مقالة منهجية

طرق تسجيل متعددة الوحدات لوصف النشاط العصبي في الجراد ( الجراد الصحراوي أمريكانا) الدوائر الشم

DOI:

10.3791/50139

⸱

يناير 25, 2013

 ,  ,  , 
1Department of Biomedical Engineering, Washington University in St. Louis

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

علينا أن نبرهن أشكال مختلفة من هذه التقنية خارج الخلية تسجيل متعددة الوحدات لوصف رائحة استجابات في المراحل الثلاثة الأولى من مسار لحاسة الشم اللافقارية. يمكن بسهولة أن تتكيف هذه التقنيات لدراسة النشاط العصبي في نظم فرقة أخرى أيضا.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كشف وتفسير الإشارات الشمية حاسمة لبقاء العديد من الكائنات الحية. بشكل ملحوظ، والأنواع عبر حاسة الشم لديها نظم تظهر شعبة مماثلة لافت للنظر مما يشير إلى أن تم تحسين النهج البيولوجية الكيميائية إلى الاستشعار على مر الزمن التطوري 1. في النظام الشمي الحشرات، وtransduced odorants من الخلايا العصبية مستقبلات الشم (ORN) في الهوائي، التي تحول المحفزات الكيميائية في القطارات من إمكانات العمل. ثم يتم ترحيل المدخلات الحسية من ORNs إلى الفص antennal (AL؛ بنية مماثلة لمبة حاسة الشم في الفقاريات). في AL، تمثيل العصبية للروائح على شكل أنماط الزمانية المكانية اطلاق موزعة على مجموعات من الخلايا العصبية الرئيسية (السندات الإذنية، كما يشار إلى الخلايا العصبية الإسقاط) 2،3. بعد ذلك تتم معالجة الناتج من الخلايا AL كينيون (KCS) في الجسم الفطر المصب (MB)، بنية الذاكرة المرتبطة حاسة الشم والتعلم 4،5. لهاه، نقدم تقنيات التسجيل الكهربية لمراقبة رائحة استجابات العصبية في هذه الدوائر حاسة الشم.

أولا، نقدم تسجيل sensillum واحد طريقة لدراسة رائحة استجابات على مستوى السكان من 6،7 ORNs. نناقش استخدام ماصات زجاجية مليئة المالحة وشحذ أقطاب لرصد ردود ORN خارج الخلية. المقبل، نقدم طريقة لرصد ردود PN خارج الخلية باستخدام التجارية 16-قناة الكهربائي 3. ويتجلى نهج مماثل باستخدام مصنوعة خصيصا tetrode الأسلاك الملتوية 8-قناة لخلية كينيون التسجيلات 8. ونحن نقدم تفاصيل الإعداد لدينا التجريبية والحاضر آثار التسجيل ممثل لكل من هذه التقنيات.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. إعداد رائحة و التوصيل

  1. تمييع حلول رائحة في الزيوت المعدنية من حيث الحجم لتحقيق مستوى تركيز المطلوب. تخزين خليط 20 مل من الزيوت المعدنية والرائحة في زجاجة والزجاج 60 مل. إدراج الإبر المحاقن اثنين الى سدادة مطاطية (قياس 19)، واحدة من أسفل والأخرى من أعلى، لتوفير مدخل ومخرج خط. ختم زجاجة مع سدادة مطاطية وهذا إرفاق مصممة خصيصا الكربون المنشط تصفية لمدخل خط (الشكل 1A).
  2. يتم تصفية الكربون باستخدام اثنين من الحقن مل 6. قطع الحقن في نصف نهاية وتجاهل الغواص. ملء كل القطع المتبقية مع القطن والفحم المنشط قبل ربطها معا باستخدام انكماش الأنابيب.
  3. توصيل خط مخرج من القمقم رائحة (باستخدام أنابيب البولي ايثيلين، ID 0،86 ملم) إلى أنبوب بلاستيكي (Nalgene FEP الأنابيب، ID 5.8 ملم) التي تزود تدفق الهواء المستمر عبر الهوائي (1B الشكل ).
  4. المباشرة الكربون تصفيتها، جفف الهواء (الغاز الناقل؛ تدفق معدل، 0.75 لتر / دقيقة) نحو الجراد باستخدام أنبوب بلاستيكي يوضع داخل سم قليل من الهوائي الجراد.
  5. لتحفيز رائحة وتهجير وحدة تخزين ثابتة (0.1 لتر / دقيقة) من فراغ الرأس ثابت فوق حل رائحة في زجاجة. ويتحقق هذا عن طريق حقن مبلغ مساو من الهواء في زجاجة جفف باستخدام مضخة بيكو (WPI، PV-820). يتم توجيه الأبخرة من الزجاجة رائحة من خلال خط الأنبوب منفذ على تدفق الهواء (1B الشكل).
  6. إزالة رائحة أبخرة تسليمها عن طريق وضع قمع فراغ ~ 10 سم خلف الهوائي الجراد.

2. إعداد الهوائي لتسجيل Sensillum الجراد واحدة

  1. تحديد الجراد الشباب والكبار من كلا الجنسين مع أجنحة بالكامل نمت، ولكن قبل مرحلة التزاوج من مستعمرة المزدحمة. لكبح الجراد، بتر ساقيه 1. ختم مواقع بتر الأنسجة بمادة لاصقة (Vetbond، 3M). آمنة رانه الجراد إلى غرفة مصممة خصيصا باستخدام قطعة صغيرة من الشريط الكهربائية رايات حول الصدر والخمسين (الشكل 2A).
  2. تحت المجهر تشريح، وجعل الأخدود الضحلة في منهاج الشمع (الشكل 2A) لوضع الهوائي. وضع الهوائي في الأخدود واستقرار ذلك باستخدام الشمع في الباتيك طرفي الهوائي (الشكل 2B، يتم استخدام electrowaxer للذوبان الشمع).
  3. اضافة الى وجود القطب الأرض (chlorided الأسلاك الفضية) في الصدر (~ 1 سم بعيدا عن الرأس). استخدام الباتيك الشمع لختم كل موقع مع الاستمرار على شق الأرض في مكان الأسلاك (الشكل 2A).

3. واحد تسجيل Sensillum لرصد رائحة أثار ردود من الخلايا العصبية مستقبلات الشم (ORNs)

  1. وضع الهوائي الجراد استقرت تحت stereomicroscope (لايكا M205C) على طاولة الاهتزاز العزلة (TMC) (الشكل 3A). تأكد من أن قاعدة sensillum تسجيل واضحلاي مرئية (الشكل 3B).
  2. استخدام مجتذب micropipette (سوتر P-1000) لصنع أقطاب الزجاج (3-10 مقاومة عند MΩ مليئة المالحة الجراد 9، تلميح ميكرومتر قطرها 1-3) باستخدام أنبوب زجاجي البورسليكات الشعرية (OD 1.2 مم، ID 0،69 ملم).
  3. وضع قطب كهربائي في الزجاج حامل micropipette التي يتم تركيبها على الآلية مياداة مجهرية (سوتر MP-285). إدراج بلطف القطب في قاعدة لsensillum (الشكل 3B). لاحظ أن كل sensillum يمكن أن تحتوي على 3-50 في ORNs الجراد 10.
  4. تضخيم إشارة (10،000 مرات) باستخدام مكبر للصوت AC (العشب P-55). تصفية الإشارة بين 0،3 حتي 10،0 كيلوهرتز واكتساب بمعدل كيلو هرتز أخذ العينات 15 (الشكل 3D) باستخدام نظام الحصول على البيانات (ابفيف، PCI-MIO-16E-4 بطاقات دق؛ الصكوك الوطنية).

4. الجراد إجراء تشريح للوب Antennal والتسجيلات الجسم الفطر

  1. اتبع restrainiإجراءات نانوغرام كما هو موضح في القسم 2.1. وضع الجراد في غرفة مصمم خصيصا كما هو موضح في الشكل 4A وB.
  2. ليروي المالحة أثناء وبعد العملية تشريح، وبناء كوب الشمع حول الرأس الجراد. يجب أن نبدأ كأس الشمع فوق أجزاء الفم، وتتجاوز عيون مركبة تشمل المنطقة بين الهوائيين كما هو موضح في الشكل 4C.
  3. للسماح للهوائيات لتمرير خلال كأس الشمع، وخلق الأنفاق الصغيرة في كلا الجانبين باستخدام البلاستيك (البولي ايثيلين) أنابيب (5 ملم طويلة، ID 0،86 ملم). تأكد من أن أنابيب بلاستيكية يمكن أن تنزلق من خلال كأس الشمع. ويتحقق هذا الأخير باستخدام طوقا المطاط التي يلتف بإحكام حول الأنبوب البلاستيك ولكن تعلق على كأس الشمع (الشكل 4C).
  4. باستخدام راتنجات الايبوكسي، ونعلق على قاعدة هوائيات إلى نهاية الجزء السفلي من الأنابيب البلاستيكية. تضمن هذه الخطوة التي عقدت في مكان الهوائيات حتى بعد المحيطةتتم إزالة بشرة.
  5. الحفاظ على كأس مليئة الشمع محلول ملحي 9 من هذه اللحظة فصاعدا. تبدأ عن طريق إزالة منطقة وسط المستطيل بين الهوائيين (أطول جانب من المستطيل تتماشى مع محور الأمامي الخلفي). بعد ذلك، قم بإزالة بشرة في المناطق المجاورة من دون إزعاج أعين المجمع وبشرة في قاعدة الهوائي (الشكل 4D).
  6. باستخدام ملقط غرامة، وإزالة بلطف الحويصلات الهوائية والأجسام الدهنية المحيطة الدماغ. في نهاية هذه الخطوة، ينبغي الدماغ الجراد رؤيتها بوضوح (الشكل 4D). لاحظ أن تقع في مناطق الدماغ التي تعالج المعلومات الشمية (مع تصبغ أصفر فاتح) بين الهوائيين.
  7. في القناة الهضمية الجراد يعمل تحت الدماغ وعلى طول الجسم. لمنع حركة الأمعاء من زعزعة الاستقرار إعداد، وسحب بلطف المعى الأمامي وقطع عليه غرامة باستخدام مقص. جعل شق صغير في البطن فقطفوق المستقيم والأمعاء إزالة عن طريق سحب المعى المؤخر مع ملقط الخشنة. لمنع تسرب المياه المالحة، ربط البطن الأمامي على الفور إلى موقع شق مع الدرز المواضيع.
  8. استخدام منصة صغيرة مصنوعة من أسلاك رقيقة مطلية بطبقة من الشمع غرامة لرفع الدماغ والاستقرار فيه 11 خلال الكهربية كما هو موضح في الشكل 4D.
  9. تتناول الدماغ بواسطة الحشرات غمد رقيقة عازلة التي تحتاج إلى إزالة قبل التجارب. لdesheath الدماغ، وانتشار بلطف كمية صغيرة من انزيم (0،3-0،4 ملغ البروتيني، سيغما الدريتش) على سطح الدماغ باستخدام ملقط غرامة 9. بعد ق ~ 5-10 من تطبيق الانزيم، وشطف الدماغ تماما مع المياه المالحة. باستخدام ملقط غرامة فائقة بلطف جدا قرصة وسحب صعودا وغمد المسيل للدموع بعد ذلك فتح مواقع على تسجيل (AL MB و؛ هو مبين في الشكل 4E، F).

5. تسجيلات متعددة الوحدات من الفص Antennal ووفطر الجسم

  1. وضع إعداد الجراد (الشكل 5A) تحت stereomicroscope علقت من موقف الازدهار وضعت على طاولة الاهتزاز العزلة.
  2. الحفاظ على معدل ثابت نضح المياه المالحة (نحو 0.04 لتر / ساعة) في كافة مراحل التجربة. استخدام سلك الفضة chlorided مغمورة في كأس الشمع المالحة مليئة والقطب الأرض.
  3. للتسجيلات PN، استخدم 16-قناة السيليكون التحقيق (NeuroNexus تكنولوجيز، البند رقم A2x2-تيت-3MM-150-150-121-A16، 5B الشكل). قبل كل تجربة، بالكهرباء الأقطاب مع الذهب لتحقيق المعاوقات الكهربائية في مجموعة أوم 200-300. استخدام الدائرة هو موضح في الشكل 7 لالكهربائي.
  4. وضع القطب الكهربائي على مقربة من سطح الفص antennal وضعه برفق في الأنسجة باستخدام دليل مياداة مجهرية (WPI، M3301R) (الشكل 5D).
  5. تقدم القطب في الخطوات 10 ~ ميكرومتر. الانتظار 2-3 دقائق في كل خطوة وتقييم اكتسابد إشارة الجودة. في موقع مثالي تسجيل، سيتم التقطت إشارات خارج الخلية من قبل قنوات متعددة تسجيل وسيكون لها عالية إشارة إلى نسبة الضوضاء (SNR> 3-5 مرات الضوضاء SDS).
  6. للتسجيلات KC، استخدم حسب الطلب tetrode الأسلاك الملتوية (الشكل 5C؛ خطوة بخطوة الإجراء تلفيق المعروضة في القسم 6). هذه الأقطاب بالكهرباء كما نوقش في الخطوة 5.3. وضع tetrode على سطح MB (الشكل 5E) كما يتم تقييد KC somata إلى الطبقة السطحية للMB 8.
  7. ويمكن إجراء كل PN والتسجيلات KC في وقت واحد من الجراد إعداد نفسه كما هو موضح في الشكل 5A تخطيطي.
  8. الانتظار على الأقل 15 دقيقة بعد العثور على موقع التسجيل للسماح استقرار الأقطاب.
  9. الحصول على جميع الإشارات خارج الخلية في 15 كيلوهرتز، فلتر بين 0،3-6 كيلو هيرتز، وتضخيم (10،000 مرات) باستخدام مكبر للصوت AC 16 قناة (علم الأحياء إلكترونيات تسوق؛ معهد كاليفورنيا للتكنولوجيا في باسادينا، كاليفورنيا) (الرقم 6A، B).

6. إجراءات لجعل ملتوية الكهربائي أسلاك للتسجيلات KC

  1. لتصميم القطب متعددة الوحدات للتسجيلات KC، استخدم سلك معزول الكروم والنيكل (RO800، 0،0005 "خيوط) 8.
  2. إذا المطلوب ثمانية أقطاب ثم لف السلك حول قطعة طويلة من 10-15 سم 4 مرات من الورق المقوى. ويمكن تغطية نهايات الورق المقوى مع أنابيب بلاستيكية لمنع حواف قطع من السلك. في حين التفاف، تأكد من وجود الركود قليلا، ولكن تأكد من أن السلك ليس مشدود. التعامل مع الأسلاك بعناية لأنه يكسر بسهولة.
  3. مجموعة الأسلاك معا في الجزء العلوي من الورق المقوى واستخدام قطعة من الشريط (الشريط الزمن، T-534-RP) لتحميلهم معا. قطع فروع في الطرف الآخر. إزالة الأسلاك والخيوط مجموعة الأسلاك في نهاية قص وكذلك باستخدام قطعة أخرى من الشريط.
  4. باستخدام لوحة عيار شاكر (الحرارية العلمية، النموذج 4625Q)، الريح جدائل معا (~ 72 لفة / دقيقة لمدة 3دقيقة) لتشكيل سلك واحد الملتوية. ويمكن قص الجزء السفلي من خيوط ملصقة على لوحة عيار الدوار ويمكن قص الجزء العلوي الى وقفة الازدهار. خلال تصفية، ينبغي أن يكون السلك الركود قليلا، ولكن لا يكون مشدود.
  5. إذابة العزل مع بندقية الحرارة (يلر 6966C) التمسك فروع الفردية معا وتشكيل سلك واحد. يجب أن يمر بطيئا 3-4 (3-4 ثانية لكل منهما) على طول السلك يكون كافيا لتسخين وصهر خيوط معا. ثم حرر السلك من أسفل والسماح له للاسترخاء. تقليم الأسلاك بالقرب من طرفي لإزالة الشريط.
  6. إدراج واحدة من نهاية السلك من خلال أنبوب 5-6 سم طويلة الزجاج، الشعرية (OD 1.0 ملم، ID 0،58 ملم). ندف بصرف النظر عن الأسلاك الملتوية في نهاية واحدة باستخدام الملقط غرامة وإزالة الطلاء من إحراق لفترة وجيزة جدا نهاية باستخدام اللهب. ويجب أن يتم هذه الخطوة بعناية؛ تعريض السلك إلى اللهب لفترة طويلة جدا سوف تتسبب في فروع متشابكة لإذابة و.
  7. فصل بلطف فروع 8 على نهاية ملتهب علىالثانية جندى كل على حدة حبلا إلى مأخذ IC 8-دبوس. معطف أعلى مأخذ IC مع الايبوكسي لعقد الخيوط والزجاج الشعرية في المكان. أيضا وضع قطرة صغيرة من الايبوكسي في الطرف الآخر من شعري لعقد الأسلاك في مكانها (الشكل 5C).
  8. وأخيرا، وقطع طرف السلك بزاوية 45 درجة مع مقص كربيد حوالي 0.5 سم من الحافة الشعرية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وترد ردود رائحة أثار واحدة من ORN لاثنين من الكحول مختلفة في الشكل 3D. اعتمادا على موقع التسجيل لا يمكن أن يتحقق (sensilla النوع، وضع القطب الكهربائي) متعددة الوحدات التسجيلات.

ويرد الموجي الخام خارج الخلية من تسجيل AL في الشكل 6A. ويمكن ملاحظة إمكانات العمل أو طفرات من سعة متفاوتة القادمة من السندات الإذنية مختلفة تتبع في هذا الجهد. على الرغم من أن الفص الجراد antennal لديه الخل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المحفزات الحسية الأكثر إثارة ردود اندماجي التي يتم توزيعها عبر مجموعات من الخلايا العصبية. وبالتالي، رصد في وقت واحد متعدد الخلايا العصبية النشاط ضروري لفهم كيفية تحفيز محددة يتم تمثيل المعلومات ومعالجتها بواسطة الدوائر العصبية في الدماغ. هنا، لقد أثبتنا خارج الخلية تقنيات التسجيل وحدة متعددة لوصف رائحة أثار ردود على المراكز الأولى على طول الطريق التكرير الثلاثة على حاسة الشم الحشرات. نلاحظ أنه تم استخدام تقنيات المقدمة هنا في عدد من الدراسات السابقة على الترميز حاسة الشم وأصبحت م...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

فإن الكتاب أود أن أشكر التالية لتمويل هذا العمل: السخي بدء الأموال من قسم الهندسة الطبية الحيوية في جامعة واشنطن، وهو مركز العلوم العصبية ماكدونيل لأنظمة المنح، ومكتب بحوث البحرية منحة (المنح #: N000141210089) إلى BR

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
اسم شركة كتالوج رقم تعليقات
معدات الكهربية
AC مكبر للصوت GRASS نموذج P55 للتسجيلات sensillum واحد
رصد الصوت (نموذج 3300) نظم AM 940000
مصنوعة خصيصا 16 قناة ما قبل مكبر للصوت ومكبر للصوت كال. التكنولوجيا. البيولوجيا إلكترونيات تسوق لAL MB والتسجيلات
الحصول على البيانات وحدة الصكوك الوطنية BNC-2090
الألياف البصرية ضوء WPI SI-72-8
مصدر الضوء 115 V WPI NOVA
دليل مياداة مجهرية WPI M3301R للتسجيلات الدماغ الجراد
Stereomicroscope1 على موقف الازدهار لايكا M80 للتسجيلات الدماغ الجراد
Stereomicroscope2 لايكا M205C للتسجيلات sensillum واحد
الاهتزاز والعزل الجدول TMC سلسلة 63-500
الآلية مياداة مجهرية سوتر الآلات MP285 / T
مرسمة الذبذبات تكترونكس TD2014B
الأقطاب الكهربائية / أدوات البناء
16-قناة الكهربائي NeuroNexus A2x2-تيت-3MM-150-121 للتسجيلات الفص antennal
الشعرية أنابيب البورسليكات مع شعيرات، ID 0،69 مم سوتر الآلات BF120-69-10 لصنع أقطاب الزجاج
Micropipette مجتذب سوتر الآلات P-1000
وظيفة المولد متعدد مستودع SG1639A عن الذهب الطلاء أقطاب
الذهب حل الطلاء (غير السيانيد) SIFCO صناعات NC SPS 5355
اختبار مقاومة BAK إلكترونيات شركة IMP-2 عن الذهب الطلاء أقطاب
التبديل الروتاري Electroswitch C7D0123N لجمع الذهبating الأقطاب
نبض المعزل WPI A365 عن الذهب الطلاء أقطاب
س صاحب سلسلة القطب وارنر الصكوك 64-1091
الفضة سلك 0،010 "قطر نظم AM 782500 الأرض الكهربائي
8 دبوس مأخذ DIP IC Digikey ED90032-ND
الشعرية أنابيب البورسليكات مع شعيرات، ID 0،58 مم وارنر الصكوك 64-0787 الملتوية بناء الأسلاك tetrode
الحرارة بندقية يلر 6966C
Rediohm-800 سلك Kanthal الدقة تكنولوجيا PF002005
عيار وحة شاكر الحراريةعلمي 4625Q التواء الأسلاك
كربيد مقص، 4.5 " البحوث الطبية الحيوية INSTR 25-1000 لقطع الأسلاك الملتوية tetrode
ملاقط نقطة غرامة HECO 91-EF5-SA لإغاظة وبصرف النظر الأسلاك tetrode
رائحة التسليم
6 مل حقنة كيندال 1180600777 لمصممة خصيصا تصفية الكربون المنشط
رائحة زجاجات البني الصياد 08-912-165
فحم BuyActivatedCharcoal.com GAC-48C
المجففة Drierite 23005
Drierite الغاز تجفيف جرة فيشر العلمية 09-204
أنبوب الانكماش الحراري 3M EPS-200 إعداد رائحة تصفية
المحور تحت الجلد الألومنيوم إبرة، قياس 19 كيندال 8881-200136 لتوفير مدخل ومخرج للخطوط زجاجات رائحة
الزيوت المعدنية مالينكرودت كيماويات 6357-04 للتخفيف الرائحة
Nalgene أنابيب بلاستيكية، 890 FEP الحرارية العلمية 8050-0310 لتوصيل الغاز الناقل
هوائي picopump WPI SYS-pv820 تسليم رائحة
البولي ايثيلين أنابيب ID 0،86 مم Intramedic 427421 لرائحة زجاجة مخرج connectiإضافات والمالحة أنابيب إسراف
سدادات مختبر الصرفة 97041 لاغلاق زجاجات رائحة
الوقت الشريط PDC T-534-RP
أنابيب الأنبوب كول-Parmer 30600-66
فراغ أنبوب ماكماستر-كار 5488K66
إعداد / تشريح
100 × 15 مم طبق بتري VWR الدولية 89000-304
18 AWG الذين تقطعت بهم السبل الأسلاك النحاسية لاب كابيل 4510013 يستخدم العزل الأسلاك ومقاطع المطاط
22 AWG الذين تقطعت بهم السبل الأسلاك هوكوب AlphaWire 1551 دماغمنصة
الباتيك الشمع الجاكار قماش 7946000
محيط الأسنان الشمع هنري شين-الأسنان 6652151
Electrowaxer Almore الدولية 66000
الايبوكسي، 5 دقائق PERMATEX 84101
مركز إبرة تحت الجلد الألومنيوم كيندال 8881-200136
البروتيني من غريس المتسلسلة سيغما الدريخ P5147 لdesheathing الدماغ الجراد
الموضوع خياطة غير معقمة الصياد NC9087024 لربط البطن بعد إزالة الأمعاء
Vetbond 3M 1469SB لاغلاق صباحاputation المواقع
دومون # 1 ملقط (الخشنة) WPI 500335
دومون # 5 ملقط التيتانيوم (غرامة) WPI 14096
دومون # 5SF ملقط (فائقة غرامة) WPI 500085 desheathing الدماغ الجراد
10 سم تشريح مقص WPI 14393 لإزالة الأرجل والأجنحة
Vannas مقص (غرامة) WPI 500086 لإزالة إهاب، قطع المعى الأمامي
المالحة الوفرة
تمديد مع مجموعة منظم تدفق معدل مور الطبية 69136 لتنظيم تدفق المياه المالحة
تعيين IV مع الإدارةY حقن موقع مور الطبية 73190 لتنظيم تدفق المياه المالحة

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ache, B. W., Young, J. M. Olfaction: diverse species, conserved principles. Neuron. 48, 417-430 (2005).
  2. Laurent, G., Wehr, M., Davidowitz, H. Temporal representations of odors in an olfactory network. Journal of Neuroscience. 16, 3837-3847 (1996).
  3. Stopfer, M., Jayaraman, V., Laurent, G. Odor identity vs. intensity coding in an olfactory system. Neuron. 39, 991-1004 (2003).
  4. Steven de Belle, J., Heisenberg, M. Associative odor learning in Drosophila abolished by chemical ablation of mushroom bodies. Science. 263, 692-695 (1994).
  5. Cassenaer, S., Laurent, G. Conditional modulation of spike-timing-dependent plasticity for olfactory learning. Nature. 482, 47-52 (2012).
  6. Hallem, E. A., Carlson, J. R. Coding of odors by a receptor repertoire. Cell. 125, 143-160 (2006).
  7. Raman, B., Joseph, J., Tang, J., Stopfer, M. Temporally diverse firing patterns in olfactory receptor neurons underlie spatiotemporal neural codes for odors. Journal of Neuroscience. 30, 1994-2006 (2010).
  8. Perez-Orive, J., et al. Oscillations and sparsening of odor representations in the mushroom body. Science. 297, 359-365 (2002).
  9. Naraghi, M., Laurent, G. Odorant-induced oscillations in the mushroom bodies of the locust. The Journal of Neuroscience. 14, 2993-3004 (1994).
  10. Ochieng, S. A., Hallberg, E., Hansson, B. S. Fine structure and distribution of antennal sensilla of the desert locust, Schistocerca gregaria (Orthoptera: Acrididae). Cell and Tissue Research. 291, 525-536 (1998).
  11. Burrows, M., Laurent, G. Synaptic Potentials in the Central Terminals of Locust Proprioceptive Afferents Generated by Other Afferents from the Same Sense Organ. Journal of Neuroscience. 13, 808-819 (1993).
  12. Pouzat, C., Mazor, O., Laurent, G. Using noise signature to optimize spike-sorting and to assess neuronal classification quality. Journal of Neuroscience Methods. 122, 43-57 (2002).
  13. Mazor, O., Laurent, G. Transient dynamics versus fixed points in odor representations by locust antennal lobe projection neurons. Neuron. 48, 661-673 (2005).
  14. Christensen, T. A., Pawlowski, V. A., Lei, H., Hildebrand, J. G. Multi-unit recordings reveal context dependent modulation of synchrony in odor-specific neural ensembles. Nature Neuroscience. 3, 927-931 (2000).
  15. Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. Single Sensillum Recordings in the Insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae. J. Vis. Exp. (36), e1725(2010).
  16. Geffen, M. N., Broome, B. M., Laurent, G., Meister, M. Neural Encoding of Rapidly Fluctuating Odors. Neuron. 61, 570-586 (2009).
  17. Ito, I., Ong, R. C., Raman, B., Stopfer, M. Sparse odor representation and olfactory learning. Nature Neuroscience. 11, 1177-1184 (2008).
  18. Laurent, G. Olfactory network dynamics and the coding of multidimensional signals. Nature Review Neuroscience. 3, 884-895 (2002).
  19. Brown, S. L., Joseph, J., Stopfer, M. Encoding a temporally structured stimulus with a temporally structured neural representation. Nature Neuroscience. 8, 1568-1576 (2005).
  20. MacLeod, K., Laurent, G. Distinct mechanism for synchronization and temporal patterning of odor-encoding neural assemblies. Science. 274, 976-979 (1996).
  21. Wehr, M., Laurent, G. Relationship between afferent and central temporal patterns in the locust olfactory system. The Journal of Neuroscience. 19, 381-390 (1999).
  22. Moreaux, L., Laurent, G. Estimating firing rates from calcium signals in locust projection neurons in vivo. Frontiers in Neural Circuits. 1, 1-13 (2007).
  23. Galizia, C. G., Joerges, J., Kuttner, A., Faber, T., Menzel, R. A semi-in-vivo preparation for optical recording of the insect brain. Journal of Neuroscience Methods. 76, 61-69 (1997).
  24. Galan, R. F., Sachse, S., Galizia, C. G., Hez, A. V. M. Odor-driven attractor dynamics in the antennal lobe allow for simple and rapid olfactory pattern classification. Neural Computation. 16, 999-1012 (2004).
  25. Kuebler, L. S., Schubert, M., Karpati, Z., Hansson, B. S., Olsson, S. B. Antennal Lobe Processing Correlates to Moth Olfactory Behavior. Journal of Neuroscience. 32, 5772-5782 (2012).
  26. Silbering, A. F., Bell, R., Galizia, C. G., Benton, R. Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe. J. Vis. Exp. (61), e2976(2012).
  27. Skiri, H. T., Galizia, C. G., Mustaparta, H. Representation of Primary Plant Odorants in the Antennal Lobe of the Moth Heliothis virescens Using Calcium Imaging. Chemical Senses. 29, 253-267 (2004).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Locust Olfactory CircuitsMulti unit RecordingSingle Sensillum RecordingPrincipal Neuron RecordingsKenyon Cell RecordingsGlass Microelectrode Fabrication16 channel Silicon ProbeTwisted Wire TetrodeAntennal Lobe RecordingsMushroom Body Recordings

مقالات ذات صلة