يتم تنفيذ.
- يتم فتح علامة تبويب فرعية لكل تسلسل الاستعلام ضمن علامة التبويب التي تظهر "النتائج الانفجار"، وكذلك لمحة عامة عن عمليات التفتيش المنفذة.
- انقر على "الأحلاف عرض" لعرض التحالفات BLAST محسوب.
- حفظ يضرب انفجار اختيارك إما عن طريق السحب والإفلات إلى تجمع البيانات أو من خلال نقرة والحق والنقر على "إضافة إلى حوض السباحة".
- لحفظ النتائج إلى ملف خارجي، انقر على اختيار حفظ ""أو" حفظ جميع ".
6. متعددة تسلسل هيكل محاذاة
- نلقي نظرة على تجمع البيانات الخاصة بك بالنقر على "إدارة البيانات" ثم رمز العدسة المكبرة بجوار عدد من تسلسل في حوض السباحة الخاص بك. بدلا من ذلك، يمكنك النقر على علامة تجمع البيانات في الجزء السفلي الأيسر من الموقع.
- انقر على زوج تسلسل هيكل في تجمع البيانات الخاصة بك لعرض التفاصيل الخاصة به.
- لإنشاء العديد من تسلسل هيكل محاذاة جميع أزواج تسلسل هيكل في حوض السباحة الخاص بك، انقر على "بيانات تحليل" ثم "وتسلسل الهيكل".
- الآن يطلب منك تحديد وضع الرسومات من محاذاة الخاص بك. إذا محاذاة الخاص بك يحتوي فقط على تسلسلات قليلة، ورفض وضع سليم بالنقر على "لا". إلا اختيار واسطة ضئيلة الرسم بالنقر على "نعم".
- في لحظات قليلة، ويظهر التوافق الخاص بك في علامة تبويب جديدة (الشكل 2). وعلاوة على ذلك، يتم حفظ تلقائيا إلى تجمع البيانات.
- لحفظمحاذاة إلى ملف خارجي، انقر على "حفظ المحاذاة".
7. شجرة المحتد
- لحساب الجار تسلسل البنية القائمة على الالتحاق بالعمل شجرة من محاذاة الخاص بك متعددة، انقر على "مجموعة بيانات تحليل" ثم "الجار الالتحاق بالعمل".
- ويتضح من شجرة مما أدى إلى علامة تبويب جديدة (الشكل 3).
- تسلق شجرة الخاص بحرية مع شريط التمرير "شجرة بسهولة."
- Reroot بك شجرة من خلال النقر على عقدة أو ورقة من شجرة ثم "Reroot في هذه العقدة".
- إذا كنت تريد إزالة الأصناف من تجمع البيانات الخاصة بك، انقر على ورقة واختر "إزالة هذه العقدة من حوض السباحة." يمكنك الآن إعادة حساب التوافق الخاص بك، وشجرة مع أخذ عينات الأصناف المخفضة.
- انقر على "شجرة حفظ" لحفظ شجرة النشوء والتطور الخاص نتيجة النهائية للتحليل الخاص بك إلى ملف NEWICK الخارجية.
8. برامج إضافية
- انقر على "الانترنت عن هذا" - "أدوات" للعثور على مزيد إعلامأوجه حول 4SALE أدوات قائمة بذاتها وProfDistS.
- بجانب محاذاة وظيفة الجار الالتحاق بالعمل المقدمة من قبل واجهة قاعدة البيانات على شبكة الإنترنت ITS2، يمكنك الآن الوصول إلى وظائف جديدة عدة، مثل ترسيم الحدود الأنواع على أساس التغييرات قاعدة التعويضية (CBCs).
9. ممثل النتائج
وقد تم بنجاح سير العمل كما هو موضح أعلاه تطبق في العديد من المسوحات وصول مفتوحة 3،4. يمكن الاطلاع على أمثلة من خلال الروابط التالية:
في هذه الدراسات على نطاق واسع، لكننا تمكنا من حل نسالة من كلوروفيتا فضلا عن Hypnales (Bryophyta) ثارتفاع القرار إيث. في كلتا الحالتين، تم جمع عينات الأصناف 1 حصرية من قاعدة البيانات ITS2 9، محاذاة تلقائيا مع 4SALE 15،16 ومعالجتها وأخيرا من قبل ProfDistS 17 إلى شجرة النشوء والتطور. في جميع هذه الخطوات، واستخدمت تسلسل والمعلومات هيكل في وقت واحد. وقد تحقق التمهيد لدعم العمود الفقري باستخدام الجار النشوء والتطور الشخصي الدمج (PNJ) 19، والذي يتوفر في إصدار مستقل من ProfDistS.
لمجموعة أصغر من تسلسل هيكل أزواج، والأرقام 1-3 وصف الخطوات الرئيسية لهذا العمل آليا 5 مباشرة على طاولة العمل الجديدة قاعدة البيانات ITS2: أخذ العينات الأصناف، ومتعددة محاذاة تسلسل هيكل شجرة النشوء والتطور، وفي نهاية المطاف على حساب.

الشكل 1. أخذ العينات الأصناف في السحب والإفلات. في أي وقت أو تسلسل تسلسل متطوره، ويمكن أن يضاف أزواج ه إلى تجمع البيانات، على سبيل المثال عن طريق السحب والإفلات. هنا يتم إضافة تسلسل هيكل باستخدام السحب والإفلات بعد التنبؤ بنية ثانوية. البيضوي أزرق يمثل منطقة حيث يتم إسقاط تسلسل هيكل إلى تجمع البيانات. اضغط هنا للاطلاع على النسخة الكاملة الحجم من هذه الصورة.

الشكل 2. متعددة تسلسل هيكل المحاذاة في وضع رسم كامل. لمتواليات القليلة في تجمع البيانات، وقد تم اختيار الوضع الكامل للرسم. القواعد هي الملونة، ويمكن تسليط الضوء أزواج قاعدة مع الدوائر الحمراء من خلال النقر على قاعدة واحدة أو شريحة من زوج قاعدة. انقر هنا لعرض النسخة الكاملة الحجم من هذه الصورة.
3.JPG "ALT =" شكل 3 "/>
الشكل 3. تسلسل هيكل الجار الالتحاق بالعمل شجرة. يمكن حفظ شجرة قابلة للبحرية محسوب من محاذاة الأصناف 7 تسلسل بنية متعددة في شكل NEWICK.