يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

الاستجواب وظيفية من الكبار طائية تكوين الخلايا العصبية مع البؤري الإشعاعية تثبيط

11.8K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/50716

⸱

نوفمبر 14, 2013

 ,  ,  ,  ,  , 

في هذه المقالة

ملخص

لا تزال وظيفة المولد الكبار الخلايا العصبية الثدييات منطقة نشطة للتحقيق. الإشعاع المؤين يمنع ولادة خلايا عصبية جديدة. استخدام الكمبيوتر الموجهة التصوير المقطعي بالإشعاع التنسيق (CFIR)، ثلاثي الأبعاد التشريحية للاستهداف فئات معينة من السكان السلف العصبية ويمكن الآن أن تستخدم لتقييم دور وظيفي من تكوين الخلايا العصبية الكبار.

الملخص

توصيف وظيفي للخلايا العصبية المولد الكبار لا تزال تمثل تحديا كبيرا. نهج لمنع تكوين الخلايا العصبية الكبار عن طريق تسليم الفيروسية الغازية أو حيوانات معدلة وراثيا لديها يفند المحتملة التي تجعل تفسير نتائج هذه الدراسات صعبة. أدوات الإشعاعية جديدة آخذة في الظهور، مع ذلك، أن تسمح لأحد للتحقيق noninvasively وظيفة مجموعات مختارة من الخلايا العصبية المولد الكبار خلال دقيقة ودقيقة استهداف التشريحية في الحيوانات الصغيرة. الإشعاعات المؤينة التنسيق يحول دون ولادة وتمايز الخلايا العصبية الجديدة، ويسمح استهداف مناطق محددة السلف العصبية. من أجل إلقاء الضوء على دور وظيفي المحتملة التي يلعب تكوين الخلايا العصبية طائي الكبار في تنظيم العمليات الفيزيولوجية، قمنا بتطوير تقنية التشعيع تنسيق موسع لمنع انتقائي ولادة الخلايا العصبية المولد الكبار في سماحة وسيطة طائي. نحن تصف طريقة لC omputer الموجهة التصوير المقطعيو ocal الأشعة تحت الحمراء (CFIR) تسليم لتمكين تشريحية دقيقة ودقيقة تستهدف في الحيوانات الصغيرة. يستخدم CFIR ثلاثي الأبعاد الحجمي التوجيه صورة لتوطين واستهداف جرعة الإشعاع، ويقلل من التعرض للإشعاع إلى مناطق الدماغ nontargeted، ويسمح لتوزيع جرعة امتثالي مع حدود شعاع حاد. هذا البروتوكول يسمح لأحد أن يسأل أسئلة بخصوص وظيفة الخلايا العصبية المولد الكبار، ولكن أيضا يفتح المناطق على الأسئلة في مجالات البيولوجيا الإشعاعية، البيولوجيا الورم، وعلم المناعة. وهذه الأدوات الإشعاعية تسهيل ترجمة الاكتشافات في مقاعد البدلاء إلى السرير.

المقدمة

وقد أثبتت الاكتشافات الحديثة أن المخ لدى الثدييات الكبار يمكن الخضوع لدرجة كبيرة من المرونة. تتولد الخلايا العصبية المولد الكبار طوال فترة البلوغ في محاريب المتخصصة في أدمغة الثدييات 1. ما هي وظيفة هذه الخلايا العصبية المولد الكبار؟ وأكثر من ذلك، وأنها لا تلعب دورا في علم وظائف الأعضاء والسلوك؟ وقد ركزت الدراسات على هذا الموضوع تقليديا على المنطقة subventricular من البطينين الوحشي والمنطقة جزئي التحبب من الحصين، ولكن الدراسات الحديثة قد تميزت تكوين الخلايا العصبية في مناطق الدماغ الأخرى مثل منطقة ما تحت المهاد الثدييات 2. وقد تم الإبلاغ عن تكوين الخلايا العصبية في الهايبوتلاموس بعد الولادة والبالغين 2....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

استخدام الحيوان

الحصول على موافقة من لجنة رعاية الحيوان واستخدام المؤسسية للرعاية القياسية واستخدام البروتوكولات. تم تطوير البروتوكول الحالي للدراسات التشعيع التنسيق على 5،5 حتي 10 أسبوع من العمر الفئران الكبار C57BL6 / J، و(الشكل 2) 2 الموصوفة سابقا. ومع ذلك، شريطة الأعمار الأخرى، ويمكن أيضا أنواع الحيوانات الصغيرة (الفئران، والفئران البيضاء والسناجب الأرضية، الخ) يمكن استخدامها، أن بروتوكولات التخدير فعالة والأطلس مرجعا الشعاعي السماح تحديد المنطقة ذات الاهتمام (ROI) متاحة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تقييم الاستهداف CT الموجهة ودقة

معايرة الميكانيكية للنظام هو أمر حاسم لضمان أن الحزم من زوايا مختلفة في جميع تتقاطع في نقطة واحدة. وقد أنجز المعايرة مع الأسلوب القائم على التصوير شبه التلقائي، حيث تم قياس دقة المحاذاة نهاية إلى نهاية ليكون 0.2 مم 29. هذه الدقة أمر بالغ الأهمية للغاية، حيث بلغ حجم هيكل سماحة متوسط ​​طائي صغيرة 2. لاختبار هذه المعايرة، قمنا بقياس توزيعات الجرعة مع الأفلام الحساسة.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

أشعة المقطعية المحورية الموجهة (CFIR) هي رواية ونهج نظام متكامل قادر على تقديم مجالات الإشعاع لأهداف في الحيوانات الصغيرة تحت السيطرة الروبوتية باستخدام CT-32 الإرشاد. قدرة CFIR لتقديم الحزم شديدة التركيز على نماذج حيوانية صغيرة توفر فرص جديدة للبحث لسد البحوث المختبرية والترجمة السريرية. وتصف هذه الورقة مقاربة CFIR للتسليم الإشعاع دقيقة خصيصا لاستهداف طائي عدد سكانها السلف العصبية. علينا أن نظهر هنا كيفية معايرة الإشعاع وتأكيد التسليم خصوصية عبر فيلم الأشعة السينية وال.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

JW ديها اتفاقيات تمويل البحوث والتشاور مع Xstrahl، وشركة

شكر وتقدير

نشكر C. Montojo، J. رييس، وM. درع للحصول على المشورة والمساعدة التقنية. وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الامريكية الوطنية للصحة منح F31 NS063550 (لDAL)، جائزة باسل أوكونور كاتب الباحث والمنح المقدمة من صندوق Klingenstein وNARSAD (لSB). SB هو WM كيك الكرام الباحث الشاب في البحوث الطبية.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
منصة أبحاث SARRPXstrahlRS225Ahttp://www.xstrahl.com/xstrahlrs225.htm< / a>
SARRP مخبأ التشعيعXstrahlاختياري ، ولكن يجب احتواء التعرض للإشعاع مع فيلم
الكروم GAFGAF IPSGAFchromic ETB2
ماوس فانتومجاميكس457اشتر ألواح مياه صلبة 0.5 سم × 30 سم × 30 سم من Gammex وقطعها إلى الحجم المطلوب.
الفأر المضاد للفوسفو هيستون H2AX Ser139 الأجسام المضادةMillipore، Inc.05-636استنساخ JBW301
نظام غذائي للقوارض عالي الدسمحمية بحثيةD12492i60٪ من السعرات الحرارية مثل الدهون ، يجب تشعيع الطعام
IsofluraneBaxter Healthcare Corporation10019-360-40
0.01 M سترات الصوديومفيشر Scientific1.471 جم من سترات الصوديوم المذابة في 500 مل من الماء منزوع الأيونات
Superfrost Plus شرائحفيشر Scientific12-550-15
يفضل تركيب وسط مضاد للنواة DAPIFisher
Scientific Fisher ScientificVectashield أو Gelvatol
البديل

المراجع

  1. Ming, G. L., Song, H. Adult neurogenesis in the mammalian brain: significant answers and significant questions. Neuron. 70, 687-702 (2011).
  2. Lee, D. A., et al. Tanycytes of the hypothalamic median eminence form a diet-responsive neurogenic....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

التشعيع البؤريالتوجيه بالتصوير المقطعي المحوسبدقة الحزمة الإشعاعيةتحت المهاد القاعدي البطنيأفلام GAF الكروميةكسور الحمض النووي DNA مزدوجة السلسلةنظام غذائي عالي الدهونتثبيط تكوين الخلايا العصبيةالعلاج القوسي بالتوجيه التجسيمي