مقالة منهجية

تتبع تكييف الخوف في الفئران

DOI:

10.3791/51180

⸱

مارس 20, 2014

 ,  , 
1Department of Psychology and Neuroscience, Baylor University, 2Institute of Biomedical Studies, Baylor University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في التجربة التالية وصفنا بروتوكول للتكييف الخوف التتبع في الفئران. هذا النوع من الذاكرة النقابي يشمل فترة التتبع التي تفصل بين التحفيز محايدة والتحفيز دون شروط.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في هذه التجربة نقدم تقنية لقياس التعلم والذاكرة. في الخوف التتبع بروتوكول تكييف المقدمة هنا وهناك خمسة أزواج بين التحفيز محايدة وحافزا دون شروط. هناك فترة التتبع و 20 ثانية الذي يفصل كل محاكمة تكييف. بشأن تجميد اليوم التالي يقاس خلال تقديم المثير الشرطي (CS) وفترة التتبع. في اليوم الثالث هناك اختبار لقياس 8 دقيقة الذاكرة السياقية. النتائج هي ممثل من الفئران التي عرضت مع التحفيز دون شروط مكره (الصدمة) بالمقارنة مع الفئران التي تلقت عروضا لهجة دون المثير غير الشرطي. تتبع تكييف الخوف قد استخدمت بنجاح للكشف عن العجز والتحسينات التعلم والذاكرة في الفئران خفية التي لم يتم العثور عليها مع غيرها من وسائل تكييف الخوف. ويعتقد هذا النوع من تكييف الخوف أن تعتمد على الاتصالات بين قشرة الفص الجبهي الإنسي والحصين. واحد الجدل الحالي هو ما إذا كان يعتقد هذا الأسلوب لتكون اللوزة مستقلة. وبالتالي، هناك حاجة أخرى الخوف تكييف اختبار لفحص آثار التعلم والذاكرة التي تعتمد على اللوزة، مثل من خلال تكييف الخوف من التأخير.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في تكييف الخوف يقترن حافزا محايد (NS) مع حافزا دون شروط مكره (الولايات المتحدة). وNS عادة لهجة ويصبح حافزا مكيفة (CS) من خلال عمليات التزاوج المتكررة مع الولايات المتحدة. ثم يمكن للCS استثارة رد فعل مشروط (CR)، مثل تجميد، في غياب الولايات المتحدة مكره. A استخداما الخوف بروتوكول ظروف غير ظروف تأخير. في هذا البروتوكول بداية NS والولايات المتحدة هي متجاورة أو مع بعض التداخل في عرض الحوافز. على الرغم من تكييف الخوف التأخير هو واحد من أنواع الأكثر شيوعا من تكييف النقابي الزمانية، وهناك عدة أنواع أخرى من تكييف النقابي الترتيبات الزمنية: تكييف في وقت واحد، تكييف الوراء، وتكييف التتبع 1. في تتبع تكييف الخوف هناك فاصل زمني خالية من التحفيز بين NS والولايات المتحدة من عدة ثوان مما أدى إلى "التتبع" الفترة.

أفادت عدة دراسات العجزق في تتبع تكييف الخوف عندما يتم إنتاج أعصاب الآفات في الهياكل التي مدخلات الحصين 2-5 أو عند استخدام وكلاء الدوائية لمنع وظيفة مستقبلات في قرن آمون. الآفة إلى نتائج الحصين في العجز في تكييف التتبع وتكييف السياقية، ولكن لا يضعف تكييف الخوف تأخير 8. هناك العديد من الفوائد لاستخدام التتبع تكييف الخوف. لا يمكن أن يتحقق بروتوكول تكييف الخوف على مدى فترة اختبار لمدة ثلاثة أيام ويسمح للذاكرة تعتمد على الحصين الذي لا يتوقف مكانيا. تكييف تتبع الخوف يمكن استخدامها كاختبار مكملة لمتاهة موريس المائية، رواية اختبار الاعتراف الكائن، أو اختبارات متاهة أخرى في التحقيق في الذاكرة التي تعتمد على الحصين.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم إنشاء الفئران المستخدمة في التجربة التالية ويضم في جامعة بايلور في درجة حرارة الغرفة من 22 درجة مئوية، مع ضوء 14 ساعة و 10 ساعة الظلام (20:00 حتي 06:00 ساعة) دورة نهاري. أعطيت الفئران بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية الوصول إلى الغذاء والماء. وكانت جميع الإجراءات للفئران في الامتثال مع المعاهد الوطنية للصحة المبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية وتمت الموافقة على بروتوكول الحيوان من جامعة بايلور رعاية الحيوان واستخدام اللجنة.

نظرة عامة

ويستند التتبع مكيفة المهمة الخوف على الإجراءات التي وصفها Wiltgen وزملاؤه 9.

1. إعداد معدات

الخوف جهاز تكييف غرفة (26 سم × 22 سم × 18 سم) يتكون من جانبين التي هي الاكريليك، وجهان التي هي المعدن، وأسفل الطابق الشبكة الذي يستخدم لتقديم صدمة القدم معتدل. غرفة الاختبار هو منزلد في غرفة الموهنة الصوت. الغرفة هي أيضا ضيق ضوء لمنع الضوء من خارج التأثير على برامج كشف الحركة.

  1. معايرة مستويات الصدمة، ومستويات الضوء، ومستويات شدة الصوت للغرفة الاختبار. قياس مستوى الخلفية للغرفة الاختبار. الضوضاء الخلفية في هذه القاعة هو 65 ديسيبل. استخدام الصوت متر لقياس هذا المستوى. يجب تعيين متر إلى 70 ديسيبل، لتعيين C، والكشف عن وضع بطيئة.
    1. معايرة مستوى الصدمة ل0.5 مللي أمبير. استخدام جهاز معايرة الخارجية لمعايرة مستوى الصدمة (انظر الجدول مواد) بشكل صحيح. قياس الداخلية للمولد الصدمة ليست دقيقة. مولد صدمة تدير صدمة سارعت والتي لا يمكن قياسها بدقة من قبل أمبير متر القياسية.
    2. وضع الرصاص احد على واحد من القضبان الشبكة ووضع الآخر بنتيجة 3 أو 4 بارات أكثر. استخدام مولد صدمة لإدارة الصدمة. ضبط مستوى الصدمة حتى يتم تحقيق المستوى الصحيح. القيام بذلك لعصامالفصل يخشى غرفة تكييف.
    3. إغلاق باب الغرفة عند قياس مستوى الضوء للغرفة. معايرة مستوى الضوء إلى ما يقرب من 1.0. هذا هو عدد محدد لبرنامج FreezeFrame المستخدمة في هذه التجربة. وسوف ضوء متر خارجي قراءة هذا ك 2 لوكس. ويمكن تعديل مستوى الضوء عن طريق نقل موقع ضوء المنزل أو عن طريق ضبط مكثف للعدسة. تأكد من أن تضييق الخناق التشغيل للعدسة بعد تعديل.
    4. معايرة مستوى الصوت ديسيبل إلى 85 ديسيبل. استخدام ديسيبل متر الخارجية داخل القفص اختبار لمعايرة مستوى ديسيبل (انظر الجدول مواد). سوف يكون الصوت قدم 2،700 هرتز لهجة. ملاحظة: في حالة استخدام الفئران الأكبر سنا من 6 أشهر من العمر قد يكون من الأفضل استخدام الضوضاء البيضاء منذ الفئران الأكبر سنا يمكن أن يكون السمع العجز.
  2. بعد جهاز مستعدة تأخذ الموضوعات إلى غرفة عقد منفصل. ملاحظة: لا إيواء الماوس في نفس الغرفة مع غرفة الاختبار.
  3. ال التسميةه ذيل الفئران التي سيتم اختبار من أجل اختبار. فمن الأفضل للحد من التعامل المفرط قبل الاختبار. بدلا من ذلك، ذيول يمكن أن توصف اليوم قبل التجربة للحد من التعامل مع الإجهاد. بعد أن وصفت الفئران تسمح لهم يتأقلم مع الغرفة لمدة 30 دقيقة. لديهم أقفاص نظيفة اضافية لتأوي الفئران بعد اكتمال الاختبار.

2. تتبع تكييف يوم 1

  1. إزالة كل فأر من القفص ووضعها في أقفاص الفردية لنقلها إلى الخوف تكييف الغرفة. استخدام الفراش نظيفة لكل القفص. وضع مذكرة لزجة على القفص نقل للحفاظ على النظام من الفئران اختبار الصحيح. ملاحظة: إذا تم إيواء الفئران منفردة ثم يمكن نقلها في قفص وطنهم.
  2. ضع الماوس في غرفة الاختبار وأغلق الباب. بدء برنامج حاسوبي.
  3. في يوم التدريب، والسماح للفئران لاستكشاف الغرفة لمدة 3 دقائق. البرنامج ثم يقدم 20 ثانية نغمة (85 ديسيبل، 2،700 هرتز) رس الحيوان. بعد فترة ضئيلة من 20 ثانية يدار صدمة خفيفة (2 ثانية، 0.5 أمبير) للحيوان.
  4. تسجيل رد فعل من هذا الموضوع للتأكد من أنها تلقت المحفزات مكره من خلال عرض الفيديو. A 200 ثانية الفاصل الزمني بين المحاكمة يفصل المحاكمات تكييف 5. يتكون كل محاكمة من 20 ثانية لهجة تليها تأخير 20 ثانية ثم صدمة.
  5. بعد اكتمال الاختبار تسمح بالبقاء الحيوان في غرفة الاختبار لمدة 1 دقيقة قبل إزالته من اختبار القفص.
  6. وضع الحيوان مرة أخرى في قفص نقل وإعادته إلى القفص وطنه. إذا كان هناك الفئران في قفص إضافية وطنهم ثم إيواء فردي الماوس حتى كل الفئران اختبار كامل. هذا سوف يقلل من الضغط على الفئران الأخرى التي لم يتم اختبارها. لن يكون حلا بديلا لإيواء منفردة كل الفئران أسبوع واحد قبل الاختبار للحد من تأثير إزالة باستمرار الفئران من القفص واحدة.
  7. تنظيف غرفة الاختبار مع 30٪ الأيزوبروبانول بعد مجموعة شرق افريقيايتم اختبار ح الحيوانية.
  8. كرر الخطوات من 2،2-2،7 لجميع الفئران في اختبار الفوج.
  9. العودة إلى غرفة كل الفئران مستعمرتهم بعد أن تم اختبارها الماوس مشاركة في الفوج.

3. أثر الخوف تكييف يوم 2: تتبع الذاكرة اختبار

  1. سوف اختبار الذاكرة التتبع يحدث في يوم 2. في هذا البروتوكول هناك 3 عروض لهجة. وضع الفئران في سياق جديد للاختبار تكييف أثر.
  2. إعداد برامج لتشغيل برنامج مع فترة الأساس 2 دقيقة تليها ثلاثة عروض 20 ثانية لهجة. هناك سا 220 ثانية بين كل عرض تقديمي ITI لهجة.
  3. للشرط السياق الجديد، ضع إدراج الاكريليك واضحة على أرضية الغرفة لتغيير الشكل والملمس، ولون الغرفة تكييف.
  4. تغيير رائحة في الغرفة من خلال وضع مستخلص الفانيليا في وزن القارب تحت إدراج الكلمة.
  5. تنظيف الغرفة مع الايثانول 70٪ بدلا من 30٪ الأيزوبروبانول. ملاحظة: هذا سوف يساعدإنشاء سياق الرواية.
  6. جعل الفئران إلى غرفة عقد وrelabel ذيولها لاختبار إذا لزم الأمر.
  7. إعداد أقفاص نقل سياق الرواية عن طريق استبدال الفراش مع ورقة ممزقة. ملاحظة: هذا سوف يساعد في خلق سياق الرواية.
  8. وضع الفئران في غرفة الاختبار ثم بدء تشغيل البرنامج. تنظيف الغرفة مع الايثانول 70٪ بعد الانتهاء من الاختبار.
  9. العودة إلى قفص الفئران وطنهم بعد الانتهاء من تكييف أثر. العودة إلى غرفة كل الفئران مستعمرتهم عندما تم اختبار جميع الفئران.

4. أثر الخوف تكييف يوم 3: الذاكرة السياقية اختبار

  1. في اليوم الثالث ويجري تكييف السياقية. إعداد برامج لتشغيل برنامج لتسجيل السلوك تجميد لمدة 8 دقائق.
  2. تنظيف غرفة مع 30٪ الأيزوبروبانول قبل اختبار وبعد اختبار كل فأر. وينبغي أن يكون سياق مماثلة ليوم 1. يجب أن يكون أقفاص نقل نفس في يوم و1.
  3. جلب الفئران إلى غرفة عقد وتسمية ذيولها للاختبار.
  4. وضع كل فأر في غرفة الاختبار ثم بدء تشغيل البرنامج. تنظيف غرفة مع 30٪ الأيزوبروبانول بعد اكتمال الاختبار.
  5. العودة إلى غرفة كل الفئران مستعمرتهم عند اكتماله.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لنتائج ممثل نقدم البيانات من السيطرة C57BL/6J الفئران التي حصلت على أزواج التحفيز محايدة مع المثير غير الشرطي (حالة الصدمة) بالمقارنة مع الفئران التي تلقت التحفيز محايدة ولكن لم يحصل على التحفيز دون شروط (أي شرط الصدمة). من المهم لتشغيل هذا الشرط عند وضع أول مرة هذا الاختبار السلوكية لتحديد ما إذا كان قد تم تنفيذ البروتوكول بشكل صحيح.

البيانات في الشكل 1 يمثل اليوم تدريب الفئران C57BL/6J في الخوف...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

كانت هناك العديد من الدراسات التي أوضحت أن الدوائر العصبية التي ترتكز عليها تتبع تكييف الخوف. ويعتقد تتبع تكييف الخوف لإشراك CA1 من الحصين 12-14. وهناك أيضا أدلة على أن قشرة الفص الجبهي الأنسي (mPFC) يلعب دورا كبيرا في تتبع العين طرفة تكييف 15، وقد تم العثور على mPFC أن تشارك في تتبع تكييف الخوف. وجدت إحدى الدراسات أن الخلايا العصبية mPFC توفير النشاط المتواصل خلال فترة التتبع، وبالتالي توفير هيكل التي يمكن أن تحافظ على الذاكرة أثناء الفاصل الزمني تتبع 1...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

والكتاب ليس لديهم ما يكشف.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويدعم هذا العمل من خلال منحة مجلس بحوث جامعة بايلور ومن منحة بحثية من مؤسسة الصرع.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
FreezeFrameCoulbourn
30٪ إيزوبروبانولقم بشراء 90٪ من الأيزوبروبانول وتخفيفه إلى 30٪
70٪ من الإيثانول
Amp-meterMed-AssociatesENV-420Windows XP و Vista و 7 متوافق مع (32 بت فقط)
مستوى33-2055
مستخلص الفانيلياماكورميك مستخلص
ملاحظات لاصقةبعد 3في × 3 بوصة
مقياس الصوت الرقمي الفانيليا النقي

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Powell, R. A., Honey, P. L., Symbaluk, D. G. Introduction to learning and behavior. , 4th ed, Wadsworth Cengage Learning. Forthcoming.
  2. Tsaltas, E., Preston, G. C., Gray, J. A. The effects of dorsal bundle lesions on serial and trace conditioning. Behav. Brain Res. 10, 361-374 (1983).
  3. McAlonan, G. M., Dawson, G. R., Wilkinson, L. O., Robbins, T. W., Everitt, B. J. The effects of AMPA-induced lesions of the medial septum and vertical limb nucleus of the diagonal band of Broca on spatial delayed non-matching to sample and spatial learning in the water maze. Eur. J. Neurosci. 7, 1034-1049 (1995).
  4. Chowdhury, N., Quinn, J. J., Fanselow, M. S. Dorsal hippocampus involvement in trace fear conditioning with long, but not short, trace intervals in mice. Behav. Neurosci. 119, 1396-1402 (2005).
  5. Quinn, J. J., Oommen, S. S., Morrison, G. E., Fanselow, M. S. Post-training excitotoxic lesions of the dorsal hippocampus attenuate forward trace, backward trace, and delay fear conditioning in a temporally specific manner. Hippocampus. 12, 495-504 (2002).
  6. Misane, I., et al. Time-dependent involvement of the dorsal hippocampus in trace fear conditioning in mice. Hippocampus. 15, 418-426 (2005).
  7. Quinn, J. J., Loya, F., Ma, Q. D., Fanselow, M. S. Dorsal hippocampus NMDA receptors differentially mediate trace and contextual fear conditioning. Hippocampus. 15, 665-674 (2005).
  8. McEchron, M. D., Bouwmeester, H., Tseng, W., Weiss, C., Disterhoft, J. F. Hippocampectomy disrupts auditory trace fear conditioning and contextual fear conditioning in the rat. Hippocampus. 8, 638-646 (1998).
  9. Wiltgen, B. J., Sanders, M. J., Ferguson, C., Homanics, G. E., Fanselow, M. S. Trace fear conditioning is enhanced in mice lacking the delta subunit of the GABAA receptor. Learn. Mem. 12, 327-333 (2005).
  10. Davis, R. R., et al. Genetic basis for susceptibility to noise-induced hearing loss in mice. Hear. Res. 155, 82-90 (2001).
  11. Zheng, Q. Y., Johnson, K. R., Erway, L. C. Assessment of hearing in 80 inbred strains of mice by ABR threshold analyses. Hear. Res. 130, 94-107 (1999).
  12. Moyer, J. R., Thompson, L. T., Disterhoft, J. F. Trace eyeblink conditioning increases CA1 excitability in a transient and learning-specific manner. 16, 5536-5546 (1996).
  13. Leuner, B., Falduto, J., Shors, T. J. Associative memory formation increases the observation of dendritic spines in the hippocampus. J. Neurosci. 23, 659-665 (2003).
  14. McEchron, M. D., Disterhoft, J. F. Hippocampal encoding of non-spatial trace conditioning. Hippocampus. 9, 385-396 (1999).
  15. McLaughlin, J., Skaggs, H., Churchwell, J., Powell, D. A. Medial prefrontal cortex and pavlovian conditioning: trace versus delay conditioning. Behav. Neurosci. 116, 37-47 (2002).
  16. Runyan, J. D., Moore, A. N., Dash, P. K. A role for prefrontal cortex in memory storage for trace fear conditioning. J. Neurosci. 24, 1288-1295 (2004).
  17. Gilmartin, M. R., McEchron, M. D. Single neurons in the medial prefrontal cortex of the rat exhibit tonic and phasic coding during trace fear conditioning. Behav. Neurosci. 119, 1496-1510 (2005).
  18. Crow, T., Xue-Bian, J. J., Siddiqi, V., Kang, Y., Neary, J. T. Phosphorylation of mitogen-activated protein kinase by one-trial and multi-trial classical conditioning. J. Neurosci. 18, 3480-3487 (1998).
  19. Martin, K. C., et al. MAP kinase translocates into the nucleus of the presynaptic cell and is required for long-term facilitation in Aplysia. Neuron. 18, 899-912 (1997).
  20. Crestani, F., et al. Trace fear conditioning involves hippocampal alpha5 GABA(A) receptors. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 8980-8985 (2002).
  21. Crestani, F., et al. Decreased GABAA-receptor clustering results in enhanced anxiety and a bias for threat cues. Nat. Neurosci. 2, 833-839 (1999).
  22. Moore, M. D., et al. Trace and contextual fear conditioning is enhanced in mice lacking the alpha4 subunit of the GABA(A) receptor. Neurobiol. Learn. Mem. 93, 383-387 (2010).
  23. Cushman, J. D., Moore, M. D., Jacobs, N. S., Olsen, R. W., Fanselow, M. S. Behavioral pharmacogenetic analysis on the role of the alpha4 GABA(A) receptor subunit in the ethanol-mediated impairment of hippocampus-dependent contextual learning. Alcohol Clin. Exp. Res. 35, 1948-1959 (2011).
  24. Raybuck, J. D., Lattal, K. M. Double dissociation of amygdala and hippocampal contributions to trace and delay fear conditioning. PLoS ONE. 6, (2011).
  25. Kwapis, J. L., Jarome, T. J., Schiff, J. C., Helmstetter, F. J. Memory consolidation in both trace and delay fear conditioning is disrupted by intra-amygdala infusion of the protein synthesis inhibitor anisomycin. Learn. Mem. 18, 728-732 (2011).
  26. Gilmartin, M. R., Kwapis, J. L., Helmstetter, F. J. Trace and contextual fear conditioning are impaired following unilateral microinjection of muscimol in the ventral hippocampus or amygdala, but not the medial prefrontal cortex. Neurobiol. Learn. Mem. 97, 452-464 (2012).
  27. Baysinger, A. N., Kent, B. A., Brown, T. H. Muscarinic receptors in amygdala control trace fear conditioning. PLoS ONE. 7, (2012).
  28. Wanisch, K., Tang, J., Mederer, A., Wotjak, C. T. Trace fear conditioning depends on NMDA receptor activation and protein synthesis within the dorsal hippocampus of mice. Behav. Brain. 157, 63-69 (2005).
  29. Smith, D. R., Gallagher, M., Stanton, M. E. Genetic background differences and nonassociative effects in mouse trace fear conditioning. Learn. Mem. 14, 597-605 (2007).
  30. Rudy, J. W., O'Reilly, R. C. Contextual fear conditioning, conjunctive representations, pattern completion, and the hippocampus. Behav. Neurosci. 113, 867-880 (1999).
  31. Wiltgen, B. J., Sanders, M. J., Anagnostaras, S. G., Sage, J. R., Fanselow, M. S. Context fear learning in the absence of the hippocampus. J. Neurosci. 26, 5484-5491 (2006).
  32. Reijmers, L. G., Perkins, B. L., Matsuo, N., Mayford, M. Localization of a stable neural correlate of associative memory. Science. 317, 1230-1233 (2007).
  33. Huerta, P. T., Sun, L. D., Wilson, M. A., Tonegawa, S. Formation of temporal memory requires NMDA receptors within CA1 pyramidal neurons. Neuron. 25, 473-480 (2000).
  34. Jacobs, N. S., Cushman, J. D., Fanselow, M. S. The accurate measurement of fear memory in Pavlovian conditioning: Resolving the baseline issue. J. Neurosci. Methods. 190, 235-239 (2010).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Fear MemoryHippocampal Dependent LearningFreezing BehaviorAuditory ToneFoot ShockContextual MemoryNovel ContextSound Attenuating ChamberFear Conditioning Chamber

مقالات ذات صلة