الحقن في الوريد في الفئران حديثي الولادة

ملخص

نماذج حيوانية من المرض لدى الأطفال يمكن أن تواجه بداية مبكرة وتطور المرض العدواني. سريريا تقديم العلاج ذات الصلة لنماذج الماوس الشباب يمكن أن يكون صعبا من الناحية الفنية. يصف هذا البروتوكول طريقة الحقن في الوريد غير الغازية عن الفئران حديثي الولادة في غضون شهرين بعد الولادة الأيام الأولى من الحياة.

الملخص

الحقن في الوريد هي الطريقة المعمول بها سريريا لتقديم العلاجات. للقوارض الكبار والحيوانات الكبيرة، والحقن الوريدية هي مجدية تقنيا والروتينية. ومع ذلك، يمكن لبعض نماذج الماوس يكون بداية مبكرة من المرض مع التقدم السريع الذي يجعل إدارة العلاجات المحتملة صعوبة. الوريد الصدغي (أو الوجه) هو مجرد الأمامي لبرعم الأذن لدى الفئران وبشكل واضح للعيان اليومين الأولين بعد الولادة على جانبي الرأس باستخدام مجهر تشريح. خلال هذا الإطار، يمكن حقنه في الوريد الصدغي مع وحدات التخزين ما يصل إلى 50 ميكرولتر. الحقن هو آمن وجيد التحمل من قبل كل من الجراء والسدود. اكتمال إجراء حقن نموذجي في غضون 1-2 دقائق، وبعد ذلك يتم إرجاع الجرو إلى قفص المنزل. في اليوم الثالث بعد الولادة الوريد من الصعب تصور ويصبح إجراء الحقن لا يمكن الاعتماد عليها من الناحية الفنية. وقد استخدمت هذه التقنية لإيصال فيروس الغدة المرتبطة (AAV) vectأملاح الإماهة الفموية، والتي بدورها يمكن أن توفر تقريبا في جميع أنحاء الجسم، ومستقر التعبير التحوير لحياة الحيوان اعتمادا على المصلي الفيروسي الذي تم اختياره.

المقدمة

تقديم العلاجات للجهاز العصبي المركزي (CNS) في نماذج الفئران من أمراض الأطفال ما زال يمثل تحديا. الفئران هذا النموذج الحالات المرضية حديثي الولادة هي الأصغر وغير ناضجة تنمويا، وبالتالي يمكن أن يكون صعبا لحقن مباشرة في الهياكل المناسبة داخل الجهاز العصبي المركزي. الحقن داخل الأوعية الدموية من العوامل العلاجية هو غير الغازية أو أسلوب جيد التحمل لتوصيل الخلايا، والمخدرات، أو ناقلات فيروسية لكامل الجسم بما في ذلك الجهاز العصبي المركزي وشبكية العين ^{1-5 3،5-9.} المنشورات السابقة تصف الزمانية الوريد حقن الوجه باستخدام نقل transilluminator ^10،11، دون مجهر تشريح ^11،12، أو التي تتطلب شخصين لحقن ^10.

البروتوكول

وقد تمت الموافقة على جميع الإجراءات الواردة في بروتوكول معهد للاستخدام الحيواني والعناية جنة (IACUC) من جامعة ولاية أوهايو.

1. إعداد مساحة العمل

1. جمع الجليد الرطب لتخدير الجراء الماوس، قفص فارغ للفصل بين السد من القمامة، ومجهر تشريح، مصدر الضوء الذي يمكن وضعه في زاوية لحقن (استخدام مصدر الضوء في 90 °   زاوية لتحجب موقع الحقن في الوريد)، سطح نظيف لوضع الحيوان للحقن، ومسحات القطن، 10/03 سم مكعب حقنة الأنسولين مع 3/8 "30 G إبرة (واحد لكل حيوان) و 1٪ ايفانز ال....

النتائج

خلال حقن الصحيح، ينبغي أن تتحول الوريد للحظات واضح، أو بلانش. إذا حقن صبغ الجرو كله يجب أن يتحول الأزرق في غضون ثوان. إذا حدث حقنة غير لائق، غالبا ما يكون هناك بلعة تحت الجلد تتركز في الرأس أو الرقبة وinjectant قد يتسرب من موقع الحقن. قد ينتج عن الحقن غير لائقة أيضا في ظهور كدمات في جميع أنحاء الحلق. الجراء التي تتلقى الحقن تحت الجلد (أي لم يتم تسليم الحقن في الوريد تماما) عموما تجربة أي آثار جانبية سيئة وتستجيب عادة للعلاج كما تفعل الفئران المحقونة بشكل صحيح.

المناقشة

تسليم داخل الأوعية الدموية وكلاء لالجهاز العصبي المركزي أو في جميع أنحاء الجسم أمر صعب في نماذج الفئران حديثي الولادة من الأمراض. بروتوكول صفها هو، طريقة سريعة نسبيا غير الغازية لإدارة حلول عن طريق الوريد في الفئران حديثي الولادة مع متطلبات الحد الأدنى من المعدات. على الرغم من مواجهة الوريد الصدغي يمكن أن ينظر إليها بالعين المجردة، قد يكون حقن مزيد من الدقة باستخدام المجهر والألياف البصرية مصدر الضوء، وخاصة لحاقن unpracticed. الحقن داخل الأوعية الدموية في الفئران حديثي الولادة لدي.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
حقنة الأنسولين Thinpro	Terumo	SS30M3009	3/10 سم مكعب ، إبرة 3/8 بوصة ، 30 جم ، 1 لكل فأر
صبغة إيفانز الزرقاء	Sigma-Aldrich	E2129	تمييع إلى 1٪ مع 1x فوسفات
مخزن من القطن الملحي قضيب	فيشر Scientific	23-400-101
مصدر ضوء الألياف	البصرية فيشر Scientific	12-562-36
تشريح مجهر

مخزن