هنا ، نصف نهج الفحص المجهري البصري شبه الغازي لتحريض جلطة ضوئية من Rose Bengal في القشرة الحسية الجسدية للفأر في الجسم الحي. يتم وصف الجوانب الفنية لإجراء التصوير من تحريض حدث التخثر الضوئي إلى التطبيق وجمع البيانات.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
روز البنغال Photothrombosis بواسطة التصوير الضوئي متحد البؤر
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
في الجسم الحي زادت تقنيات التصوير في الاستخدام بسبب التطورات الحديثة في أصباغ التصوير والتقنيات البصرية ، مما يسمح بالقدرة على تصوير الأحداث الخلوية في سليم. بالإضافة إلى ذلك ، فإن القدرة على إحداث حالات مرضية فسيولوجية مثل السكتة الدماغية في الجسم الحي تزيد من فائدتها. تسمح التقنية الموضحة هنا بالتقييم الفسيولوجي للاستجابات الخلوية داخل الجهاز العصبي المركزي بعد السكتة الدماغية ويمكن تكييفها مع الحالات المرضية الأخرى التي تتم دراستها. تستخدم التقنية المقدمة إثارة الليزر للصبغة الحساسة للضوء Rose Bengal in vivo للحث على حدث إقفاري بؤري في وعاء دموي واحد.
يوضح بروتوكول الفيديو إعداد نافذة قمجمة رقيقة فوق القشرة الحسية الجسدية في فأر لتحريض حدث تخثر ضوئي في روز البنغال ، مما يحافظ على إصابة مادة الجاف والدماغ الأساسية عند الحد الأدنى. يتم إجراء التحضير الجراحي في البداية تحت مجهر تشريح باستخدام منصة جراحية / تصوير مخصصة ، والتي يتم نقلها بعد ذلك إلى مجهر متحد البؤر مزود بمحول موضوعي مقلوب. يتم تقديم الصور التمثيلية التي تم الحصول عليها باستخدام هذا البروتوكول بالإضافة إلى تسلسلات الفاصل الزمني لتحريض السكتة الدماغية. هذه التقنية قوية من حيث أنه يمكن تصوير نفس المنطقة بشكل متكرر في الأيام اللاحقة ، مما يسهل الدراسات الطولية في الجسم الحي للعمليات المرضية بعد السكتة الدماغية.
المقدمة
تقنية الموضحة تصاريح التصور في الجسم الحي الاستجابات الخلوية التالية تحريض روز البنغال على الفور photothrombosis في الماوس سليمة. روز البنغال (4،5،6،7-tetrachloro-2، 4، 5، 7'-tetraiodofluorescein) هو صبغ حساس يستخدم للحث على السكتة الدماغية في النماذج الحيوانية (الماوس والفئران). بعد حقن البلعة من RB عن طريق الوريد الذيل وإضاءة لاحقة من خلال الجمجمة ضعيفة مع ضوء الليزر 564 نانومتر، الجلطة هو فعل يسبب السكتة الدماغية الفسيولوجية 1. طريقة وصفت في الأصل من قبل روزنبلوم وايل الصبان في عام 1977، وتكييفها في وقت لاحق من قبل واتسون في منتصف 1980s 1،2. وباختصار، فإن المشع روز البنغال مع الضوء الأخضر الإثارة (ليزر 561 نانومتر في حالتنا)، الذي يولد إنتاج أنواع الاكسجين التفاعلية، والذي ينشط في وقت لاحق العامل النسيجي، وهو البادئ شلال التخثر. تحريض شلال التخثر ينتج الدماغية ليهأيون التي هي ذات الصلة مرضي السكتة الدماغية السريرية 3.
السكتة الدماغية لديها الفيزيولوجيا المرضية المعقدة ويرجع ذلك إلى تفاعل العديد من خلايا مختلفة الأنواع بما في ذلك الخلايا العصبية، الدبقية، البطانة والجهاز المناعي. اختيار أفضل أسلوب لدراسة تتطلب عملية الخلوية معينة اعتبارات متعددة. تقنيات تجريبية تقع على نطاق واسع في واحدة من ثلاث فئات: في المختبر، في الجسم الحي وسيليكون ولكل منها مزايا وعيوب في الدراسات المختبرية لديها عيب أساسي لإزالة الخلايا من بيئتها الطبيعية، وبالتالي قد لا تتكاثر آثار ينظر في حالها. الحيوانات الحية. في الجسم الحي تقنيات توفير لتعزيز النسخ التجريبية من الحالات المرضية مع زيادة أهمية متعدية. وفي سيليكون وتشير بصفة عامة إلى النمذجة الحاسوبية من مرض أو عملية الخلوية، وحين تستخدم بشكل متزايد لدراسة التفاعلات المخدرات المحتملة للامتحانسبيل، ما زال يتعين اختبار أي معلومات استقاها في الخلايا أو الأنسجة الحية.
يجب أن النموذج المثالي من السكتة الدماغية في إعداد مختبر تظهر ملامح مرضية مشابهة لتلك التي ظهرت في عدد السكان. في حين أن هناك خصائص مشتركة الفسيولوجية من السكتة الدماغية في البشر، وهناك أيضا العديد من الاختلافات تبعا لنوع الإصابة من ذوي الخبرة. السكتة الدماغية في البشر كما يحدث انسداد صغيرة أو كبيرة سفينة، والآفات نزفية، والشريان إلى الشريان أو الانسدادات القلب والتي تؤدي إلى احتشاء أحجام متنوعة فضلا عن الاختلافات في الآليات المتعلقة بكل علم الأمراض. الاستفادة من استخدام نماذج السكتة الدماغية الحيوان هو الجيل من عوائق استنساخه التي تحاكي خصائص السكتة الدماغية الإنسان. وتشمل النماذج الأكثر شيوعا السكتة الدماغية الحيوان انسداد الشريان باستخدام: وسط انسداد الشريان الدماغي (أساليب خيوط صمية أو اللف) التي نماذج القاصي MCAO ونموذج photothrombosis. مزايا لوقد استعرض د عيوب كل نموذج في مكان آخر (انظر 4 و 5). نماذج عالمية الدماغية (MCAO)، في حين أن من السهل نسبيا لأداء هي أقل أهمية من السكتة الدماغية البشرية من هي نماذج السكتة الدماغية التنسيق. وبالإضافة إلى ذلك، وهذه الأساليب تختلف اختلافا كبيرا في إحداث تقرحات احتشاء الدماغ استنساخه. نموذج photothrombosis هو تكرار للغاية طالما يتحكم المجرب التجارب بشكل جيد، وتوفير ميزة واضحة على نماذج MCAO. ومع ذلك، ويرجع ذلك إلى الأوعية الدموية الدقيقة إهانة وقد وصفت نموذج لعرض غبش الدماغية الحد الأدنى، المنطقة التي يعتقد أن الخلايا لتكون انقاذها 6،7. بالإضافة إلى ذلك، وذمة وعائية المنشأ وتشكيل السامة للخلايا وذمة ويمكن أيضا أن يتسبب الإشعاع التالي من منطقة التصوير. على الرغم من هذه القيود وفرت تقنية نظرة جديدة في العديد من العمليات الفسيولوجية التالية السكتة الدماغية 8، 9، 10، 11.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
ملاحظة: تمت الموافقة على جميع الإجراءات الحيوانية من لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي من جامعة تكساس مركز العلوم الصحية في سان انطونيو، وكانت متسقة مع المبادئ التوجيهية صلوا اليها.
1. التخدير لإعداد القشرية
- ضع الماوس في غرفة الاستقراء مع 2-3٪ isofluorane مختلطة مع الأكسجين للحث على التخدير. نلاحظ انخفاض معدل التنفس كما هو الناجم عن الماوس. قرصة مخلب من الماوس لتحديد ما إذا كان الفأر هو على استعداد للانتقال إلى مخروط الأنف. ملاحظة: مستوى التخدير هو خطوة حاسمة في أي تحضير في الجسم الحي، وينبغي الحرص على عدم للحث على المستوى الذي سوف يسبب نقص التروية العالمي.
- مرة واحدة يتم تخدير الماوس بما فيه الكفاية، ونقل الحيوان إلى الجراحة / منصة التصوير ووضع الأنف الماوس، في مخروط الأنف وتطبيق 1-1،2٪ isofluorane للحفاظ على حالة تخدير. تأكد من أن الفأر هو ملقى على درجة حرارة المشتركntrolled سادة التدفئة للحفاظ على درجة حرارة الجسم (37 درجة مئوية +/- 0.5 ° C) في جميع أنحاء الإجراءات المتبقية. وضع مرهم التعليم والتدريب المهني في العيون لمنع جفاف بينما تحت التخدير.
- مراقبة علم وظائف الأعضاء من الفأرة باستخدام نظام قياس التأكسج نبض باستخدام الذيل أو القدم كليب المتوفرة مع النظام. تأكد من أن معدل التنفس ويحتفظ بين 50-65 الأنفاس / دقيقة. تأكد من أن معدل ضربات القلب لا يزال بين 300-450 نبضة في الدقيقة وتشبع الأكسجين يحتفظ بين 97-98٪ لضمان البقاء على المدى الطويل للحيوان.
- عندما يتم تخدير الماوس بشكل كاف، حلق شعر على الجمجمة باستخدام كليبرز الكهربائية، إزالة الشعر المتبقي ونظيفة مع betadine، تليها مسحة الإيثانول. كرر هذا الإجراء حتى ثلاث مرات لضمان بيئة الجراحية المعقمة.
2. إجراء العمليات الجراحية
- مع فروة الرأس وتنظيفها بالكامل وحليق، وجعل 5 ملم شق في فروة الرأس من الفأرة للكشف عن fissu الجمجمةالدقة وتحديد bregma.
- استخدام قضيب من القطن المعقم لإزالة أي رباط المتبقية المغطي الجمجمة.
- الغراء حلقة العرف الفولاذ المقاوم للصدأ (الشكل 1) مع لاصق الأنسجة حتى العظم المغطي القشرة الجدارية باستخدام إحداثيات التجسيمي من Bregma: -1 الى -3 ملم والوحشي: 2-4 ملم. ملاحظة: الغراء يحدد عادة في غضون 2 دقيقة بعد وضع الحلقة على العظام.
- يضعوا عصابة لحامل التجسيمي (الشكل 2) لتحقيق الاستقرار في الماوس ولمنع الحركة أثناء التصوير.
- تحت المجهر الجراحي الصف تشريح، حفر ببطء قسم 1-2 ملم في الجمجمة باستخدام سرعة تسيطر عليها مثل DREMEL أداة (Meisinger 3.9 مم مثقاب) والتأكد من الحفاظ على مستوى المنطقة كما هو حفر عليه. تحقيق ذلك باستخدام نمط التعرج. لتجنب حرارة بناء، ضبط سرعة الحفر إلى الأقل وأخذ فترات راحة متكررة.
- عندما تصبح الجمجمة الجمجمة تسلق في المظهر، ومواصلة رقيقمن الجمجمة باستخدام شفرة مشرط باستخدام نفس نمط التعرج للحفاظ على مستوى سطح ضعفت لتسهيل إزالة السلس للطبقات رقيقة من الجمجمة الجمجمة. استخدام غيض من شفرة مشرط جعل السكتات الدماغية خطية صغيرة مع الضغط الخفيف لإزالة طبقات رقيقة من العظام في وقت واحد. مواصلة هذا العمل حتى بشكل واضح الأوعية الدموية وضوحا من خلال المجهر تشريح.
- إذا يثقب المجرب من خلال أو كسر في الجمجمة أثناء عملية رقيق، الموت ببطء الحيوان بسبب الضرر المحتمل أن القشرة الكامنة.
ملاحظة: الجمجمة الماوس ما يقرب من 300 ميكرون في سمك ويتكون من اثنين من طبقات رقيقة من العظم المضغوط (الطبقة الداخلية واحد خارجي واحد)، وطبقة من العظم الإسفنجي تقع بين طبقتين من العظم المضغوط. الطبقة الخارجية من العظم المضغوط ويتم إزالة معظم العظم الإسفنجي داخل منطقة حفر 5 مم أدى إلى التقريبية طبقة 50 ميكرون من العظم المضغوط المتبقية (انظر الشكل 2B). Visualizسوف أوجه من الأوعية الدموية ضمان النهائية الجمجمة ضعيفة سليمة ما يقرب من 50 ميكرون في سمك. لذا الجمجمة لا تزال موجودة عندما ضعفت هذه سمك.
3. المجهر مجموعة المتابعة
- استخدام نظام مجهر مقلوب (التقليدية، متحد البؤر أو النظامين الفوتون) الذي يحتوي على العاكس موضوعي. ملاحظة: من الممكن أيضا للاستفادة من المجهر تستقيم القياسية. فإن العامل المحدد أن تكون المساحة بين مرحلة والأهداف. تعديلات على مرحلة قد تكون ضرورية لتحقيق هذا الإعداد.
- تأمين منصة الجراحية / التصوير إلى مرحلة العرف الذي يقع جانبا قاعدة المجهر. ملاحظة: يرصد منصة باستخدام جاك مختبر للسماح الحركة الرأسية من منصة العمليات الجراحية / التصوير تحت الهدف. هي التي شنت جاك مختبر لوحة الملصقة على أربعة أعمدة اسطوانية. (انظر الشكل 2).
- وضع العاكس موضوعي يحتوي على 20Xالهدف خلال نافذة الجمجمة. استخدام مصدر ضوء خارجي للعثور على نافذة الجمجمة من خلال النظر من خلال العدسات المجهر ووضع الهدف في مجال التصوير. ملاحظة: سيتم يرمز منطقة التصوير من خلال وجود الأوعية الدموية.
- لتحقيق أهداف المياه القائمة، استخدم السائل الدماغي الشوكي الاصطناعي (ACSF) (130 ملي كلوريد الصوديوم، و 30 ملي بوكل، 12 ملي KH 2 PO 4، 200 ملي NaHCO 3 و 30 ملي HEPES، و 100 ملي الجلوكوز) باعتبارها وسيلة نظرا لاحتمالات تسرب داخل تجويف الجمجمة أثناء التصوير (الشكل 3).
4. روز البنغال صبغ إعداد وإدارة وتحريض السكتة الدماغية
- إعداد 20 ملغ حل / مل جديدة من روز البنغال في السائل الشوكي الدماغي الاصطناعي (ACSF)؛ تصفية وتعقيم قبل الإدارة. لا إعادة استخدام أو تخزين البنغال روز مرة واحدة وقد تم مزجه. جعل حل جديد لكل تجربة.
- إعطاء حقن الوريد 0.1 مل ذيل روز البنغال بينما الصورةتعليب النافذة الجمجمة مع ليزر 561 نانومتر لضمان حقن كاف من الحل. ملاحظة: سيتم تصور روز البنغال في 5 ثانية بعد الحقن في الأوعية الدموية في الدماغ. ينبغي أن تملأ وعاء كامل مع روز البنغال.
- بعد الحقن كافية من روز البنغال صبغ اختيار سفينة مناسبة للتخثر على أساس قطر الأوعية الدموية (40-80 ميكرون) لضمان استنساخ حجم الآفة بشكل خاص. التفريق بين الشرايين والأوردة من خلال النظر في اتجاه تدفق الدم: والشرايين تنتقل من قطر أكبر للسفن القطر الأصغر، وعروق تتحرك من أصغر لسفن القطر الأكبر. ويتم إنجاز هذا بسهولة عن طريق التصور مرة واحدة يتم حقن روز البنغال.
- تغيير الإعداد المجهر على النحو التالي:
- زيادة مدة بقاء. ملاحظة: هذا وسوف تختلف وفقا لنظام المجهر يجري استخدامها.
- زيادة قوة الليزر إلى 100٪.
- جمع الصور التسلسل الزمني في 1 إطار / ثانية باستخدامأقصى سرعة المسح الضوئي.
- مسح الماوس حتى يتم تشكيل جلطة مستقرة داخل السفينة. ملاحظة: هذا يتحقق عادة في غضون 5 دقائق من المسح المستمر (انظر الشكل 4).
- بعد تحريض تشكيل الجلطة باستخدام روز البنغال، وإزالة الماوس من منطقة التصوير إلى مجهر تشريح. إزالة بعناية حلقة من الصلب غير القابل للصدأ من الجمجمة الجمجمة. دراسة نافذة في الجمجمة عن أي نزيف. في حالة حدوث نزيف، إنهاء التجربة.
- استخدام 6.0 حيدة خياطة لإغلاق الجرح على الجمجمة. وضع مرهم مضاد حيوي على طول خط خياطة لمنع العدوى. حقن Buprenex (0.05 ملغ / كلغ) تحت الجلد كل 12 ساعة لمدة ثلاثة أيام لإدارة الألم.
- عودة الماوس إلى غرفة الإنعاش بعد إزالة من مخدر حتى مستيقظا تماما والتحرك بحرية.
- عودة الماوس إلى قفص نظيفة لمزيد من التحقيق في وقت لاحق.
5. التصوير الطولي على اللاحقة أيام
- توظيف الأساليب التالية لإجراء التصوير الطولي في أيام لاحقة آخر photothrombosis.
- تخدير الماوس كما هو موضح في المادة 1 من الطرق.
- على الكافية التخدير إعادة فتح فروة الرأس عن طريق إزالة أي الغرز المتبقية لإعادة فتح الجلد المغطي مجال التصوير المحفورة سابقا.
- استخدام قضيب من القطن المعقم لإزالة أي رباط المتبقية المغطي الجمجمة.
- الغراء حلقة العرف الفولاذ المقاوم للصدأ (الشكل 1) مع لاصق الأنسجة حتى العظم المغطي مجال التصوير السابق.
- يضعوا عصابة لحامل التجسيمي (الشكل 2) لتحقيق الاستقرار في الماوس ولمنع الحركة أثناء التصوير.
- تحديد الأوعية الدموية الكامنة وراء الجمجمة ضعيفة سابقا. استخدام الوريد الذيل حقن FITC-ديكستران للتحقق من وجود تجلط يسببها سابقا.
- استخدام 6.0 حيدة خياطة لإغلاق فيCISION على الجمجمة. وضع مرهم مضاد حيوي على طول خط خياطة لمنع العدوى. حقن Buprenex (0.05mg / كلغ) تحت الجلد كل 12 ساعة لمدة ثلاثة أيام لإدارة الألم.
- عودة الماوس إلى غرفة الإنعاش بعد إزالة من مخدر حتى مستيقظا تماما والتحرك بحرية.
6. التأكيد من السكتة الدماغية التعريفي (بعد الوفاة)
- في ختام دراسة، تحقق من حجم المخ باستخدام 2،3،5-triphenyltetrazolium كلوريد (TTC) تلطيخ كما هو مبين في الشكل (5). إن طريقة الكامل يمكن العثور عليه في 12.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
وكان الهدف من هذا الأسلوب للحث على السكتة الدماغية في النماذج الحيوانية (الماوس والفئران) بعد حقن البلعة من RB عن طريق الوريد الذيل وإضاءة لاحقة من جمجمة ضعفت مع ضوء الليزر 561 نانومتر. الصور في الشكل (4) تدل على تطور تكوين جلطة في وعاء واحد بعد التشعيع في المنطقة في 0، 1، 1.5 و 2 دقيقة. قبل تشكيل جلطة السفينة بأكملها بيضاء بسبب التدفق الحر روز البنغال. بعد تحريض تشعيع السفينة هناك سواد واضح في أجزاء من السفينة ويشير إلى تحريض تشكيل جلطة (إطارات 1 و 1.5 دقيقة). بع...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
ابتليت القدرة على ترجمة التجريبية الفيزيولوجيا المرضية السكتة الدماغية من الحيوان إلى الإنسان التطبيق مع الفشل. ومع ذلك، فإن استخدام نماذج حيوانية، مثل نموذج photothrombosis، ويسمح لفهم أفضل للالسكتة الدماغية الفيزيولوجيا المرضية واستكشاف طرق علاجية جديدة لتوفير الحماية العصبية إثر إصابته بجلطة. السكتات الدماغية وmicroinfarctions التي تنتجها نموذج photothrombotic القشرية الصغيرة هي ذات الصلة سريريا تحت الإكلينيكي أو "الصامتة" السكتة الدماغية 13-15، والتي لديها...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
تعلن الكتاب أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.
شكر وتقدير
تم توفير التمويل لهذا العمل من قبل: AG007218 و NIH F32 AG031606.
تم إنشاء الصورفي مرفق التصوير البصري الأساسي ، والذي تدعمه UTHSCSA و NIH-NCI P30 CA54174 (CTRC في UTHSCSA) و NIH-NIA P01AG19316.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الكواشف | |||
| روز البنغال | سيجما | 330000 | |
| الأيزوفلوران التخدير | MWI الإمداد البيطري | 088-076 | |
| Vetbond | 1469SB | 1469SB | |
| aCSF & nbsp ؛ | 126 ملي كلوريد الصوديوم ، 2.5 ملي كلوريد كلوريد ، 1.25 ملي هيدروكلوريد الصوديوم < الفرعي >2 < / فرعي > < > 4 < / فرعي > ، 2 ملي مولار كلوريد المغنيد < الفرعي >2< / فرعي > ، 2 ملي مولار كلوريد المكالسيوم < الفرعي >2 < / فرعي > ، 10 ملي مولار جلوكوز و 26 ملي مولار من NaHCO3< / sub> (الرقم الهيدروجيني 7.4). | ||
| [header] | |||
| تشريح مقص | المنتجات الصناعية الحيوية | 500-410 | |
| مقص التشغيل 14 سم | منتجات صناعية حيوية | 12-055 | |
| ملقط Dumont High Tech # 5 نمط ، منتجات صناعية حيوية مستقيمة | TWZ-301.22 | ||
| LabJack 132X80 | Optosigma Co | 123-6670 | |
| منصة ل Labjack 8X 8 | Optosigma Co | 145-1110 | |
| حامل قضيب الأذن من الإعداد التجسيمي | Stoelting / Cyborg | 51654 | |
| Dispomed Labvent آلة تخدير القوارض | DRE، Inc. | 15001 | |
| Tech IV Isoflurane مبخر | DRE، Inc. | 34001 | |
| F علبة الهواء | DRE، Inc | 80120 | |
| أنبوب التنفس الدوائر بابين | DRE، Inc | 86111B | |
| محول القوارض لأنبوب حمام | DRE، Inc | 891000 | |
| O2< / sub> منظم لخزانات الأكسجين | DRE، Inc | CE001E | |
| تحريض القوارض | DRE، Inc | 15004C | |
| Ethicon Silk 6-0 ؛ 18 بوصة مع خياطة إبرة P-3 | Express | 1639G | |
| محول بصري عاكس موضوعي | تقنيات | ||
| مثقاب فوردوم الجهد المزدوج 110/120 | Foredom | 134.53 | |
| Meisinger 3.9 مم مثقاب | Meisinger | (المرجع # 310 104 001 001 009) | |
المراجع
- Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis. Annals of Neurology. 17, 497-504 (1985).
- Rosenblum, W. I., El-Sabban, F. Platelet aggregation in the cerebral microcirculation: effect of aspirin and other agents. Circulation Research. 40, 320-328 (1977).
- Owens, A. P. 3rd, Mackman, N. Sources of tissue factor that contribute to thrombosis after rupture of an atherosclerotic plaque. Thrombosis Research. 129, Suppl 2. S30-S33 (2012).
- Carmichael, S. T. Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose. NeuroRx : the journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2, 396-409 (2005).
- Manual of stroke models in rats. , 332 CRC Press. (2009).
- Herz, R. C., Kasbergen, C. M., Hillen, B., Versteeg, D. H., de Wildt, D. J. Rat middle cerebral artery occlusion by an intraluminal thread compromises collateral blood flow. Brain Research. 791, 223-228 (1998).
- Brint, S., Jacewicz, M., Kiessling, M., Tanabe, J., Pulsinelli, W. Focal brain ischemia in the rat: methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism : Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 8, 474-485 (1988).
- Zheng, W., et al. Purinergic receptor stimulation reduces cytotoxic edema and brain infarcts in mouse induced by photothrombosis by energizing glial mitochondria. PloS One. 5, e14401(2010).
- Zheng, D. M., Wewer, J., Lechleiter, J. P. 2Y. 1R. -initiated IP3R-dependent stimulation of astrocyte mitochondrial metabolism reduces and partially reverses ischemic neuronal damage in mouse. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 33, 600-611 (2013).
- Witte, O. W., Stoll, G. Delayed and remote effects of focal cortical infarctions: secondary damage and reactive plasticity. Advances in Neurology. 73, 207-227 (1997).
- Hagemann, G., Redecker, C., Neumann-Haefelin, T., Freund, H. J., Witte, O. W. Increased long-term potentiation in the surround of experimentally induced focal cortical infarction. Annals of Neurology. 44, 255-258 (1998).
- Kramer, M., et al. TTC staining of damaged brain areas after MCA occlusion in the rat does not constrict quantitative gene and protein analyses. Journal of Neuroscience Methods. 187, 84-89 (2010).
- Blinder, P., Shih, A. Y., Rafie, C., Kleinfeld, D. Topological basis for the robust distribution of blood to rodent neocortex. Proceedings of the National Academy of Sciences. 107, 12670-12675 (2010).
- Nishimura, N., Rosidi, N. L., Iadecola, C., Schaffer, C. B. Limitations of collateral flow after occlusion of a single cortical penetrating arteriole. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 30, 1914-1927 (2010).
- Nishimura, N., Schaffer, C. B., Friedman, B., Lyden, P. D., Kleinfeld, D. Penetrating arterioles are a bottleneck in the perfusion of neocortex. Proceedings of the National Academy of Sciences. 104, 365(2007).
- Blum, S., et al. Memory after silent stroke: Hippocampus and infarcts both matter. Neurology. 78, 38-46 (2012).
- Heinsius, T., Bogousslavsky, J., Van Melle, G. Large infarcts in the middle cerebral artery territory Etiology and outcome patterns. Neurology. 50, 341-350 (1998).
- Wardlaw, J. What causes lacunar stroke. Journal of Neurology, Neurosurgery & Psychiatry. 76, 617-619 (2005).
- Inoue, Y., et al. Ischemic stroke under anticoagulant therapy]. Rinsho shinkeigaku. Clinical Neurology. 50, 455-460 (2010).
- Tiannan Wang, W. C., Xie, Y., Zhang, W., Ding, S. Controlling the Volume of the Focal Cerebral Ischemic Lesion through Photothrombosis. American Journal of Biomedical Sciences. 2, 33-42 (2009).
- Head, B. P., Patel, P. Anesthetics and brain protection. Current Opinion in Anaesthesiology. 20, 395-399 (2007).
- Kirsch, J. R., Traystman, R. J., Hurn, P. D. Anesthetics and cerebroprotection: experimental aspects. International Anesthesiology Clinics. 34, 73-93 (1996).
- Koerner, I. P., Brambrink, A. M. Brain protection by anesthetic agents. Current Opinion in Anaesthesiology. 19, 481-486 (2006).
- Gelb, A. W., Bayona, N. A., Wilson, J. X., Cechetto, D. F. Propofol anesthesia compared to awake reduces infarct size in rats. Anesthesiology. 96, 1183-1190 (2002).
- Bhardwaj, A., Castro, I. A., Alkayed, N. J., Hurn, P. D., Kirsch, J. R. Anesthetic choice of halothane versus propofol: impact on experimental perioperative stroke. Stroke; A Journal Of Cerebral Circulation. 32, 1920-1925 (2001).
- Barretto, R. P., Messerschmidt, B., Schnitzer, M. J. In vivo fluorescence imaging with high-resolution microlenses. Nature Methods. 6, 511-512 (2009).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
