يستخدم الكلاسيكية تحليل forelimb التماثل للاسطوانة الاختبار بشكل روتيني لتقييم العجز السلوكية في الفئران بعد إصابات الدماغ أو السكتة الدماغية. ومع ذلك، فإنه فشل في الكشف عن العجز المستمر في الفئران. توضح هذه الدراسة أن قياس السلوك مخلب-السحب هو تحليل أكثر حساسية للإصابة المخ في الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
مخلب السحب: رواية، والتحليل الحساسة للماوس اختبار اسطوانة
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يتم استخدام اسطوانة الاختبار بشكل روتيني للتنبؤ الأضرار الدماغية البؤري إلى القشرة الحركية forelimb في القوارض. عندما وضعت في الاسطوانة والقوارض تستكشف من قبل تربية ولمس جدران الاسطوانة مع الكفوف forelimb من أجل دعم الوضعي. بعد الإصابة الدماغية إلى القشرة الحسية forelimb، الجرذان تعتمد بشكل أكبر على من لم يتأثر forelimb مخلب لدعم الوضعي مما أدى إلى اللمسات أقل مع مخلب المتضررين والذي يسمى forelimb التباين. في المقابل، فشل الأضرار الدماغية البؤري في مخ الفأر أن يؤدي إلى العجز مقارنة ثابتة في forelimb التباين. في حين عجز forelimb التباين لوحظ بشكل غير منتظم، والفئران لا يبرهن على وجود وظيفة السلوك رواية السكتة الدماغية تسمى "سحب-باو". مخلب-السحب هو الميل عن الماوس لسحب مخلب المتضررين على طول جدار الاسطوانة بدلا من دفع مباشرة من خارج الجدار عند الترجل من الخلف إلى موقف أربعة أرجل. لقد سبق أثبتت أنمخلب-سحب السلوك حساس جدا للإصابات الدماغية القشرية الصغيرة إلى القشرة الحركية forelimb. نحن هنا نقدم بروتوكول مفصل لتحليل سحب مخلب. نحدد ما هو مخلب السحب وشرح كيفية تحديد سلوك سحب مخلب. اختبار اسطوانة هو اختبار بسيط وغير مكلف لإدارة ولا يتطلب التدريب قبل أو استراتيجيات الحرمان من الطعام. في استخدام تحليل سحب مخلب مع اختبار اسطوانة، يملأ مكانا للتنبؤ الإصابات الدماغية القشرية مثل photothrombosis وEndothelin-1 (ET-1) نقص التروية يسببها - نموذجين التي تزيد على الإطلاق في شعبية وتنتج إصابات التنسيق أصغر من وسط انسداد الشريان الدماغي. أخيرا، وقياس السلوك سحب مخلب في اسطوانة الاختبار سيسمح دراسات الانتعاش وظيفية بعد الاصابة القشرية باستخدام فوج واسعة من سلالات الفئران المعدلة وراثيا حيث فشلت السابق تحليل forelimb التماثل للكشف عن عجز متسقة.
المقدمة
هدف استراتيجيات تجديد العصبية هو تثبت كل إصلاح الأنسجة والانتعاش وظيفية. وعادة ما يتم تقييم الانتعاش وظيفية مع الاختبارات السلوكية التي تقيس عجز وظيفي، في هذه الحالة التي تنطوي على المهارات الحركية التي ترتبط مع الأضرار التي لحقت مناطق محددة في الدماغ. إصابات في الدماغ أو ضرر نقص تروية إلى منطقة forelimb الحسية من القشرة يمكن البرهنة من قبل عدد من الاختبارات السلوكية. واحدة من هذه التجارب، يتم استخدام اسطوانة الاختبار على نطاق واسع في الفئران لتقييم عجز وظيفي في نشاط forelimb 1. اختبار لديه منخفضة التكلفة انشاء تتطلب سوى اسطوانة، وكاميرا والجدول مع كبار شفافة. فمن السهل أن إدارة لأنه يقوم على السلوك الاستكشافي الطبيع....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
بيان الأخلاق: تمت الموافقة على جميع التجارب التي كتبها جامعة ميموريال لجنة أخلاقيات رعاية الحيوان نيوفاوندلاند وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي للرعاية الحيوان.
1. الفئران
- استخدام فئران بالغة. في هذه الدراسة، تم استخدام الذكور البالغين FVBN الفئران (ن = 10) بين 2-4 أشهر. الفئران منزل على ساعة 12:12 عكس دورة ضوء الظلام وتوفر القياسية طعام القوارض والمياه الإعلانية libitum.
2. المواد المطلوبة لاختبار اسطوانة ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
لقد أثبتنا سابقا يبدو أن سلوك سحب مخلب بعد الإصابة الدماغية التنسيق إلى forelimb الحسية القشرة، وهو مؤشر إيجابي من الضرر 4. استخدمت الحقن داخل القشرية من ET-1 في القشرة الحسية forelimb للحث على آفة الدماغية (الشكل 8A، B). وبحثت هذه الدراسة ما إذا كان سلوك سحب مخلب تمديد لمدة أطول من 14 يوما بعد الإصابة لاستخدامها المحتمل لتقييم الانتعاش وظيفية. تم اختبار الفئران في اختبار اسطوانة في اليوم قبل ET-1 الحقن لنقطة زمنية ما قبل الجراحة، وعلى أيام 1 و 3 و 7 و .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
النقاط الرئيسية لإقامة عند قياس سلوك سحب مخلب في اسطوانة الاختبار ما يلي: أ) تحديد عدد مخلب-تستمر مقابل إجمالي اللمسات مخلب لكل مخلب قبل إصابات الدماغ لإنشاء خط الأساس. ب) تحديد عدد من مخلب-المؤثرات السلبية مقابل إجمالي اللمسات مخلب لكل مخلب بعد الإصابة الدماغية. والثالث) تميز بين مخلب السحب والحركة الجانبية للمخلب على طول جدار الاسطوانة أثناء الدوران الجانبي الجذع الفأر.
مخلب-السحب هو سلوك الرواية التي تظهر بعد .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.
شكر وتقدير
نشكر السيد جون كروويل والسيد تيري Upshall للحصول على الخبرة التقنية والمساعدة في التصوير الفوتوغرافي وبالفيديو. وأيد هذا العمل من خلال تشغيل المنح لJLV من المعاهد الكندية لأبحاث الصحة ومؤسسة البحوث والتنمية في نيوفاوندلاند والقلب والسكتة الدماغية مؤسسة كندا الشراكة الكندية للحصول على منحة السكتة الدماغية محفز الانتعاش. كان RBR حاصل على كيث جريفيث التذكارية القلب والسكتة الدماغية مؤسسة العليا للمنح الدراسية.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| أسطوانة | بارتفاع 17.5 سم ، قطر خارجي 9.5 سم ، قطر داخلي 8.8 سم ، سمك الجدار 0.35 سم (أو 3.5 مم) | ||
| طاولة | 54 × 56 × 66.5 سم (العرض × الطول × الارتفاع) ، أعلى الطاولة عبارة عن ورقة 51 × 51 سم من زجاج شبكي. | ||
| مرآة | 34x58 سم كاميرا فيديو مرآة | ||
| Sony | DCR-SR42 | كاميرا فيديو مع تخزين مدمج ، وظيفة SD ، تقريب بصري 40x | |
| كمبيوتر | Dell | Optiplex 760 | المعالج: Intel ، 3.0 جيجاهرتز ، ذاكرة 4.00 جيجابايت (RAM) ؛ |
| شاشة الكمبيوتر | Samsung | S22C350H | |
| Excel (Microsoft Office Professional Plus) | Microsoft | v14.0.7106.5003 | |
| VLC Media Player | Video LAN | v2.1.2 | مشغل وسائط مع سرعة التشغيل وتعديل ودعم الفيديو |
| القرص الصلب الخارجي | ويسترن ديجيتال | WDBAAU0020HBK-01 | 2 تيرابايت |
المراجع
- Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury. Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).
- Kolb, B., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
