وتعرض هذه الورقة التقنية لجمع الدم من الشريان الأبهر الظهري من الزرد. كما يوفر إرشادات للحصول على المصل لاستخدامها في تحليل الكيمياء الحيوية، مثل اختبارات لتحديد مستويات الكولسترول والدهون الثلاثية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
جمع الدم لتحليل الكيمياء الحيوية في الزرد الكبار
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
وقد استخدم الزرد لتكون نموذجا للدراسات الحيوانية من الأمراض التي تصيب الإنسان عدة. يمكن أن تكون بمثابة منصة قوية لدراسات ما قبل السريرية من الأحداث الجزيئية والاستراتيجيات العلاجية، وكذلك لتقييم الآليات الفسيولوجية لبعض الأمراض 1.
وهناك عدد قليل نسبيا من المنشورات المتعلقة الزرد علم وظائف الأعضاء الكبار من الأعضاء والأجهزة 2، والذي قد يؤدي إلى استنتاج الباحثين أن التقنيات الأساسية اللازمة للسماح للاستكشاف نظم الزرد تفتقر 3. ولم يبلغ عن القيم 1 البيوكيميائية الدموية من الزرد في عام 2003 من قبل مورثا و 4 الزملاء الذين يعملون تقنية جمع الدم لأول مرة من قبل Jagadeeswaran وزملاؤه في عام 1999. لفترة وجيزة، تم جمع الدم عن طريق طرف micropipette من خلال شق جانبي، ما يقرب من 0.3 سم في الطول، في المنطقة من الشريان الأبهر الظهري 5. نظرا للأبعاد دقيقة المعنية، هذاهي تقنية عالية الدقة تتطلب ممارس درجة عالية من المهارة. وقد استخدم نفس الاسلوب من قبل المجموعة نفسها في منشور آخر في نفس العام 6. في عام 2010، المقررة ايمز وزملاؤه كل مستويات السكر في الدم في الزرد 7. اكتسبوها الوصول إلى الدم عن طريق إجراء قطع الرؤوس مع مقص ومن ثم ادخال heparinized أنبوب جمع microcapillary في صياغة الصدرية. يذكرون الصعوبات مع انحلال الدم التي تم حلها مع درجة حرارة التخزين المناسبة على أساس آل عمل وآخرون كيلباتريك. 8. وجدنا عند محاولة استخدام تقنية Jagadeeswaran في مختبرنا، وأنه كان من الصعب جعل شق في مكان على وجه التحديد الحق في عدم السماح لكمية كبيرة من الدم إلى أن تضيع قبل أن بدأ جمع.
مؤخرا، غوبتا وآخرون. 9 10 صفه كيفية تشريح أجهزة الزرد الكبار، Kinkle وآخرون. ووصف كيفية تنفيذ intraperitonووصف حقن EAL، وPugach وآخرون. 11 كيفية تنفيذ الرجعية المدارية عن طريق الحقن. ومع ذلك، هناك حاجة إلى مزيد من العمل لأكثر تماما استكشاف التقنيات الأساسية للبحث في الزرد.
صغر حجم الزرد تحديات للباحثين استخدامه كنموذج تجريبي. وعلاوة على ذلك، نظرا لهذا صغر الحجم، وأنه من المهم أن يتم تطوير تقنيات بسيطة لتمكين الباحثين من دراسة المزايا من طراز الزرد.
البروتوكول
1. نص بروتوكول
- قبل جمع الدم الزرد، من الضروري أن تعد المياه التخدير. صب ~ 200 مل من الماء في وعاء ماء بسعة 500 مل. إضافة ~ 200 غرام من رقائق الثلج. يجب أن تكون درجة الحرارة حوالي 4 درجات مئوية. كما رقائق ذوبان الجليد، سيكون من الضروري لإضافة المزيد من رقائق الثلج للحفاظ على درجة حرارة ثابتة بالقرب من 4 درجات مئوية.
- عندما الماء التخدير مستعدة، وإعداد المواد اللازمة لجمع الدم. وضع تلميح منخفضة على الاحتفاظ pipettor P20 وترك pipettor حيث يمكن الوصول إليها بسهولة. لا تسمح للطرف ماصة للاتصال بأ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تعرض هذه الورقة تقنية بسيطة تتيح المزيد من الدم وتحليل مصل الدم في التجارب الزرد. هذه التقنية لديها القدرة على المساهمة في دراسات المستقبل الزرد الدموية التي تتطلب بيانات المعلمة الدم. وينبغي أن يسمح أيضا لمزيد من التطبيقات من الزرد كنموذج تجريبي.
هذه التقنية لا تتطلب مهارات خاصة أو تنفيذ أسلوب دقيق. وعلاوة على ذلك، فإنه يمكن حتى ضعف كمية الدم التي سيتم جمعها نسبة إلى غيرها من التقنيات، مما يتيح لاستخدام عدد أقل .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
FIPE / HCPA - Fundo دي Incentivo إلكتروني Pesquisa Eventos
الرؤوس - Coordenação دي دي Aperfeiçoamento Pessoal دي نيفل العليا
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| اسم كاشف | شركة | فهرس العدد | تعليقات |
| نصائح الاحتفاظ منخفض | النظم البيولوجية التطبيقية | 022493020 | |
| إيبندورف جهاز طرد مركزي 5415D | إيبندورف | توقف |
المراجع
- Schneider, A. C. R., dos Santo, J. L., Porawski, M., Schaefer, P. G., Maurer, R. L., Matte, U., da Silveira, T. R. Implementação de um novo modelo de experimentação animal Zebrafish. Rev. HCPA. 29, 100-103 (2009).
- Briggs, J. P. Th....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
