مقالة منهجية

هندسة الأنسجة: بناء ومتعددة الخلايا 3D سقالة لتسليم الطبقات صفائح خلية

DOI:

10.3791/51044

⸱

أكتوبر 3, 2014

 ,  , 
1School of Engineering, University of California, Merced

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لإنشاء هياكل عالية التنظيم من الأنسجة المعقدة ، يجب على المرء تجميع أنواع متعددة من المواد والخلايا في مركب متكامل. يشتمل هذا التصميم الاندماجي على صفائح خلايا ذات طبقات خاصة بالأعضاء مع مادتين متميزتين مشتقتين بيولوجيا تحتويان على قاعدة مصفوفة ليفية قوية ، وخلايا بطانية لتعزيز تكوين أوعية جديدة.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

العديد من الأنسجة، مثل قلوب البشر البالغين، غير قادرين على تجديد كاف بعد الضرر. 2،3 استراتيجيات في هندسة الأنسجة تقترح الابتكارات لمساعدة الجسم على الشفاء والإصلاح. على سبيل المثال، قد يكون النهج TE قادرة على تخفيف إعادة القلب بعد احتشاء عضلة القلب (MI)، وربما زيادة إجمالي وظائف القلب إلى القريب العادي قبل MI مستوى 4 كما هو الحال مع أي نوع من الأنسجة وظيفية، وتجديد أنسجة القلب الناجح ينطوي على تسليم السليم لل أنواع الخلايا متعددة مع العظة البيئية لصالح التكامل وبقاء الكسب غير المشروع زرع خلية / الأنسجة. يجب أن تعالج الأنسجة المهندسة معلمات متعددة بما في ذلك: الإشارات القابلة للذوبان، خلية الى خلية التفاعلات، والمواد مصفوفة تقييم وسائل إيصالها، آثارها على بقاء الخلية، والقوة المادية، وتسهيل وتنظيم الخلايا إلى الأنسجة. الدراسات باستخدام الحقن المباشر للخلايا الكسب غير المشروع فقط تجاهل هذه العناصر الأساسية. 2،5،6لم يتم بعد إعداد تصميم النسيج الجمع بين هذه المكونات. هنا، نقدم مثالا لتصاميم متكاملة باستخدام طبقات من ألواح الخلايا منقوشة مع نوعين متميزين من المواد البيولوجية المشتقة من نوع من الخلايا التي تحتوي على الجهاز المستهدف والخلايا البطانية لتعزيز تكوين الأوعية جديد في "نسيج". على الرغم من أن هذه الدراسات تركز على توليد أنسجة تشبه القلب، وهذا التصميم الأنسجة يمكن تطبيقها على العديد من الأجهزة الأخرى من القلب مع تصميم المواد والحد الأدنى من التغييرات، ومن المفترض أن يكون المنتج قبالة الجاهزة للاستخدام للعلاجات التجدد. بروتوكول يتضمن خمس خطوات مفصلة. ويستخدم البولي درجة الحرارة حساسة (N -isopropylacrylamide) (pNIPAAM) لأطباق زراعة الأنسجة معطف. ثم، وخلايا أنسجة محددة يتم تربيتها على سطح لوحات مغلفة / أسطح micropattern لتشكيل خلية ورقة مع التصاقات جانبية قوية. ثالثا، يتم إنشاء مصفوفة قاعدة للأنسجة عن طريق الجمع بين مسامية مصفوفة مع permissi التوعية المستحدثةلقد الهلاميات المائية والخلايا البطانية. وأخيرا، يتم رفع الأوراق خلية من الأطباق pNIPAAM المغلفة ونقل إلى قاعدة عنصر، مما يجعل بناء كاملة.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أظهر حقن الخلايا و / أو المواد المفردة وحدها نجاحا متغيرا في أنظمة الأعضاء الأخرى ونجاحا محدودا في تجديد القلب. 5،7-12 حاليا ، يتم توصيل الخلايا المشتقة من الخلايا الجذعية إلى الأنسجة التالفة باستخدام مجموعة متنوعة من طرق التوصيل بما في ذلك: الحقن المباشر للخلايا في الأنسجة والتروية في إمدادات الدم. 13-17 قام آخرون بزرع خلايا بمفردها ، والمواد وحدها و / أو بالاشتراك مع ناقلات المواد للمساعدة في تجديد الأعضاء التالفة. 18-21 يجمع هذا التصميم بين استراتيجيات متعددة توفر قوة المواد والزخرفة في مواد متعددة وأنواع خلايا متعددة.

على وجه التحديد ، توفر المصفوفة الليفية القاعدية الخالية الخلوية القوة البدنية الأساسية للبناء ، مما يجعلها مناسبة للخياطة في المريض ، إذا لزم الأمر. تمتلئ المساحات الفارغة في المصفوفة الأساسية بالخلايا البطانية في هيدروجيل متساهل للأوعية الدمويةالجديدة 22 لتأسيس الأوعية الدموية بسرعة للبنية المزروعة. ثم يتم دمج هذا المركب مع صفائح الخلايا المزخرفة مسبقا التي تسمح بالاتصال المحسن من خلية إلى خلية ، وتحاكي الأنسجة الأصلية بشكل أوثق. 1،23-25 تم تحديد عملية الإنتاج الإجمالية للتصحيح الخلوي متعدد الطبقات بواسطة المخطط الانسيابي في الشكل 1.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. إنشاء لوحات pNIPAAM المغلفة

  1. حل 2.6 غرام من pNIPAAM في 2 مل من / 40٪ محلول الهكسان 60٪ التولوين.
  2. حرارة الخليط إلى 60 درجة مئوية لمدة 10 دقيقة أثار، حتى يتم حل pNIPAAM.
  3. قطع ورق الترشيح في دائرة قطرها 60 ملم ورقة مكان في قمع بوخنر.
  4. تصفية حل من خلال بوخنر القمع في وزنه قبل دورق زجاجي (لا تستخدم البلاستيك، والهكسان سوف تذوب البلاستيك).
  5. ضع الكأس ومحتوياتها في فراغ جرس (24 رطل) O / N (16 ساعة). ملاحظة: حتى يتفاعل مع بقايا الآيزوبروبيل سيكون أكسدة لذلك تأكد من أنها لا تأتي في اتصال مع الأوكسجين.
  6. تزن الكأس لتحديد وزن pNIPAAM.
  7. إضافة ايزوبروبيل إلى pNIPAAM، وخلق 50/50 ث / ث الحل.
  8. ضع 2 مل من محلول على سطح لوحة زراعة الأنسجة، ومعطف لمدة 5 دقائق تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية.
  9. غسل لوحة مع 2 مل من برنامج تلفزيوني الدافئ مرتينقبل استخدام لثقافة الخلية.

2. إنشاء خلية صفائح

ملاحظة: يمكن إنشاء أوراق خلية من الخلايا الأولية للجهاز الهدف باستخدام عدد من الأساليب المختلفة، أو طلاء الأسطح زراعة الأنسجة مع الحرارية استجابة البوليمر كما هو موضح هنا. وتقدم لوحات الحرارية الحساسة قبل المغلفة أيضا عدد من البائعين.

ملاحظة: هذا البروتوكول هو لثقافة استخدام طبق 35 ملم. باختصار، يتم تحضين الخلايا أولا عند 37 درجة مئوية لمدة لا تقل عن 24 ساعة عند التقاء لتأسيس اتصالات جانبية بين الخلايا المجاورة. للافراج عن صحائف خلية، يتعرض لوحات لدرجات حرارة أقل من 32 درجة مئوية. ثم يتم نقل ورقة الخلية إلى قاعدة مصفوفة ليفية قوية تحتوي على هيدروجيل متساهل التوعية المستحدثة مع الخلايا البطانية في الأوعية الدموية.

  1. عزل السكان الخلية. ملاحظة: هذه الطريقة تعتمد على إجراءات اشتقاق الفردية ونوع من الخلايا. الفئران مو سلس الأبهروتستخدم خلايا scle (RASMC) في هذا المثال. هذه هي خلايا العضلات الملساء معزولة الأولية من الشريان الأورطي البطني من الفئران.
  2. غسل الخلايا مع 2 مل من PBS الدافئ.
  3. إضافة 3 مل من التربسين (أو الشق الآخر / حل يفصل) إلى الخلايا لمدة 5 دقائق.
  4. تمنع التربسين بإضافة 3 مل من وسائل الإعلام والثقافة، أو حل العازلة الفوسفات (PBS) التي تحتوي على 10٪ مصل بقري جنيني (FBS).
  5. جمع الخلايا في أنبوب مخروطي الشكل والاعتماد قسامة.
  6. تدور الخلايا في 1،000 دورة في الدقيقة (228 x ج) لمدة 5 دقائق.
  7. نضح وطاف resuspend الخلايا في وسائل الإعلام نموها (يتم استخدام SmGM2 بالإضافة إلى عدة رصاصة مستنبت للRASMC).
  8. وضع وسائل الإعلام التي تحتوي على الخلايا على 35 ملم الحرارية الحساسة وحة - pNIPAAM لوحة المغلفة بتركيز التي من شأنها تحقيق 100٪ التقاء. ملاحظة: للحصول RASMCs تم تحديد هذا العدد ليكون 100،000 خلية / سم 2. ولكن نظرا لفقدان الخلايا أثناء وفاة، و 120٪ من ذلك فا يستخدم LUE.
  9. وضع في حاضنة عند 37 درجة CO / N. ملاحظة: من المهم للحفاظ على الخلايا عند 37 درجة مئوية للحفاظ على التصاق الخلية إلى لوحة.

3. إعداد مصفوفة التأسيسية

ملاحظة: مختلف المصفوفات ليفية 3D يمكن استخدامها لطبقة مصفوفة ليفية قوية بين الأوراق الخلايا الحساسة. وتشمل بعض الأمثلة: جلفوم، bioglass والمواد الطبيعية acellularized 26 أو nanospun المواد 27،28 وقدمت المثانة البولية الخنزير مصفوفة (UBM) المستخدمة في هذه الدراسات بسخاء من وجهة نظرنا متعاون، الدكتور Badylak 29.

  1. قبل استخدامها، وتحديد خصائص المصفوفة بما في ذلك عدم وجود محتوى الخلوي إذا تم استخدام مصفوفة decellularized، 27،28 بقاء الخلية المحددة، والفضاء باطل 22
  2. قطع مصفوفة تعقيمها قبل إلى الحجم المطلوب والشكل. ملاحظة: وهنا، يستخدم حفرة لكمة لقطع دائرة قطرها 4 مم.
ve_title "> 4. الخلايا البطانية لحصد في حديث التوعي متساهل هيدروجيل

ملاحظة: يمكن الحصول على الخلايا البطانية من مجموعة متنوعة من المصادر، بما في ذلك التمييز من الخلايا الجذعية أو السلف. هنا، وتستخدم HuVECs.

  1. استخدام أي هيدروجيل متساهل (الليفين، والمواد الهلامية الكولاجين) لفترة طويلة كما المرة عبر ربط قصيرة بما يكفي للسماح للخلايا تبقى قابلة للحياة. ملاحظة: هنا، هلام لHyaluronan (HA) على ربط عبر مع يستخدم جسر ثاني كبريتيد.
  2. إعداد هيدروجيل HA وفقا لبروتوكول الشركة.
  3. جمع الخلايا البطانية وتفريق في حل وحيد الخلية باستخدام 1X التربسين. ملاحظة: يمكن أيضا Accutase أو خلية التفكك العازلة استخدامها لتشتت خلية واحدة.
  4. تنشيط انزيم التربسين باستخدام مبلغ مساو من مثبط التربسين فول الصويا (إذا كان من المهم أن الخلايا لا تتلامس مع المصل) أو 10٪ FBS في برنامج تلفزيوني، وجمع الحل / الخلايا في أنبوب مخروطي 15 مل.
  5. Count الخلايا، وحساب حجم الحاجة للأبعاد التصحيح (كميا سابقا). ملاحظة: للحصول على 4 ملم التصحيح، وتستخدم هنا من 2 مليون الخلايا البطانية.
  6. استخراج خلايا من 2 مليون، والمكان الى 15 مل أنبوب مخروطي الشكل الجديد.
  7. تدور في (228 x ج) لمدة 5 دقائق.
  8. نضح طاف، وترك الخلايا كما بيليه في أنبوب مخروطي.
  9. مزيج من المواد السائلة HA والجيلاتين في 1: الحصة 1. ثم إضافة 80٪ من حجم التداول الكلي في أنبوب مخروطي يحتوي على بيليه.
  10. resuspend الخلايا البطانية في 1: 1 HA / خليط الجيلاتين
  11. وضع خلايا معلقة في خليط HA / الجيلاتين في قاعدة مصفوفة ليفية من الخطوة 2.
  12. إضافة 1/5 (20٪) من حجم التداول الكلي المطلوب للرابط عبر
  13. احتضان لمدة 1 ساعة على 37 درجة مئوية.

5. عزل صفائح خلية

  1. إزالة لوحات 35 ملم pNIPAAM المعاملة التي تحتوي على خلايا من الحاضنة ومكان في غطاء ثقافة الخلية فيRT.
  2. نضح بسرعة وسائل الإعلام من الخلايا، وإضافة 2 مل من 6٪ الجيلاتين العادية الذي تم تسخينه إلى 37 درجة مئوية.
  3. في حين أن الجيلاتين لا تزال دافئة، ضع شعرية معدنية في الجيلاتين، غمر تحت سطح الجيلاتين العادية (فيلم 1).
  4. وضع لوحة كاملة على الجليد لمدة 5 إلى 7 دقائق، والسماح للالجيلاتين لتتصلب.
  5. بعد 7 دقائق، واستخدام ملعقة لفصل بعناية حواف الجيلاتين من الجانب من لوحة، ومن ثم استخدام ملقط لرفع شعرية معدنية من لوحة ملاحظة: الجيلاتين 6٪، ورقة خلية يجب أن ترفع مع شعرية.
  6. نقل ورقة الخلية إلى الطبق ووضع على رأس قاعدة ليفية مصفوفة هيدروجيل الجمع، ووضع بعناية شعرية على أعلى بناء. ملاحظة: الجانب القمي من ورقة خلية ستبقى في هذا المنصب.
  7. إضافة 2 مل من وسائل الإعلام دافئ (37 درجة مئوية).
  8. احتضان O / N السماح للخلايا ورقة التمسك السطح هيدروجيل.
  9. إزالة رانه شعرية المعادن بعد حل ارتفاع درجة حرارة (حوالي 1 ساعة)، أو في اليوم التالي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

مخطط التدفق (الشكل 1) يبين طريقة الكلي لجعل التصحيح متعدد الطبقات. يتم فصل الخلايا من ورقة لوحة تعامل pNIPAAM بإسقاط درجة حرارة أقل من 32 درجة مئوية. ثم يتم وضع ورقة خلية على رأس هيدروجيل عبر ربط تحتوي على الخلايا البطانية المصنف في مصفوفة ليفية الأساسية (الشكل 1). ويمكن أيضا لوحات الحرارية الحساسة سابقة التجهيز أن تستخدم لخلق ورقة الخلية. وتستخدم أسطح الطوبوغرافية خاصة لنمط تحديدا (أي محاذاة) الخلايا 30.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الخطوات الحاسمة في البروتوكول ما يلي: طلاء أسطح لوحة مع البوليمر thermoresponsive والتلاعب في أوراق الخلية بعد التبريد لوحات. لأن خلايا مختلفة تظهر الخصائص الفيزيائية المختلفة، مثل adhesivity، يجب أن يكون الأمثل الوقت لرفع كل نوع من الخلايا المختلفة. العنصر الثاني، والأكثر تحديا بكثير من هذا البروتوكول، ومراكز على التلاعب في خلية ورقة، جانبا مهما من أساليب لتجميع الأنسجة. طبقة وحيدة الخلية في خلية ورقة هشة للغاية ويمكن أن تمزق بسهولة إذا التلاعب بالملقط. وعلاوة على ذلك، عندما لا ي...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ليس لدينا ما نكشف عنه.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تمويل هذا العمل من خلال جائزة الكلية الجديدة الثانية من معهد كاليفورنيا للطب التجديدي (CIRM; RN2-00921-1) ، وجائزة البحث الوطنية الممولة من المعاهد الوطنية للصحة (F32-HL104924) ، ومنحة تدريب CIRM (TG21163). تم توفير المواد من قبل: Glycosan Biosystems Inc / BioTime والدكتور ستيفن باديلاك (جامعة بيتسبرغ)

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
recodes < / strong>
Calcein-AMInvitrogenC3099Cell Tracker / صبغة حية
Lysotracker RedInvitrogenL7528Cell Tracker
أحمر محايدSigmaN7005صبغة الخلية المرئية
pNIPAAMSigma Aldrich412780250Poly (N< / em>-isopropylacrylamide)
تولوينسيجما ألدريتش244511-1L
الهكسانسيجما ألدريتش296090-1L
RAOSMCLonzaR-ASM-580خلايا العضلات الملساء الأبهرية
SmGM2LonzaCC-4149وسائط العضلات الملساء
HUVECInvitrogenC-003-5Cالخلايا البطانية الوريدية البشرية
HyStemGlycosan / بيوتايم
الأيزوبروبيل الكحولVWR الدوليةBDH1133-4LP
التربسينكورنينج سيلجرو25-053-C1
PBSGibco14287-072
FBSGibco16140-071
المعدات المحددة< / قوي >
ورق الترشيحAhlstrom & nbsp ؛6310-0900 
قمع Buchner سيجما ألدريتش Z247308 
لوحات UpCell Nunc 2014-11 
الأشعة فوق البنفسجيةشركة Jelight منظف UVO موديل رقم 42
ضوء

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ohashi, K., Okano, T. Functional tissue engineering of the liver and islets. Anat Rec (Hoboken). 297, 73-82 (2014).
  2. Chen, Q. Z., Harding, S. E., Ali, N. N., Lyon, A. R., Boccaccini, A. R. Biomaterials in cardiac tissue engineering: Ten years of research survey. Mat Sci Eng R. 59, 1-37 (2008).
  3. Jakob, P., Landmesser, U. Current status of cell-based therapy for heart failure. Curr Heart Fail Rep. 10, 165-176 (2013).
  4. Tongers, J., Losordo, D. W., Landmesser, U. Stem and progenitor cell-based therapy in ischaemic heart disease: promise, uncertainties, and challenges. Eur Heart J. 32, 1197-1206 (2011).
  5. Etzion, S., et al. Influence of embryonic cardiomyocyte transplantation on the progression of heart failure in a rat model of extensive myocardial infarction. J Mol Cell Cardiol. 33, 1321-1330 (2001).
  6. Masuda, S., Shimizu, T., Yamato, M., Okano, T. Cell sheet engineering for heart tissue repair. Adv Drug Deliv Rev. 60, 277-285 (2008).
  7. Koh, G. Y., Soonpaa, M. H., Klug, M. G., Field, L. J. Strategies for myocardial repair. J Interv Cardiol. 8, 387-393 (1995).
  8. Li, R. K., et al. Construction of a bioengineered cardiac graft. J Thorac Cardiovasc Surg. 119, 368-375 (2000).
  9. Muller-Ehmsen, J., et al. Rebuilding a damaged heart: long-term survival of transplanted neonatal rat cardiomyocytes after myocardial infarction and effect on cardiac function. Circulation. , 105-1720 (2002).
  10. Reinecke, H., Zhang, M., Bartosek, T., Murry, C. E. Survival, integration, and differentiation of cardiomyocyte grafts: a study in normal and injured rat hearts. Circulation. , 100-193 (1999).
  11. Roell, W., et al. Cellular cardiomyoplasty improves survival after myocardial injury. Circulation. 105, 2435-2441 (2002).
  12. Soonpaa, M. H., et al. Potential approaches for myocardial regeneration. Ann N Y Acad Sci. 752, 446-454 (1995).
  13. Akins, R. E. Can tissue engineering mend broken hearts. Circ Res. 90, 120-122 (2002).
  14. Goodell, M. A., et al. Stem cell plasticity in muscle and bone marrow. Ann N Y Acad Sci. 938, 208-218 (2001).
  15. Menasche, P., et al. Myoblast transplantation for heart failure. Lancet. 357, 279-280 (2001).
  16. Murry, C. E., Wiseman, R. W., Schwartz, S. M., Hauschka, S. D. Skeletal myoblast transplantation for repair of myocardial necrosis. J Clin Invest. 98, 2512-2523 (1172).
  17. Orlic, D., et al. Transplanted adult bone marrow cells repair myocardial infarcts in mice. Ann N Y Acad Sci. 938, 221-229 (2001).
  18. Elia, R., et al. Silk-hyaluronan-based composite hydrogels: a novel, securable vehicle for drug delivery. J Biomater Appl. 27, 749-762 (2013).
  19. Kai, D., et al. Stem cell-loaded nanofibrous patch promotes the regeneration of infarcted myocardium with functional improvement in rat model. Acta Biomater. , (2014).
  20. Hong, H. J., et al. Tracheal reconstruction using chondrocytes seeded on a poly(l-lactic-co-glycolic acid)-fibrin/hyaluronan. J Biomed Mater Res A. , (2014).
  21. Serpooshan, V., et al. The effect of bioengineered acellular collagen patch on cardiac remodeling and ventricular function post myocardial infarction. Biomaterials. 34, 9048-9055 (2013).
  22. Turner, W. S., et al. Cardiac tissue development for delivery of embryonic stem cell-derived endothelial and cardiac cells in natural matrices. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 100, 2060-2072 (2012).
  23. Sato, M., Yamato, M., Hamahashi, K., Okano, T., Mochida, J. Articular cartilage regeneration using cell sheet technology. Anat Rec (Hoboken). 297, 36-43 (2014).
  24. Sawa, Y., Miyagawa, S. Present and future perspectives on cell sheet-based myocardial regeneration therapy. Biomed Res Int. 2013, 583912(2013).
  25. Demirbag, B., Huri, P. Y., Kose, G. T., Buyuksungur, A., Hasirci, V. Advanced cell therapies with and without scaffolds. Biotechnol J. 6, 1437-1453 (2011).
  26. Song, J. J., Ott, H. C. Organ engineering based on decellularized matrix scaffolds. Trends Mol Med. 17, 424-432 (2011).
  27. Badylak, S. F., et al. The use of extracellular matrix as an inductive scaffold for the partial replacement of functional myocardium. Cell Transplant. 15, Suppl 1. S29-S40 (2006).
  28. Wang, Y., et al. Lineage restriction of human hepatic stem cells to mature fates is made efficient by tissue-specific biomatrix scaffolds. Hepatology. 53, 293-305 (2011).
  29. Gilbert, T. W., et al. Collagen fiber alignment and biaxial mechanical behavior of porcine urinary bladder derived extracellular matrix. Biomaterials. 29, 4775-4782 (2008).
  30. Luna, J. I., et al. Multiscale biomimetic topography for the alignment of neonatal and embryonic stem cell-derived heart cells. Tissue Eng Part C Methods. 17, 579-588 (2011).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Tissue EngineeringCell SheetspNIPAAM CoatingFibrous Matrix HydrogelEndothelial CellsRat Aortic Smooth Muscle CellsLight MicroscopyCell Sheet TransferHydrogel CrosslinkingThermo Sensitive Polymer

مقالات ذات صلة