يتم تنفيذ كل عملية جراحية وفقا للمبادئ التوجيهية التي وضعتها وزارة الداخلية في المملكة المتحدة وجامعة قسم الخدمات البيطرية في أدنبرة.
1. مجموعة المتابعة العملية الجراحية ملاحظات
- تغيير في الدعك نظيفة الجراحية، ثوب، وكأب وفرك القناع. تنظيف جميع الأسطح من غرفة العمليات بما في ذلك المعدات بالكلورهيكسيدين 2٪ في ايزوبروبيل 70٪.
- قبل الجراحة، الأوتوكلاف جميع المستلزمات والأدوات التي سيتم استخدامها في العملية الجراحية. ينبغي حزم معقمة لكل عملية تشمل ما يلي: 3 الستائر والشاش وتطبيقها طرف القطن، والأغطية سيليكون والأدوات الجراحية، راجع الجدول من مواد جراحية محددة وأدوات والشكل 1. وزن الفئران وقياس من حجم مناسب من البوبرينورفين (0.04 ملجم / كجم) على أن تدار تحت الجلد 1 ساعة قبل إتمام الإجراء. وضع؛ 3 × 1 مل المحاقن لإدارة السوائل تحت الجلد خلال سورغريها، 2 × 6-0 الغرز VICRYL، 1 × 5-0 الغرز Ethilon، علامة العقيمة مع الحاكم ومشرط المتاح 10 شفرة، 4-5 أزواج من القفازات المعقمة وحدة الكي باليد.
- المكان 4 × 10 مل العقيمة، 0.9٪ قارورة المياه المالحة في حمام مائي تحسنت إلى 37 درجة مئوية. سيتم استخدام هذا لاستبدال السوائل تحت الجلد (1 مل / كجم / ساعة)، وشطف موقع الجراحية. إعداد بطانية homeothermic، المستقيم التحقيق، مصباح الحرارة، مجهر جراحي ومخدر تلاعب. بدوره على الليزر وبرمجياتها، مجموعة المتابعة تلاعب مخدر آخر، ووضع وسادة الحرارة تحت حصيرة سوداء على الحيوان الذي سيضع أثناء الفحص.
- استخدام الذكور والفئران وزنها 250-300 ز لويس. يتم تنفيذ الفئران منزل لمدة 7 أيام مع الغذاء والماء بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية مع 12 ساعة الدوائر السوداء الخفيفة قبل أي عملية جراحية.
2. التخدير وتحضير الجلد
- وضع فأر في غرفة تحريض تلاعب مخدر وتدير 4٪ isoflurane ومع 1L/min O 2 لل2-3 دقيقة للحث على التخدير. إزالة الفئران تخدير من الغرفة ووضعه مستلق على حصيرة نظيفة، ساخنة. الحفاظ على isoflurane وبنسبة 1.5٪ باستخدام مخروط الأنف. تطبيق عامل lacrilube أو ما شابه ذلك لمنع تآكل القرنية أثناء العملية. إجراء اختبار قرصة القدم وسادة لضمان الحيوان هو تخدير كاف قبل المتابعة. كرر هذه التجربة الاخيرة قبل كل خطوة رئيسية في إجراء وضبط تركيز مخدر الاستنشاق وفقا لذلك.
- حلاقة عن كثب الأمامي البطن باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية بحيث يتعرض سطح البطن بأكمله. تطبيق السماط الكريم لمدة موصى بها من قبل المورد. إزالة كريم وشطف جيدا الجلد مع ملحي معقم تحسنت إلى إزالة كل آثار من القشدة. تطبيق الكلورهكسيدين 2٪ في ايزوبروبيل 70٪ على الجلد والسماح ليجف قبل المتابعة. هذا هو إعداد الجلد القياسية في وحدتنا على أساس الأدلة الحالية للعدوى موضع الجراحة. فضلك د 34iscuss مع قسم الطب البيطري الخاص ما هو الإجراء القياسي في وحدتك قبل انتخاب بروتوكول إعداد الجلد.
- مكان 2 ستائر جانبي الفئران والحرص على الاحتفاظ بها العقيمة. وضعت على قفازات معقمة وبمساعدة مساعد فتح علب معقمة. وضع جميع الصكوك على الستارة واحد وخياطة الجروح، والشاش، القطن تطبيقها، والأغطية سيليكون وعلامة من ركلة جزاء العقيمة مع حاكم من ناحية أخرى.
- تحديد خط الوسط باستخدام xiphisternum والذيل كنقاط مرجعية. جعل خط الوسط. قياس 0.8 سم تحت xiphisternum وبمناسبة هذه النقطة. رسم خط عمودي على خط الوسط من هذه النقطة. اتخاذ خط الوسط كمركز للعلامة رفرف من 1 سم و 2 سم إلى اليسار واليمين من خط الوسط. رسم خطوط عمودية متوازية على خط الوسط من النقاط. قياس 4 سم تحت الخط الأفقي الأصلي ورسم آخر مواز له. باتباع هذه التعليمات ويرسم على 4 × 4 سم رفرف ينقسم إلى 4 شرائح متساوية(انظر الشكل 2).
3. دوبلر الليزر التصوير
- تحرك بحذر الفئران على مخروط الأنف من الثانية تلاعب مخدر في الماسح الضوئي LDI. يستمر التخدير عند 1.5٪ isoflurane و، 1L/min O 2. بدوره على الليزر واتبع إرشادات الشركة المصنعة لبدء المسح الضوئي. بعد حفظ الملف الممسوح ضوئيا عودة الفئران عودة إلى تلاعب الأولى وإعادة إدراج التحقيق المستقيم من بطانية homeothermic باستخدام البارافين الأبيض الطري ومواد التشحيم.
4 في الموقع رفرف الترام - نموذج عضلي جلدي من IRI
- الأيدي إعادة فرك وضعت على قفازات معقمة جديدة. قطع على دائرة قطرها 5 سم في وسط وثنى العقيمة المتبقية ووضع هذا على البطن يتعرض لإنشاء رايات العقيمة الميدان.
- إجراء شق على الناحية اليسرى الجانبية حافة ملحوظ (الشكل 3A وباء). تحقيق الارقاء. جعل شقوق مماثلة أسفل خطوط أفقيةإلى اليسار من خط الوسط. تحقيق الارقاء.
- المغطي الدهون يجب أن يكون اليسار السفلي غمد المستقيمة مرئية. باستخدام ملقط ومقص القزحية غرامة بعناية تحصل تحت هذه الدهون. والحرص على عدم تلف الثاقبة القادمة من خلال الجهة اليسرى الأمامية غمد المستقيمة. الطائرة التي تتيحها مثل تشريح هو أن مباشرة فوق البطن الأمامي اللفافة الجدار. يواصل تشريح في هذه الطائرة حول الهوامش المرسومة. في الحفرة الحرقفية اليسرى تكمن الكبيرة، وسطحية المنعطف الحرقفي السفن هذه يمكن أن تكون مرتبطة أو أكتوي. ثم توسيع تشريح إعلامي بحذر وفقط بقدر الهامش الجانبي للعضلة المستقيمة اليسرى. هناك تغير لونها واضح في هذه النقطة من الوردي إلى الأبيض بالقرب من (الشكل 3C). ري بعناية المنطقة مع ملحي معقم وتحقق من أن الارقاء قد تحقق قبل وضع الشاش الرطب على المنطقة.
- كرر الإجراء على الجانب المقابل ولكن هذه المرة تمديد ريا لينيا ألبا (منتصف خط). الحرص على تحديد ويكوي كل الثاقبة العضلي الجلدي الناشئة في وسط الحق المستقيمة البطنية العضلات (الشكل 3D). إذا لم يتم ذلك بشكل صحيح فإنه يمكن أن يؤدي إلى ورم دموي بعد العملية الجراحية والنتائج زائفة. وبالمثل تحقيق الإرقاء، لري ووضع الشاش الرطب على رفرف المثارة.
- العودة إلى الهامش السفلي للالمستقيمة الأمامية اليسرى (الشكل 3E و F). يكوي ثقب معظم أدنى ينظر إليها. انتقل إلى خفض نافذة صغيرة (حوالي 0.6 سم × 0.6 سم) في غمد المستقيمة الأمامية باستخدام microscissors وأشار منحني ملقط Graeffe. بلانت تشريح ببطء إلى أسفل الهامش الجانبي للعضلة حتى يخفف العضلات خارج ولكن قبل أن يتم اختراق غمد الخلفي. ثم تناوب على ملقط وتخفف من حدة تشريح إعلامي حتى البطن من العضلات هو فوق الحافة المنحنية من ملقط ونصائح أحرار في الهامش وسطي. إطعام تقريبيLY 6 سم من 5-0 Ethilon في فكي ملقط وربط قبالة غمد المستقيمة السفلية. عند الانتهاء من هذه الخطوة هو عزل رفرف عضلي جلدي على واحد مهيمن سفينة الأوعية شرسوفي متفوقة عميق. تغطية مع الشاش رطبة.
- قطع الأغطية سيليكون في الأشكال البيضاوية مع زوايا على نحو سلس، (الشكل 3G). وينبغي لهذه أن تكون كبيرة بما يكفي لتغطية معظم المنطقة المعرضة تحت الأجزاء fasciocutaneous من رفرف. ومع ذلك، يجب اتخاذ الحذر لضمان أن حافة الجلد يمكن أن تكون مغلقة دون أي توتر ومنحنى الإنسي للبيضاوي قد تضطر إلى أن تقرن مرة أخرى لمنعها تدفق إضعاف من خلال الثاقبة المتبقية. ثم تتم خياطة هذه في مكان مع 6-0 VICRYL (الشكل 3H). تغطي بشاش رطبة.
- استخدام بسيطة المقاطعة 'ربط خارج' 5-0 الغرز Ethilon رفرف لتخفيض درجة الحرارة وفقدان الماء (الشكل 3I). تغطية مع الشاش رطبة.
- تمديد الجرح متفوق على يسارxiphisternum (الشكل 3I). خياطة هذا إلى الربع العلوي الأيسر لتحسين من رأي الميدان.
- قطع بعيدا أي الدهون المغطي للكشف عن متفوقة، اليسار، الأمامي غمد المستقيمة. قطع (0.6 سم × 0.6 سم) نافذة صغيرة في هذا غمد (الشكل 3J). تمديد الجرح بشكل إعلامي حتى تغيير في مسار الألياف العضلية من العمودي إلى وينظر منحرف والاتساق من معبأة بإحكام لييفات فضفاضة.
- إدراج ملقط المنحني بعناية بين هذه العضلات واثنين من فتح الطائرة من قبل تشريح حادة. قطع بعناية أسفل فقط بقدر السطح العلوي من هذه ملقط المنحني قطع طريق البطن من العضلات المستقيمة البطنية اليسرى لكشف الكامنة العميقة، متفوقة الشريان والوريد الشرسوفي (الشكل 3K).
- باستخدام الأدوات الدقيقة وعالية الطاقة على المجهر التشغيل، فصل بعناية الشريان والوريد وتجريدها من أي الدهون المحيطة بها.
- تطبيق المشابك أكلاند ارضحي إلى أحدrtery والوريد (B-1، "V" نوع) وبدء موقت العد التنازلي لفترة 30 دقيقة الدماغية. ري فرضت عنيق، وتغطي بشاش. ونحن لم تستخدم الموسعات السفينة مثل فيراباميل أو pabavarine لكن ينبغي أن يكون تشنج الأوعية مشكلة، وينبغي النظر في هذه الأدوية.
- إدارة البوبرينورفين (0.04 ملغ / كلغ) وتحسنت، ملحي معقم (1 مل / كغ / ساعة).
- بدءا من الزاوية اليسرى العليا، خياطة رفرف في مكان مع الغرز 6-0 تحت البشرة VICRYL وقف وربط قبالة في xiphisternum.
- عندما يوجد وقت الدماغية 30 قد انتهت، وإزالة بعناية والمشابك، ولري عنيق مع المياه المالحة حرارة. تأكد من أن تم إعادة تأسيس تدفق. يرجى ملاحظة أن هذه المرة الدماغية نص عليه المملكة المتحدة الرئيسية هيئة مكتب. الباحثين العاملين في السلطات الأخرى قد تكون قادرة على توسيع نطاق هذا الوقت. سوف تمديد الوقت الدماغية قد يؤدي إلى نتائج سريرية أسوأ.
- خياطة حواف قطع من المستقيمة إلى مكانه مرة أخرى مع 6-0 VICRYL.والحرص على عدم تطبيق الكثير من التوتر لأن ذلك يمكن أن يؤدي إلى مجعد من السفن.
- إكمال خياطة تحت الجلد مع الحرص على دفن كل عقدة تحت الجلد (الشكل 3K).
- تنظيف منطقة الجرح واتركه حتى يجف. إعادة رسم المناطق على رفرف.
- إعادة فحص الحيوان للحصول على صورة ما بعد الجراحة.
- إعادة تطبيق lacrilube لعيون الحيوان ومكان في حاضنة حرارة (37 درجة مئوية) لمدة 1 ساعة لاستعادة قبل أن يعود إلى وحدة تربية.
الخطوات الحاسمة في إطار بروتوكول
جوهر هذا الإجراء هو في تحديد العميق، سفن شرسوفي متفوقة. ويظهر هذا بوضوح في الفيلم المرافق له. وباختصار، هو قطع نافذة في غمد المستقيمة الأمامية لفضح الألياف العضلية الأساسية التي سيقوم بتشغيل طوليا. من خلال توسيع تشريح سطحي من غمد المستقيمة الأمامية بشكل إعلامي تغييرا في مسار الألياف العضلية لوحظ جمعةROM طولية لمنحرف. إدراج فظة انتهت، المنحنية، ملقط Graeffe (أو ما شابه) عند تقاطع هذه حزم من الألياف العضلية اثنين. بلانت تشريح أفقيا. خفض، وذلك باستخدام المقص الصغير، على السطح العلوي للملقط المنحني الذي عقد في هذه الطائرة بين حزم الألياف العضلية. على إزالة Graeffe ملقط الشريان الشرسوفي عميق، متفوقة وسيراعى الوريد في منتصف من الجسم البطنية العضلات المستقيمة. تجريدها من المغطي الدهون في الأوعية باستخدام الأدوات الدقيقة وتطبيق المشابك.
الأجزاء fasciocutaneous من رفرف الترام الفئران هي رقيقة بما فيه الكفاية للسماح للرفرف لاتخاذ كعضو كامل سماكة الجلد الكسب غير المشروع. لمنع هذا، وضمان أن هذا هو نموذج صحيح من IRI رقيقة، يتم وضع ورقة السيليكون مرنة تحت الأجزاء fasciocutaneous من رفرف. اعتمد 35 هذه الخطوة من قبل الباحثين الآخرين بإجراء نماذج الترام الفئران. 17،21،25
الفئران مضغه throuعقدة GH لذلك تأكد من جميع الغرز هي تحت البشرة ويتم دفن كل عقدة. في الاضطلاع الدقيق autocannabilism خياطة من اللوحات كما ذكرت من قبل الباحثين الآخرين يمكن تجنبها. 24
بعد إدارة البوبرينورفين لحد التخدير الصيانة إلى 1٪ isoflurane و(1L/min O 2).