يستخدم هذا البروتوكول قسطرة البالون ليسبب إصابة داخل اللمعة على الشريان السباتي الفئران والآن فصاعدا حصول تضخم neointimal. هذا هو نموذج راسخة لدراسة آليات إعادة الأوعية الدموية في استجابة لإصابات. كما انها تستخدم على نطاق واسع لتحديد صحة النهج العلاجية المحتملة.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
إصابة الأوعية الدموية بالون والإدارة داخل اللمعة في الجرذ الشريان السباتي
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تم تأسيس البالون نموذج إصابة الشريان السباتي في الفئران جيدا لأكثر من عقدين من الزمن. ويبقى وسيلة هامة لدراسة الآليات الجزيئية والخلوية العاملة في الأوعية الدموية فقد التمايز العضلات الملساء، وتشكيل neointima وإعادة الأوعية الدموية. الذكور سبراغ داولي الفئران هي في معظم الأحيان يعملون الحيوانات لهذا النموذج. لا يفضل إناث الفئران كما الهرمونات الأنثوية هي وقائية ضد أمراض الأوعية الدموية، وبالتالي إدخال الاختلاف في هذا الإجراء. أصيب الشريان السباتي الأيسر عادة مع السباتي الأيمن تخدم كوسيلة لمراقبة سلبية. سبب ترك إصابة الشريان السباتي من قبل بالون منتفخ أن يجرد البطانة وانتفخ الصورة جدار الوعاء الدموي. بعد الإصابة، والاستراتيجيات العلاجية المحتملة مثل استخدام مركبات الدوائية وإما الجينات أو نقل shRNA يمكن تقييمها. عادة لجينة أو نقل shRNA، وtransduced قسم الجرحى من التجويف سفينة محليا لمدة 30 دقيقة مع الخامسالجسيمات iral ترميز إما بروتين أو shRNA للتسليم والتعبير في جدار الوعاء الدموي المصاب. Neointimal سماكة يمثلون خلايا العضلات الملساء الوعائية التكاثري القمم عادة في 2 أسابيع بعد الإصابة. ويتم حصاد السفن في الغالب على هذه النقطة الوقت لتحليل الخلوي والجزيئي للمسارات الإشارات المحمولة، فضلا عن الجينات والبروتينات التعبير. ويمكن أيضا أن تحصد السفن في نقطة زمنية سابقة لتحديد بداية التعبير و / أو تفعيل بروتين أو مسار محدد، اعتمادا على أهداف تجريبية المقصود. ويمكن وصف السفن وتقييمها باستخدام تلطيخ النسيجي، المناعية، المقايسات البروتين / مرنا، والمقايسات النشاط. الشريان السباتي الأيمن سليمة الشريان من نفس الحيوان هو الرقابة الداخلية مثالية. التغييرات الناجمة عن الإصابة في المعلمات الجزيئية والخلوية يمكن تقييمها من خلال مقارنة الشريان المصاب إلى الشريان السيطرة الصحيح الداخلي. وبالمثل، وطرائق علاجية يمكن تقييمها من خلال مقارنة اصابهد وتعامل الشريان إلى الشريان الوحيد السيطرة بجروح.
المقدمة
القسطرة البالونية الأجهزة الطبية التي تستخدم في إجراء قسطرة، لغرض توسيع الموقع إعاقة (ق) العصيدة الشريانية أو خثرة في الأوعية الدموية. يتم فرض التجويف السفينة ضاقت لفتح من قبل بالون منتفخ، وسوف يتم استعادة تدفق الدم بشكل تسلسلي للتخفيف من أعراض نقص التروية المصب، مثل الذبحة الصدرية واحتشاء عضلة القلب، وألم في الساق. ومع ذلك، تضاءلت النجاح الكبير الذي حققته الاوعية الدموية التي كتبها مضاعفات ما بعد الجراحة مثل نتائج من القوة مما تسبب الضغطي الأوعية الدموية (إصابة البالون)، وهي جدار الوعاء الدموي إعادة وفي كثير من الحالات إعادة تضييق للسفينة التجويف (عودة التضيق) 1.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
ملاحظة: استخدام الحيوانات في التجارب التالية تم مراجعتها والموافقة عليها من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC).
1. إجراءات قبل الجراحة
- تعقيم الأدوات الجراحية قبل الاستخدام.
- الأوتوكلاف جميع الأدوات الجراحية 24 ساعة أو أقل قبل الجراحة. إذا يتم تنفيذ عملية جراحية متعددة في نفس اليوم، وتعقيم الأدوات قبل التعقيم حبة الجاف في بين العمليات الجراحية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
بعد أسبوعين من الإصابة، ويتم حصاد الشرايين السباتية، مقطوع وتعرض لتحليل الصرفي. الشرايين هي عبر مقطوع والملون مع H & E (أرقام 1، 2B، C و 3). يحتوي على الفئران جدار الشريان السباتي أربع طبقات من الصفيحة المرنة، والتي تظهر على شكل خطوط وردية اللون. المنطقة الواقعة بين الصفيحة الأبعد، الصفيحة المرنة الخارجية (ثعبان البحر) والصفيحة أعمق، الصفيحة المرنة الداخلية (IEL) هي وسائل الإعلام طبقة العضلات الملساء (الشكل 1). منطقة داخل IEL هي البطانية، أحاد.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وقد تم إصابة الفئران بالون السباتي وصف جيدا من قبل Tulis في عام 2007 34، وقد سبق بيان شامل وكل تفاصيل هذا الإجراء من قبل الدكتور Tulis. ويوصى بشدة القراء الذين يرغبون في تنفيذ هذا الإجراء لقراءة بروتوكول Tulis ". ومع ذلك، هناك شيء واحد ونحن لا توافق مع الدكتور Tulis: بدلا من تضخيم البالون بمحلول ملحي أو أي نوع من السوائل، اقترحنا لتضخيم مع الهواء. وفقا لتجربتنا الشخصية، تضخيم مع السائل من الصعب تجنب فقاعات الهواء. وبالإضافة إلى ذلك، فإنه من الصعب على التكيف بمرونة الضغط أثناء إجراء الإ.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.
شكر وتقدير
نحن ممتنون للدكتور كلوز لتطوير هذه الطريقة ووصفها لأول مرة. كما نعرب عن امتناننا للدكتور توليس على بروتوكوله المفصل الذي كان مفيدا بشكل أساسي لعملنا السابق والحالي والمستقبلي. تم دعم هذا العمل من خلال منح R01HL097111 و R01HL123364 من المعاهد الوطنية للصحة إلى MT ، ومنحة جمعية القلب الأمريكية 14GRNT18880008 إلى MT.
نود أن نشكر راشيل نيوتن على دعمها الفني الخبير وعلى مساعدتها القيمة أثناء عملية التصوير.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| قسطرة استئصال الصمة بالبالون فوغارتي, 2 فرنسي | إدواردز لعلوم الحياة ، ألمانيا | لوحة تشغيل الطور الدلهي 120602F | |
| - تتضمن 2 وسادة و 2 عازل | Braintree Scientific، Inc. | 39OP | |
| مصدر ضوء LED | فيشر Scientific | 12-563-501 ؛ | |
| ملقط هارتمان للبعوض 4 "منحني | المنحل الطبي، إنك. سان دييغو ، كاليفورنيا | gS 22.1670 | |
| Crile Retractor 4 "مزدوج النهاية | Apiary Medical، Inc. | gS 34.1934 | |
| الأدوات الجراحية الأخرى | Roboz Surgical Instrument Company، Inc. ، Gaithersburg ، MD | ||
| الوريد المحيطي (IV) قنية، 24 جم | دينار | بحريني 381312 | |
| كيتامين حمض الهيدروكلورايد ، 100 مجم / مل ، 10 مل | كيتاسيت - باترسون فيت | 07-803-6637 ؛ | |
| زيلازين (AnaSed) ، 20 مجم / مل ، 20 مل | كيتاسيت - باترسون فيتي | 07-808-1947 | |
| بوبرينكس ، 0.3 مجم / 1 مل (5 أمبولات / علبة) | كيتاسي- باترسون بيتر | 07-850-2280 | |
| غسول إزالة الشعر بزيت ناير بيبي - 9 أوقية | جهاز تضخم أمازون / وول مارت / سي في إس | غير / أ | |
| ديماكس ميديكال ديماكس ميديكال | دي30 | ||
| D300 3-way محبس كوك | بي براون ميديكال شركه. | 4599543 | |
| مرهم الدموع الاصطناعية | مختبرات الرجبي ، دولوث ، جورجيا | غير متاح |
المراجع
- Landzberg, B. R., Frishman, W. H., Lerrick, K. Pathophysiology and pharmacological approaches for prevention of coronary artery restenosis following coronary artery balloon angioplasty and related procedures. Progress in Cardiovascular Diseases. 39, 361-398 (1997).
- Muller, D. W., Ellis, S. G., Topol, E. J.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
