الردود المثانة البولية انتفاخ مستدعى الحشوي الحركي نموذجا لألم المثانة في الفئران

ملخص

ما يقرب من 3-8 ملايين شخص في الولايات المتحدة يعانون من متلازمة ألم التهاب المثانة الخلالي / المثانة (IC / BPS)، وهي حالة تتميز المنهكة في جزء من آلام الحوض. من أجل دراسة المساهمات الجهاز العصبي إلى حالة، يتم استخدام نموذج الفسيولوجية للألم المثانة البولية في الفئران والجرذان.

الملخص

ما يقرب من 3-8 ملايين شخص في الولايات المتحدة يعانون من متلازمة التهاب المثانة / المثانة الخلالي ألم (IC / BPS)، وهي حالة تتميز المنهكة زيادة الإلحاح وتكرار التبول، وكذلك كثرة التبول اثناء الليل وآلام الحوض العامة، وخاصة عند ملء المثانة أو يفرغ. على الرغم من سنوات من البحث، وسبب IC / BPS لا يزال بعيد المنال واستراتيجيات العلاج غير قادرين على توفير الإغاثة الكامل للمرضى. من أجل دراسة المساهمات الجهاز العصبي إلى حالة، تم تطوير العديد من النماذج الحيوانية لتقليد الألم والأعراض المرتبطة IC / BPS. واحدة من هذه نموذج الفئران هو البولية المثانة انتفاخ (UBD). في هذا النموذج، يتم تسليم الهواء المضغوط الضغط محددة إلى المثانة من حيوان تخدير طفيفة على مدى فترة معينة من الزمن. في جميع أنحاء الداخلي، والأسلاك في عضلات البطن المائلة العلوية تسجيل النشاط الكهربائي من العضلات. ويعرف هذا النشاط باعتبارها استجابة الحشوي الحركي (VMR) وأناسا مقياس موثوق بها وقابلة للتكرار من حس الألم. هنا، نحن تصف الخطوات اللازمة لتنفيذ هذه التقنية في الفئران بما في ذلك التلاعب الجراحية، وتسجيل الفسيولوجية، وتحليل البيانات. مع استخدام هذا النموذج، يمكن كشف التنسيق بين الخلايا العصبية الحسية الأولية والحبل الشوكي afferents الثانوية، والمناطق الجهاز العصبي المركزي العالي التي تشارك في آلام المثانة. ويمكن بعد هذه المعرفة العلوم الأساسية أن تترجم سريريا لعلاج المرضى الذين يعانون من IC / BPS.

المقدمة

ويعرف الألم المزمن رسميا باسم الألم الذي يستمر لثلاثة أشهر تقريبا، أو لمدة أطول من شفاء الأنسجة الطبيعية الوقت ^1. هذا النوع من الألم هو واحد من الأسباب الرئيسية أن الناس هي التي تحرك التماس العناية الطبية ⁽²⁾ ويمكن أن تصل تكلفتها 635 مليار دولار سنويا ^3. تعتبر استراتيجيات الألم المزمن الحالي التأقلم القديمة؛ بعد عقود من التقدم الطبي، مضادات الالتهاب غير الستيروئيدية (العقاقير المضادة للالتهابات) والمواد الأفيونية لا تزال العلاجات الأولية التي يحددها الأطباء. ولكن هذه العلاجات تستهدف جميع أنواع مختلفة من الألم في نفس الطريق، وتوفير تأثيرات مسكنة في جميع أنحاء الجسم بدلا من التركيز تحديدا على سبب هذا الحادث الألم بالضبط. من أجل مساعدة أولئك الذين يعانون من أفضل الألم المزمن، يجب أن تحول الانتباه البحوث نحو المسببات والعلاج الألم محددة المحتملة المرتبطة الأسباب الأكثر شيوعا لآلام المزمنة. الهدف من هذا manuscriحزب العمال هو لوصف النموذج المستخدم لفهم أفضل لحالة تعرف باسم التهاب المثانة الخلالي / متلازمة المثانة المؤلمة (IC / BPS).

IC / BPS هو الشرط المنهكة التي تؤثر على الملايين من الناس، والنساء في المقام الأول فوق سن ال 40 ^4. ولا تعرف الاسباب الحقيقية لIC / BPS، ومع ذلك ارتبط انتشار لعلم الوراثة ^5، والوجبات الغذائية محددة، ومستويات التوتر عالية ⁶ . وتشمل أعراض IC / BPS ولكن لا تقتصر على: زيادة الحاجة الملحة للتبول، زيادة تواتر التبول، وآلام، وثقب، أو حرق الألم أثناء ملء المثانة ويفرغ، وكثرة التبول اثناء الليل ^7. مرضى الذين يعانون من هذه الظروف لديهم مستويات أعلى من التوتر والقلق هي أكثر ^8. هذه النتائج زيادة التوتر في زيادة الألم، والذي يؤدي إلى زيادة مستويات التوتر الأصلي. وقد أظهرت الدراسات أن مستويات الاكتئاب والقلق تقلل العلاجات التالية التي تخفف الألم البولية، وبالتالي كسر هذه الدورة بفعالية إيجابية ردود الفعل ^{9. كان واحدا من التحديات في اكتشاف علاجات جديدة لIC / BPS قلة فهم العلوم الأساسية من آلام المثانة.}

من أجل دراسة المساهمات الجهاز العصبي إلى حالة، تم تطوير العديد من النماذج الحيوانية لتقليد الألم والأعراض المرتبطة IC / BPS. تقليديا، وقد تم صوغه التهاب المثانة في الحيوانات مع إدخال المواد الكيميائية المختلفة مثل زيت الخردل، والأسيتون، عديد السكاريد الشحمي، وحامض الهيدروكلوريك، وسيكلوفوسفاميد في المثانة. ومع ذلك لا يوجد عملاء لجهات أجنبية موجودة في البول العقيمة من المرضى IC / BPS، وبالتالي التشكيك في صحة هذه النماذج. آخر نموذج الفئران من آلام المسالك البولية هو انتفاخ المثانة البولية (UBD) ^10. في هذا النموذج، يتم تسليم الهواء المضغوط الضغط محددة إلى المثانة حيوان مستيقظا أو تخدير طفيفة على مدى فترة معينة من الزمن. في جميع أنحاء الداخلي، والأسلاك في عضلات البطن المائلة أكتيف الكهربائية سجل متفوقةإيتي من العضلات (مع مخطط كهربية العضل (EMG)). ويعرف هذا النشاط باعتبارها استجابة الحشوي الحركي (VMR) وغير موثوق بها، وقياس استنساخه من حس الألم ^10. مماثلة جوفاء الجهاز انتفاخ (مثل المثانة والمستقيم) على متطوعين من البشر صحية تنتج مشاعر الانزعاج وزيادات كبيرة في الألم ذكرت ^11،12، والصفات التي غالبا ما تستخدم لتشخيص IC / BPS. وبالتالي، بالتزامن مع أساليب الكهربائية، والدوائية، وoptogenetic من التحفيز أو التثبيط، UBD هو نموذج مفيدة وصالحة لفهم كل من مكونات الجهاز العصبي المحيطي والمركزي من حس الألم المثانة والألم.

هنا، نحن تصف الإجراء لUBD كما يستخدم حاليا في المختبر لدينا في غضون عضوات من سلالة الماوس المشتركة، C57BL/6J. بسبب صعوبات في عملية قسطرة للذكور، ويتم تنفيذ هذا الإجراء في المقام الأول في إناث الفئران. وقد تم تكييف هذا البروتوكول من تلك التي وضعتها نيس <م> وآخرون ^10. ونشرت سابقا من مختبرنا ^13. يصف بروتوكول الأربعة التالية المكونات الأساسية لهذا النموذج في الحيوانات تخدير: (1) القسطرة وجراحة المثانة القطب تسجيل (2) تحريض التخدير الجزئي (3) انتفاخ المثانة وتسجيل VMR، و (4) تحليل البيانات الخام من آثار VMR / EMG . وتناقش الفروق الدقيقة في إجراء UBD-VMR بسبب اختيار الكائن الحي، وعمق التخدير والاستقراء، ودرجة حرارة الجسم أدناه.

البروتوكول

تمت الموافقة على بروتوكول التالية من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام في جامعة دوكين ويتسق مع المبادئ التوجيهية من المعاهد الوطنية للصحة.

1. زرع الجراحية من سلك كهربائي والمثانة البولية القسطرة باستخدام تقنيات العقيمة (الوقت الإجمالي 5-10 دقيقة)

1. وينبغي إعداد العناصر التالية قبل الجراحة تبدأ:
   1. مراقبة الفعالة وضبط درجة حرارة الجسم إلى 37.5 ± 0.5 درجة مئوية باستخدام نظام مراقبة درجة الحرارة مع وسادة التدفئة التي تعمل بالبطاريات والحيوان هيئة التحقيق في درجة الحرارة (قائمة المواد) ربط النظام الآلي لمصباح الحرارة المنخفضة القوة الكهربائية للسيطرة إضافية من درجة حرارة الجسم.
   2. المعدات اللازمة للتخدير isoflurane ويشمل الهواء المضغوط (على سبيل المثال 100٪ O _2)، المرذاذ isoflurane و، isoflurane و، غرفة تحريض isoflurane و(لضربة قاضية الأولي)، مخروط الأنف، ونظام العادم.
   3. التجمع اله الأدوات الجراحية المناسبة، والرابع القسطرة، والأقطاب الكهربائية (قائمة المواد)
2. لحث الدولة التخدير في غرفة تحريض على 2-3٪ isoflurane و. إزالة الماوس من الغرفة عند فقدان المنعكس التقويمي (0-1 دقيقة).
3. وضع الماوس في مخروط الأنف مع 2-2.5٪ isoflurane و. قرصة أخمص القدمين للتحقق من التخدير الكامل. ينبغي أن يكون هناك أي رد من الحيوان. بدء الموقت.
4. وضع 1 قطرة من مرهم للعين على كل عين من الماوس.
5. بدوره الماوس فوق ذلك الجانب الظهري لأسفل.
6. إدراج القسطرة من خلال مجرى البول والمثانة في.
7. تراجع القسطرة الجراحية في التشحيم لتليين القسطرة.
   1. عقد بلطف فتح مجرى البول مع ملقط وأشار عمودي على الجسم الحيوان. عقد القسطرة مع مجموعة ^{الثانية} 2 من الملقط، إدراج بلطف نهاية القسطرة في مجرى البول في زاوية عمودية على الجسم الحيوان.
   2. عندما ذهبت قسطرة في مجرى البول ~ 1-2 مم، وضبط بلطف القسطرة بحيث يتم الآن موازية للجسمتهدف نحو الرأس. هذه الحركة أمر ضروري لتجنب عظم العانة.
   3. دفع برفق القسطرة نحو جسم الفأر. القسطرة يجب أن ينزلق الى تجويف الجسم بسلاسة ودون مقاومة. لا قوة القسطرة. إذا لم تدخل القسطرة بسلاسة، والعودة إلى موقف القسطرة متعامدة والبدء من جديد.
   4. مع القسطرة إدراجها بالكامل في المثانة، ودفع برفق على البطن الماوس لطرد محتويات المثانة. إزالة كل البول من القسطرة عن طريق دفع قطعة صغيرة من منشفة ورقية في افتتاح القسطرة. عندما يتم استيعابه منشفة ورقية مع البول، ويحل محل. إزالة البول باستمرار طوال البروتوكول المتبقية بما في ذلك خلال التجارب المثانة انتفاخ (انظر البروتوكول 3 أدناه).
8. إدراج اثنين من الأسلاك الفضية في عضلات البطن وترك سلك فضية واحدة في الصدر (كما في الأرض.)
   1. استخدام الكحول أو اليود لتطهير منطقة الجانبي على يمين القسطرة (الجانب الأيسر من الحيوان الجسم.)
   2. تعرض عضلات البطن اليسرى.
      1. عقد الجلد بالقرب ترك عضلات البطن بالملقط. جعل 1-2 سم شق صغير مع مقص جراحي المتوسط.
      2. إدراج غيض من مقص في شق وتوسيع شق بلطف إلى 2 سم.
      3. استخدام ملقط لتحريك اللفافة المغطي لفضح عضلات البطن المائلة العلوية. يجب الحرص على عدم قطع / مزق أي من الأوعية الدموية الرئيسية التي تقع في هذه المنطقة.
   3. ينحني ثلاثة أسلاك الفضة في النصف. استخدام إبرة حادة 21 G لاتخاذ لدغة صغيرة من العضلات. ثم، ودفع الإبرة من خلال العضلات. عند إدراج في العضلات يجب الحرص على عدم ثقب أي الأعضاء الداخلية أو حث الضرر لا لزوم لها إلى العضلات.
   4. عصا نهاية خالية من الأسلاك الفضية واحد في افتتاح إبرة G 21. برفق الإبرة مرة أخرى من خلال العضلات لرسم سلك الفضة عن طريق لدغة العضلات. عندما إبرة خالية من العضلات، وسحب بلطف الأسلاك الفضية من خلال العضلات حتى في حلقة السلك هو مطاردة معلدغة العضلات.
   5. كرر الخطوات 1.7.3-1.7.4 للسلك الثاني العضلات. يجب وضع هذا السلك ~ 0.5 سم من السلك الأول العضلات. من المهم أن السلكين لا تلمس بعد الإدراج.
   6. إدراج سلك الفضة الثالث (الأرض) في الصدر أقل شأنا من القلب.
      1. استخدام إبرة حادة 21 G لاتخاذ لدغة صغيرة من الجلد (أنه ليس من الضروري إجراء شق أو حلاقة الجلد)، ودفع الإبرة من خلال الجلد.
      2. إدراج الأسلاك الفضية كما هو موضح أعلاه والجذب من خلال الجلد.
9. وضع كمية صغيرة من 37.5 درجة مئوية الزيوت المعدنية المعقمة على العضلات تتعرض لإبقائها رطبة وسحب الجلد فوق العضلات كما يتعرض أقصى حد ممكن.
10. حقن 0.5 مل تحت الجلد المالحة للمساعدة في الحفاظ على مستويات السوائل أثناء الخطوات اللاحقة.
11. لفة بلطف الحيوان على الجانب بحيث درجة حرارة الجسم يمكن الحفاظ بسهولة.

2. الجزئي التخدير الإجراءات تنحى (توتةل الوقت ~ 75 دقيقة)

تمت الموافقة على بروتوكول التخدير التالية من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام في جامعة دوكين ويتسق مع المبادئ التوجيهية من المعاهد الوطنية للصحة.

1. مباشرة بعد القسم الأول (أعلاه) كاملة، وانخفاض isoflurane وإلى 1.5٪. عقد على هذا المستوى لمدة 15 دقيقة.
2. انخفاض isoflurane ومثل هذا الحيوان هو تخدير جزئي.
   1. isoflurane وأقل بنسبة 0.125٪ كل 15 دقيقة حتى المعروضات الحيوانية استجابة انثناء إلى أخمص قدميه قرصة لكن لا نطق أو غير ذلك التحرك.
   2. عادة، وهو مستوى 0.8-1.0٪ isoflurane وهو الأمثل، ولكن يمكن أن تختلف مستويات بسبب الاختلافات في الاجهزة التخدير. النطق و / أو التمشي هي أحداث نادرة للغاية عندما التخدير هو في المستوى المناسب.

3 مخطط كهربية العضل (EMG) تسجيل خلال المثانة انتفاخ مع الضغوط مدرج (15-75 ملم زئبقي) (الوقت الإجمالي - متغير اعتمادا على التجربة)

1. الإعداد العناصر التالية لتسجيل EMG والمثانة انتفاخ:
   1. الإعداد مكبر للصوت، والتحويل الرقمي، وبرنامج تسجيل. في هذا الإعداد، والتحويل الرقمي لديها واحد من إدخال لمكبر للصوت واثنين من المدخلات لمنظم الضغط (ضغط والمدخلات التحفيز علامة، انظر أدناه القسم 3.1.2). بالضبط الأجهزة والبرمجيات الإعداد للتخصيص (انظر قائمة المواد للحصول على تعليمات محددة).
   2. إعداد نظام لتقديم رشقات نارية محددة من ضغط الهواء إلى الحيوان. ويشار إلى هذا النظام باسم "منظم ضغط موقوتة" في البروتوكول التالي. لأنها تتيح للتسليم الآلي بما في ذلك الضغط رقمنة ضغط الهواء، والسيطرة على طول المحاكمة، والتشغيل الآلي الفاصل بين المحاكمة، والسيطرة على عدد المحاكمة، والتحفيز إشارة رقمية بداية (انظر أندرسون وآخرون ¹⁴ لالتخطيطي من منظم الضغط في الوقت المناسب).
2. ربط جميع الأسلاك الرصاص من الماوس (2 + 1 أسلاك البطن سلك الأرض) إلى مكبر للصوت والتحويل الرقمي وبدء التسجيل في إشارة EMG برنامج التحويل الرقمي. ملاحظة وقت ما "الكتابة" محددا في برنامج التحويل الرقمي.
3. إزالة منشفة ورقية من المثانة القسطرة. ربط أنابيب القسطرة إلى الهواء (من منظم الضغط في الوقت المناسب.)
4. تسليم واحدة و 20 ثانية في محاكمة 60 مم زئبق ضغط انتفاخ.
   1. ضبط منظم تدفق إلى 60 مم زئبق (ضغط الاختيار باستخدام مقياس ضغط الدم التناظرية.)
   2. ضبط منظم ضغط الوقت المناسب لتقديم فاصل prepressure 20 ثانية (وهذا سيكون إشارة التحفيز 2V سجلت في برنامج التحويل الرقمي) تليها 20 ثانية ضغط انتفاخ النبض.
   3. بدء محاكمة (فاصل prepressure + ضغط انتفاخ المحاكمة). عندما تبدأ المحاكمة الفعلية الضغط، مضاعفة فحص الضغط باستخدام مقاييس ضغط الدم 3 متصلا النظام.
   4. أثناء المحاكمة ضغط انتفاخ، ينبغي مراعاتها إشارة EMG قوية (> 0.5 V) خلال وربما بعد 20 ثانية انتفاخ. قد يحمل هذا الحيوان abdomiحركة نال ولكن الحيوان لا ينبغي أن نطق أو غير ذلك التحرك. على الرغم من نادرة، إذا لوحظت تحركات غير طبيعية أو الالفاظ، وزيادة مستوى isoflurane و.
5. إذا كان زئبقي انتفاخ 1 ^شارع 60 تنتج إشارة EMG المناسبة، كرر الخطوة 3.4 مرتين أخريين مع فاصل intertrial من 1-2 دقيقة.
6. عند تلقي إشارات قوية من 60 ملم زئبقي المحاكمات الثلاث، نفذ distentions التجريبية.
   1. العديد من الدراسات استخدام الإنتفاخات متدرج بدءا من ضغط منخفض (10-15 ملم زئبقي) ويعمل ما يصل الى الضغوط الضارة (75-80 ملم زئبقي) في 10-15 زيادات مم زئبق. رؤية النتائج ممثل أدناه على سبيل المثال آثار في الضغوط المختلفة.
   2. وتشمل التجارب النموذجية فاصل زمني 20 ثانية prepressure، 20 ثانية ضغط انتفاخ المحاكمة، وفاصل intertrial 1-2 دقيقة.
   3. تنفيذ ثلاث distentions في كل ضغط ثم المتوسط ​​عبر المحاكمات الثلاث (للحصول على استجابة الحشوي الحركي واحد لكل الضغط). في طريقة بديلة، صerform خمسة الإنتفاخات في كل ضغط، ونبذ المحاكمات العالية والمنخفضة، ومن ثم متوسط ​​الاستجابات الثلاث المتبقية.
7. الإنتفاخات مرة واحدة تجريبية كاملة، إيقاف التسجيل، حفظ الملف التجربة، والتضحية الحيوانية باستخدام أساليب المعتمدة.

4. تحليل آثار EMG الخام

1. تتم تحليل استجابات الحشوي الحركي (أي تسجيلات EMG) بسهولة باستخدام برنامج التحويل الرقمي على متن الطائرة أو من خلال برنامج من طرف ثالث (قائمة المواد) الإرشادات التالية هي الإرشادات العامة التي يمكن استخدامها لتحليل هذه البيانات باستخدام برامج متعددة أو باستخدام التحليل اليدوي .
2. لتصدير EMG، والضغط، والبيانات إشارة التحفيز من برامج التحويل الرقمي قم بما يلي:
   1. فتح ملف التجريبية.
   2. انقر فوق "ملف" "تصدير باسم".
   3. تغيير نوع الملف إلى "نص جدول (. TXT)،" اسم الملف ثم انقر فوق "حفظ".
   4. في بونافذة ف تصل، تغيير معدل العينة الإخراج إلى "1000،" تغيير وقت البدء في جمع البيانات وتغيير اللحظة التي بدأت نهاية الوقت الى "MaxTime ()." حدد خانة وسم "وقت الإخراج تحول ذلك الخط الأول هو 0.0 ثانية، "وانقر على زر" موافق ".
   5. سيتم الآن تصدير البيانات كملف نصي يمكن فتحه في مجموعة متنوعة من البرامج. يجب أن يحتوي ملف أربعة أعمدة (مؤقت، VMR (EMG)، الضغط، التحفيز).
3. لكل حيوان التجريبية اختبار، تنفيذ العمليات الحسابية التالية.
   1. تصحيح إشارة EMG لمجموعة البيانات بالكامل عن طريق حساب القيمة المطلقة من كل نقطة زمنية.
   2. تحديد الاستجابة المتوسط ​​EMG خلال القسم خلفية التجربة.
   3. طرح هذا المتوسط ​​EMG خلفية استجابة من كل نقطة بيانات مصححة في التجربة للحصول على خلفية تصحيح مجموعة البيانات.
   4. تحديد المنطقة تحت المنحنى (AUC) لكل 20 ثانية قبلفاصل الضغط في الخلفية تصحيح مجموعة البيانات.
   5. تحديد AUC لكل 20 ثانية المحاكمة ضغط انتفاخ في الخلفية تصحيح مجموعة البيانات.
   6. تقسيم كل AUC محاكمة ضغط انتفاخ (حصلت عليه في الخطوة 4.3.5) من أدنى prepressure الفاصل AUC من التجربة برمتها (التي تم الحصول عليها في الخطوة 4.3.4). هذا هو AUC تطبيع وتصحيح الخلفية لكل محاكمة كاملة ضغط انتفاخ.
4. لكل حيوان التجريبية، متوسط ​​المحاكمات تطبيع متعددة من ضغط واحدة للحصول على VMR ​​تطبيع في فولت * ثانية (Vsec).
5. إجراء الإحصاءات المناسبة على البيانات اعتمادا على التصميم التجريبي.

النتائج

ويمكن رؤية مثال على مجمل الإعداد UBD-VMR في الشكل 1A. زيادة الضغط خطوات لحث زيادة في VMR الخام (أي EMG) (الشكل 1B). وVMR الخام والضغط والتحفيز إشارة علامة التي ينبغي مراعاتها أثناء التسجيل باستخدام برنامج التحويل الرقمي يمكن أن ينظر في الشكل 2. القناة أعلى ينظر في الرقم 2 هو تتبع EMG (في V). وينبغي أن يكون إشارة خلفية التتبع EMG ثابت والسعة منخفضة (<0.2 V). إذا خلفية عالية أو تحتوي على طفرات كبيرة متفر...

المناقشة

في البشر، والخلالي متلازمة الألم التهاب المثانة / المثانة (IC / BPS) يمثل مشكلة سريرية هامة لأن المرضى قد المنهكة الألم الذي هو في كثير من الأحيان لا تستجيب للعلاج الألم العادية ^15. واحدة من التحديات الرئيسية في فهم وعلاج الألم في نهاية المطاف المثانة المزمن هو فهم العمليات العصبية العادية التي تشارك في الاستجابة لانتفاخ المثانة الضارة. من أجل التغلب على هذا التحدي، نموذج حيواني من آلام المثانة هو ضروري. وينبغي أن يكون هذا النموذج استنساخه، ومستقرة، وسهولة قياس. لحسن ال...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
بطانية التدفئة بالأشعة تحت الحمراء ونظام المراقبة	Kent Scientific	Right-Temp System	تم إعداد هذا النظام لمراقبة درجتي حرارة منفصلتين. يجب أن يشمل ذلك وبطانية التدفئة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن للنظام ضبط درجة الحرارة تلقائيا للحفاظ على درجة حرارة محددة. ومع ذلك ، فإن هذه الوظيفة التلقائية تنتج تداخلا كهربائيا أثناء تسجيل مخطط كهربية العضل ويجب إيقاف تشغيلها. يمكن أن توفر كينت حزمة بطارية لوسادة التسخين لاستخدامها أثناء تسجيل riEMG جزء من التجربة.
مبخر الأيزوفلوران	Draeger	Vapor 19.1	سيعمل أي مبخر إيزوفلوران ، ولكن من المفيد أن يكون لديك واحد يحتوي على شقوق متعددة بين 0-2٪ إيزوفلوران.
متعددة من الأيزوفلوران		n / a
100٪ خزان هواء الأكسجين	مصادر متعددة	n / a	لتهوية
التنفس الهواء	مصادر متعددة	n / a	لانتفاخ المثانة
24 G 0.56 في القسطرة الوريدية	BD Biosciences	381411	لقسطرة المثانة
Surgilube (معقم)	مختبرات سافاج	0281-0205-02	أي تزييت من الدرجة الجراحية سيعمل بشكل جيد.
الزيوت المعدنية (المعقمة)	مصادر متعددة	المصادر الملحية
(المعقمة)	مصادر متعددة	n / a
AG8W سلك فضي ، 2 م ، 0.20 مم (.008 بوصة) D ، L ، بدون عزل   ؛	وارنر إنسترومنتس	W4 64-1318	أي سلك فضي بهذه المواصفات سوف يعمل. لا يحتاج السلك إلى "مكلور"."مرهم
العيون	متعددة	n / a
مقص جراحي صغير	مصادر متعددة	n / a
ملقط حاد	مصادر متعددة	n / a
21 G إبرة	مصادر متعددة	n / a
مضخم العشب P511 مع كابل إدخال 3 أسلاك	Grass Instruments	P511 ( F-P5IC3 / REV1)	هذا هو "مكبر الصوت" المستخدم في البروتوكول. مكبر للصوت مع الإعدادات التالية: المعاير = 1 مللي فولت ؛ تردد لو = 300 هرتز ؛ التضخيم = 20 ؛ مرحبا تردد = 10 كيلو هرتز; مرشح الخط = في.
كامبريدج للتصميم الإلكتروني (CED) 1401 Plus (أو ما يعادله)	Cambridge Electronic Design	1401 Plus	هذا هو "المحول الرقمي" المستخدم في البروتوكول. ستعمل أنظمة التحويل الرقمي الأخرى من WINDAQ أو شركات أخرى بشكل جيد. تحتاج إلى مدخلات لإشارة الضغط ومخطط كهربية العضل وإشارة التحفيز.
برنامج CED Spike2	Cambridge Electronic Design	Spike 2	هذا هو "برنامج التحويل الرقمي" المستخدم في البروتوكول. يجب أن يكون من نفس الشركة المصنعة مثل محول الرقميات.  يجب إعداد البرنامج ب 3 قنوات للضغط (مقياس 0-100 مم زئبق) ، وإشارة EMG (عادة من -5 إلى +5 فولت) ، وعلامة التحفيز (0-2 فولت) النطاق.
مخطط التدفق من خزان الهواء إلى قسطرة المثانة	n / a	n / a	تسلسل التوصيلات من خزان الهواء المضغوط إلى المثانة الحيوانية:  خزان الهواء إلى 1/4 في الأنابيب إلى مقياس الجريان جيلمونت إلى موصل y. الفرع 1 من موصل y إلى مقياس ضغط الدم.  فرع 2 إلى مدخل واحد على صمام عصابة 4 اتجاهات إلى إخراج صمام 4 اتجاهات إلى منظم الضغط الموقوت إلى 3/32 الأنابيب من منظم الضغط الموقوت إلى موصل ذ 2 (فرع 1 إلى مقياس ضغط الدم) مع فرع 2 إلى 3/32 أنابيب   إلى موصل 3rd y.  الفرع 1 من y موصل إلى مقياس ضغط الدم الثالث والفرع 2 لقسطرة المثانة الحيوانية.
مقياس الجريان Gilmont	Gilmont	GF8321-1401	ستعمل ماركات متعددة لمقاييس التدفق. بالنسبة للهواء الباحث عن انتفاخ المثانة ، يجب أن يكون مقياس التدفق قادرا على التعامل مع الضغوط العالية (مثل مقياس جيلمونت هذا).  لاستنشاق الهواء ، يجب تعديل معدل التدفق وصولا إلى 100 مل / دقيقة (معدل الماوس النموذجي هو 500-1,000 مل / دقيقة).
4-طريقة عصابة صمام	النخبة		هذه قطعة محددة من المعدات.  تم تصميم صمام عصابة النخبة لخزانات الأسماك عند ضغوط هواء منخفضة. في إعداد انتفاخ المثانة ، يعمل هذا الصمام كصمام أمان في حالة ارتفاع الضغط. سيؤدي الضغط المرتفع جدا أثناء التشغيل الأولي للخزان إلى تدمير محول الضغط في منظم الضغط المحدد بوقت و / أو مقاييس ضغط الدم. بالإضافة إلى ذلك ، من خلال توفير كمية صغيرة من التسرب في النظام ، يسهل هذا الصمام ضبط الضغط بين 10-80 مم زئبق.
1/4 في أنابيب	مصادر متعددة	n / a
3/32 بوصة أنابيب	مصادر متعددة	موصلات n / a
"Y" (1/4 و 3/32 بوصة)	مصادر متعددة	n / a
مقياس ضغط الدم	CVS		أي مقياس ضغط الدم التناظري من مخزن الصيدلية سيعمل لهذا التطبيق.
منظم الضغط الموقوت	مخصص		هذه آلة مصممة خصيصا (جامعة واشنطن في متجر ماكينات سانت لويس) تسمح بتوصيل الضغط الآلي بما في ذلك رقمنة ضغط الهواء ، والتحكم في طول التجربة ، وأتمتة الفاصل الزمني بين المحاكمات ، والتحكم في رقم التجربة ، والإشارة الرقمية لبدء التحفيز. ومع ذلك ، يمكن التحكم في المكونات الأساسية للنظام (الضغط والإيقاف لفترة تجريبية معينة) من خلال مفتاح تشغيل / إيقاف بسيط في الخط.   مثل هذا التحكم التناظري للتجربة سيتطلب معلمات تحليل إضافية (انظر البروتوكول 4). بالإضافة إلى ذلك ، سيتعين على المرء تعيين الضغط يدويا بناء على مقياس ضغط الدم التناظري أثناء تحليل البيانات.
IGOR Pro	Wavemetrics	n / a	لتحليل إشارة EMG. يمكن استخدام العديد من أنواع البرامج المختلفة لتحليل البيانات في هذه التجارب.