نحن تصف تصميم الجهاز "رابط سريع" لتسهيل زرع مثلي كبد الفئران.
مقالة منهجية
أجهزة التصنيع والادوات لتسهيل الجرذ زرع الكبد
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
زرع مثلي كبد الفئران هو نموذج شعبية، وهو ما ثبت في ورقة إن الرب الزوار مع استخدام الجهاز "رابط سريع". هذا الأسلوب يسمح للالوريدي أسهل أزرار anatomoses بعد منحنى التعلم معقولة. ويتألف الجهاز من اثنين من المقابض، والتي اقتطعت من شفرات المشرط، مقراب واحد، والتي يتم الحصول عليها عن طريق تعديل ملقط كوخر، والأصفاد تصميم من غرامة الجوف أنابيب البولي ايثيلين. لا يمكن أن يؤديها العملية برمتها في منخفضة التكلفة باستخدام المواد المختبرية الشائعة. ويقدم هذا التقرير بروتوكول خطوة بخطوة لتصميم القطع المطلوبة وتشمل الإستنسل.
المقدمة
وقد تبين أن تقنية زرع مثلي كبد الفئران في مجلة الاخيرة من التجارب متصور ورقة 1. أجريت الوريد البابي الكبدي والأشعة تحت الوريد الأجوف anastomoses باستخدام رابط سريع بمساعدة تقنية الكفة. وقد تم اختيار هذه التقنية بين التنقيحات الأخرى من تقنية وKamada الأصلي 2-4، لأنها تسمح للanastomoses أسهل وأسرع، والنتائج في الدورة الدموية على نحو أفضل، ويمكن تنفيذها مع منحنى التعلم أقصر 1،5.
يتطلب تقنية سريعة رابط استخدام مقبض، وهو مقراب والأصفاد، ويمكن تصميم كل منها من المواد المختبرية الشائعة وفقا للتقنية وصفها في هذا التقرير.
البروتوكول
1. مقبض: تصميم وتشكيل
- تأمين العدد 10 الكربون شفرة مشرط على لوح خشبي مع شريط.
- علامة على وسط الحلبة تحت المجهر. يجب أن يكون موجودا 1.2 سم على التوالي من بستان من شفرة مشرط.
- حفر ثقب 2 مم مع كروية بت الماس، التي شنت على تدريبات عالية السرعة.
- توسيع ثقب مع مغزلي أو بت الماس مخروطي. قطر النهائية تختلف وفقا لوزن الفئران كما هو مبين في الجدول 1.
- تصميم شكل مقبض مع علامة دائمة. الشكلان 1 و 2 ويمكن استخدام الإستنسل.
- تحويل الحفر في طاحونة مقاعد البدلاء البسيطة وإزالة جزء من شفرة خارج الشكل.
- جولة قبالة قطعة مع سرعة منخفضة الدورية فرشاة.
2. مقراب: تصميم وتشكيل
- يتم الحصول على مقراب عن طريق تعديل على التوالي الجراحية كليمر أو forcep كوخرق.
- قطع نصف من فرع واحد تحت المجهر باستخدام عالية السرعة طاحونة مقاعد البدلاء البسيطة.
- جعل الأخاديد متناظرة على كلا الجانبين للسماح المؤشر إلى الانزلاق في تماما.
- قطع فتحة طولية في الذراع الطويلة وتحقق من أن مركز الذراع الطويلة ووضع جيد يؤهلها التعامل هي على محور واحد.
- تصميم الشق على الذراع الطويلة التي تواجه وسط المقبض.
- جعل فرع رقيقة قدر الإمكان وجولة قبالة قطعة مع انخفاض سرعة الدوران فرشاة.
3. الأصفاد: تصميم وتشكيل
- الفرجار الكفة تختلف وفقا لوزن الفئران وسلالة. على النقيض من ذلك، يجب أن تبقى طولها حوالي 4 مم.
- تأخذ غرامة الجوف أنابيب البولي ايثيلين وجولة قبالة حافة واحدة مع العدد 10 مشرط.
- تصميم بستان 0.5 مم من الحافة، وقطع بعناية منحدر النزول إلى بستان.
- قطع واحد أو اثنين من النكات كامل سمك في أنابيب. هذه الإرادةمساعدة التلاعب في الكفة خلال إعداد الكسب غير المشروع وزرع.
- قطع الكفة في 4 ملم من حافته.
النتائج
وقد تم تصنيعها خمس مجموعات، بما في ذلك خمسة approximators و 11 مقابض. كسر واحد مقبض خلال المباراة النهائية بالفرشاة. وكانت هذه المشكلة يرجع ذلك إلى حقيقة أن عصابة من المقبض كانت ضيقة جدا، وقد تم حلها من خلال وضع أضيق جزء من حلقة مقبض عند 0.5 مم. وقعت أية مشاكل خلال تشكيل لapproximators.
| الوزن الفئران (ز) | بورتا مقبض (ضياء الداخلية) (مم) | بورتا الكفة (ديا الخارجي) (ملم) | IVC مقبض (ضياء الداخلية) (مم) | IVC الكفة (ديا الخارجي) (ملم) |
| 120-180 | 2.2 | 1.7 | 2.6 | 2.08 |
| 180-270 | 2.6 | 2.08 | 3،4-3،7 | 3،0-3،25 |
| > 270 | 2.9 | 2.42 | 4.2 | 3.7 |
الجدول 1.
الشكل 1. بورتا مقبض الاستنسل. إذا طبع مع مقياس 01:01 يمكن استخدامها لتوجيه مقبض تشكيل. انقر هنا لعرض أكبر شخصية .
الشكل 2. IVC مقبض الاستنسل. إذا طبع مع مقياس 01:01 يمكن استخدامها لتوجيه مقبض تشكيل. انقر هنا لعرض أكبر شخصية .
الشكل (3). وينبغي تأمين v.porta بورتا وIVC الأصفاد جهة النظر الجانبي. الكسب غير المشروع إلى الأخدود المركزي، في حين سفينة المستلم إلى الوحشي واحد. هذه وسيلة تسمح للالأمثل الاتصال البطانية إلى البطانية.
الشكل 4. يتم تمثيل بورتا وIVC الأصفاد المشهد الأمامي. الفرجار مناسبة للفئران وزنها 180-270 ز.
المناقشة
ويصف هذا التقرير تصميم وبناء نظام التبديل السريع للرابط لتسهيل زرع كبد الفئران.
زرع كبد الفئران هو نموذج شعبية مع 125-180 أوراق ذات صلة نشرت سنويا منذ عام 1990 في وقت مبكر ( www.pubmed.com ). فإنه يسمح لمجموعة واسعة من التجارب بما في ذلك استكشاف قضايا الحفاظ المناعية والكسب غير المشروع. استخدام عدة "رابط سريع" يسمح لanastomoses أسهل وأسرع مع ضمان الاتصال البطانية إلى البطانية. وقد وصفت وصفا تفصيليا ومناقشة الخطوات التقنية لزرع كبد الفئران سابقا 1.
يمكن بناء عدة سريعة رابط بأسعار منخفضة من المواد المختبرية الشائعة. التحدي الرئيسي اجه ارتبط انهيار مؤشر واحد خلال المباراة النهائية بالفرشاة، ولقد تم حل هذه المشكلة عن طريق تعيين أضيق الاسميةر من حلقة مقبض عند 0.5 مم (الشكلان 1 و 2 إظهار الأحجام المناسبة). فيما يتعلق بنوعية شفرة، ينبغي النظر فقط الفولاذ المقاوم للصدأ. على الرغم من أن قليلا أقل مرونة مقارنة بالمتوسط شفرة الفولاذ الكربوني، شفرات الفولاذ المقاوم للصدأ لا تتطور الصدأ، والسماح لاستخدام مدى الحياة من المقابض.
من المذكرة، وتصميم المقابض والأصفاد الحالي هو نتيجة لعملية، مما أدى إلى أحجام المقترحة، مما يسمح للanastomoses الأكثر كفاءة. بأقطار الكفة تختلف وفقا لأوزان الفئران (الجدول 1). يمكن السكوت اختلافات ضئيلة من حيث طول، ويبلغ طوله المعتاد من حوالي 4 مم (الشكلان 3 و 4).
وفيما يتعلق مقراب، forcep وكوشر المحدد يجب أن يعالج لا يقل عن 4 سم من نقطة ارتكاز. وهذا يسمح لإغلاق آمن من رف خارج بطن الحيوان.
وعموما،الجهاز المقترح يمكن أن تسمح anastomoses الوريد أسهل لزرع الكبد وغيرها من أنواع الطعوم في الفئران.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
شكر وتقدير
وأيد هذه الدراسة من قبل مؤسسة Artères، ومؤسسة أوروبا Astellas ومؤسسة Boninchi. وأيد CT من قبل مؤسسة العلوم الوطنية السويسرية (التقييم منحة 3232230-126233).
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Porta cuff | altecweb أو لفائف سميث الطبية | 01-96-1729 800/100/420 | تجويف: متغير الجدار: 0.30 مم الطول: 3.8-4.2 مم altecweb.com< / a> أو smiths-medical.com< / a> |
| IVC الكفة | altecweb أو smiths-medical | ملف 01-96-1733 800/100/540 | تجويف: متغير الجدار: 0.30 مم الطول: 3.8-4.2 مم altecweb.com< / أ> أو smiths-medical.com< / a> |
| Dremel | 100 | المصغرة35,000 دورة في الدقيقة dremel.com< / a> | |
| نقطة العجلة الماسية | Dremel | 7103 | 2 مم dremel.com< / a> |
| نقطة العجلة الماسية | Dremel | 7105 | 4.4 مم dremel.com< / a> |
| نقطة العجلة الماسية | Dremel | 7144 | 2.4 مم dremel.com< / a> |
| عجلات القطع | Dremel | 420 | dia: 23.8 مم السماكة: 0.5 مم dremel.com< / a> |
| يعالج الرابط السريع | dltchiropody (DLT) PAR | 10 | شفرات مشرط معدلة dltchriopdy< / a> |
| تقريب الرابط | السريع فارما | UD-04-275 | ملقط كوشر المعدل pharmap.ch< / a> |
المراجع
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic Liver Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (65), e4143(2012).
- Hori, T., et al. Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide. World Journal of Gastroenterology., WJG. 16, 3120(2010).
- Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation Proceedings. 37 (1), 185-188 (2005).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47(1979).
- Oldani, G., et al. A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result. Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).
إعادة الطباعة والأذونات
طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه
طلب إذن