نقدم بروتوكولا جراحيا يوضح بالتفصيل كيفية إجراء قطع أو سحق الملح على العصب الوجهي في الفأر. يمكن استخدام بضع إبطال العصب الوجهي لدراسة الاستجابة الفسيولوجية لإصابة الأعصاب واختبار التقنيات العلاجية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الوجه Axotomy العصب في الفئران: نموذج لدراسة الاستجابة العصبون الحركي للإصابة
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
والهدف من هذا البروتوكول الجراحي هو لفضح العصب الوجهي، والتي يعصب عضلات الوجه، في خروجها من الثقبة الإبرية الخشائية وإما قطع أو التضييق عليه للحث على إصابة الأعصاب الطرفية. مزايا هذه الجراحة هي بساطته، استنساخ عالية، وعدم وجود تأثير على الوظائف الحيوية أو التنقل من شلل في الوجه لاحقة، مما أدى إلى نتائج جراحية خفيفة نسبيا بالمقارنة مع غيرها من نماذج إصابة العصب. والميزة الرئيسية لاستخدام نموذج إصابة العصب القحفي هي أن العصبونات الحركية يقيمون في السكان متجانسة نسبيا في نواة المحرك الوجه في بونس، وتبسيط دراسة أجسام الخلايا العصبون الحركي. بسبب طبيعة متناظرة من الوجه تعصيب العصبية وعدم الحديث المتبادل بين نواة المحرك الوجه، وهذه العملية لا يمكن أن يؤديها من جانب واحد مع الجانب unaxotomized أصبحت بمثابة الرقابة الداخلية المقترنة. مجموعة متنوعة من التحليلات يمكن أن يؤديها بعد العمل الجراحي لتقويمليالي الاستجابة الفسيولوجية وتفاصيل منها خارج نطاق هذا المقال. على سبيل المثال، يمكن استعادة وظيفة العضلات بمثابة علامة السلوكية للعودة التعصيب، أو العصبونات الحركية يمكن كميا لقياس بقاء الخلية. بالإضافة إلى ذلك، العصبونات الحركية يمكن التقاط بدقة باستخدام تسليخ مجهري ليزر لتحليل الجزيئي. لأن axotomy العصب الوجهي هو الغازية الحد الأدنى وجيد التحمل، ويمكن استخدامها على مجموعة واسعة من الفئران المعدلة وراثيا. أيضا، وهذا النموذج الجراحة يمكن استخدامها لتحليل فعالية من العلاجات الطرفية إصابة العصب. تقدم إصابة العصب الوجهي وسيلة للتحقيق في العصبونات الحركية فحسب، ولكن أيضا ردود المكروية المركزية والطرفية الدبقية، والجهاز المناعي، والجهاز العضلي الهدف. نموذج إصابة العصب الوجهي هو الأعصاب الطرفية نموذج إصابة مقبولة على نطاق واسع التي هي بمثابة أداة قوية لدراسة إصابة العصب والتجدد.
المقدمة
العديد من النماذج إصابة الأعصاب الطرفية موجودة، ولكن واحدة أن تبرز لدراسة العصبونات الحركية هو الوجه نموذج axotomy العصبية. العصب الوجهي، والمعروف أيضا باسم العصب القحفي السابع، ينشأ في بونس ويعصب عضلات تعبيرات الوجه 1،2. في هذا البروتوكول الجراحي، يتعرض العصب الوجهي في خروجها من الثقبة الإبرية الخشائية وإما خفض أو سحقهم. شدة إصابة العصب يمكن تصنيفها في أعقاب التصنيفات سندرلاند 3، والذي يميز الإصابة على أساس intactness من محاور عصبية، endoneurium، perineurium، وغلاف، والتي هي طبقات النسيج الضام الذي التفاف بالتتابع حول حزم محور عصبي. في إصابة سحق (انهتاك المحوار)، وقطعت محاور عصبية، ولكن يتم الاحتفاظ perin....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تنفذها مدرسة جامعة إنديانا للطب المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام اللجنة ومتابعة المعهد الوطني للصحة المبادئ التوجيهية.
1. تقنية جراحية
- الحفاظ على تقنية العقيم أثناء هذا الإجراء باستخدام القفازات المعقمة، والصكوك، وحقل جراحي معقم وفقا للمبادئ التوجيهية NIH 25. تعقيم الأدوات قبل البدء في عملية جراحية قبل التعقيم لهم (انظر الجدول من الكواشف محددة / معدات لائحة كاملة). استخدام التعقيم الزجاج حبة لتعقيم الأدوات خل....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
بعد إجراء axotomy العصب الوجهي، وفقدان العصبون الحركي يحدث نتيجة للإصابة. البقاء على قيد الحياة بعد إصابة العصبون الحركي يعتمد على العديد من المتغيرات، مثل الجنس والعمر الحيوان في وقت الجراحة، وtimepoint التي تتم التهم العصبون الحركي، وموران ومراجعة Graeber 24 و Jinno ومراجعة يامادا 22 كلا تلخيص البيانات بقاء العصبون الحركي. عادة، حوالي 86٪ من العصبونات الحركية البقاء على قيد الحياة في 28 يوما بعد axotomy 14،15،26. يتم وصف حركية فقدان العصبون الحرك.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
تتمثل الخطوة الحاسمة لهذا البروتوكول في وضع الماوس بشكل صحيح قبل بدء الجراحة. إذا لم يكن الفأر مستلقيا على جانبه ، أو لم يتم تسجيل الأذن بالزاوية الصحيحة ، أو تم إجراء الشق في مكان غير صحيح ، يصبح العثور على العصب الوجهي أكثر صعوبة. عندما يتم إتقان هذه التقنية ، ستستغرق العمليات الجراحية دقائق فقط لكل فأر.
يمكن استخدام الغرز أو الغراء أو مشابك الجرح لإغلاق الجرح. يفضل استخدام مشابك الجرح بسبب صغر حجم الشق والسرعة التي يمكن تطبيقها بها. لقد قررنا أنه إذا تم استخدام مشابك الجرح ووضع الفئران معا.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
يتم تمويل هذا العمل من قبل NIH RO1 NS 40433 (K.J.J.).
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| مجهر ستيريو | Leica | M60 | |
| شريط وضع العلامات | فيشر Scientific | 15-952 | |
| Vannas-T & uuml; مقص زنبركي بينجن - مستقيم / حاد / 8.5 سم / 5 مم أدوات | العلوم الدقيقة | 15003-08 | تعقيم قبل الاستخدام |
| ملقط Dumont # 5/45 - أطراف قياسية / بزاوية 45 درجة ؛ / Dumoxel / 11 سم | أدوات العلوم الدقيقة | 11251-35 | تعقيم قبل الاستخدام |
| مشابك خياطة ميشيل - 7.5 مم × 1.75 مم | أدوات العلوم الدقيقة | 12040-01 | توصف بأنها "مشبك الجرح" في البروتوكول ، تعقيم قبل الاستخدام |
| Hagenbarth Cross Action Wound Clip Applier 5 " | George Tiemann & amp Co | 160-910 | يستخدم لتطبيق مشبك الجرح ، وتعقيم قبل الاستخدام |
| قضيب ومزيل مشبك خياطة ميشيل - لمشابك 7.5 مم أدوات | العلوم الدقيقة | 12029-12 | تستخدم لإزالة مشبك الجرح |
| 0.9٪ حقن كلوريد الصوديوم ، USP | Hospira | 0409-4888-10 | |
| Betadine ، 16 أونصة ، مع موزع | فيشر Scientific | 19-027132 | |
| 70٪ إيثانول | |||
| الخرز الزجاجي |
المراجع
- Kaufman, M., Bard, J. The Anatomical Basis of Mouse Development. , Elsevier. New York, NY. (1999).
- Ashwell, K. The adult mouse facial nerve nucleus: morphology and musculotopic organization. Journal of Anatomy. 135, 531-538 (1982).
- Sunderland, S.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
