وقد تم تطوير نموذج الفأر من بالمنظار إعادة الإعمار قاعدة الجمجمة البشرية التي تخلق واجهة نصف نافذ بين الدماغ والأنف باستخدام الطعوم المخاطية الأنفية. يسمح هذا الأسلوب للباحثين لدراسة التسليم إلى النظام العصبي المركزي للعلاجات عالية الوزن الجزيئي التي تستبعد خلاف ذلك حاجز الدم في الدماغ عندما تدار بشكل منتظم.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
منتبذ المخاطي Engrafting إجراءات تسليم المخدرات مباشرة الى المخ في الفئران
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
وأعاق إيصال العلاجات إلى الدماغ عن وجود حاجز الدم في الدماغ (BBB) الذي يقيد مرور مركبات الوزن الجزيئي القطبية وارتفاع من مجرى الدم وإلى أنسجة المخ. وقد تحقق بعض النجاح التسليم المباشر في البشر من خلال زرع القسطرة عبر الجمجمة؛ ولكن هذا الأسلوب هو الغازية للغاية ويترافق مع مضاعفات عديدة. وثمة بديل أقل الغازية لتكون جرعة الدماغ من خلال زرع جراحيا، غشاء نصف نفوذ مثل الغشاء المخاطي للأنف الذي يستخدم لإصلاح العيوب الجمجمة قاعدة التالية بالمنظار transnasal جراحة إزالة ورم في البشر. نقل المخدرات على الرغم من أن هذا الغشاء تجاوز بشكل فعال ومنتشر BBB مباشرة الى الدماغ والسائل المخي الشوكي. مستوحاة من هذا النهج، وقد وضعت نهجا الجراحية في الفئران التي تستخدم الأغشية المخاطية المغروسة المانحة الحاجز أكثر من خارج القحف الجراحية عيب BBB. وقد تبين هذا النموذج على نحو فعالتسمح بمرور المركبات عالية الوزن الجزيئي في الدماغ. منذ العديد من المرشحين المخدرات غير قادرين على عبور BBB، وهذا النموذج هو قيمة لأداء اختبار قبل السريرية لعلاجات جديدة للأمراض العصبية والنفسية.
المقدمة
علاج الأمراض العصبية والنفسية وأعاقت بشدة من وجود حاجز الدم في الدماغ (BBB) الذي يمنع أكثر من 95٪ من جميع وكلاء الدوائية المحتملة من الوصول إلى الجهاز العصبي المركزي 1-3. على سبيل المثال، الدبقية مشتقة عصبية عامل (GDNF) وقد تبين أن تكون فعالة في علاج مرض باركنسون عند حقنه مباشرة في الدماغ، ولكن غير فعالة عند تسليمها بشكل منتظم لأنه لا يمكن اختراق BBB 4-6.
العديد من اقترب وضعت في محاولة للتحايل على هذه المشكلة. وقد أظهرت تحسنا في تسليم النظامية من neurotheraputics باستخدام تقارن المخدرات التي تحتوي على الأجسام المضادة للبروتينات النقل ان....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
قبل الجراحة تأكد من الموافقة على جميع الإجراءات التي تتم عن طريق IACUC وأية سلطات أخلاقية أو قانونية إضافية واستخدام الممارسات علاج الحيوان إنسانية. وهذا يشمل استخدام الظروف الجراحة المعقمة، التخدير باستخدام الماوس وافق IACUC الأسلوب، التشحيم عيون الفئران مع مرهم الطبيب البيطري أثناء الجراحة، وتوفير الرعاية بعد الجراحة. لا المضي قدما في عملية جراحية إذا كان هناك أي سؤال حول ما إذا تمت الموافقة على جوانب الإجراء. تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تؤدى في هذه الوثيقة من قبل لجنة جامعة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام بوسطن.
1. إعداد الحيوانات واللوازم الجراحية <....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
الحصول على كبيرة بما يكفي الأنف الحاجز ازدراع هو أمر حاسم لخطوات لاحقة. ويمكن تحقيق ذلك عن طريق حفر في الموقع على الجمجمة الماوس المانحة هو مبين في الشكل 1A. وقطع على طول هذا الطريق إنتاج النباتى من حجم كاف كما هو مبين في الشكل 1B. إذا كان عمق الحفر ليست عميقة بما فيه الكفاية، وسوف يكون مبتورا الكسب غير المشروع، وسوف يكون من الصعب الحصول على غشاء كبيرة بما يكفي لتغطية سطح الدماغ. حفر أكثر إبداعا من لا ينصح المسار المقترح لأن أكثر الأنسجة ستبقى على.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الخطوة الأكثر صعوبة من الإجراء الموصوفة هنا هو النقل الناجح للغشاء المخاطي الحجم بشكل كاف على سطح الدماغ. يرصد هذه الخطوة أسهل بكثير إذا كان الحاجز الأنفي تحصد كبيرة بما فيه الكفاية وتنظيفها جيدا. إذا تم اقتطاع جزء بطني من الحاجز، وينبغي الحصول على الكسب غير المشروع الجديدة. يجب أن تكون زاوية الحفر العمودي في الرأس الماوس لضمان أن الغشاء المخاطي ليست تضررت من الحفر. إذا لم يتم اتخاذ مسار الحفر أوسع من المستحسن ستكون أصعب بكثير لإزالة الأنسجة الزائدة التي يتم توصيلها إلى الحاجز. يج.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
بنيامين س بليير MD هو المخترع الرئيسي للطرق تغطي براءات الاختراع المؤقت لتسليم المخدرات الى الجهاز العصبي المركزي.
شكر وتقدير
وقد تم تمويل هذه الدراسة من قبل مؤسسة Mcihael J. فوكس للبحوث 2011 الابتكارات الاستجابة السريعة باركنسون برنامج جوائز. كان الممولين أي دور في تصميم الدراسة وجمع البيانات وتحليلها، قرار نشر أو إعداد المخطوطة.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الفئران | تاكونيك | C57BL / 6 | |
| Isoflurane | Piramal الرعاية الصحية | ||
| مقص الطالب الناعم | أدوات العلوم الدقيقة | 91461-11 | |
| مثقاب هوائي | MTI Dental | 333-CB | |
| مثقاب | |||
| ملقط | أدوات العلوم الدقيقة | 91106-12 | |
| 0.9٪ حقن كلوريد الصوديوم USP | Abbott Laboratories | 4925 | |
| طبق البوليسترين بتري | فيشر | 08-757-12 | للتخزين المؤقت لمعقم حبة الكسب غير المشروع |
| أدوات العلوم الدقيقة | 18000-45 | ||
| نظام الأكسجين / الأيزوفلوران | SurgiVet | V720100 | |
| نظام التحكم في درجة الحرارة | Physitemp | TCAT-2LV | |
| أداة تجسيمية للحيوانات الصغيرة | KOPF | موديل 940 | |
| مرهم | |||
| ماكينة حلاقة | |||
| أدوات تطبيق قطنية برؤوس | فيشر | 23-400-106 | |
| 7.5٪ بروفيدون | اليود مقشر جراحي للبيتادين | ||
| 70٪ شفرة جراحية من الإيثانول | |||
| ريشة غير قابلة للصدأ | 2976 # 10 | ||
| مقبض مشرط - # 3 | أدوات العلوم الدقيقة | 10003-12 | |
| 3٪ بيروكسيد | لتنظيف الجمجمة | ||
| لاصق الأنسجة Vetbond | 3M | 1469SB | |
| إبر | Becton و Dickinson and Company | 305176 | إبرة مقطوع ويستخدم أيضا |
| محاقن | بيكتون ، Dickinson and Company | 309597 | |
| قفازات النتريل | Denville Scientific Inc | G4162 | لإغلاق البئر وحماية الكسب غير المشروع |
| 5-0 خيط | |||
| حامل إبرة الطالب هالسي | أدوات العلوم الدقيقة | 91201-13 | |
| لاصق | متاح بشكل مشترك طقم | ||
| أسمنت الأسنان بالغراء الفائق ، 1 رطل ، وردي غير شفاف | Stoelting | 51458 | |
| Isobutane (2-ميثيل بوتان) | Aldrich | M32631 | لحمام الثلج الجاف |
| الجاف |
المراجع
- Cardoso, F. L., et al. Looking at the blood-brain barrier: Molecular anatomy and possible investigation approaches. Brain Res. Rev. 64, 328-363 (2010).
- Pardridge, W. M. Drug transport across the blood-brain barrier. J. Cereb. Blood Flow Metab
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
