يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

العصبية آخر نشر في إعداد الحصين تكشفت مع اختراق الصغرى، والقطب صفيف

8.2K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/52601

⸱

مارس 27, 2015

 ,  ,  , 
1Neural Engineering Center, Department of Biomedical Engineering, Case Western Reserve University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

قمنا بتطوير الحصين تكشفت في المختبر الذي يحافظ CA1-CA3 مجموعة من الخلايا العصبية. جنبا إلى جنب مع اختراق مجموعة الكهربائي الصغير، النشاط العصبي يمكن رصدها في كل من التوجهات الطولي والعرضي. يوفر هذا الأسلوب المزايا على الاستعدادات شريحة الحصين كما نشر في قرن آمون كلها يمكن تسجيلها في وقت واحد.

الملخص

يصف هذا البروتوكول وسيلة لإعداد جديدة في المختبر إعداد الحصين شقة جنبا إلى جنب مع مجموعة تشكيله الدقيقة لرسم خريطة النشاط العصبي في قرن آمون. من عرضية إعداد شريحة الحصين هو إعداد الأنسجة الأكثر شيوعا لدراسة الحصين الكهربية. وقد تم تطوير شريحة الحصين طولية أيضا من أجل التحقيق في وصلات طولية في قرن آمون. ويمكن أيضا أن يستمر الحصين الماوس سليمة في المختبر بسبب سمكه يسمح انتشار الأوكسجين الكافي. ومع ذلك، لا هذه التحضيرات ثلاثة لا توفر الوصول المباشر إلى نشر العصبي منذ بعض الأنسجة إما مفقود أو مطوية. يوفر الحصين سليمة تكشفت كل من عرضية وطولية اتصالات في تكوين شقة للوصول المباشر إلى الأنسجة لتحليل المدى الكامل لانتشار الإشارة في قرن آمون في المختبر. من أجل مراقبة النشاط العصبي من ر فعالانه طبقة الخلايا، أدلى مخصص اختراق مجموعة صغيرة القطب (PMEA) كانت ملفقة وتطبيقها على الحصين تكشفت. وPMEA مع أقطاب 64 من 200 ميكرومتر في الطول يمكن تسجيل النشاط العصبي في عمق الحصين الماوس. مزيج فريد من إعداد الحصين تكشفت وPMEA يوفر أداة جديدة في المختبر لدراسة سرعة واتجاه الانتشار من النشاط العصبي في مناطق CA1-CA3 ثنائية الأبعاد من الحصين مع إشارة إلى ارتفاع نسبة الضوضاء.

المقدمة

فهم التوصيل العصبي أو انتشار الإشارات العصبية من الأهمية بمكان لتحديد آلية التواصل العصبي في كل من الوظيفة العادية والحالات المرضية في الدماغ 1-3. الحصين هو واحد من الهياكل الأكثر درس على نطاق واسع في الدماغ لأنه يلعب دورا أساسيا في العديد من وظائف المخ مثل الذاكرة، وتتبع المكاني وتشارك في العديد من التغيرات المرضية التي تؤثر على السلوك بصورة جذرية فضلا 1،6. وعلى الرغم من الحصين يسلك منظمة معقدة، وعناصر مختلفة من هيكلها يمكن التعرف بسهولة والوصول إليها في إعداد شريحة 4-6. في الاتجاه العرضي للقرن آمون، ومن المعروف النشاط العصبي لنشر من خلال مسار ثلاثي متشابك التي تشكل التلفيف المسنن (DG)، CA3، CA1 andsubiculum 4،5. ويعتقد أن انتقال متشابك والتوصيل المحاور تلعب دورا رئيسيا لcommunicatiعلى في هذه الدائرة عرضية 4،6. ومع ذلك، والإكثار من الإشارة العصبية يحدث في كل من عرضية وطولية 4،6 الاتجاهات. وهذا يعني أن الحصين لا يمكن تحقيق كامل عن طريق استخدام مستحضرات شريحة التي تحد من المراقبة لاتجاه معين من نشر 4. تم تطوير شريحة طولية للتحقيق في مسارات محور عصبي على طول المحور الطولي 5. وقد لاحظ الباحثون جاما وثيتا التذبذبات سلوك معين في الغالب على طول عرضية وطولية محاور على التوالي 6. وقد تم دراسة هذه السلوكيات على حدة، حتى الآن الدخول في وقت واحد لكلا الاتجاهين أمر بالغ الأهمية لفهم هذه السلوكيات. حتى مع تطور إعداد الحصين سليمة، فمن الصعب رصد انتشار في جميع أنحاء الأنسجة كامل بسبب هيكل مطوية من الحصين 4. يوفر الحصين تكشفت الوصول إلى الخلايا العصبية معبأةفي شكل طبقة الخلايا ثنائية الأبعاد 7،8 مسطح.

التي تتكشف التلفيف المسنن (DG) (الشكل 1)، وقرن آمون يعتمد شكل بالارض مع تكوين مستطيل فيه كلا عرضية وطولية الاتصالات لا تزال سليمة مع طبقة الخلايا الهرمية مرتبة في ورقة ثنائية الأبعاد تحتوي على كل CA3 وCA1، ترك شقة قطعة من الأنسجة العصبية التي يمكن استخدامها لتحقيق انتشار العصبي (الشكل 2) 8. ويمكن بعد ذلك النشاط العصبي يمكن رصدها مع ماصات الفردية والزجاج، والمصفوفات مسرى مكروي، تحفيز كهربائي، وكذلك الأصباغ الحساسة الجهد (VSD) 3،7،8. وبالإضافة إلى ذلك، المشفرة وراثيا مؤشر الجهد من الفئران المعدلة وراثيا يمكن أن تستخدم لتتبع نمط انتشار 9.

التكوين المسطح من شبكة الحصين المطوية هي مناسبة تماما لتسجيل طريقة البصرية ولكن أيضا لمجموعة ومسرى مكروي. Mهي ملفقة معاهدة الفضاء الخارجي للصفائف المتاحة تجاريا مع أقطاب الملف الشخصي شقة أو منخفضة ويمكن تسجيل النشاط العصبي في كل من شرائح الأنسجة والخلايا العصبية مثقف 10-12. ومع ذلك، فإن نسبة الإشارة إلى الضوضاء (SNR) تنخفض عندما يتم الحصول على إشارات من لأنسجة سليمة منذ سوما من الخلايا العصبية تقع في عمق الأنسجة. مطلوبة صفائف مسرى مكروي الكهربائي مع الجانب نسب عالية لتحسين SNR.

لهذا الغرض، تم وضع اختراق مجموعة مسرى مكروي (PMEA) في المختبر لدينا، ويوفر القدرة على تحقيق مباشرة في الأنسجة عن طريق إدراج 64 المسامير التي يبلغ قطرها 20 ميكرومتر وارتفاع 200 ميكرون في قرن آمون تكشفت 7،13 . هذه المجموعة مسرى مكروي ديها SNR أعلى بالمقارنة مع الجهد حساسة التصوير صبغ وSNR لا تزال مستقرة خلال تجربة 7،13. مزيج من إعداد الحصين تكشفت وPMEA يوفر طريقة جديدة للاستثمارآي جيت نشر العصبي على طائرة ثنائية الأبعاد. التجارب باستخدام هذه التقنية قد أسفرت بالفعل عن نتائج هامة حول آليات انتشار الإشارة العصبية في الحصين حيث النشاط العصبي يمكن أن تنتشر بشكل مستقل من نقاط الاشتباك العصبي متشابك أو الكهربائية 7.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم استعراض الحيوان البروتوكولات التجريبية التي وافقت عليها لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي في الجامعة: ملاحظة. وتستخدم الفئران CD1 من كلا الجنسين في سن P10 P20 لفي هذه الدراسة.

1. حلول لجراحة وتسجيل التجريبي

  1. إعداد الطبيعي السائل النخاعي الاصطناعي (ACSF) العازلة التي تحتوي على (مم): كلوريد الصوديوم 124، بوكل 3.75، KH 2 PO4 1.25، MgSO 4 2، NaHCO 3 26، سكر العنب 10، وCaCl 2 2. استخدام هذا ACSF العادي للانتعاش بعد تشريح الأنسجة، وكذلك لغسل النظام في بداية التجربة.
  2. إعداد ACSF السكروز الذي يتم استخدامه أثناء تشريح الحصين ويحتوي على (مم): 220 السكروز، بوكل 2.95، ناه 2 PO4 1.3، MgSO 4 2، NaHCO 3 26، سكر العنب 10، وCaCl 2 2. من أجل حمل النشاط صرعي في إعداد الأنسجة قرن آمون سليمة، إضافة 4-Aminopyridine (4-AP) لACSF العادي فيتركيز 100 ميكرومتر.

2. إجراء العمليات الجراحية لإعداد الحصين سليمة

  1. إسقاط الأيزوفلورين (1 مل) في غرفة في الجزء السفلي من وعاء زجاجي مجفف (No.1 في مواد محددة والمعدات) واستخدام منشفة ورقية العادية لتغطية سطح مرحلة القاع حتى الحيوان لا تحصل على اتصال مع السائل. ثم، ضع الماوس CD1 في جرة وإغلاق الغطاء. حفاظ على الحيوانات في جرة مغلقة لمدة 1 دقيقة لمدة 2 دقيقة. عندما تردد التنفس حوالي واحد في الثانية الواحدة، وإزالة الماوس من الجرة.
  2. ضع الماوس على مرحلة الجراحة وقطع رأس مع مقص مناسبة. مباشرة بعد قطع الرأس، ووضع الرأس في الجليد الباردة (3-4 ° C)، المؤكسج السكروز ACSF لمدة 30 ثانية.
  3. استخدام مقص غرامة (NO.5 في مواد محددة والمعدات) لإزالة الجلد في أعلى الجمجمة وقطع الجمجمة على طول خط الوسط من الرأس وكذلك في طرفي بالقرب من وتيرةالفص راؤول. استخدام ملقط (رقم 6 في مواد محددة والمعدات) لقشر الجمجمة قطع نحو كل جانب من الرأس من أجل فضح الدماغ.
  4. إدراج ملعقة مختبر الدقيقة (رقم 8 في مواد محددة والمعدات) إلى الفجوة بين الفصوص الجدارية من الدماغ والجمجمة لقشر بعناية الدماغ من الجزء السفلي من الجمجمة ثم بإفلاته على الجليد الباردة استعداد (3 -4 درجة مئوية) مرحلة جراحية مغطاة رقة الترشيح الرطب (NO.2 في مواد محددة والمعدات). إزالة المخيخ مع شفرة الجليد المبردة وفصل نصفي الكرة الأرضية عن طريق قطع خط الوسط من الدماغ. ثم، ضع نصفي فصل في كوب مليئة ACSF السكروز الجليد الباردة فقاعات مع 95٪ O 05/02٪ CO 2.
  5. خذ نصف الكرة الأرضية ومكان على المسرح ورق الترشيح الجليد الباردة. وضع المناشف الورقية العادية أو ورق الترشيح في جميع أنحاء الدماغ لامتصاص حل اضافي. استخدام اثنين من الأدوات الزجاجية ماصة مصقول النار (رقم 10 في المواد والمعدات) لفصل القشرة عن بقية الجزء الأوسط من المخ.
  6. بعد تعرض الحصين من داخل القشرة وضعت على المسرح المثلج، ضع اثنين أو ثلاث قطرات من الجليد الباردة ACSF السكروز على النسيج ثم قم بإزالة حل إضافية حول الحصين. قطع الاتصالات مع القشرة في طرفي الحصين. ثم، تشريح الحصين من المخ مع الحريق مصقول الأدوات الزجاجية وإزالة الجزء المتبقي من الدماغ.
  7. فصل الحصين كله مع الجانب شكوة لها تواجه صعودا وقرن آمون تلم أسفل. إسقاط بسرعة مرتين أو ثلاث قطرات من الثلج الباردة السكروز ACSF على النسيج مرة أخرى وإزالة الحل إضافية حول الأنسجة باستخدام قطعة من منشفة ورقية. استخدام النار مصقول أداة الزجاج لتسليم الحصين كله لفضح تلم (الشكل 1B، C).
  8. تحت المجهر الضوئي العادي، اضافة الى وجود إبرة الزجاج العرف (رقم 11 في الماطري محددةالمرض والمعدات) في واحدة من نهاية التلم وقطع الاتصالات الألياف، من التلفيف المسنن (DG) إلى مرفد أو مجال CA1، على طول اتجاه تلم (الشكل 1C). تطبيق شفرة الجليد الباردة لتقليم نهايات الحاجز والزمانية للالحصين إذا لزم الأمر. اضافة الى وجود العرف الأسلاك المعدنية حلقة (رقم 12 في المواد المحددة والمعدات) في خفض التلم وسحب أكثر من DG بعيدا عن الأنسجة في حين عقد نهاية مرفد / CA1 من الحصين بواسطة أداة النار الزجاج المصقول (1D الشكل) .
  9. وبعد إجراء تتكشف أعلاه، إضافة اثنين أو ثلاث قطرات آخر من السكروز ACSF الجليد الباردة على الأنسجة وإزالة حل إضافية حول الأنسجة. ثم، وتقليم الحصين تكشفت مع شفرة الجليد الباردة في حواف (الشكل 1E) ووضع بإعداد ملعقة في غرفة يتعافى مليئة ACSF العادي وفقاعات مع 95٪ O 05/02٪ CO 2 في RT (حوالي 25 ° C). تركالأنسجة الحصين كشفها لاسترداد حوالي 1 ساعة قبل وضعه في غرفة تسجيل.
  10. خذ نصف الكرة المخ الأخرى واستخدامه للذهاب من خلال خطوات 2،5-2،9. عادة، يستغرق حوالي 1 إلى 2 دقيقة لإنهاء الإجراء بأكمله تتكشف في الحصين واحد وإسقاط الجليد الباردة السكروز ACSF باستمرار للحفاظ على الأنسجة بالأكسجين والمائية.

الإعداد 3. نظام التجريبية

  1. الغراء PMEA مخصصة ملفقة على حزمة مجموعة دبوس شبكة (PGA) واستخدام الربط الأسلاك الصغيرة لتوصيل كل لوحة من مسرى مكروي واحد للوحة دبوس على الحزمة (الشكل 3B). ثم، تضاف حزمة في المقبس على لوحة الدوائر حسب الطلب (13).
  2. ربط بشكل فردي كل مسرى مكروي لمرشحات مع تمريرة الفرقة قطع تردد من 1 هرتز إلى 4 كيلو هيرتز ومكبرات الصوت مع زيادة 100 على العرف وحة الدوائر (13). رقمنة الناتج التناظرية من لوحات الدوائر الالكترونية من قبل A / D التحويلنظام erting، واكتساب وتخزين البيانات على الكمبيوتر.
  3. الغراء تسجيل البلاستيك غرفة مصنوعة خصيصا حول مجموعة مع مدخل ومخرج أنابيب لتدفق الحل (الشكل 4A). استخدام اثنين على الأقل زجاجات للحفاظ على حلول مختلفة في النظام، والانضمام إليها والسيطرة على أنابيب انتاج الزجاجات التي كتبها a-صمام ثلاثي. وصل الناتج من صمام ثلاثي إلى نظام الأنابيب مع غرفة بالتنقيط الرابع الذي توجيه الحل في غرفة تسجيل.
  4. بين صمام ثلاثي ومدخل للغرفة تسجيل، إضافة سخان كهربائي لتسخين حل لدرجات الحرارة للرقابة (35 ° C) قبل ويسترشد الحل إلى غرفة تسجيل. إرفاق منفذ للغرفة تسجيل لأنبوب فراغ لجمع الحل في أنبوب فراغ متصل القارورة. لا تدوير أي حل في أي تجربة في هذه الدراسة.

4. وضع كشف الحصين على PMEA لتسجيل النشاط العصبي

  1. لإعداد الإعداد التجريبية، وملء زجاجة واحدة مع ACSF العادي وزجاجة أخرى مع 4-AP ACSF. في كل زجاجات، فقاعة 95٪ O 05/02٪ CO 2 من بداية كل تجربة. استخدام موصل ثلاثي صمام للتحكم في الحل وسيتم اختيار أثناء التجربة. توصيل أنبوب فراغ عند مخرج غرفة لضخ الحل في وعاء الغبار. تسخين خط الأنابيب قبل تسليمه إلى غرفة تسجيل والحفاظ على حل على مستوى درجة الحرارة للرقابة (35 ° C).
  2. عندما يتم إغلاق مدخل ومخرج من غرفة تسجيل، واستخدام العرف الزجاج ماصة بالقطارة لنقل ووضع الحصين تكشفت في غرفة تسجيل. تحت المجهر، ضع الحصين تكشفت باستخدام فرشاة الدهان الصغيرة العادية في حين أن الأنسجة يعوم في الحل. ضع الحصين تكشفت مع الجانب شكوة من أسفل، منطقة CA3 مشيرا بعيدا، وحقل CA1 مشيرا تجاه الباحث.
  3. تمتص بعناية بعيدا الحل في الغرفة باستخدام ماصة الفراغ من على حافة غرفة تسجيل لخفض مستوى حل حتى يتم تجفيفها الغرفة ويخفض الأنسجة على صفيف. ثم، ضع بعناية مرساة الأنسجة العرف (الشكل 4) (رقم 14 في المواد المحددة والمعدات) على الجزء العلوي من الأنسجة لعقد الحصين تكشفت على صفيف. وضع بضع قطرات من محلول إلى غرفة تسجيل لإعادة ملء ذلك، وتدريجيا فتح مدخل ومخرج لضبط معدل تدفق إلى حوالي قطرتين في الثانية الواحدة في غرفة IV بالتنقيط.
  4. احتضان الأنسجة في غرفة تسجيل مع ACSF العادي لمدة 1 دقيقة لاستعادة، ثم التبديل إمدادات حل ل4-AP ACSF المنحل وضبط معدل تدفق بشكل صحيح. احتضان الأنسجة في 4-AP حل ACSF لمدة 5 إلى 10 دقيقة ثم الباحث يمكن أن يبدأ البرنامج لتسجيل إشارة عندما يظهر النشاط العفوي.

5. إزالةالأنسجة من PMEA بعد تجربة

  1. السيطرة على مرساة الأنسجة من قبل مياداة مجهرية ورفع تدريجيا الأنسجة من غرفة تسجيل. إيقاف كل من مدخل ومخرج لوقف تدفق في غرفة تسجيل. وينبغي أن تكون غرفة تسجيل كامل مع حل أو إضافة بضع قطرات من محلول لملء الغرفة إذا كانت غرفة تسجيل ليست كاملة.
  2. استخدام فرشاة الدهان الصغيرة لرفع كل زاوية من الأنسجة. إذا كان النسيج لا يتحرك في الحل، ثم توظيف فراغ أنبوب لتجف الغرفة بعناية مع النسيج لا يزال جالسا على صفيف. ثم فتح بعناية مدخل لإعادة ملء تدريجيا الغرفة وأغلقت مدخل لوقف تدفق عندما غرفة تسجيل ممتلئة. تطبيق فرشاة الدهان الصغيرة لرفع كل زاوية من النسيج مرة أخرى.
  3. يتم فصل كرر الخطوة 5.2 حتى الأنسجة من مجموعة ويتحرك في الحل. إذا كانت الأنسجة يعوم في الحل، ثم استخدام فراغ أنبوب لامتصاص الأنسجة بعيدا. مفتوحة رانه تتدفق في مدخل وفتح الفراغ في منفذ. يغسل النظام مع الماء المقطر وتجفيف بها.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تم تسجيل البيانات التي تظهر في الأرقام هنا في إعداد الحصين تكشفت مع 4-AP (100 ميكرومتر) ACSF وأضاف خلال حضانة الأنسجة في غرفة تسجيل في RT (25 ° C). عادة يبدأ النشاط خلال 5 دقائق، ولكن في بعض الأنسجة قرن آمون من الحيوانات القديمة قد يستغرق وقتا أطول. إطلاق الخلايا العصبية 4-AP التي يسببها لوحظ مع PMEA هو نفسه كما ذكرت سابقا 14،15. منذ الأقطاب لديها ارتفاع 200 ميكرون، وتقع النصائح القطب أسفل طبقة الخلايا (الشكل 3C) لأن طبقة الخلايا عادة ما بين 250 و 300 م...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تطوير إعداد الحصين تكشفت، حيث يتم الاحتفاظ المحاور الطولية والعرضية للقرن آمون في تركيبة مع مجموعة ومسرى مكروي اختراق، يوفر أداة قوية للتحقيق في صلات التشريح أو انتشار العصبية في الحصين 7. هذا الإجراء تتكشف ينطبق على دراسة الحصين في فئران بالغة أيضا. وأظهرت الدراسات التي أجريت مؤخرا مع هذا المستحضر إلى أن نشاط صرعي 4-AP يسببها يمكن أن تنتشر مع جبهة الموجة القطرية عبر المنطقة بأكملها من الحصين تكشفت (الشكل 6) 7،8. وأظهرت هذه الدراسات أن الحصين...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة (المعهد الوطني للاضطرابات العصبية والسكتة الدماغية) Grant 1R01NS060757-01 ومن قبل E.L. كرسي Lindseth الممنوح لدومينيك إم دوران. نشكر مختبر الدكتور أندرو إم رولينز على المساعدة في تصوير OCT.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
جرة مجففةLABRECYCLERS Inc.5410ضع مناشف ورقية عادية في قاع البرطمان لاستخدام التخدير الحيواني.
يتم وضع شفرة ومرحلة جراحية مصنوعة من Custome لفتح الحصينN / AN / Aطبق بتري رأسا على عقب (في الوسط) في الجليد مع وضع ورق ترشيح مبلل فوقه.
استرداد الأنسجة المصنوعة حسب الطلبN / AN / Aتم لصق الأنابيب البلاستيكية بشبكة بلاستيكية في الأسفل وفقاعات بنسبة 95٪ O2 / 5٪ CO2 في aCSF.
التشغيل المستقيم  مقصفيشر العلميS17336B                                                                                      رقم أدوات Medco:81995 يستخدم هذا المقص في    قطع رأس الفئران.
Integra Miltex Goldman-Fox   مقصفيشر العلمي12-460-517                                              MILTEX INC                                                    No.:5-SC-320يستخدم هذا المقص لقطع جمجمة الفئران.
Miltex
ملقط		كلافلين المعدات الطبيةCESS-722033-00001يستخدم هذا الملقط لتقشير الجمجمة المقطوعة لفضح الدماغ
الملعقة الدقيقةصحةهذه الملعقة الدقيقة لنقل الدماغ بالكامل من نصف الكرة إلى غرفة recorering.
Frey Scientific الفولاذ المقاوم للصدأ شبه الملعقةالكاردينال هيلثتستخدم هذه الملعقة شبه الدقيقة لنقل الحصين المكشوف إلى الجلوكوز aCSF في غرفة التعافي.
فرشاة طلاء صغيرةLowe'stem #:  105657                                  نموذج #:  90219تلك ذات الحجم الأصغر في عبوة فرشاة الطلاء العادية أداة
مساعدة الزجاج المصقول للحريقN / AN / Aكانت هذه الأداة مصقولة بالنار ومصنوعة من ماصات زجاج باستور العادية.
إبرة زجاجية مصنوعة حسب الطلبN / AN / Aكانت هذه الأداة مصقولة بالنار ومصنوعة من ماصات زجاجية Pasteur العادية.
أداة زجاجية مصنوعة حسب الطلب مع حلقة سلكية معدنيةN / AN / Aكانت هذه الأداة مصقولة بالنار ومصنوعة من ماصات زجاجية Pasteur العادية مع حلقة سلكية معدنية معاد تشكيلها.
القطارة الزجاجيةN / AN / Aكانت هذه الأداة مصنوعة من ماصات زجاجية Pasteur العادية مع أطرافها المقطوعة ورأس مطاطي متصل بالطرف المقطوع.
مرساة الأنسجة المصنوعة حسب الطلبN / AN / Aشبكة ألياف النايلون على حلقة سلكية نحاسية معزولة. تم الاحتفاظ بمرساة الأنسجة بواسطة معالج دقيق.
مصفوفة الأقطاب الكهربائية الدقيقة المصنعة حسب الطلبN / AN / Aمزيد من التفاصيل حول المصفوفة يرجى الرجوع إلى  Kibler, et al, 2011. 
دوائر المرشحات ومكبرات الصوت المخصصة للمصفوفةN / AN / Aمزيد من التفاصيل حول المصفوفة يرجى الرجوع إلى  Kibler, et al, 2011. 
معالج الحصول على البيانات 3400aمختبرات ميكروستارN / Aهذا نظام كامل للحصول على البيانات مع محول A / D.
غرفة الرحم الكاردينال تستخدم الصغيرة المصنوعة حسب الطلب تم لصق

المراجع

  1. Richardson, K. A., Schiff, S. J., Gluckman, B. J. Control of traveling waves in the Mammalian cortex. Phys Rev Lett. 94 (2), 028103-028112 (2005).
  2. Luhmann, H. J., Dzhala, V. I., Ben-Ari, Y. Generation and propagation of 4-AP-induced epileptiform activity in neonatal intact limbic structures in vitro. Eur J Neurosci. 12 (8), 2757-2768 (2000).
  3. Grinvald, A., Manker, A., Segal, M. Visualization of the spread of electrical activity in rat hippocampal slices by voltage-sensitive optical probes. J Physiol. 333, 269-291 (1982).
  4. Gloveli, T., et al. Orthogonal arrangement of rhythm-generating microcircuits in the hippocampus. Proc Natl Acad Sci USA. 102 (37), 13295-13300 (2005).
  5. Amaral, D. G., Witter, M. P. The three-dimensional organization of the hippocampal formation: a review of anatomical data. Neuroscience. 31 (3), 571-591 (1989).
  6. Albani, S. H., McHail, D. G., Dumas, T. C. Developmental studies of the hippocampus and hippocampal-dependent behaviors: insights from interdisciplinary studies and tips for new investigators. Neurosci Biobehav Rev. 43, 183-190 (2014).
  7. Zhang, M., et al. Propagation of Epileptiform Activity Can Be Independent of Synaptic Transmission, Gap Junctions, or Diffusion and Is Consistent with Electrical Field Transmission. J Neurosci. 34 (4), 1409-1419 (2014).
  8. Kibler, A. B., Durand, D. M. Orthogonal wave propagation of epileptiform activity in the planar mouse hippocampus in vitro. Epilepsia. 52 (9), 1590-1600 (2011).
  9. Wang, D., McMahon, S., Zhang, Z., Jackson, M. B. Hybrid voltage sensor imaging of electrical activity from neurons in hippocampal slices from transgenic mice. J Neurophysiol. 108 (11), 3147-3160 (2012).
  10. Wingenfeld, K., Wolf, O. T. Stress , memory, the hippocampus. Front Neurol Neurosci. 34, 109-121 (2014).
  11. Liu, J. S., et al. Spatiotemporal dynamics of high-K+-induced epileptiform discharges in hippocampal slice and the effects of valproate. Neurosci Bull. 29 (1), 28-36 (2013).
  12. Oka, H., Shimono, K., Ogawa, R., Sugihara, H., Taketani, M. A new planar multielectrode array for extracellular recording: application to hippocampal acute slice. J Neurosci Methods. 93, 61-68 (1999).
  13. Kibler, A. B., Jamieson, B. G., Durand, D. M. A high aspect ratio microelectrode array for mapping neural activity in vitro. J Neurosci Methods. 204 (2), 296-305 (2012).
  14. Schechter, L. E. The potassium channel blockers 4-aminopyridine and tetraethylammonium increase the spontaneous basal release of [3H]5-hydroxytryptamine in rat hippocampal slices. J Pharmacol Exp Ther. 282 (1), 262-270 (1997).
  15. Perreault, P., Avoli, M. 4-aminopyridine-induced epileptiform activity and a GABA-mediated long-lasting depolarization in the rat hippocampus. J Neurosci. 12 (1), 104-115 (1992).
  16. Chesnut, T. J., Swann, J. W. Epileptiform activity induced by 4-aminopyridine in immature hippocampus. Epilepsy Res. 2 (3), 187-195 (1988).
  17. Nam, Y., Wheeler, B. C. In Vitro Microelectrode Array Technology and Neural Recordings. Crit Rev Biomed Eng. 39 (1), 45-62 (2011).
  18. Gonzalez-Sulser, A., et al. Hippocampal neuron firing and local field potentials in the in vitro 4-aminopyridine epilepsy model. J Neurophysiol. 108 (9), 2568-2580 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

العصبية آخر نشر في إعداد الحصين تكشفت مع اختراق الصغرى، والقطب صفيف
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.