تحديد الخلايا العصبية الحركية خارج الخلية لعضلة حمام سباحة للسيارات في<em&gt; Aplysia californica</em

Hui Lu; Jeffrey M. McManus; Hillel J. Chiel

doi:10.3791/50189

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تحديد الخلايا العصبية الحركية خارج الخلية لعضلة حمام سباحة للسيارات في

11.6K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/50189

⸱

مارس 25, 2013

Hui Lu¹ , Jeffrey M. McManus¹ , Hillel J. Chiel¹^,²^,³

¹Department of Biology, Case Western Reserve University , ²Department of Neurosciences, Case Western Reserve University , ³Department of Biomedical Engineering, Case Western Reserve University

في هذه المقالة

ملخص

في الحيوانات الكبيرة مع الخلايا العصبية التي تم تحديدها ( على سبيل المثال الرخويات)، ويتم تحليل حمامات السيارات باستخدام تقنيات الخلايا^1،2،3،4. مؤخرا، قمنا بتطوير تقنية لتحفيز الخلايا العصبية خارج الخلية وتسجيل الأفراد في Aplysia californica 5. وصفنا الآن على بروتوكول لاستخدام هذه التقنية لتحديد وتوصيف فريد الخلايا العصبية الحركية داخل حوض المحرك.

الملخص

في الحيوانات الكبيرة مع الخلايا العصبية التي تم تحديدها (مثل الرخويات)، وتحليل حمامات السيارات ويتم باستخدام تقنيات الخلايا ^1،2،3،4. مؤخرا، قمنا بتطوير تقنية لتحفيز الخلايا العصبية خارج الخلية وتسجيل الأفراد في californica Aplysia ^5. وصفنا الآن على بروتوكول لاستخدام هذه التقنية لتحديد وتوصيف فريد الخلايا العصبية الحركية داخل حوض المحرك.

هذه التقنية خارج الخلية من المزايا. أولا، يمكن تحفيز كهربائي خارج الخلية والخلايا العصبية من خلال تسجيل غمد ^5، لذلك لا بد من إزالتها. وهكذا، سوف تكون أكثر صحة الخلايا العصبية في التجارب خارج الخلية مما كان عليه في تلك الخلايا. ثانيا، إذا العقد يتم تناوب المناسبة من قبل تعلق من غمد، يمكن الوصول إلى الخلايا العصبية خارج الخلية أقطاب على جانبي العقدة، مما يجعل من أسهل وأكثر كفاءة لتحديد الخلايا العصبية متعددة في إعداد نفسه. الثالث، extracelluلار الأقطاب لا تحتاج إلى اختراق الخلايا، وبالتالي يمكن نقلها بسهولة ذهابا وإيابا بين الخلايا العصبية، مما تسبب في أضرار أقل لهم. هذا هو مفيدة بشكل خاص عند واحد يحاول تسجيل متعددة الخلايا العصبية خلال تكرار أنماط الحركية التي قد تستمر لدقائق فقط. الرابعة، أقطاب خارج الخلية هي أكثر مرونة من تلك الخلايا خلال حركات العضلات. قد الأقطاب الكهربائية بين الخلايا وتلف سحب الخلايا العصبية خلال تقلصات العضلات. في المقابل، يتم الضغط بلطف منذ الأقطاب خارج الخلية إلى الخلايا العصبية وغمد أعلاه، فإنها عادة البقاء فوق الخلايا العصبية ذاتها خلال تقلصات العضلات، وبالتالي يمكن استخدامها في الأعمال التحضيرية أكثر سليمة.

لتحديد الخلايا العصبية الحركية بشكل فريد لمجموعة السيارات (وخاصة العضلات I1/I3 في Aplysia) باستخدام أقطاب خارج الخلية، يمكن للمرء استخدام الميزات التي لا تتطلب قياسات داخل الخلايا كمعايير: سوما الحجم والموقع، الإسقاط محور عصبي، وتعصيب العضلات ⁴، 6،7. لتجمع السيارات المستعملة خاصة لتوضيح هذه التقنية، سجلنا من الأعصاب الشدق 2 و 3 لقياس التوقعات محور عصبي، وقياس قوات تقلص العضلات I1/I3 لتحديد نمط تعصيب العضلات لالخلايا العصبية الحركية الفردية.

علينا أن نبرهن العملية الكاملة لأول الخلايا العصبية الحركية باستخدام تحديد تعصيب العضلات، ثم تميز توقيتها خلال أنماط السيارات، وخلق طريقة مبسطة لتحديد التشخيص السريع. طريقة مبسطة وسريعة أكثر التشخيص متفوقة للتحضير أكثر سليمة، على سبيل المثال في إعداد الشامل الشدق علقت ⁸ أو في الجسم الحي ^9. ويمكن أيضا أن تطبق هذه العملية في أحواض السيارات الأخرى في ^10،11،12 Aplysia أو في النظم الحيوانية الأخرى ^{2،3،13،14.}