Method Article

انخفاض الجاذبية المظاهرات الأجهزة البيئة في نموذج المنمنمة تدفق عداد الكريات ورفيق ميكروفلويديك تقنية خلط

DOI:

10.3791/51743

November 13th, 2014

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التشخيص الدم رحلات الفضاء تحتاج الابتكار. وقد نشرت عدة مظاهرات توضح على متن الطائرة، وانخفاض الجاذبية تكنولوجيا صحة التشخيص. نحن هنا نقدم وسيلة لبناء وتشغيل مكافئ تلاعب رحلة تجريبية لنموذج أولي نقطة من الرعاية تصميم التدفق الخلوي، مع مكونات واستراتيجيات الإعداد للتكيف مع الاجهزة الأخرى.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

حتى وقت قريب، تم جمع عينات الدم رائد فضاء على متن الطائرة ونقلها إلى الأرض على مكوك الفضاء، وتحليلها في المختبرات الأرضية. إذا كان البشر هم للسفر خارج المدار الأرضي المنخفض، والانتقال نحو الفضاء جاهزة، نقطة من الرعاية مطلوب (POC) الاختبار. هذا الاختبار يجب أن تكون شاملة، وسهلة لأداء في بيئة منخفضة الجاذبية، وتتأثر ضغوط إطلاق ورحلات الفضاء. وقد تم تطوير أجهزة POC لا تعد ولا تحصى لتقليد نظرائهم نطاق المختبر، ولكن معظمها تطبيقات الضيقة وقلة استخدام واضح لديهم في بيئة منخفضة الجاذبية على متن الطائرة. في الواقع، والمظاهرات من تشخيص الطب الحيوي في تقليل خطورة محدودة تماما، مما يجعل اختيار عنصر وتحديات لوجستية معينة يصعب الاقتراب عندما تسعى لاختبار التكنولوجيا الجديدة. للمساعدة في ملء الفراغ، نقدم طريقة وحدات لبناء وتشغيل جهاز للتشخيص أولي الدم و p المرتبط بهarabolic تلاعب في اختبارات الطيران التي تلبي معايير لرحلة الاختبار على متن رحلة مكافئ والطائرات انخفاض الجاذبية. طريقة تركز أولا على تجميع للتلاعب في الطيران، اختبار انخفاض الجاذبية من تدفق عداد الكريات ورفيق ميكروفلويديك رقاقة الاختلاط. المكونات هي قابلة للتكيف مع تصاميم أخرى وبعض مكونات مخصصة، مثل محمل عينة microvolume وربما يكون micromixer ذات أهمية خاصة. طريقة ثم تركز على التحولات إعداد الرحلة، من خلال تقديم الإرشادات والاقتراحات للتحضير لرحلة تجريبية ناجحة فيما يتعلق تدريب المستخدمين، وتطوير إجراءات التشغيل القياسية (SOP)، وغيرها من القضايا. أخيرا، وصفت في رحلة تجريبية إجراءات محددة لمظاهرات دينا.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

عدم كفاية التشخيص الحالية الصحية الفضاء جاهزا تقدم عاملا مقيدا لأعمق استكشاف الفضاء المأهول. التشخيص يجب أن تكون شاملة، وسهلة الاستخدام في انخفاض الجاذبية، وبعيدة نسبيا عن ضغوط وإطلاق رحلات الفضاء (على سبيل المثال، وارتفاع ز القوات، والاهتزاز، والإشعاع، والتغيرات في درجة الحرارة، والضغط المقصورة التغييرات). التطورات في نقطة الرعاية السريرية (POCT) قد تترجم إلى حلول فعالة رحلات الفضاء من خلال استخدام عينات المرضى الأصغر حجما (مثل وخزة إصبع)، FLUIDICS أبسط وأصغر (أي، على microfluidics)، وتخفيض متطلبات الطاقة الكهربائية، من بين أمور أخرى المزايا. التدفق الخلوي هو نهج واحد جذابا للمركز ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم جمع عينات دم الإنسان المستخدمة في هذا البروتوكول بموافقة IRB باستخدام بروتوكولات الغازية الحد الأدنى (انظر شكر وتقدير).

1. تزوير الجمعية

  1. تجميع مكونات النموذج (FLUIDICS، البصرية والالكترونيات السيطرة / الحصول على البيانات) لتدفق بسيط الخلوي نظام لاستخدامها في خفض شروط الجاذبية
    1. إعداد نظام الضغط مع الحد الأدنى من الوزن والقوة تحتاج لدفع FLUIDICS النظام

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تظهر نتائج تمثيلية للمظاهرة micromixer في الشكل 7، كما يراها كاميرا CCD تركيبها على stereomicroscope. خلط يمكن تقييم بصريا في أي نقطة على طول دوامة، وكذلك في قناة الخروج عن التجارب التي تنطوي على مجموعتين من سوائل: الدم / المالحة والأزرق / صبغة صفراء. التحليل الكمي للصور ثنائية الأبعاد ويمكن أن تشمل تحديد التوحيد الظل عبر عرض القناة في مناطق مختلفة، كما هو مبين في مطبوعات أخرى 38-40. انظر الشكل التكميلي 1 لمزيد من التفاصيل. انظر

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الطريقة الموصوفة هنا مكن مظاهرة فعالة من مكونات التكنولوجيا الكبرى (عينة التحميل، خلط ميكروفلويديك، والكشف البصري) أثناء الطيران الدوراني FAST 2010، وكانت النتائج مماثلة لاختبار الأرض. كانت أساليب التدريب وSOP الموصوفة هنا فعالة بشكل خاص، وساعدت على إلقاء الضوء الأدوات وغيرها من الوجود "عكازين" تعتمد على الممارسة للمظاهرات التي لن تكون متوفرة على متن رحلة مكافئ.

وتشمل مجالات التحسين الاحتواء والتخطيط. ا.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يوجين Y. تشان، كانديس باي، وجوليا Z. شارب هي المخترعين على براءة اختراع التكنولوجيا ذات الصلة المقدمة من خلال معهد الطب الحمض النووي، وكيان تجاري.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وأيد تطوير الأجهزة من قبل وكالة ناسا SBIR العقود NNX09CA44C وNNX10CA97C. وأيد تحليل البيانات للكتلة ومحمل عينة المظاهرات البصرية وكالة ناسا المرحلة الثالثة NNC11CA04C العقود. تم إجراء جمع الدم البشري باستخدام بروتوكول ناسا IRB # SA-10-008. برامج التحكم / الاستحواذ المقدمة من خلال الأجهزة الطبية الصكوك الوطنية برنامج المنح. وقدمت قوالب لالرقائق في جونز هوبكنز منشأة الدقيق microfabrication ومركز هارفارد لأنظمة النانو. أوتو J. براينر ولوقا جافي (معهد الطب DNA) ساعد في التجمع رف خلال صيف عام 2010. قدمت ناسا الموظفين الفيديو لقطات فيديو خلال رحلة الأسبوع رحلة. قدم كارلوس بارينتوس (معهد الطب DNA) المساعدة وصورة شخصية. شكر خاص إلى الو....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
مضخة الهواء الصغيرةSmart Products، Inc.AP-2P02Aأقصى ضغط = 6.76 رطل لكل بوصة مربعة ؛ 1.301 بوصة × 0.394 بوصة × 0.650 بوصة ، 0.28 أونصة (8 جم) ؛ متوفر مباشرة من
مستشعر الضغط التفاضليالذكية Honeywell International، Inc.ASDX015D44RRange  of  0-15 رطل لكل بوصة مربعة ؛ 0.974 بوصة × 0.550 بوصة × 0.440 بوصة ، 0.09 أونصة (2.565 جم) ؛ يشمل الموردون Digi-Key and Mouser Electronics
قارورة بلاستيكية صلبة (صغيرة الحجم)Loritz & amp شركاه ، شركة55-05البوليسترين. معرف 0.81 بوصة (20.6 ملم) ، IH 2.06 بوصة (52.4 مم) ؛ متاح مباشرة من LA Container Inc. ؛ منتج مماثل متوفر من Dynalab Corp.
قفازات فحص اللاتكسشركة DynarexCorporation 2337الإصبع الأوسط المستخدم في الحجاب الحاجز اللاتكس في قارورة مصدر السوائل. العلامات التجارية الأخرى ( على سبيل المثال< / em> ، Aurelia & reg ؛   تجارة نابضة بالحياة ؛) مقبولة.
الغراء البصريمنتجاتنورلاند NOA 88لاصق منخفض التفريغ ؛ متاح مباشرة من نورلاند ؛ متاح أيضا من شركة Edmund Optics Inc.
3-طريقة صمامات الملف اللولبيشركة LEELHDA0531115Hصمامات الغاز ، ولكن يمكن أن تعمل مع السائل ؛ 1.29 "L ، 0.28" D. & nbsp ؛ المنتج المتوقف.  منتجات مماثلة متوفرة من شركة LEE.
مقياس التدفق الحجمي للمياهOMEGA Engineering inc. يفضل بشدة مقياس معدل التدفق غير الملامس FLR-1602A.  نوصي باستخدام مستشعر تدفق السائل SENSIRION LG16 OEM لمعدلات التدفق من nl / min حتى 5 مل / دقيقة.
كاشف الفوتون PCD-mini SenslPCDMini-00100للكشف عن التألق ؛ متاح مباشرة من Sensl
AccelerometerCrossbow Technology, Inc.CXL02LF33 كشف القوة النهائية. تم توفيرها إلى DMI من قبل وكالة ناسا. منتج مماثل متاح من Vernier Software & التكنولوجيا، ذ.م.م. 
مجهر مجهرمجهر AmScopeSE305R-AZ-E
CCD كاميراThorlabsDCU223C1,024 × 768 دقة ، لون ، USB 2.0 ؛ متوفر مباشرة من Thorlabs
USB وكابل الزناد (داخل / خارج) لكاميرا CCDThorlabsCAB-DCU-T1متوفر مباشرة من Thorlabs
Microbore tubingSaint-Gobain CorporationAAD04103Tygon®; معرف 0.02 "، OD 0.06 "، 500 قدم ، 0.02" جدار. الموردين: VWR ، Thermo Fisher Scientific Inc.
دبابيس فولاذية مجوفةنيو إنجلاند أنبوب صغير(مخصص)0.025 "OD ، 0.017" معرف ، 0.500 " L ، أنبوب الفولاذ المقاوم للصدأ ، النوع 304 ، مقطوع ، مزيل الأزيز ، تخميل ؛ تمكين وصلات الأنابيب الصغيرة ، ووصلات أنابيب الرقائق
المشبك المنزلقWorld Precision Instruments، Inc.14042متوفر مباشرة من
قطع محولWorld Precision Instruments, Inc.14011متاح مباشرة من World Precision Instruments
رقاقة السيليكونAddison Engineering، Inc.6 "القطر; ل SU-8 تصنيع القالب
البولي ديميثيل سيلوكسان (PDMS) عامل معالجة المطاط الصناعيداو كورنينج3097358-1004المورد: Global Industrial SLP, LLC
إبرة (23 مقياس), شطبة طرفTerumo Medical CorporationNN-2338Rجدار رقيقة جدا; 23 G × 1.5 "; 22 G أيضا قابلة للاستخدام; الموردين: Careforde, Inc., 
إبرة الاستغناء الطبي في مدينة بورت سيتي (مقياس 23) ، طرف حادCML Supply901-23-10023 جم × 1 بوصة ؛   متاح من زجاج غطاء إمداد CML
Thermo Fisher Scientific، Inc.12-518-105Eختم الذهب والتجارة ؛ زجاج البورسليكات غير القابل للتآكل ؛ لغطاء رقاقة PDMS ؛ 24 × 60 مم ؛ متاح من Thermo Fisher Scientific, Inc.
مضخة فراغMTN8407 الجبللتفريغ PDMS; المورد:  شركة رايدر سيستم، إنك. 
غرفة فراغثيرمو فيشر العلمية، إنك.5311-0250نالجين والتجارة; بولي كربونات شفاف متاح من Thermo Fisher Scientific، Inc.
منظف البلازماHarrick PlasmaPDC-32G
المكبر اليدويMitutoyo183-131استخدم في الاتجاه العكسي لتمكين العرض عند ~ 15 بوصة.
861283 الإيثانولكارولينالتنظيف الرقائق. خفف إلى 70٪ باستخدام ماء مليبور.
نظام تنقية المياهThermo Fisher Scientific، Inc.D11901متاح مباشرة من Thermo Fisher Scientific، Inc.
يتصاعد الترجمة الضوئيةThorlabsK6X6-Axis Kinematic Optic Mount ؛ المنتج الذي توقف ؛ منتج جديد (K6XS) متاح مباشرة من Thorlabs
LaptopHewlett-PackardVP209AVHP Pavilion Laptop الذي يعمل بنظام Windows 7
Laptop Tray (محمل بنابض)Products, INC.RAM-234-3 ذاكرة الوصول العشوائي Tough-Tray ™. يمكن أن تستوعب أجهزة الكمبيوتر المحمولة بعرض 10 إلى 16 بوصة.
مقسم USBConnectland Technology Limited3401167
بطاقات الحصول على بيانات USB (8 مدخلات تناظرية ، 12 إدخال / إخراج رقمي)National InstrumentsNI USB-600812 بت ، 10 كيلو سي / ثانية منخفضة التكلفة متعددة الوظائف DAQ
USB بطاقات الحصول على البيانات (16 مدخلا تناظريا ، 32 إدخال / إخراج رقمي)National InstrumentsNI USB-621616 بت ، 400 كيلو ثانية / ثانية معزولة من سلسلة M MIO DAQ ، تحكم يعمل بالحافلة
/ برنامج الاستحواذNational InstrumentsLabVIEW 2009مشفر الأدوات الوطنية (NI) LabVIEW 
3D الصلبة النمذجة البرمجياتDassault Systè شركة ميس سوليد ووركسSolidWorks 2011
2D نمذجة البرمجياتAUTODESKAutoCAD LT 2008
رف المعدات العمودية(ناسا المقدمة)N / A
اللوح البصري الألومنيومالصلب ThorlabsMB242424 "× 24" × 1/2 "، 1/4" -20 صنابير ؛ متوفر مباشرة من Thorlabs
الصناعية الصلب والمقسىشركة J-B WeldCompanyJ-B لحام الصلب عززت الايبوكسي الغراء
المايكرو هيماتوكريت الشعيرات الدموية فيشر Scientific22-362-574القطر الداخلي 1.1 إلى 1.2 مم
1 مل محاقنHenke-Sass، Wolf4010.200V0NORM-JECT®; المورد: Grainger، Inc.
خلايا الدم الحمراءالبشرية أبحاث مبتكرةIPLA-WB3تم اختبارها ووجدها سلبية من قبل المورد من أجل: HBsAg و HCV و HIV-1 و HIV-2 و HIV-1Ag أو HIV 1-NAT و ALT والزهري بالطرق المعتمدة من إدارة الغذاء والدواء. نظرا لعدم وجود طرق اختبار يمكن أن تضمن على وجه اليقين 100٪ عدم وجود عامل معدي ، يجب التعامل مع المنتجات المشتقة من الإنسان على النحو المقترح في دليل وزارة الصحة والخدمات الإنسانية الأمريكية حول السلامة البيولوجية في المختبرات الميكروبيولوجية والطبية الحيوية ، للمصل البشري أو عينات الدم التي يحتمل أن تكون معدية
مركز المحلول الملحي المخزن بالفوسفاتP5493SIGMA10x ؛ مخفف إلى 1x
TweenP9416SIGMATWEEN & reg; 20
جهاز طرد مركزيLW ScientificSTRAIGHT8-5KSwing-Out 8-place الطرد المركزي.  متاح من خلال الوكلاء المعتمدين.  أجهزة الطرد المركزي الأخرى متاحة مباشرة من LW Scientific.
مسجل فيديو عالي الدقةSonyMHS-CM5
صبغة الحمض النووي الفلورسنت البرتقاليInvitrogenS-11364SYTO® 83 صبغة الحمض النووي الفلورسنت البرتقالي. مخزنة في مذيب DMSO. ارتد دائما معدات الحماية الشخصية الموصى بها. لا حاجة إلى نصيحة خاصة
.
حبات عد الفلورسنتInvitrogenMP 36950CountBright & trade ؛ الخرز العد المطلق.  ارتد دائما معدات الحماية الشخصية الموصى بها. لا توجد نصيحة معالجة خاصة مطلوبة.
للمنتجات World Precision Instruments Leur National مخصص

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Thomas, R. A., Krishan, A., Robinson, D. M., Sams, C., Costa, F. NASA/American Cancer Society High-Resolution Flow Cytometry Project-I. Cytometry. 43, 2-11 (2001).
  2. Wen, J., Krishan, A., Thomas, R. A.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Reduced Gravity TestingParabolic FlightMiniaturized Flow CytometerMicrofluidic MixingFluidics SystemOptical Block DetectionSample Loader DemonstrationRig Support StructureElectronic Shutdown MechanismValve Control System

Related Articles