مقالة منهجية

موت الخلايا المرتبطة الانقسام الشاذ التي لاحظها التصوير متحد البؤر في الخلايا السرطانية لايف

14.9K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/50568

⸱

أغسطس 21, 2013

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Cancer Research Center, Sheba Medical Center, 2The Neufeld Cardiac Research Institute, Tel-Aviv University, 3Department of Physiology and Pharmacology, Tel-Aviv University, 4Imaging Unit, Sackler Faculty of Medicine, Tel-Aviv University, 5Biotechnology and Cell Signaling, Ecole Superieure de Biotechnologie Strasbourg, 6Department of Human Molecular Genetics and Biochemistry, Tel-Aviv University

في هذه المقالة

ملخص

وقد تم توثيق النشاط السامة للخلايا من phenanthridine PJ-34 في خلايا السرطان الذين يخضعون الانقسام في الوقت الحقيقي من خلال التصوير متحد البؤر الحية. PJ-34 استئصال سرطان الثدي البشرية MDA-MB-231 الخلايا إيواء خارج centrosomes في الانقسام. على عكس الانقسام ثنائي الوصل العادي، لم تكن متفاوتة المسافات خارج centrosomes في قطبي المغزل في حضور PJ-34.

الملخص

المشتقات فينانثرين بوصفها قوية PARP1 مثبطات تحول دون تجميع ثنائي الوصل من centrosomes الزائدين في خلايا متعددة centrosomal السرطانية البشرية في الانقسام. كان phenanthridine PJ-34 جزيء أقوى. Declustering من خارج centrosomes أسباب فشل الإنقسامية وموت الخلايا في الخلايا المتعددة centrosomal. معظم السرطانات البشرية الصلبة لديها حدوث ارتفاع إضافي، centrosomes. وقد تم توثيق هذا النشاط من PJ-34 في الوقت الحقيقي عن طريق التصوير متحد البؤر الحية سرطان الثدي البشرية MDA-MB-231 الخلايا transfected مع ناقلات ترميز لفلوري γ-تويولين، وهي وفيرة للغاية في centrosomes والفلورسنت H2B هيستون في الوقت الحاضر الكروموسومات. تم الكشف عن ترتيبات الكروموسومات الشاذة ودي عنقودية بؤر γ-تويولين تمثل centrosomes declustered في transfected MDA-MB-231 الخلايا بعد العلاج مع PJ-34. الأمم المتحدة عنقودية خارج centrosomes في قطبي المغزل سبقت موت الخلية الخاصة بهم. هذه النتائج مرتبطة FOR للمرة الأولى في النشاط السامة للخلايا الحصري الكشف مؤخرا من PJ-34 في الخلايا السرطانية البشرية مع خارج centrosomes دو المجموعات في الانقسام، وفشل الإنقسامية مما يؤدي إلى موت الخلية. ووفقا لنتائج الدراسة السابقة التي لاحظها التصوير متحد البؤر الخلايا الثابتة، PJ-34 الخلايا السرطانية القضاء حصرا مع متعددة centrosomes دون المساس تمر الخلايا الطبيعية الانقسام مع اثنين من centrosomes ومغزل ثنائي الوصل. لم يشارك هذا النشاط السامة للخلايا من PJ-34 بواسطة أخرى قوية PARP1 مثبطات، ولوحظ في PARP1 ناقصة MEF extracentrosomes إيواء، مما يشير إلى الاستقلالية لها من PARP1 تثبيط. يعيش التصوير متحد البؤر عرضت أداة مفيدة لتحديد جزيئات جديدة القضاء على الخلايا أثناء الانقسام.

المقدمة

المستمدة فينانثرين PARP1 مثبطات، بما في ذلك PJ-34، وقد صممت لحماية الخلايا هادئة من موت الخلايا أفكارك الناجمة عن الطاقة المستهلكة PARP1 بوساطة الحمض النووي إصلاح تحت ظروف الإجهاد (احتشاء عضلة القلب أو السكتة الدماغية) 1. ومع ذلك، في الآونة الأخيرة اكتشفنا أن PJ-34، في تركيز أعلى مرتين من أن يحفز PARP1 تثبيط، يمكن أن يسبب موت الخلايا حصرا في الخلايا السرطانية البشرية 2،3. كان أكثر سرعة انتشار الخلية، وكان أكثر كفاءة في القضاء على الخلايا. ويعزى النشاط السامة للخلايا من PJ-34 إلى خارج centrosomes دو المجموعات في الانقسام 2. العديد من الخلايا السرطانية البشرية الميناء multicentrosomes 4،5. الحضانة من الخلايا البشرية سرطان الثدي MDA-MB-231، التي تؤوي centrosomes الزائدين، مع 20 ميكرومتر PJ-34 استئصاله كفاءة هذه الخلايا في غضون 72-96 ساعة دون إضعاف الخلايا هادئة أو بعض الخلايا المتكاثرة حميدة بايواء اثنين centrosomes في الانقسام 2،3. تضمين الخلايا حميدة الإنسان خلايا الظهارية الثديية MCF-10، الخلايا البطانية الإنسان (HUVEC) وخلايا اللحمة المتوسطة الأولية المحضرة من الغدة الصعترية الإنسان. وكانت هذه الخلايا مقاومة لهذا النشاط السامة للخلايا من PJ-34. لم PJ-34 لا تتداخل مع دورة الخلية الخاصة بهم خلال 96 ساعة الحضانة أو تؤثر centrosomes وتشكيل المغزل ثنائي الوصل 2،3.

ثنائي القطب الجسيم المركزي الجمعية هو أمر حاسم لتشكيل مغزل الانقسام بين القطبين في 4،5. ولذلك، وضعت الخلايا مع أكثر من عقدين من centrosomes آلية الجزيئية فهم نادرا، تجميع centrosomes بهم إضافية في قطبين 4-9. قد فشل القطبين جمعية centrosomes قضيتهم متعدد الأقطاب مشوهة مغزل والشاذة الكروموسومات الفصل الذي يسيطر على دورة الخلية في G2 / M الاعتقال، ويؤدي إلى موت الخلايا التي تعزى إلى فشل الإنقسامية 4،5. يتم التحقيق بشكل مكثف الآليات الجزيئية الكامنة وراء خارج centrosomes دو المجموعات <سوب> 10. وفهم آلية موت هذا تمكين القضاء حصرية من الخلايا السرطانية في حين أن يجنب الأنسجة 5،10 صحية.

وهكذا، والمركبات التي تستخدم لتنشيط موت الخلايا الإنقسامية كارثة نقدم طريقة جديدة لعلاج السرطان انتقائية، والتي قد تكون فعالة في مجموعة واسعة من النتائج cancers.Our الصلبة الإنسان تشير إلى أن التصوير متحد البؤر يمكن أن تستخدم لتحديد الجزيئات التي تؤثر خارج centrosomes التجميع في الانقسام 2،3، مما يجعل هذه المركبات سرطان استهداف المرشحين المخدرات.

لقد وثقنا النشاط السامة للخلايا من phenanthridine PJ-34 عن طريق المسح الضوئي خلايا سرطانية بشرية ثابتة وحية (مع حدوث ارتفاع إضافي، centrosomes في الانقسام) مقابل الخلايا الطبيعية. ويرد وصف خطوة خطوة من إجراءات التصوير المستخدمة لتحديد النشاط السامة للخلايا من PJ-34 في خلايا سرطانية بشرية أدناه.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. إعداد خلية ثقافة

تم شراؤها MDA-MB-231 الخلايا من ATCC (الاميركي نوع من كوكتيل الثقافة) وتخزينها في النيتروجين السائل.

  1. البذور 10 6 MDA-MB-231 الخلايا في 92 مم طبق بيتري في 10 المتوسطة كاملة مل تحتوي على Dulbeco التعديل النسر متوسطة (DMEM)، و 10٪ مصل الحصان، 1٪ L-الجلوتامين، و 1٪ Penstrep-Amphotericine B. يسمح للخلايا لتتكاثر إلى حوالي 80-100٪ التقاء.
  2. إزالة مستنبت من صحن وتجاهل.
  3. غسل طبقة الخلايا لفترة وجيزة مع 0.25٪ (W / V) حل التربسين EDTA-لإزالة كل آثار من المصل.
  4. إضافة 2.0 مل من محلول التربسين EDTA-إلى طبق ومراقبة الخلايا بواسطة المجهر المقلوب حتى يتم فرقت طبقة الخلايا (عادة في غضون 5 إلى 15 دقيقة).
  5. إضافة 18 مل كاملة متوسطة النمو ونضح بلطف الخلايا عن طريق ماصة. نقل إلى أنبوب.
  6. الطرد المركزي تعليق خلية في 1،200 دورة في الدقيقة.
  7. إعادة تعليق بيليه خلية في 24 مل من CUlture المتوسطة.
  8. إضافة 2 مل من تعليق الخلية إلى 35 مم أطباق أسفل الزجاج (حوالي 25٪ التقاء) ووضعت في الحاضنة (5٪ CO 2، 37 ° C).
  9. الحلول:
    1. متوسط ​​كاملة لتكاثر الخلايا: DMEM مع FBS 10٪، والمضادات الحيوية 1٪ (100 وحدة / مل البنسلين G، و 100 ميكروغرام / مل الستربتوميسين، حل القلم بكتيريا-التقابل) و 2 مم L-الجلوتامين.
    2. حل التربسين EDTA-، التي تحتوي على 0.25٪ التربسين EDTA-.
  10. الأطباق:
    92 مم أطباق بتري.
    35 مم بولي-D-يسين أسفل الزجاج المطلي أطباق الثقافة.

2. إعداد الخلايا للتصوير متحد البؤر لايف

  1. البذور 2 × 10 5 MDA-MB-231 الخلايا في أسفل الزجاج أطباق الثقافة في 2 مل المتوسطة كاملة كما هو مذكور في القسم 1. عندما تصل إلى خلية ثقافة التقاء 60-70٪ (حوالي 3-4 × 10 5 خلايا لكل طبق)، والمضي قدما مع ترنسفكأيشن.
  2. بالنقل الخلايا مع اثنين من البلازميدات encodجي اندماج البروتينات γ-تويولين-GFP (للكشف الفلورسنت من centrosomes) وهيستون-RED (H2B-RED، للكشف الفلورسنت من الكروموسومات) باستخدام كاشف ترنسفكأيشن الليبوسومال جت PI، بعد بروتوكول التصنيع. لفترة وجيزة، وخلط 2 ميكروغرام من كل البلازميد في أنبوب مع 100 ميكرولتر كلوريد الصوديوم (150 مم). مزج كاشف ترنسفكأيشن (100 ميكرولتر) مع 100 ميكرولتر كلوريد الصوديوم (150 مم) في أنبوب الثاني، واحتضان 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة (RT). ثم الجمع بين الحلين، مزيج (باستخدام دوامة معتدل) وتدور إلى أسفل. احتضان لمدة 30 دقيقة في RT.
  3. أثناء الحضانة من خليط ترنسفكأيشن، وغسل خلايا مرة واحدة مع برنامج تلفزيوني واستبدال خلية متوسطة مع 2 مل من DMEM الدافئة مع عدم وجود ملاحق (37 ° C).
  4. إضافة بلطف الخليط ترنسفكأيشن إلى الخلايا في DMEM ومن ثم العودة إلى الخلايا الحاضنة (37 درجة مئوية، 5٪ CO 2) لمدة 8 ساعة.
  5. بعد 8 ساعات من الحضانة، استبدال DMEM مع 2 مل المتوسطة كاملة واحتضان الخلايا في الحاضنة لمدة 24الموارد البشرية.
  6. 24 ساعة بعد ترنسفكأيشن، استبدال المتوسطة من الخلايا مع 2 مل المتوسطة كاملة تحتوي على 20 ميكرومتر PJ-34.
  7. احتضان الخلايا لمدة 18 ساعة إضافية (37 درجة مئوية، 5٪ CO 2).
  8. موضوع الخلايا للعيش التصوير متحد البؤر لمدة 16 ساعة على الأقل في غرفة التصوير والحفاظ على الخلايا في 5٪ CO 2 و 37 درجة مئوية.
  9. في موازاة ذلك، دراسة فعالية ترنسفكأيشن 36 ساعة آخر ترنسفكأيشن باستخدام المجهر الفلورسنت على النحو التالي:
    1. البذور 2 × 10 5 MDA-MB-231 الخلايا في لوحة 6 جيدا تحتوي على 1 ساترة لكل بئر في 2 مل المتوسطة كاملة.
    2. بالنقل الخلايا كما هو مذكور في أقسام 2،2-2،5.
    3. 36 ساعة آخر ترنسفكأيشن إصلاح الخلايا transfected التي شنت على ساترة من قبل الحضانة في الميثانول الباردة: الأسيتون (1:1) حل، 7 دقائق، -20 درجة مئوية.
    4. نضح الحل تثبيت والسماح للساترة مع الخلايا التي شنت لتجف في غطاء الكيميائية.
    5. تطبيق إطالة الذهب antifade كاشف مع دابي وترك اله ساترة لتجف في الظلام لمدة 6 ساعة.
    6. فحص الشريحة تحت المجهر الفلورسنت وحساب النسبة المئوية من الخلايا transfected (إشارات حمراء وخضراء) من مجموع السكان من الخلايا (تلطيخ DNA بواسطة دابي). النسبة المئوية ترنسفكأيشن المطلوب هو حوالي 20-40٪ عندما يتم عد الخلايا 100-200.

3. المعلمات التقنية لايف متحد البؤر إعدادات الماسح الضوئي التصوير

  1. ScanMode XYZT؛ الثقب [متجدد الهواء] 1.00؛ زووم 3.5 و 8 بت القرار؛ الليزر DPSS 561 نانومتر؛ أرغون، ليزر مرئية 488 نانومتر؛ الليزر و/ ني مرئية 633 نانومتر؛ الهدف HCX PL APO CS 63X 1.40 OIL الأشعة فوق البنفسجية؛ العددي الفتحة 1.4؛ سرعة المسح الضوئي 700 هرتز؛ مؤشر الانكسار 1.52.
  2. تم بواسطة IMARIS التصوير البرمجيات 7.0 إعداد صورة 3-D العرض.

4. التصوير متحد البؤر من الانقسام في الخلايا الثابتة

  1. البذور 2 × 10 5 MDA-MB-231 خلايا الثدي السرطانية (آي تي سي سي)، والماوس العادي الخلايا الليفية الجنينية (MEF)، أو PARP1 ناقصة MEF (PARP - / -، الدكتور فرنسوا Dantzer استعداد) على coverslips الزجاج في لوحة 6 جيدا في 2 مل المتوسطة كاملة. تم غسلها مع coverslips على 96٪ من الإيثانول، وبعد بواسطة غسل بالماء DD العقيمة، والمجففة لمدة 2 ساعة، ووضعها في كل بئر من صحن 6 جيدا.
  2. إضافة PJ-34 (10-30 ميكرومتر) إلى المتوسطة واحتضان الخلايا للفترة المطلوبة (عادة ما يصل الى 96 ساعة).
  3. غسل coverslips مرة واحدة مع برنامج تلفزيوني (الفوسفات مخزنة المالحة)، وإصلاح الخلايا باستخدام الحضانة في الميثانول الجليد الباردة: الأسيتون (1:1) حل، 7 دقائق، -20 درجة مئوية.
  4. نضح الحل تثبيت والسماح للcoverslips على لتجف في غطاء الكيميائية (في هذه المرحلة، يمكن أن تظل في coverslips على -20 درجة مئوية لعدة أسابيع).
  5. غسل coverslips مرة واحدة مع PBST (PBS تستكمل مع 0.1٪ توين 20) لpermeabilize أغشية الخلية ومنع الخلايا مع 10٪ NDS (حمار عادي سيروم) في PBST ('عرقلة الحل') لمدة 1 ساعة على RT.
  6. احتضان الخلايا الثابتة permeabilized مع antibodi الابتدائيوفاق لمدة 2 ساعة على RT (للمغزل وcentrosomes تلطيخ). مخففة الأجسام المضادة في عرقلة الحل على النحو التالي: تويولين مكافحة α (1:250 تمييع) والمضادة للγ تويولين (1:200 تمييع). يتم تطبيق الأجسام المضادة الأولية كما يلي: تطبيق 100 ميكرولتر (في قطرة) من مزيج من الأجسام المضادة في عرقلة الحل لكل ساترة على 6 جيدا غطاء لوحة (الغطاء هو رأسا على عقب). وضع بلطف ساترة على انخفاض الأجسام المضادة وخلايا المصنفة التي تواجه الهبوط. لاحتضان coverslips التي تواجه الأجسام المضادة لمدة 2 ساعة في درجة حرارة الغرفة.
  7. ضع coverslips على العودة في الآبار وغسل الخلايا 3 مرات مع PBST. ثم استخدام نفس الإجراء الموضح في 4.6 لوصفها الخلايا على coverslips مع الأجسام المضادة الثانوية فلوري. احتضان الخلايا على coverslips مع الأجسام المضادة الثانوية لمدة 1 ساعة، RT، في الظلام. مخففة الأجسام المضادة في عرقلة الحل على النحو التالي: فلور اليكسا 488 (1:1،000 التخفيف؛ الخضراء) واليكسا فلور 568 (1:1،000 التخفيف؛أحمر).
  8. تحميل coverslips على استخدام الذهب إطالة كاشف antifade مع دابي (الكروموسومات لتلطيخ)، واحتضان بين عشية وضحاها في RT في الظلام لتجف.
  9. دراسة ينزلق الغطاء بواسطة الفحص المجهري متحد البؤر.

5. بقاء الخلية تقاس إنتاج ATP

يتم قياس إنتاج ATP من قبل الانارة ATP كشف عدة مقايسة.

  1. بذور الخلايا في لوحة 96 جيدا، ما يقرب من 20،000 الخلايا في 800 ميكرولتر المتوسطة في كل بئر. وينبغي أن تستخدم ثلاثة آبار فارغة لتحديد التلألؤ خلفية المتوسطة.
  2. إعداد ATP القياسية سلسلة التخفيف من حوالي 10 ميكرومتر إلى 100 ميكرومتر والحفاظ على الجليد.
  3. إضافة 50 ميكرولتر من المنظفات إلى كل بئر ويهز لوحة لمدة 5 دقائق في شاكر المداري، 700 دورة في الدقيقة.
  4. إعادة كل قارورة من 'الركيزة مجفف بالتجميد' مع 5 مل من 'المخزن المؤقت الركيزة' في المجموعة.
  5. إضافة 50 ميكرولتر من الحل الركيزة المعاد إلى الآبار، ويهزلوحة لمدة 5 دقائق على شاكر المداري، 700 دورة في الدقيقة.
  6. الحفاظ على لوحة في الظلام لمدة 10 دقيقة.
  7. قياس luminiscence من كل بئر بواسطة ELISA قارئ صفيحة ميكروسكوبية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

PJ-34 هو المياه مستقر قابل للذوبان phenanthridine 1 (الشكل 1). كشفت نتائجنا السابقة موت الخلايا ودي عنقودية خارج centrosomes في عدة أنواع من الخلايا السرطانية متعدد centrosomal الثابتة التي كانت تعامل مع PJ-34. في المقابل، لم تضعف الخلايا المتكاثرة العادي 2،3. وقد تم تحديد Centrosomes بواسطة وضع العلامات مزدوج مع الأجسام المضادة الموجهة ضد centrine1 وγ-تويولين في الخلايا خارج centrosomal ثابت 2.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يعيش المقدمة التصوير متحد البؤر وثائق في الوقت الحقيقي من تأثير السامة للخلايا من PJ-34 في خلايا متعددة centrosomal الحية خلال الانقسام (الشكل 3 و معلومات تكميلية). وكان هذا أول الوثائق الحية عازيا السمسة من PJ-34 في خلايا سرطانية بشرية لcentrosomes اضافية دي تجميع وموت الخلايا، مما يشير إلى تحريض الميتوزى موت الخلايا النكبة عن PJ-34 5-9. في المقابل، لوحظ تجمع ثنائي الوصل من centrosomes فائقة numerary في الحي غير المعالجة MDA-MB-231 الخلايا التي تمر الا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن الكتاب أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة.

شكر وتقدير

مصادر التمويل لهذا البحث: صندوق مشترك لشركة جامعة تل أبيب نقل التكنولوجيا، راموت ومركز سبأ-الطبية (M. CA وSI)، ICRF - سرطان الإسرائيلي البحوث في مؤسسة (M. CA.) ومؤسسة العلوم اسرائيل ( SI).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
REAGENTS
DMEMInvitrogen (GIBCO)41965 
FBS (مصل الأبقار الجنينية)Invitrogen (GIBCO)12657 
Pen-Strep-Ampho solutionالصناعات البيولوجية ، إسرائيل03-033-1B 
L-glutamineInvitrogen (GIBCO)25030-024 
0.25٪ Tripsin-EDTAInvitrogen (GIBCO)25200 
92 ملم أطباق بتريNunc,Thermo Scientific150350 
35 مم بولي D-lysine مطلي بالزجاج المطلي أطباق ثقافةMatTek Corporation ، الولايات المتحدة الأمريكيةP35GC-0-14-C& nbsp ؛
طقم فحص الكشف عن ATP المضيءAbcamab113849 
NDS (مصل الحمير العادي)Jackson ImmunoResearch017-000-121 
الأجسام المضادة المضادة لألفا التوبولينSigmaT90261: 250 التخفيف (IF)
الأجسام المضادة المضادة للتوبولينSigmaT51921: 200 التخفيف (IF)
Alexa Fluor 488 Goat Anti-Mouse IgGInvitrogenA-110171: 1،000 التخفيف (IF) Alexa
Fluor 568 الحمار المضاد للأرانب IgGInvitrogenA-100421: 1،000 التخفيف (IF)
كاشف ProLong Gold المضاد للبهتان مع DAPI (تركيب)InvitrogenP36935  ؛
JetPEI (كاشف التعداء الشحمي) Polyplus101-10  ؛
EQUIPMENT< / strong>
مجهر متحد البؤرLeica (مانهايم ، ألمانيا)TCS SP5II& nbsp ؛

المراجع

  1. Jagtap, P., et al. Novel phananthridine inhibitors of poly(adenosine 5'-diphosphate-ribose) synthetase: Potent cytoprotective and antishock agents. Crit. Care Med. 30, 1071-1082 (2002).
  2. Castiel, A., et al. A small molecule exclusively eradicates human cancer cells: Extra-centrosomes de-clustering agent. BMC Cancer. 11 (1), 412(2011).
  3. Inbar-Rozensal, D., et al. A selective eradication of human nonhereditary breast cancer cells by phenanthridine -derived polyADP-ribose polymerase inhibitors. Breast Cancer Res. 11 (6), R78(2009).
  4. Gergely, F., Basto, R. Multiple centrosomes: together they stand, divided they fall. Genes Dev. 22, 2291-2296 (2008).
  5. Godinho, S. A., Kwon, M., Pellman, D. Centrosomes and cancer: how cancer cells divide with too many centrosomes. Canc. Met. Rev. 28, 85-98 (2009).
  6. Doxsey, S. Re-evaluating centrosome function. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2, 688-698 (2001).
  7. Walczak, C. E., Heald, R. Mechanisms of mitotic spindle assembly and function. International Rev. of Cytology. 265, 111-158 (2008).
  8. Ogden, A., Rida, P. C. G., Aneja, R. Let's huddle to prevent a muddle: centrosome declustering as an attractive anticancer strategy. Cell Death Differ. 19, 1255-1267 (2012).
  9. Kramer, A., Anderhub, S., Maier, B. Mechanisms and Consequences of centrosomes clustering in cancer cells. The Centrosome: Cell and Molecular mechanisms of functions and disfunctions in disease. Schatten, E. , Humana Press Springer. 255-277 (2012).
  10. Galimberti, F., et al. Anaphase Catastrophe Is a Target for Cancer Therapy. Clin. Cancer Res. 17, 1218-1222 (2011).
  11. Kanai, M., et al. Haploinsufficiency of poly(ADP-ribose) polymerase-1-mediated poly(ADP-ribosyl)ation for centrosome duplication. Biochem. Biophys. Res. Commun. 359, 426-430 (2007).
  12. Gartner, E. M., Burger, A. M., Lorusso, P. M. Poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors: a novel drug class with a promising future. Cancer J. 16, 83-90 (2010).
  13. Wahlberg, E., et al. Family-wide chemical profiling and structural analysis of PARP and tankyrase inhibitors. Nature Biotechnology. 30, 283-288 (2012).
  14. Rouleau, M., Patel, A., Hendze, M. J., Kaufmann, S. H., Poirier, G. G. PARP inhibition: PARP1 and beyond. Nature Rev. Cancer. 10, 293-301 (2010).
  15. Leber, B., et al. Proteins Required for Centrosome Clustering in Cancer Cells. Sci. Transl. Med. 2 (33), 33-38 (2010).
  16. Kwon, M., et al. Mechanisms to suppress multipolar division in cancer cells with extra centrosomes. Gene Dev. 22, 2189-2203 (2008).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

PJ 34 H2b PARP1 MDA MB 231

مقالات ذات صلة