نصف تقنية جديدة لزرع القلب والرئة البطني غير المتجانسة (HAHLT) في الفئران. ينتج عن تكوين الزرع دوران الكسب غير المشروع محمل جزئيا ، مما يسمح بالتقييم الوظيفي المباشر. يمكن استخدام هذا النموذج للدراسات الحادة أو المزمنة للوظيفة والحالة المناعية للكسب غير المشروع المزروع.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
الفئران منتبذ البطن القلب / زراعة واحدة والرئة في تكوين محملة حجم
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
هنا ، نصف تقنية جديدة لزرع القلب والرئة البطني غير المتجانسة (HAHLT) في الفئران. يتضمن تكوين طعم الزرع مفاغرة الوريد الأجوف السفلي للمتبرع (IVC) إلى IVC المتلقي ، والشريان الأورطي الصاعد للمتبرع (Ao) إلى متلقي Ao البطني. يتم الحفاظ على فصوص الرئة العلوية والوسطى اليمنى وتعمل كقنوات لتدفق الدم من القلب الأيمن إلى القلب الأيسر.
هناك العديد من المزايا لاستخدام هذه التقنية ، وهي تتناسب مع مجموعة واسعة من التطبيقات. نظرا لأن الكسب غير المشروع يتم زرعه في تكوين يسمح بتحميل الحجم الديناميكي ، يمكن تقييم وظيفة القلب مباشرة في الجسم الحي. يسمح استخدام قسطرة توصيل الضغط والحجم بتوصيف المعلمات الديناميكية الدموية المعتمدة على الحمل والمستقلة عن الحمل. يمكن تحويل الكسب غير المشروع إلى تكوين محمل عن طريق تطبيق مشبك على IVC تحت الكبد الخاص بالمتلقي. نصف التقنيات الجراحية المعدلة لكل من عمليات المتبرع والمتلقي ، واستراتيجية حماية عضلة القلب المثالية. اعتمادا على الهدف التجريبي ، يمكن تكييف هذا النموذج للاستخدام في كل من الدراسات الحادة والمزمنة لوظيفة الكسب غير المشروع ، والحالة المناعية ، وظروف التحميل البطيني المتغيرة. يتم الحفاظ على المسالك الهوائية الموصلة للرئة المزروعة ، وتسمح بإعادة تهوية الرئة الحادة. هذا يسهل تحليل تأثيرات الدم الوريدي والشرياني المختلط الذي يوفر نضح الشريان التاجي للطعم.
أحد قيود هذا النموذج هو تعقيده التقني. هناك منحنى تعليمي كبير للمشغلين الجدد ، الذين يجب توجيههم بشكل مثالي في هذه التقنية. تعتبر خلفية التدريب الجراحي مفيدة لأولئك الذين يرغبون في تطبيق هذا النموذج. على الرغم من تعقيده ، فإننا نهدف إلى تقديم النموذج بتنسيق واضح وسهل التطبيق. نظرا للتشابه الفسيولوجي لهذا النموذج مع زراعة تقويم العظام ، ونطاقه الواسع من تطبيقات الدراسة ، فمن المحتمل أن يكون الجهد المستثمر في تعلم هذه التقنية مفيدا.
المقدمة
تم وصف أول نموذج للقوارض لزراعة قلب البطن غير المتجانس (HAHT) من قبل أبوت وزملاؤه في عام 19641. تم تطبيق هذه التقنية والتعديلات اللاحقة على نطاق واسع لتوصيف وظيفة الكسب غير المشروع والحالة المناعية. تتضمن غالبية تقنيات HAHT الموصوفة قلبا غير محملبالحجم 2،3. تم وصف نماذج HAHT التي تتضمن البطينين المحملين بالحجم ، ولكنها غالبا ما تكون محدودة في واحد أو أكثر من النواحي.
< p class = 'jove_content'> تم وصف زراعة القلب والرئة البطنية غير المتجانسة (HAHLT) مع البطين الأيسر المحمل بالحجم (LV) سابقا. وصف تشين وزملاؤه4 ، وبعد ذلك إبراهيم وزملاؤه5 HAHLT بمفاغرة الأبهر الأبهري (المتبرع يصعد إلى الشريان الأورطي البطني المتلقي). الحمل الحجمي الوحيد المقدم للبطين في هذه الدورة الدموية هو العودة الوريدية التاجية. وصف عصفور وزملاؤه تقنية HAHT التي تم فيها التخلص من دائرة الرئة عن طريق مفاغرة الشريان الرئوي للمتبرع (PA) إلى الأذين الأيسر للمتبرع (LA)6. في هذه الدورة الدموية ، يحدث التدفق الوريدي إلى البطين الأيمن (RV) عبر SVC متبرع إلى مفاغرة IVC المتلقي ، ويتم إخراج الحمل الوريدي اللاحق إلى مفاغرة الأبهر الأبهري. تم تقييم وظيفة القلب جزئيا في الجسم الحي ، وكذلك في المختبر باستخدام جهاز Langendorff. وصف فيغيريدو وزملاؤه نموذج HAHLT مشابه لنموذج7 الخاص بنا ، ولكن في الفئران. يحدث التدفق الوريدي إلى عربة سكن متنقلة عبر SVC المتبرع إلى مفاغرة IVC المتلقي. يمر الدم لاحقا عبر الدورة الدموية الفردية للرئة ويتم إخراج حمل الجهد المنخفض إلى مفاغرة الأبهر الأبهري. تم تقييم وظائف القلب في دراستهم عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI). وصف ون وزملاؤه تقنية HAHT فريدة من نوعها يتم فيها تحميل LV عن طريق الشريان الأورطي المتلقي إلى المتبرع بمفاغرة LA8. لذلك ، يملأ LV عند الضغوط الجهازية. لم يتم تقييم وظيفة القلب ، وما إذا كان حجم السكتة الدماغية LV يتم إخراجه مسبقا في نموذجهم.تتضمن العديد من التقنيات المشار إليها أعلاه ظروف تحميل LV غير فسيولوجية ، بما في ذلك التقنيات التي يتم تمثيل حملها المنخفض الجزئي فقط عن طريق العودة الوريدية التاجية. من ناحية أخرى ، تقترب العديد من التقنيات من التحميل الفسيولوجي للجهد المنخفض. غالبية هذه التقنيات ، كما هو الحال مع تقنية عصفور وزملاؤها ، تحذف الدورة الدموية الرئوية وتستخدم PA من المتبرع بمفاغرة LA6،9. الدورة الدموية التي وصفها Galinanes وزملاؤها10 تستخدم الأجوف المتلقي المباشر لمتبرع بمفاغرة لوس أنجلوس ، مع حذف الدورة الدموية الرئوية والقلب الأيمن. يحقق يوكوياما وزملاؤه نفس التأثير عن طريق ربط المتبرع PA وإنشاء اتصال بين الأذيني في قلب المتبرع (حذف رئة المتبرع والدورة الدموية للقلب الأيمن)11. يتضمن تداول Maruyama وزملاؤه12 مفاغرة بين PA الأيسر للمتبرع والمتلقي Ao ، مما يسمح بملء LV عبر الدورة الدموية الرئوية كقناة ، ولكنه يستبعد القلب الأيمن بشكل فعال.
< p class = 'jove_content'> في الحالات التي تم فيها استيفاء شروط التحميل الفسيولوجية القريبة ، نطور تقنية HAHLT في 2 من النواحي الرئيسية. أولا ، على حد علمنا ، لم يتم وصف التكوين الدقيق الذي نبلغ عنه في الفئران. من المحتمل أن يكون هذا هو الدورة الدموية الأكثر تنوعا للباحثين الراغبين في دراسة فسيولوجيا وهيكل ومناعة طعم القلب والرئة المزروع. ثانيا ، نصف كيف يمكن توصيف وظيفة الكسب غير المشروع بشكل مباشر في الجسم الحي. بالنسبة لهذا التطبيق ، يمكن إدخال قسطرة توصيل الضغط والحجم مباشرة في قمة الجهد المنخفض لطعم الزرع ، مما يسمح بالتوصيف الوظيفي الكامل للقلب.يمكن تطبيق التقنية الموضحة هنا على كل من الدراسات الحادة والمزمنة لوظيفة الكسب غير المشروع ، بينما يمكن إجراء التقييم الوظيفي إما في الجسم الحي أو في المختبر. نقدم نموذجا يمكن أن تكون فيه ظروف التحميل قريبة من الفسيولوجية ، ولكن يمكن التلاعب بدرجة التحميل البطيني بشكل حاد ومزمن عن طريق تحويل العودة الوريدية نحو الكسب غير المشروع أو بعيدا عنه. يمكن أيضا التلاعب بظروف ما بعد التحميل. نظرا للاحتفاظ بالرئة ومجرى الهواء في تكوين الزرع هذا ، يمكن للباحثين إعادة تهوية رئة المتبرع بشكل حاد. بشكل فريد ، تؤدي إعادة تهوية الرئة إلى تغيير تكوين الدم الذي يتخلل الشرايين التاجية المزروعة. في ظل ظروف عدم التهوية، يتم نزع الأكسجين من الدم المخرج من الشريان الأورطي المتبرع، ويختلط بالدم المؤكسج في الشريان الأورطي المتلقي. في ظل ظروف التهوية الحادة ، يصبح الدم المقذوف مؤكسجا. وبالتالي ، يمكن مقارنة وظيفة الكسب غير المشروع في ظل ظروف التهوية وغير جيدة التهوية ، وأيضا في ظل ظروف محملة متغيرة.
يصف البروتوكول أدناه تعديلات مهمة على عمليات HAHLT المانحة والمتلقية الموصوفة سابقا. كما يصف التقنية المثلى لحماية الكسب غير المشروع المزروع طوال فترة نقص التروية (الوقت بين الزرع المتبرع والغرسة المتلقية). تشمل مزايا هذه التقنية الحالات الفسيولوجية التي يحتمل أن تقترب من تلك الخاصة بالكسب غير المشروع المزروع تقويم العظام ، ومجموعة واسعة من التطبيقات الاستقصائية. أحد القيود المهمة هو تعقيدها التقني. مع التوجيه والممارسة الكافيين ، من المرجح أن تفوق مزايا هذه التقنية التحديات في اعتمادها.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وتم إيواء جميع الحيوانات ويعتني به وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية لرعاية واستخدام حيوانات المختبر الوطني و. منحت الموافقة الأخلاقية لهذا البروتوكول من قبل الجامعة لجنة رعاية الحيوان كولومبيا البريطانية. واستخدمت 450 غ لهذا البروتوكول - الذكور والجرذان سبراج داولي يتراوح وزنها بين 300.
عملية 1. المانحة
- لدينا حوالي 100 مل من شلل القلب (RT) في قارورة أسطواني متصلة طويلة في الوريد (IV) أنابيب القسطرة عن طريق محبس 3-الطريقة. استخدام الحامل لرفع القارورة إلى ما يقرب من 80CM فوق سطح المنطوق، مما يتيح تسليم شلل القلب عن طريق الجاذبية.
- لتصور هياكل كاف، استخدم إما زوج من loupes لالجراحية أو مجهر تشريح.
ملاحظة: نحن نستخدم حاليا مجهر التشغيل مجهر مع 3.4 - 21.3X التكبير. - وضع المانحة في غرفة التخدير ولحث التخدير مع 4-5٪ الأيزوفلورين.
- نقل الفئران على منصة التشغيل والحفاظ على التخدير من مخروط الأنف مع 1-2٪ الأيزوفلورين. تطبيق مرهم التعليم والتدريب المهني لعيون الحيوان لمنع جفاف. إدارة ميدازولام (2 ملغ / كلغ) داخل peritoneally مع 25 G الإبرة.
- استخدام كليبرز الجراحية، حلق المانحة من xiphisternum للفك السفلي. حلاقة منطقة صغيرة من الفخذ الأيسر (للوصول IV لاحقا). تطبيق وكيل السماط على الأسطح المنطوق، انتظر حوالي 5 دقائق، وإزالة الشعر بقطعة من الشاش.
- الإعدادية مواقع الجراحية مع حل يستند إلى chlorexidine بوفيدون اليود أو (نستخدم بالكلورهيكسيدين فقط). اختراق مواقع الجراحي مع 0،1-0،5٪ ليدوكائين تحت الجلد.
- تأمين الأمامية وhindlimb اليسار إلى منصة التشغيل بشريط لاصق، وترك hindlimb الصحيح مجانا لرصد عمق التخدير والعلامات الحيوية.
- بعد التأكد من عمق التخدير المناسب من خلال دواسة قرصة، وجعل شق في الفخذ الأيسر باستخدام تجعدمشرط 22 شفرة. عن طريق تشريح حادة، فضح الوريد الفخذي مشترك اليسار والحصول على حق الوصول IV على النحو التالي:
- سحب بلطف الأنسجة التي تغمر الوريد الفخذي، ويقني؛ يدخل القنية الوريد مع 24 G IV. ربط IV على طول قصيرة من مليئة المالحة IV الأنابيب، وتأمين أنابيب في مكان بشريط لاصق.
ملاحظة: يتم وصف هذا الإجراء لإقناء؛ إدخال القنية الوريدية الفخذ لدى الفئران في مواضع أخرى من جيسبيرسن وزملاؤه 14. - توصيل 10 مل حقنة مليئة المالحة إلى الأنبوب الرابع، وبلطف نضح الدم لضمان تحديد المواقع الصحيح للIV.
- حقن 300-500 وحدة دولية من الهيبارين غير المجزأ من خلال الأنبوب الرابع، وبعد ذلك تدفق أنابيب مع 3-5 مل من المياه المالحة.
- سحب بلطف الأنسجة التي تغمر الوريد الفخذي، ويقني؛ يدخل القنية الوريد مع 24 G IV. ربط IV على طول قصيرة من مليئة المالحة IV الأنابيب، وتأمين أنابيب في مكان بشريط لاصق.
- المقبل، يبضع الرغامى المتبرع على النحو التالي:
- جعل شق خط الوسط في الأنسجة الرخوة بين الشق الوداجي والفك السفلي باستخدام مشرط 22 شفرة. اختراق الكبسولة للغدة الدرقية في خط الوسط باستخدام Metzenمقص باوم، وفصوص منفصلة لها باستخدام تشريح حادة.
- باستخدام تشريح حادة، فصل عضلات حزام الرقبة في خط الوسط لفضح السطح الأمامي من القصبة الهوائية.
- استخدام ملقط منحنية لتشريح بصراحة طائرة كفافي حول القصبة الهوائية. تطويق القصبة الهوائية مع ربطة عنق من الحرير 4-0.
- باستخدام مقص القزحية، وجعل شق عرضي في القصبة الهوائية الأمامية، ما يقرب من أدنى 5MM في الغضروف الدرقي. إدخال بلطف قنية القصبة الهوائية (14 G IV) وثبته في مكانه باستخدام التعادل 4-0 الحرير.
- توصيل قنية القصبة الهوائية لجهاز التنفس الصناعي الميكانيكي. إعادة توجيه تدفق الأكسجين والأيزوفلورين عبر الدائرة التنفس الصناعي، وتهوية المانحة بمعدل وحجم المد والجزر التي تنبأ بها وزنه 13.
- إجراء شق في خط الوسط من الصدر (باستخدام مشرط 22 شفرة)، وتوسيع شق في الشق الوداجي إلى ما دون xipisternum.
- البقاء في خط الوسط، إجراء القص المتوسط باستخدام قطع العظام. سحب حواف القص مع ضام الذاتي الاحتفاظ. أدخل التامور وتجاويف الجنبي.
- إجراء استئصال التوتة. فمن الأسهل لتقسيم لأول مرة بصراحة الغدة الصعترية في خط الوسط، ثم فصلها عن الهياكل المحيطة باستخدام مزيج من تشريح حادة وحادة.
ملاحظة: أصل الشرايين الصدرية الداخلية قد أصيب عندما تشريح الغدة الصعترية بعيدا عن حواف القصية متفوقة. لمنع النزيف، ويمكن تطبيق مقاطع مرقئ قبل إزالة الغدة الصعترية في هذه النقاط. - باستخدام مقص Metzenbaum و / أو وير حاد، تشريح شبه الأجوفية الدهون بعيدا عن الوريد الأجوف السفلي (IVC). تأكد من أن IVC خالية نسبيا من الدهون والنسيج الضام من مفترق CAVO الأذيني متفوق، إلى الحجاب الحاجز دون المستوى.
- باستخدام وير حاد، مجانا محيطي الوريد الأجوف العلوي (SVC) وتطويقها بالتعادل 4-0 الحرير.
- المقبل، تشريحغادر الوريد الأجوف خالية من الهياكل المحيطة بها، وligate أنه قريب وبشكل أقصى مع 4-0 العلاقات الحرير. بتر جزء من التدخل الأجوف لفضح الشريان تحت الترقوة الأيسر.
- مجانا محيطي الأوعية قوس الأبهر باستخدام وير حاد. تطبيق مقاطع الجراحية الداني والقاصي إلى الشريان اللا اسم له، وتقسيمه بين لقطات. ترك اليسار الشريان السباتي المشترك والشريان تحت الترقوة الأيسر قص الامم المتحدة.
- المقبل، يقني؛ يدخل القنية في SVC مع القسطرة 24 G IV. تأمين القسطرة مع ضعت سابقا 4-0 الحرير التعادل.
- الاستعداد لموسم الحصاد الكسب غير المشروع المناسب، ولكن لطيف.
- باستخدام مقص حاد، تقسيم IVC فقط متفوقة على السطح البطني. تقسيم SVC متفوقة على موقع إقناء؛ إدخال القنية لها، وضمان أن الهياكل الهوائية مجاورة لم يصب بأذى.
- إيقاف جهاز التنفس الصناعي وقطع قنية القصبة الهوائية. المسح الشامل القصبة الهوائية قريب.
- فهم القصبة الهوائية مقطوع مع ملقط، وإزالة القلبوالرئتين أون الكتلة. وهذا يتطلب الجر لطيف مع تشريح حاد كما هو إزالة الطعم القلب والرئة. فصل القصبة الهوائية من المريء الأساسي. تجنب اصابة الشريان الأورطي النازل، حتى أن جزء طويل من انه لا يزال سليما بعد الحصاد.
2. إعداد القلب والرئة الكسب غير المشروع
ملاحظة: حين الانتهاء من هذا الجزء من هذا الإجراء، يجب أن يكون مساعد التخدير القوارض المتلقي والتحضير لزرع الكسب غير المشروع.
- وضع الكسب غير المشروع القلب والرئة على الشاش الجراحي مع السطح الأمامي للقلب لأسفل. باستخدام تشريح حادة، وإزالة أي المريء المتبقية، وتجنب إصابة الشعب الهوائية الخلفية.
- موقع الأبهر الصدري تنازلي وإدراج 16 G ذات الرؤوس صريحا قنية. تأمين قنية في مكان بالتعادل 4-0 الحرير.
- تحديد موقع السفن قوس الأبهر، وتطبيق مقطع الجراحية إلى الشريان تحت الترقوة الأيسر. ترك الشريان السباتي الأيسر برنامج الأمم المتحدة للقص لالفرعيةمتتالية دي-بث.
- إدارة الجرعة الأولى من شلل القلب من خلال ربط أنابيب شلل القلب إلى الشريان الأبهر قنية 16 G. الشريان السباتي يجب المغطي مؤقتا مع ملقط لضمان تسليم كاف من شلل القلب.
ملاحظة: هناك فائدة إلى وجود قنية الأبهر المرفقة هي أن شلل القلب يمكن أن تدار بشكل مستمر و / أو بشكل متقطع كما تريد. لجرعات متقطعة، ونحن عادة تقديم شلل القلب كل 10-15 دقيقة في 5 مل boluses أكثر من 30 - 45 ثانية. - باستخدام مقص Metzenbaum و / أو وير حاد، تشريح الدهون المناطق شبه الأبهر بعيدا من الشريان الأورطي. تأكد من أن الشريان الأورطي هو خالية نسبيا من الدهون والنسيج الضام من الشريان تحت الترقوة الأيسر (قوس البعيدة) إلى موقع إقناء؛ إدخال القنية لها.
- المقبل، فضح القصبات الهوائية mainstem اليسار باستخدام وير حاد، وligate أنه قريب مع ربطة عنق من الحرير 4-0. المسح الشامل اليسار البعيدة القصبات الهوائية إلى ربطة باستخدام مقص القزحية. إجراء استئصال الرئة اليسرى قبل ligating الرئوية اليسرىالشريان والوريد مع 4-0 العلاقات الحرير. المسح الشامل البعيدة للرباط وإزالة الرئة اليسرى.
- على النحو الوارد أعلاه، وإزالة كل فصوص الرئة الأخرى باستثناء الحق في الفص العلوي والمتوسطة. تجنب إصابة IVC في عملية أداء lobectomies.
- توصيل أنابيب شلل القلب إلى الشريان الأبهر قنية وإدارة شلل القلب مستمر في حين يجري إعداد المتلقي. وضع الكسب غير المشروع القلب والرئة في وعاء معقم (على سبيل المثال، كوب).
3. مستلم عملية
- تخدير المتلقي وفقا لعملية المانحة أعلاه. استخدام مرهم التعليم والتدريب المهني لحماية العينين الحيوان من جفاف. تأكيد التخدير في كثير من الأحيان عن طريق دواسة قرصة.
- وضع الحيوان وفقا لعملية المانحة، وهذه المرة ترك forelimb الصحيح مجانية لمراقبة العلامات الحيوية وعمق مخدر.
- حلق البطن من xiphisternum إلى القضيب. حلاقة منطقة صغيرة من الفخذ الأيسر (للوصول IV لاحقا). تطبيقالسماط وكيل لأسطح المنطوق، انتظر حوالي 5 دقائق، وإزالة الشعر بقطعة من الشاش.
- الإعدادية مواقع الجراحية مع اليود البوفيدون أو الحل القائم على chlorexidine. اختراق مواقع الجراحي مع 0،1-0،5٪ ليدوكائين تحت الجلد.
- يبضع الرغامى وتهوية المتلقي وفقا لتوجيهات أعلاه. بدلا من ذلك، والحفاظ على المتلقي تحت التخدير مخروط الأنف.
- إدخال قسطرة في الوريد الفخذي كما هو موضح أعلاه. حقن 300-500 وحدة دولية من الهيبارين غير المجزأ من خلال الأنبوب الرابع، وبعد ذلك تدفق أنابيب مع 3-5 مل من المياه المالحة.
- إجراء عملية فتح البطن عن طريق شق البطن خط الوسط مع مشرط 22 شفرة من xiphisternum إلى القضيب. التراجع عن جدار البطن باستخدام ضام الذاتي الاحتفاظ. وبعد ذلك، سحب أحشاء متفوق وإلى الجانب الأيسر للفأر. التفاف عليها في الحارة، غارقة في المياه المالحة الشاش.
- فضح الشريان الأورطي IVC والبطن من قبل تشريح حادة خلال المغطي إعادةترو-البريتوني الدهون.
- لدينا المشبك السفينة المنحني متاحة وجاهزة.
- محيطي تحرير IVC والشريان الأورطي قريب وبشكل أقصى وتطويق لهم 4-0 العلاقات الحرير. يجب أن يكون هناك ما يقرب من 2-3 سم المسافة بين هذه المواقع.
- تطبيق بعناية المشبك السفينة المنحني، وضمان أن يتعرض جزء كاف من كلا IVC والشريان الأبهر فوق فكي المشبك.
- إجراء شق في الجدار الأمامي للIVC مع إبرة 25 G متصلة 1 مل حقنة مليئة المالحة. تمديد شق مع مقص بوتس لتتناسب مع طول المتبرع IVC الفوهة.
- إزالة الطعم القلب والرئة من الحاوية الخاصة به وفصلها من شلل القلب. وضع الكسب غير المشروع في البطن المستلم في وضع الأمثل لأداء مفاغرة وريدية.
ملاحظة: سوف يكون موجها والكسب غير المشروع القلب والرئة في نهاية المطاف بشكل غير مباشر قليلا، حيث يشير مهيمنة نحو عام البطن السفلى اليسرى رباعي. - تأمين كعبواصبع القدم ينتهي من مفاغرة مع النايلون 9-0 خياطة. ربط عقدة آمنة في كل نهاية، تاركا إبرة مثبتة في الذراع الطويلة للخياطة، ونهاية قصيرة من الخيط أن تكون مرتبطة في وقت لاحق. إدارة جرعة من شلل القلب.
- في إدارة الموضة، كامل نصف خط خياطة وربطة عنق على الذراع خياطة قصيرة معارضة. إدارة جرعة من شلل القلب.
- إكمال النصف الآخر من الخط خياطة وربطة عنق عليه. مفاغرة وريدية كاملة. إدارة جرعة من شلل القلب
- الشرق الكسب غير المشروع القلب والرئة مع الإشارة مهيمنة القلب تجاه من البطن السفلى اليسرى رباعي. تأكد من أن مفاغرة وريدية لا ملتويا أو الملتوية.
- تقييم طول الشريان الأورطي المانحة التي سوف تكون هناك حاجة للوصول إلى الشريان الأورطي المتلقي، والحفاظ على حد سواء IVC وanastomoses الأبهري في تكوينات خالية من التوتر وبرنامج الأمم المتحدة للمتلوى.
- تقسيم الأبهر النازل (البعيدة إلى الشريان تحت الترقوة الأيسر) مع مقص القزحية.
- جعل incisioن في الجدار الأمامي من الشريان الأورطي المتلقي مع إبرة 25 G متصلة 1 مل حقنة مليئة المالحة. تمديد شق مع مقص بوتس لتتناسب مع طول فتحة الأبهر المانحة.
- ترسيخ اصبع القدم (الجانب المتفوق) من الشريان الأورطي المانحة إلى المستلم الشريان الأورطي باستخدام خياطة 9-0 النايلون. ثم، لتمرير الإبرة إلى الجانب الأنسي من الشريان الأورطي وإكمال نصف مفاغرة في إدارة الموضة.
- في كعب مفاغرة الشريان الأبهر، عكس اتجاه خط خياطة (التحول في اتجاه خياطة)، وإكمال النصف الجانبي للمفاغرة في إدارة الموضة.
- إزالة ببطء القسطرة الرابع في SVC، وligate في SVC مع مشبك جراحي.
- دي الهواء الشريان الأورطي من خلال تحديد موقع برنامج الأمم المتحدة للقص ترك الشريان السباتي المشترك. عقد الشريان مفتوحا، في وضع مستقيم من شأنها أن تسمح للهواء أن أخلت بحرية.
- لفترة وجيزة فتح فكي المشبك السفينة المنحني والسماح الشريان السباتي ينزف (دالبريد الجوي) ل2-3 ثانية. إعادة تطبيق المشبك السفينة.
- تطبيق مقطع الجراحية إلى الشريان السباتي. إزالة المشبك السفينة المنحني.
- تحقق من وجود نزيف في خطوط الدرز. إذا كان موجودا، وتطبيق ضغط لطيف مع الشاش الجراحي أو إصلاح بطول 9-0 النايلون خياطة (اعتمادا على شدة النزيف).
- قلب المانحة أن تستأنف الضرب في غضون دقائق.
- إيلاء اهتمام وثيق للعلامات الحيوية المستلم، وعمق التخدير، وإدارة حجم الإنعاش حسب الحاجة.
- اعتمادا على النهاية التجريبية، إما إغلاق بطن الحيوان والسماح لها التعافي من التخدير، أو إعداد الحيوان للتقييم القلب والأوعية الدموية.
ملاحظة: أمثلة من تقييم الكسب غير المشروع وتشمل التدابير في الجسم الحي التي تعتمد على الحمل والحمل مستقل ديناميكا الدم، تدابير في المختبر وظيفة في Langendorff وسائط قلب العمل، و(في الجراحة البقاء على قيد الحياة) تخطيط صدى القلب أو تحقيقات MRI. - فينهاية التجارب النهائية الحادة، يصرح باستخدامها الحيوانات عن طريق استنزاف.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تقنية HAHLT المذكورة أعلاه هي عالية التقنية وتتطلب اهتماما وثيقا بالتفاصيل. ويبين الجدول 1 بعض العوامل الرئيسية المرتبطة ناجحة مقابل إجراءات غير ناجحة، ويمكن أن تستخدم كدليل لاستكشاف الصعوبات التقنية.
بعد غير مثبت الشريان الأورطي المتلقي، ينبغي النظر إلى الكسب غير المشروع الشرايين التاجية لملء مع الدم المؤكسج. وبناء على ذلك، ينبغي أن تصبح عضلة القلب الوردي وperfused لكذلك. في تجارب ناجحة من الناح...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
سوف تكون مسنودة النجاح مع تقنية الموضحة هنا على عدة عوامل. ومفتاح بينها أن يكون ضمان الاستقرار في كل من المتبرع والمتلقي الحيوانات، واعتماد تقنية المنطوق الدقيقة التي هي آمنة ومتوافقة مع الحد الأدنى من فقدان الدم، وضمان اعتقال شلل القلب الكامل مع موحد الكسب غير المشروع التبريد، والتقليل من الوقت الإجمالي الدماغية، والكسب غير المشروع بث دي كاف. كما اعترف أعلاه، التعقيد التقني تقنية هو الحد رئيسها.
عرضناها تقنيات H...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
شكر وتقدير
علامة J. كيرنز تتلقى دعما من برنامج UBC الطبيب السريري محقق (منح من خلال كلية الملكية للأطباء والجراحين في كندا)، والدكتوراه زمالة UBC 4YF.
جون بويد H. هي جمعية Sanitorium الوطنية ومؤسسة مايكل سميث للبحوث الصحية إجابات. التمويل عن طريق CIHR. الكتاب أود أن أشكر الدكتور M. الارد وريتشارد Wamboldt لما قدموه من مساعدة في الإعداد وصيانة المعدات الارواء.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| Celsior Cardioplegic Soution | Genzyme | يتم الاحتفاظ بالمحلول على الجليد طوال العملية. نقوم بإعداد الحل الخاص بنا ، مع تعديلات طفيفة. | |
| جهاز التنفس الصناعي للقوارض | جهاز هارفارد | موديل 683 | |
| مراقب تسجيل حيوي | Nonin | موديل 9847V | يعرض SpO2< / sub> ومعدل ضربات القلب. |
| القنية الرابعة | جيلكو | 3063 | 24 - 26 جم × 3/4 "قنات. |
| IV Tubing | CareFusion | MP9259-C | أنبوب موصل قصير الطول (18 سم). |
| مقاطع جراحية مقاطع | التيتانيوم | Teleflex Medical | 001204 |
| خيوط | Ethicon ، Sharpoint | LA54G ، بكرة حريرية AK-0107 | 3-0 ، وخياطة 9-0 prolene (ذراع واحد ، إبرة DR5). |
| الأدوات الجراحية | غير قابلة للتطبيق | غير قابلة للتطبيق | الأدوات المستخدمة عامة ويمكن شراؤها من أي شركة توريد جراحية. |
المراجع
- Abbott, C. P., Lindsey, E. S. A technique for heart transplantation in the rat. Arch Surg. 89 (1964), 649-652 (1964).
- Ma, Y., Wang, G. Comparison of 2 heterotopic heart transplant techniques in rats: cervical and abdominal heart. Exp Clin Transplant. 9 (2), 128-133 (2011).
- Wiedemann, D., Boesch, F., Schneeberger, S., Kocher, A., Laufer, G., Semsroth, S. Graft function after heterotopic rat heart transplant with an isolated reperfused working heart: a methodic consideration. Exp Clin Transplant. 10 (2), 154-157 (2012).
- Chen, Z. H., Xia, S. S. The technique of heterotopic heart-lung transplantation in the rat. J Tongji Med Univ. 6 (2), 67-70 (1986).
- Ibrahim, M., Navaratnarajah, M., et al. Heterotopic abdominal heart transplantation in rats for functional studies of ventricular unloading. J Surg Res. 179 (1), e31-e39 (2013).
- Asfour, B., Hare, J. M., et al. A simple new model of physiologically working heterotopic rat heart transplantation provides hemodynamic performance equivalent to that of an orthotopic heart. J Heart Lung Transplant. 18 (10), 927-936 (1999).
- Figueiredo, J. -L., Nahrendorf, M., Sosnovik, D. E., Weissleder, R. MRI of a novel murine working heart transplant model. Circ Heart Fail. 2 (3), 272-274 (2009).
- Wen, P., Wang, X., et al. A simple technique for a new working heterotopic heart transplantation model in rats. Transplant Proc. 45 (6), 2522-2526 (2013).
- Didié, M., Biermann, D., et al. Preservation of left ventricular function and morphology in volume-loaded versus volume-unloaded heterotopic heart transplants. A.Am J Physiol Heart Circ Physiol. 305 (4), H533-H541 (2013).
- Galiñanes, M., Zhai, X., Hearse, D. J. The effect of load on atrophy, myosin isoform shifts and contractile function: studies in a novel rat heart transplant preparation. J Mol Cell Cardiol. 27 (1), 407-417 (1995).
- Yokoyama, H., Ohmi, M., Murata, S., Nakame, T., Tabayashi, K., Mohri, H. Proposal of a working left heart model with a heterotopic transplantation technique in rats. J Heart Lung Transplant. 14 (4), 706-712 (1995).
- Maruyama, T., Swartz, M. T., McBride, L. R., Pennington, D. G. Working heart model of heterotopic heart-lung transplantation in rats. J Thorac Cardiovasc Surg. 107 (1), 210-215 (1994).
- Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).
- Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. J Vis Exp. (59), 3496-3410 (2012).
- Habertheuer, A., Kocher, A., et al. Innovative, simplified orthotopic lung transplantation in rats). J Surg Res. 185 (1), 419-425 (2013).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
