مقالة منهجية

جلد كامل عيب نموذج في تقييم الأوعية الدموية من الحيوية في فيفو

DOI:

10.3791/51428

⸱

أغسطس 28, 2014

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Plastic Surgery and Hand Surgery, University Hospital rechts der Isar, Technische Universität München, 2Institute for Signal Processing, University of Lübeck, 3Department of Plastic Surgery and Hand Surgery, University Hospital Zürich, 4FONDAP Center for Genome Regulation, Facultad de Ciencias, Universidad de Chile

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الأوعية الدموية هي مفتاح النهج في هندسة الأنسجة ناجحة. ولذلك، هناك حاجة إلى تقنيات موثوقة لتقييم تطوير شبكات الأوعية الدموية في الأنسجة يبني. هنا نقدم طريقة بسيطة وفعالة من حيث التكلفة لتصور وقياس الأوعية الدموية في الجسم الحي.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يعتبر الأوعية الدموية كافية ليكون واحدا من العوامل الرئيسية التي تحد من النجاح السريري ليبني الأنسجة المهندسة. من أجل تقييم استراتيجيات جديدة تهدف إلى تحسين الأوعية الدموية، يطلب من وسائل موثوق بها لجعل في نمو أوعية دموية جديدة في السقالات الحيوية الاصطناعي مرئية وقياس النتائج. على مدى العامين الماضيين، وقد أدخلت مجموعتنا نموذجا عيب الجلد الكامل تمكن رؤية مباشرة من الأوعية الدموية التي تضوء ويوفر إمكانية القياس الكمي من خلال تجزئة الرقمية. في هذا النموذج، واحدة يخلق جراحيا عيوب البشرة الكاملة في الجزء الخلفي من الفئران ويحل لهم المواد التي تم اختبارها. ويمكن أيضا أن يدرج جزيئات أو خلايا من الاهتمام في هذه المواد لدراسة آثارها المحتملة. بعد وقت الملاحظة من اختيار المرء، وexplanted المواد للتقييم. توفر الجروح الثنائية إمكانية إجراء المقارنات الداخلية التقليل في القطع الأثرية بين الأفراد وكذلك انخفاض عدد الحيوانات اللازمة للدراسة. بالمقارنة مع المناهج الأخرى، أسلوبنا يقدم، تحليل الفعال بسيط يمكن الاعتماد عليها والتكلفة. قمنا بتنفيذ هذا النموذج كأداة روتينية لأداء عالية الدقة عند اختبار فحص الأوعية الدموية من المواد الحيوية المختلفة وتفعيل النهج الحيوي.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

في العقود الأخيرة، فتحت هندسة الأنسجة تصل خيار علاجي جديد ليحل محل عيوب الأنسجة مع خلايا الجسم نفسه 1. من أجل دعم العملية الفسيولوجية لتجديد الأنسجة، فقد تم تصميم السقالات كبنية قابلة للتحلل، التي توفر سيناريو حيث الخلايا من السرير الجرح يمكن أن تنمو واستعادة الخلل 2،3.

يعتبر الأوعية الدموية كافية لتكون العقبة الرئيسية التي تتولى إعادة اختراق السريري السقالات bioartificial 4. مع نشوب الخلايا، فإن الطلب على المواد الغذائية وزيادة الأكسجين والأوعية الدموية من المواد يصبح أساسيا. بالتالي يمكن عدم كفاية أو تأخير الأوعية الدموية يؤد....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. إعداد السقالات

  1. توليد عينات من السقالات باستخدام 12 ملم اللكمات الخزعة.
  2. لإدخال الجزيئات النشطة بيولوجيا أو الخلايا في السقالة، واستنزاف السقالات طريق الضغط عليها بلطف مع شاش معقم. ثم ترطيب السقالات من خلال إضافة 160 ميكرولتر من محلول يحتوي على جزيئات الحيوية النشطة أو خلايا الفائدة. انقر نقرا مزدوجا تحقق نجاح التنشيط الحيوي مع الخلايا من خلال فحوصات الأيض مثل MTT فحوصات.
  3. إذا لزم الأمر، إصلاح المركبات أو الخلايا لفحصها داخل سقالة من خلال ت....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يمكن إنشاء موثوق الثنائي عيب الجلد الكامل في الماوس (الشكل 1) حيث يمكن استبدال الجلد بواسطة مادة بيولوجية قيد الدراسة (الشكل 2). هنا، لم يلاحظ أي تعقيدات كبيرة أثناء أو بعد إجراء الجراحة، لا علامات العيانية للعدوى أو رد فعل جسم غريب. في حالات نادرة، ويحصل على سقالة فقدت عندما ماوس يزيل ذلك. انكماش الجرح وحظ أبدا (الشكل 3). الأنسجة تضوء يسمح التصور الواضح للهياكل الأوعية الدموية تصل إلى 30 ميكرون في العرض، في عينة الأنسجة كلها التي.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هناك حاجة إلى إنشاء النهج الناجحة في تحسين التروية الدموية في الأنسجة المهندسة ويبني، الذي يطالب تطوير طرق موثوقة جديدة لدراسة العمليات الحيوية داخل الأوعية الدموية. الطرق الشائعة لصنع سقالة الأوعية الدموية مرئية خارج الحي تشمل استخدام المجهر، والذي يوفر أداة عالية الدقة. في معظم الحالات، على الرغم من هذه الطريقة يقتصر على تحليل الأنسجة المناطق الصغيرة وتميل إلى أن تكون مكلفة وتستغرق وقتا طويلا. وعلاوة على ذلك، فإنه غالبا ما تشمل وضع العلامات تفصيلا وطرق تلوين، حيث لا يمك.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تضارب المصالح بيان:

جميع المؤلفين: لا أحد

الإفصاحات المالية:

أي من الكتاب لديه مصلحة مالية في أي من المنتجات والأجهزة وأو المخدرات المذكورة في هذه المخطوطة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقدمت انتيغرا قالب الجلد تجديد تفضلت انتيغرا علوم الحياة مؤسسة. مصادر الأموال التي تدعم العمل: هذا العمل تم تمويله جزئيا من قبل جائزة CIRM-BMBF المبكر بالحركة الثانية ومركز FONDAP لتنظيم الجينوم على حد سواء لJTE (العدد 15090007).

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
Ethilon P-3 13 مم 3/8 دائرة 5-0Ethicon ، Norderstedt ، ألمانيا698GEthilon polyamid-6 دقة نقطة عكس قطع خياطة
خزعة (10 مم)Xiomedics ، Acuderm inc. ، Fort Lauderdale ، FL ، الولايات المتحدة الأمريكيةP1050
اللكمات الخزعة (12 مم)Xiomedics ، Acuderm inc. ، فورت لودرديل ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكيةP1250
الكاميرا الرقمية   ؛ريكو، هانوفر، ألمانياCx1
Gazin Mullkompresse Lohmann und Rauscher ، Neuwied ، ألمانيا13622شاش معقم (10 سم × 10 سم)
سقالة مزدوجة الطبقة قائمة على الكولاجين (8 × 10 بوصة)شركة Integra Life Science Corporation ، بلينسبورو ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية88101
Isoflurane ، غاز سائل للتخدير الاستنشاقي   ؛باكستر ، Unterschleissheim ، ألمانيا100196040
Pentobarbital ، 16 جم / 100 ملFa. Merial ، Hallbergmoos
Nuri Nu / Nu Nude ، CrLNU-Foxn1nu< / sup>Charles River ، Sulzfeld ، ألمانيارمز السلالة 088الفئران العارية الشعرية ، من 6 إلى 8 أسابيع من العمر وبوزن جسم يتراوح بين 20 إلى 25 جم & nbsp ؛
بوبرينورفين (0.3 مجم / مل)Essex Pharma GmbH ، ميونيخ ، ألمانيا
شبكة تيتانيزد (15 سم × 15 سم) ، EXTRALIGHTPFM Medical AG ، K & ouml ؛ ln, ألمانيا6000029
Tissucol Duo S Immuno 2 mlBaxter Germany GmbH, Unterschleiß heim, GermanyB1332020110614محلول الفيبرين الثرومبين 
ستارة لاصقة شفافة (30.5 سم × 26 سم)KCI Medical Products, Wimborne Dorset, UKM6275009/10
خياطة

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Rahaman, M. N., Mao, J. J. Stem cell-based composite tissue constructs for regenerative medicine. Biotechnology and Bioengineering. 91 (3), 261-284 (2005).
  2. Lutolf, M. P., Hubbell, J. A. Synthetic biomaterials as....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة