يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

القياس الآلي من الأوعية الدقيقة سرعة تدفق الدم في الرئة الانبثاث من الجرذان

8.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/51630

⸱

نوفمبر 30, 2014

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Division of Plastic, Maxillofacial, and Oral Surgery, Duke University Medical Center, 2Department of Radiation Oncology, Duke University Medical Center, 3Department of Cardiology, University of Colorado Denver, 4Department of Physical Chemistry, University of Mainz

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

يتم تقديم طريقة لقياس سرعة تدفق الدم في الدورة الدموية الدقيقة في نقائل سرطان الرئة للسطح الجنبي في الفئران بطريقة آلية ، باستخدام الفحص المجهري الرئوي داخل الصدر المغلق. هذا النموذج لديه القدرة على استخدامه كأداة واسعة النطاق لإجراء البحوث الفسيولوجية على النقائل الرئوية في القوارض.

الملخص

نظرا لأن الرئة هي عضو مستهدف رئيسي للأمراض النقيلية ، فإن النماذج الحيوانية لدراسة فسيولوجيا النقائل الرئوية لها أهمية كبيرة. ومع ذلك ، يوجد عدد قليل جدا من الطرق حتى الآن للتحقيق في نقائل الرئة بطريقة ديناميكية على مستوى الدورة الدموية الدقيقة ، بسبب صعوبة الوصول إلى الرئة بالمجهر. هنا ، يتم تقديم طريقة الفحص المجهري داخل الحيوية لتصوير الدورة الدموية الدقيقة في النقائل الرئوية السطحية في الفئران وظيفيا وتحديدها كميا ، باستخدام نافذة رئوية مغلقة للصدر وتحليل آلي لسرعة تدفق الدم واتجاهه. تم إثبات فائدة هذه الطريقة لقياس الزيادات في سرعة تدفق الدم استجابة للتدخل الدوائي ، وتصوير الأوعية الدموية الملتوية المعروفة للأورام الصلبة. هذا هو أول عرض للفحص المجهري داخل الحيوية على النقائل الرئوية في نموذج الصدر المغلق. نظرا لصغر غزوها ، وكذلك بسبب سهولتها النسبية وعمليتها ، فإن هذه التقنية لديها القدرة على تجربة الاستخدام على نطاق واسع في المختبرات المتخصصة في أبحاث الأورام الرئوية.

المقدمة

الرئة هي واحدة من أهم الأعضاء المستهدفة للمرض النقيلي ، ولأن هذه الحالة يصعب علاجها بنجاح بالعلاج الكيميائي والإشعاعي ، لا يزال العلاج نادرا1،2. تساهم السمات الفيزيولوجية المرضية والدورة الدموية الدقيقة المحددة للأورام الأولية والنقيلية الصلبة ، مثل نقص الأكسجة المجهري ، والحد من الانتشار ، والأوعية الدموية غير الفعالة للورم ، بشكل كبير في مقاومتها للعلاج المضاد للسرطان3،4. نظرا للمقياس المجهري والطبيعة الديناميكية للمعلمات مثل تدفق الدم في الأوعية الدموية الدقيقة ، أصبح الفحص المجهري داخل الحيوية للورم في الحي أداة بحثية مهمة جدا في هذاالمجال 5. بينما تم تطبيق نماذج الفحص المجهري داخل الحيوية على الأورام في مواقع الأعضاء المختلفة ، بما في ذلك الرئة النقيلية داخل القفص الصدري المفتوح ، لم يتم تطوير أي بروتوكول حتى الآن لأبحاث النقائل الرئوية في بيئة مغلقة من الناحية الفسيولوجية6،7. يعوق هذا المسعى بشكل خاص ضرورة الوصول الجراحي إلى القفص الصدري دون التأثير على الوظيفة العامة للرئة7-9. في الآونة الأخيرة ، تم إدخال طريقة لتصوير تدفق الدم في الدورة الدموية الدقيقة الرئوية في بيئة قريبة من الصدر في الفئران الحية ، باستخدام الفحص المجهري داخل الحياةالفلورية 10. يتيح هذا البروتوكول القياس الكمي المنهجي لسرعة تدفق الدم من خلايا الدم الحمراء المحقونة والمسماة بالفلورسنت ، باستخدام التحليل المحوسب ، مع الحفاظ على استقرار من الناحية الفسيولوجية والحفاظ على سلامة الرئة11. في هذه الدراسة الحالية ، يتضح كيف يمكن تعديل هذه التقنية لتصوير وقياس تدفق الدم في الدورة الدموية الدقيقة في النقائل الرئوية الملقحة بوريد الذيل على السطح الجنبي في الفئران التي تعاني من نقص المناعة. هذا النموذج هو أيضا أول نموذج يدرس أورام الرئة النقيلية في إعداد مجهر داخل الصدر المغلق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

ملاحظة: جميع الإجراءات الحيوانية المتعلقة الموصوفة في هذا البروتوكول وقد تمت الموافقة من قبل لجنة رعاية الحيوان المؤسسية واستخدم جامعة ديوك (DUIACUC).

1. سرطان خلية ثقافة وحقن

  1. زراعة خلايا السرطان النقيلي fluorescently المسمى (على سبيل المثال MDAMB231-GFP خلايا سرطان الثدي البشرية، هدية من الدكتور باتريشيا Steeg، NCI، وخلايا فأر ساركوما YFP المسمى، هدية من الدكتور ديفيد كيرش، المركز الطبي لجامعة ديوك، قسم علاج الأورام بالإشعاع) في مستنبت المناسب (على سبيل المثال Dulbecco لتعديل النسر المتوسطة (DMEM) مع 10٪ مصل بقري جنيني و 1٪ البنسلين / streptavidin) عند 37 درجة مئوية حتى ما يقرب من 90٪ متموجة.
  2. يعرض للتريبسين الخلايا، غسلها 2 مرات مع برنامج تلفزيوني، عد، ثم ضخها في عروق الذيل من 10 أسابيع من العمر الفئران عارية الإناث تخدير الأيزوفلورين عند 5 مليون خلية لكل حيوان، وذلك باستخدام حقنة بإبرة G 27. anesthes مستوى الجراحيةيتم التحقق منها الجيش العراقي بسبب عدم وجود رد فعل حتى أخمص القدمين قرصة.

2. رصد الانبثاث عن طريق MicroCT

  1. دراسة الفئران مرة واحدة في الأسبوع باستخدام الصغير CT / الدقيقة Irradiator، للكشف عن وجود نقائل فوق ما يقرب من 2 مليمتر في القطر في القطر. وكلفت-CT الجزئي كما هو موضح سابقا (12).
    1. الفئران الخاضعة لل3٪ الأيزوفلورين التخدير قبل التصوير. تأكيد التخدير العميق عن طريق قرصة أخمص قدميه.
    2. بعد بداية التخدير، وبسرعة نقل الفئران إلى مهد التصوير في غرفة التصوير والاتصال عن طريق الأنف مخروط إلى خليط الأيزوفلورين الهواء في 2.5-3٪. ضبط الموقف من الفئران في المهد في الطريقة التي يتم وضع الصدر في شعاع الفوتون من الماسح الضوئي MicroCT، باستخدام عناصر التحكم موقف الخارجية ومحدد ليزر على مهد التصوير. تأكد من إغلاق الباب إلى غرفة التصوير، لحماية المحقق من أشعة غاما.
    3. السيطرة على الموقف من الحيوان مرة أخرى باستخدامالكاميرا لون الفيديو. إجراء منخفضة الدقة اختبار التصوير CT المدى، واستخدام الصورة الناتجة لضبط مجال الرؤية للأبعاد XYZ من التجويف الصدري.
    4. صورة الصدر الفئران باستخدام 2 مم آل مرشح في 40 KVP، 2.5 مللي أمبير، وفوكسل 0.008 في 7 FPS ويعود الحيوان إلى قفصه. التصوير من حيوان واحد ينبغي أن لا يزيد عن 15 أو 20 دقيقة. لا يعودون الحيوان الذي خضع لعملية جراحية للشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما. لا تترك حيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه أنه كاف للحفاظ على الاستلقاء القصية.
    5. تأكيد الانبثاث بظهور أجسام معتمة نسبيا التي لا يمكن تفسيرها من خلال الأوعية الدموية داخل الصدر (الشكل 1A)

جراحة 3. غرفة النافذة

  1. التخدير، والعلامات الحيوية والذيل قثطرة الوريد
    1. اختيار الحيوانات مع وجود المرض المنتشر. حقن الحيوان مع د داخل الصفاقبيئة نظام التشغيل من 50 ملغ / كغ بنتوباربيتال. تأكيد التخدير على مستوى الجراحي بواسطة إصبع قرصة قبل المتابعة.
      يجب أن تكون مطابقة بروتوكولات التخدير إلى الإعداد التجريبية منها: مذكرة. وقد تم اختيار بنتوباربيتال هنا كما مخدر طويل المفعول، وذلك للحث على التخدير العميق لإجراءات مطولة، في حين تقدم خيار السطحية إعادة الجرعات. ومع ذلك، وفقدان الحيوانات لالجرعة الزائدة هي مشكلة مشتركة مع التخدير بنتوباربيتال. وثمة خيار آخر أن يحافظ على ردود الفعل اللاإرادي إلى درجة أكبر من بنتوباربيتال هو الكيتامين في تركيبة مع المهدئات مثل زيلازين أو medetomidine، ولكن الذي يسمح فقط للملء مع جرعة إعادة دورة واحدة.
    2. يحلق الحيوانات على جانب من الجسم الذي لديه المرض المنتشر، وفي منطقة الرقبة، وذلك باستخدام المقص. تمحو كل ما تبقى من الشعر فضفاضة من الجلد. بعد إزالة الشعر فضفاضة، وتطبيق مرهم البيطرية للعيون، لمنعهم من الجفاف.
      ملاحظة: قد يكون الفئران عارية Athymic الشعر المتبقية التي REQUIإزالة الدقة قبل الشروع في العمليات الجراحية. من المهم جدا لإزالة كل الشعر جيدا، لأنها قد تتداخل مع العمليات الجراحية والتصوير.
    3. إصلاح الحيوان في موقف ضعيف على لوحة معدنية التي يتم وضعها على وسادة التدفئة 37 ° C المياه تعميم. يتم إصلاح الأطراف الأمامية والخلفية على لوحة مع الشريط.
      ملاحظة: ومن المفيد لمراقبة وتسجيل العلامات الحيوية، مثل معدل ضربات القلب والشرايين الأوكسجين في الدم باستخدام مقياس التأكسج النبض، في جميع أنحاء العمليات الجراحية والتجريبية.
  2. التنبيب الرغامي
    1. من أجل وضع قسطرة للتهوية من الحيوان، أولا جعل مستعرضة عنق الرحم شق الجلد، يليه فصل متوسط ​​من بطني عضلات طولية إلى القصبة الهوائية.
    2. الاستخدام المتكرر العمل الافتتاحية إلى إغلاق مع ملقط حادة لإنشاء ممر للخياطة من خلال الجانب الظهري من القصبة الهوائية.
    3. إجراء شق صغير في القصبة الهوائية على رانه الجانب البطني، وليس أكثر من نصف دائرية، ما يقرب من بين القصبة الهوائية حلقة الثانية والثالثة. ترك جزء طويل بما فيه الكفاية من القصبة الهوائية تعرض على السطح الظهري، لتمكين تثبيت القسطرة القصبة الهوائية.
    4. إدراج 2،5-3،0 مم "Y" القصبة الهوائية قنية في القصبة الهوائية، وتشديد مع خياطة 4-0 حيدة. ضمان توصيل قنية لضغط تدوير التنفس الصناعي مع زجاجة متصلة القناة انتهاء مليء 6 سم من الماء، للحفاظ على الضغط الرئوي الإيجابي. وينبغي أن يكون الغاز المتدفق 100٪ الأكسجين، ما لم المطلوب تجريبيا على خلاف ذلك.
    5. ادخال قسطرة مع G إبرة 25-27، ومليئة المالحة heparinized إلى واحدة من الأوردة ذيل فأر، وإصلاح في مكان مع الشريط.
      ملاحظة: تأكد من المباح للقسطرة الوريد الذيل في جميع أنحاء الإجراء من قبل مرارا وتكرارا حقن كمية صغيرة من المياه المالحة heparinized في الوريد الذيل. أيضا، التنبيب أورو-القصبة الهوائية، أي توجيه من القصبة الهوائيةأنبوب عن طريق الفم للتخدير الحيوان والماضي الحنجرة إلى القصبة الهوائية، هو بديل محتمل لإجراء القصبة الهوائية الموضح هنا. ومع ذلك، يتطلب هذا الأسلوب من التدريب والخبرة خاص، لتجنب الأضرار التي لحقت القصبة الهوائية، وأيضا للحيلولة دون القسطرة عرضي من المريء.
  3. تطبيق نافذة الرئوي
    1. إزالة الجلد من الجانب من الصدر حيث يقع المرض المنتشر، من خلال خلق شق، ومن ثم فصل الجلد باستخدام تشريح حادة.
      ملاحظة: الجلد يمكن رفعه وإزالة لاحقا إلى مفرزة
    2. المضي قدما في طريق تشريح طبقتين من تتراكب الجهاز العضلي (الصدرية، المنشارية، والظهرية العريضة)، ولكن ترك العضلات الوربية سليمة. إنشاء ثقب في تجويف الصدر من حوالي 1.5 سم في القطر، عن طريق إزالة أجزاء من عادة اثنين من أضلاعه المجاورة. من الناحية المثالية، حدد موقع ثقب في المنطقة من ص السادس والسابعالقولون العصبي.
    3. العظم:
      1. لتقليل النزيف والضرر على سطح الرئة، وعقد بإحكام الضلع لا بد من تخفيض مع ملقط الجراحية مسننة خلال عدة قطاعات. باستخدام مقص جراحي، وقطع الجانب الإنسي من الضلع الأول، في زاوية ما يقرب من 45 درجة، وترك الجانب أشار من عظم الضلع المتبقي لافتا الخارج.
      2. وفي وقت لاحق، وقطع الجانب الوحشي من عظم الضلع بطريقة مماثلة، وترك مرة أخرى الجانب أشار العظم الصدري إلى الخارج، لمنع الأضرار التي لحقت سطح الرئة.
      3. كرر الإجراء الضلع المجاور، ثم قطع العضلات الوربية وإزالة قطعة رفعه. خلال هذا الإجراء، والحفاظ على ضغط الرئة بطريقة التفاعل الميكانيكية بين سطح الرئة والقفص الصدري إلى أدنى حد ممكن. القيام بذلك عن طريق تنظيم ضغط بشكل مناسب إلهام على جهاز التنفس الصناعي.
    4. الإدراج من النافذة:
      1. اضافة الى وجود نافذة الرئة العرف، ويتكون من ساترة هذا هوتعلق على مقبس زجاجي (الشكل 1B). نعلق الإطار إلى المقبس من قبل الإلتصاق، أو عن طريق تطبيق كمية صغيرة جدا من الشحوم فراغ. إدراج النافذة بطريقة الانبثاث سطح تقع على مقربة من وسط النافذة. إذا لزم الأمر، وضبط فتحة إدخال لجلب نقيلة مجهرية إلى وسط النافذة من خلال توسيع الثقب قليلا إلى الجانب المعني.
        ملاحظة: المرض المنتشر على سطح الجنبي يمكن حصرها في النقاط البيضاء التعرف عليها بوضوح أو مناطق داخل أجزاء خلاف الوردي لسمك السلمون الملونة صحية من سطح الرئة التي تظهر في الغالب على طول الشقوق. في حين يمكن أن يحدث micrometastases على مناطق أخرى من الخارج الجنبي، وخطوط الخلايا التحقيق عرض دائما تقريبا تطفو على السطح micrometastases في منطقة مثقبة، مرة واحدة المرض المنتشر يمكن أن يتم الكشف عن شعاعيا.
      2. بعد إدخال المقبس في ثقب، وخلق اتصال مباشر مع الجنبة الحشوية لللأونج، خياطة حواف إطار نافذة لعضلة الوربية المحيطة، وذلك باستخدام 4.0 خياطة حيدة (الشكل 1C). استخدام زيادة طفيفة الضغط إلهام على جهاز التنفس الصناعي للمساعدة في الهواء المتبقية للهروب وخلق الختم.
        ملاحظة: معدل التنفس من الفئران يمكن أن تختلف اختلافا كبيرا، تبعا لحالة من التخدير، وحالة من الإثارة أو القلق، وتركيز الأكسجين من الهواء من وحي (قوة المراقبة الدولية 2)، وما إلى ذلك من المفضل لضبط معدل التنفس ما بين 70 و 90 نبضة في الدقيقة. ينبغي تعديل الضغط إلهام بحذر وعدم وضعها لأكثر من تقريبا. 8 سم H 2 O (0.6 ملم زئبقي)، لتجنب الأضرار التي لحقت سطح الرئة.
    5. وضع الحيوان في رادع مصمم خصيصا التي تم تصميمها للقضاء-Z اتجاهي الحركة (الشكل 1D) على لوحة الصلب الذي يتوضع على الحرارية (الكهربائية) التدفئة بطانية، تحت المجهر مضان. السيطرة على جسم الحيواندرجة الحرارة باستخدام الثرمستور المستقيم. ضبط مسامير من رادع الحيوان، والضغط إلهام على جهاز التنفس الصناعي لتحقيق التحكم الأمثل من الحركة الجانبية.
      ملاحظة: التنفس الطبيعي في الثدييات يشمل جميع الاتجاهات الثلاثة للحركة الرئة والإرشاد الصدر: الثنائي، ظهراني بطني، والقحف-الذيلية. من أجل الحفاظ على حركة التنفس الطبيعية قدر الإمكان، من المهم للحد-Z الاتجاه ضغط بالقدر اللازم. لأن Z-الأبعاد ضبط النفس لديه القدرة على تقديم الاعمال الفنية التي قد تؤثر على تدفق الدم وغيرها من المعالم، فمن المستحسن أن تبقي شروط ثابتة خلال سلسلة من القياسات المتكررة في نفس الحيوان.

4. التصوير والقياس من الأوعية الدقيقة تدفق الدم

  1. جمع خلايا الدم الحمراء عبر ثقب في القلب وتسمية لهم الجاذبة (1،1 = -dioctadecyl-3،3،3 بيركلورات = 3 = -tetramethyl-indocarbocyanine)، كما هو موضح سابقا <سوب> 10.
  2. ضخ 300 ميكرولتر من خلايا الدم الحمراء وصفت في الوريد ذيل فأر قبل الجراحة تتم غرفة النافذة، لتجنب الآثار الأولى تمريرة التصاق لزجاج النافذة. القضاء على أي فقاعات الهواء في حقنة أو القسطرة، كما إدخال الهواء إلى الوريد سوف تمنع أي حقن أخرى.
  3. صورة تدفق الدم مع كاميرا CCD المجهر في -40 ° C رقاقة درجة حرارة التبريد، وحوالي 100X قرار الكلي (أي مع الهدف المجهر 10X، 10X وقبل الكاميرا بصري). استخدام معيار مجموعات تصفية رودامين / TRITC (450-490 نانومتر الإثارة، والانبعاثات> 515 نانومتر). تسجيل معدل الإطار وبكسل القرار الفعلي للتسلسل الصورة الناتجة. سجل 200 على الأقل (من الناحية المثالية حوالي 300) الصور في كومة، لضمان التحليل الناجح لسرعة التدفق.
  4. تجديد فقدان السوائل في الحيوان عن طريق ضخ ما يقرب من 1 مل من المياه المالحة الملكية الفكرية في كل ساعة.
    ملاحظة: إعدادات التجريبية التي تنطوي على التدخل، على سبيل المثالدواء بتعديل سرعة تدفق الدم في الانبثاث السرطان الرئوي، يتطلب قياسات متكررة من سرعة تدفق الدم في السرطان النقيلي الرئوي. لهذه التجارب الموسعة، من المهم لتجديد الحيوان مع السائل كافية.
  5. الموت ببطء الحيوانات عن طريق التسريب من 3 مل من 3N بوكل في الوريد الذيل
  6. تقييم مداخن صورة باستخدام، وهي متاحة علنا خوارزمية الكمبيوتر نشرت استنادا ماتلاب من شأنها أن تخلق تدفق الرمادي السرعة واللون المشفرة خرائط لجميع تدفق الدم يتتبع 10،11. تقييم في وقت لاحق الصور الرمادية الناتجة باستخدام برنامج تحليل الصور تجاري أو متاحة للجمهور، مثل صورة J، بعد العتبة من القيم التي تشير إلى أي حركة خلايا الدم، أي لا الأوعية الدموية نشطة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

ومن المعروف أن الأوعية الدموية في الأورام الصلبة لتختلف كثيرا عن إمدادات الدم الطبيعي، والتي تبين درجة أكبر من تعرج، والمسافات INTERVASCULAR أعلى 13. وفقا لذلك، والمسارات تدفق الدم في الرئة التجريبية سرطان الثدي وساركوما الانبثاث لها الأشكال غير النظامية والثغرات INTERVASCULAR كبيرة (الشكل 2A، وانخفاض فريقين) بالمقارنة مع دوران الأوعية الدقيقة الرئوي العادي (الشكل 2A، لوحة العليا). في دراسة سابقة، وقد تجلى قدرة طريقة نافذة الرئوي لأداء ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

ويرد النموذج الذي هو ممكن للتغيرات الصورة في الأوعية الدقيقة تدفق الدم والعمليات الحيوية الأخرى في الانبثاث الرئة من الفئران، وذلك باستخدام intravital المجهري والتحليل الحسابي تدفق الدم. بينما توجد طرق أخرى لأداء المجهري على الرئتين تتعرض في ribcages مفتوحة من القوارض، وهذا النموذج هو أيضا أول من صورة الانبثاث الرئوية من خلال ثقب جدار الصدر في مكان مغلق الصدر. باستخدام هذه الطريقة، يتم عرض جدوى لقياس التغيرات التي يسببها دواء في الأوعية الدقيقة تدفق الدم الانبثاث الرئوية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

شكر وتقدير

نصيحة علمية للدكتورين تيموثي مكماهون وسيتشينغ شان موضع تقدير. يشكر المقدمون الدكتورين ديفيد كيرش وباتريشيا ستيج على الهدية السخية لساركوما الفأر المسمى بالفلورسنت وخلايا MDAMB-231 النقيلية ، على التوالي. تم تمويل هذا العمل جزئيا من قبل وكالة مشاريع البحوث الدفاعية المتقدمة الأمريكية (DARPA) رقم الجائزة الرئيسية N66001-10-C-2134 ، وجزئيا من قبل قسم علاج الأورام بالإشعاع ، المركز الطبي بجامعة ديوك.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الفئران العارية اللورميةتشارلزريفر سلالة كود 316أنثى 10 أسابيع رياضية عارية الفئران
micro-CT / micro-Irradiator   ؛شركة الأشعة السينية الدقيقةXrad 225Cxاستخدم MicroCT للكشف عن النقائل
DiI (1،1 = -dioctadecyl-3،3،3 = ، 3 = -tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)Sigma Aldrich468495-100MGامزج 100 ul من خلايا الدم الحمراء المعبأة مع 100 ul من 0.5 مجم / مل DiI في 200 دليل على الإيثانول ، 2 مل من محلول سكر العنب 5٪ في الماء ، واملأ ما يصل إلى 10 مل من الحجم النهائي باستخدام
جهاز التنفس الصناعي الملحي للقوارضKent ScientificTOPO Small Animalالجهاز مهم للحفاظ على ضغط الرئة الإيجابي بعد تطبيق استرواح الصدر
Zeiss Axioskop مجهر فلوري مستقيمZeissAxioskopمجهر للتصوير داخل الحيوية
Andor كاميرا CCDAndoriXonEM 885CCD للتصوير المباشر لتدفق الدم
مقياس التأكسج النبضيStarrLifeMouseمقياسالتأكسج النبضي
المجهرالفلوريZeissAxioskopالمجهر الفلوري

المراجع

  1. Billingsley, K. G., et al. Pulmonary metastases from soft tissue sarcoma: analysis of patterns of diseases and postmetastasis survival. Ann Surg. 229, 602-610 (1999).
  2. Rashid, O. M., Takabe, K. The evolution of the role of surgery in the management of breast cancer lung metastasis. J Thorac Dis. 4, 420-424 (2012).
  3. Mayer, A., Vaupel, P. Hypoxia, lactate accumulation, and acidosis: siblings or accomplices driving tumor progression and resistance to therapy. Advances in experimental medicine and biology. 789, 203-209 (2013).
  4. Okunieff, P., O'Dell, W., Zhang, M., Zhang, L., Maguire, D. Tumor oxygen measurements and personalized medicine. Advances in experimental medicine and biology. 765, 195-201 (2013).
  5. Palmer, G. M., et al. In vivo optical molecular imaging and analysis in mice using dorsal window chamber models applied to hypoxia, vasculature and fluorescent reporters. Nature protocols. 6, 1355-1366 (2011).
  6. Palmer, G. M., et al. Optical imaging of tumor hypoxia dynamics. Journal of biomedical optics. 15, (2010).
  7. Funakoshi, N., et al. A new model of lung metastasis for intravital studies. Microvasc Res. 59, 361-367 (2000).
  8. Kuebler, W. M. Real-time imaging assessment of pulmonary vascular responses. Proc Am Thorac Soc. 8, 458-465 (2011).
  9. Tabuchi, A., et al. Precapillary oxygenation contributes relevantly to gas exchange in the intact lung. Am J Respir Crit Care Med. 188, 474-481 (2013).
  10. Hanna, G., et al. Automated measurement of blood flow velocity and direction and hemoglobin oxygen saturation in the rat lung using intravital microscopy. American journal of physiology. Lung cellular and molecular physiology. 304, 86-91 (2013).
  11. Fontanella, A. N., et al. Quantitative mapping of hemodynamics in the lung, brain, and dorsal window chamber-grown tumors using a novel, automated algorithm. Microcirculation. , (2013).
  12. Newton, J., et al. Commissioning a small-field biological irradiator using point, 2D, and 3D dosimetry techniques. Medical physics. 38, 6754-6762 (2011).
  13. Vaupel, P. Tumor microenvironmental physiology and its implications for radiation oncology. Seminars in radiation oncology. 14, 198-206 (2004).
  14. Tabuchi, A., Mertens, M., Kuppe, H., Pries, A. R., Kuebler, W. M. Intravital microscopy of the murine pulmonary microcirculation. J Appl Physiol. 104, 338-346 (2008).
  15. Fingar, V. H., Taber, S. W., Wieman, T. J. A new model for the study of pulmonary microcirculation: determination of pulmonary edema in rats. J Surg Res. 57, 385-393 (1994).
  16. Manzoor, A. A., Schroeder, T., Dewhirst, M. W. One-stop-shop tumor imaging: buy hypoxia, get lactate free. The Journal of clinical investigation. 118, 1616-1619 (2008).
  17. Evans, S. M., et al. Imaging and analytical methods as applied to the evaluation of vasculature and hypoxia in human brain tumors. Radiation research. 170, 677-690 (2008).
  18. Radiloff, D. R., et al. The combination of theophylline and endothelin receptor antagonism improves exercise performance of rats under simulated high altitude. Journal of applied physiology. 113, 1243-1252 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

المجهرية الحيوية داخل الجسمنموذج الصدر المغلقخلايا دم حمراء فلوريةنافذة صدريةتحليل آليتدخل دوائيالأوعية الدموية للأورام
القياس الآلي من الأوعية الدقيقة سرعة تدفق الدم في الرئة الانبثاث من الجرذان
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.