قياس آلام جلدية اللمس في نموذج الفئران التهاب البروستاتا الجرثومي

ملخص

قد عدوى في البروستاتا يكون عاملا مساعدا في التوسط في آلام الحوض التهاب البروستات المزمن. وصفنا الإجراء لإعداد اللقاح البكتيري موحدة، تقطير من البكتيريا في مجرى البول من الفئران الذكور ومنهجية لقياس آلام جلدية في الفئران عن طريق اللمس مع مرور الوقت.

الملخص

Uropathogenic الإشريكية القولونية (UPEC) هي مسببات الأمراض التي تلعب دورا هاما في التهابات المسالك البولية والتهاب البروستاتا الجرثومي ^1. لقد أظهرنا مؤخرا أن UPEC دورا هاما في بدء الألم الحوضي المزمن ^2، سمة من سمات التهاب البروستاتا المزمن / متلازمة آلام الحوض المزمنة (CP / CPPS) ^3،4. يمكن للعدوى في البروستاتا بواسطة UPEC ذات الصلة سريريا بدء وتأسيس الألم المزمن من خلال آليات التي قد تنطوي على تلف الأنسجة والشروع في آليات المناعة الذاتية ^5.

وثمة تحد لفهم الآلية المرضية لUPEC في البروستاتا هو عدم إمكانية الوصول النسبي للغدة البروستاتا للتلاعب. تستخدم لدينا سبق وصفها طريقة العدوى داخل الاحليل ⁶ إلى تقديم سلالة من UPEC السريرية في الفئران الذكور تؤسس عدوى الصاعد من البروستاتا. هنا، نحن تصف بروتوكولات لدينا لتوحيد باcterial اللقاح ⁷ فضلا عن إجراء القسطرة لتخدير الفئران الذكور تقطير من البكتيريا.

ويتميز في المقام الأول CP / CPPS عن وجود آلام جلدية اللمس ^4. واستند اختبار السلوك على مفهوم فرط التألم الجلدية الناجمة عن الألم الحشوي المشار ^8-10. التركيز في الأنسجة الحشوية العصبي يقلل الألم الجلدي عتبات السماح للاستجابة للمؤثرات مبالغ فيها غير مؤلمة عادة (آلام جلدية). استخدام القوة الطبيعي أن الجلد نتيجة في الاستجابات الشاذة التي تميل إلى الزيادة مع شدة الألم الحشوي الأساسي. وصفنا المنهجية في NOD / ShiLtJ الفئران التي تستخدم الألياف فري فون لقياس آلام جلدية مع مرور الوقت عن طريق اللمس استجابة لعدوى البكتيريا واحدة مع UPEC.

البروتوكول

1. البكتيريا التحضير للتلقيح ماوس

يجب القيام بما يلي في ظل ظروف معقمة.

1. تأخذ واحدة 17 × 100 ملم أنابيب البولي بروبلين مع قبعات وإضافة 3 مل من وسائل الإعلام لوريا الطازجة (LB) مرق. نصائح باستخدام تعقيمها، واتخاذ بعض البكتيريا الجلسرين المجمدة الأسهم من سلالة CP1 ² و نقل كمية صغيرة من الثقافة في أنبوب يحتوي على سائل الإعلام LB. استبدال غطاء أنبوب الأوكسجين بحيث لا يزال قادرا على إدخال الأنبوب - الثقافة تحتاج إلى أن تنمو في الظروف الهوائية. أنبوب المكان عند 37 درج....

النتائج

درسنا NOD / ShiLtj وC57BL/6J ذكور الفئران لوجود الألم المزمن على عدوى بكتيرية. وتغرس الفئران الذكور (5 إلى 7 أسابيع من العمر) بمحلول ملحي أو البكتيريا في مجرى البول (الشكل 1). أدى التحفيز الميكانيكي للمنطقة الحوض مع خيوط فري فون من الفئران C57BL/6J المالحة وغرست UPEC الفئران المصابة C57BL/6J تردد في الاستجابة التي لم تتغير خلال مدة 28 يوما من التجربة (الشكل 1). في المقابل، أظهرت الفئران المصابة NOD UPEC الردود على تحفيز الحوض التي كانت أكبر .......

المناقشة

التهاب في البروستاتا مع الماوس UPEC يسمح للفي النمذجة الجسم الحي من الأحداث التي قد تكون لهم علاقة في التسبب في التهاب البروستاتا الجرثومي، CP / CPPS أو كحدث المهيئة في الالتهابات المزمنة. الأساليب المذكورة لإعداد البكتيرية وتقطير التعادل على مجموعة كبيرة من المؤلفات حول نماذج UPEC في التهاب المسالك البولية الإناث ^7،14. نموذج له تطبيق واسع لدراسة المرضية، واختبار اللقاحات المرشحة المحتملة وآليات التشكيل المناعي. القدرة على تتبع السلوك الألم بطريقة قابل.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
اسم كاشف	شركة	كتالوج رقم
ثقافة أنابيب	BD الصقر	352059
LB مرق ميلر	EMD	EM1.10285.0500
أنابيب الطرد المركزي Nalgene	الحرارية	3118-0050
Isoflurane	بتلر شين	NDC 11695-6776-1
قسطرة إبرة 30G	هاميلتون	91030
PE10 أنابيب	BD intramedic	427400
فري فون الشعيرات	Stoelting	58025-31