يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
البصري مستدعى تسجيل المحتملين في نموذج الفئران التجريبية العصب البصري إزالة الميالين
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
يستخدم تسجيل الإمكانات البصرية (VEP) على نطاق واسع في الممارسة السريرية لتقييم شدة التهاب العصب البصري في مرحلته الحادة ، ولمراقبة مسار المرض في فترة المتابعة. ترتبط التغييرات في معلمات VEP ارتباطا وثيقا بالضرر المرضي في العصب البصري. يقدم هذا البروتوكول وصفا مفصلا حول نموذج القوارض للحقن المجهري للعصب البصري ، حيث يتم إنتاج آفة إزالة الميالين الجزئية في العصب البصري. تتم مناقشة تقنيات تسجيل VEP أيضا. باستخدام الأقطاب الكهربائية المزروعة في الجمجمة ، يمكننا الحصول على آثار VEP قابلة للتكرار أثناء الجلسة وبين الجلسات. يمكن تسجيل VEPs على الفردية على مدى فترة زمنية لتقييم التغيرات الوظيفية في العصب البصري طوليا. يوفر نموذج إزالة الميالين بالعصب البصري ، جنبا إلى جنب مع بروتوكول تسجيل VEP ، أداة للتحقيق في عمليات المرض المرتبطة بإزالة الميالين وإعادة الميالين ، ويمكن استخدامه لتقييم آثار أدوية إعادة الميالين الجديدة أو العلاجات العصبية.
المقدمة
التهاب العصب البصري هو أحد أكثر أشكال الاعتلال العصبي البصري شيوعا ، مما يتسبب في فقدان كامل أو جزئي للرؤية1. من الناحية النسيجية ، يتميز بإزالة الميالين الالتهابي ، وفقدان الخلايا العقدية العصبية ودرجات متفاوتة من إعادة الميالين في العصبالبصري 2. عادة ما يكون التهاب العصب البصري هو البداية الواضحة للتصلب المتعدد. الإمكانات البصرية المستحثة (VEP) هي أداة غير جراحية للتحقيق في وظيفة النظام البصري. يعكس وظيفة ما بعد الشبكية من شبكية العين إلى القشرة البصرية الأولية ويتأثر في العديد من حالات أمراض العصبالبصري 3. تم استخدام VEP في الغالب في مرضى التهاب العصب البصري لتقييم سلامة المسار البصري4.
....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
وأجريت جميع الإجراءات التي تنطوي على الحيوانات وفقا للقانون الاسترالي من الممارسة لرعاية واستخدام الحيوانات لأغراض علمية والمبادئ التوجيهية لبيان ARVO لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية، وتمت الموافقة من قبل: بيان الأخلاق لجنة أخلاقيات الحيوان من جامعة ماكواري.
1. VEP الكهربائي زرع
- تخدير الحيوانات مع حقن داخل الصفاق من الكيتامين (75 ملغ / كلغ) وmedetomidine (0.5 ملغ / كلغ).
ملاحظة: بعد التخدير، ومراقبة ردود الفعل انسحاب (اختبار قرصة، منعكسة القرنية وجفني،....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
وتظهر آثار استنساخه VEP داخل الدورات في الشكل 1 و تأخير كبير في الكمون N1 يمكن أن ينظر بعد حقن العصب البصري. ويمكن ملاحظة آفات العصب البصري جزئية من إزالة الميالين على أقسام النسيجية باستخدام Luxol تلطيخ الأزرق سريع 5 الشكل 2 يوضح مقطع تمثيلي مع آفة عديمة الميلين التنسيق صغيرة في وسط العصب البصري. لاحظ أن المقطع العرضي لا تمثل الحجم الكلي للآفة. ويمكن قياس منطقة عديمة الميلين على كل شريحة على التوالي من العصب للاستدلال على حجم الآفة باس.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
العصب البصري شديد التأثر بالتلف الميكانيكي. يمكن أن تؤدي إصابة سحق العصب البصري على مدى 1 ثانية إلى فقدان حوالي 75٪ من RGC على مدى أسبوعين10. لذلك ، مطلوب توخي الحذر الشديد أثناء إجراء العمليات الجراحية. وفقا لتجربة المؤلفين ، من الأفضل بكثير تكييف نهج التشريح الحاد لفضح وإفساح المجال عبر الأنسجة المحيطة بالعصب البصري على طول اتجاه العصب ، بدلا من اختراق الاتجاه العمودي للعصب البصري. أيضا ، يجب فك الأم الجافية والعناكبوتية طوليا لتجنب أي ضرر يشبه بضع البسات لمحاور RGC. عادة ما يستخدم اللون الأزرق إيفان لتسهيل .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
لا يوجد لدى أي من المؤلفين مصالح متضاربة أو مصالح متضاربة.
شكر وتقدير
وأيد هذه الدراسة من قبل معهد بحوث أمراض العيون أستراليا (ORIA). نشكر الأستاذ Algis Vingrys والدكتور بانغ بوي، جامعة ملبورن، لمساعدتنا في البداية لتطوير تقنية تسجيل VEP.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| كيتامين 100 مجم / مل (كيتاميل) | مختبرات تروي | AC 116 | |
| ميديتوميدين 1 مجم / مل (دوميتور) فايزر | sc-204073 | ||
| تروبيكاميد 1.0٪ (ميدرياسيل) ألكون | sc-202371 | ||
| نظام بطانية متجانسة الحرارة | هارفارد | جهاز NC9203819 | |
| مقياس مقاومة | Grass | F-EZM5 | |
| السحابات الدقيقة | M1.0 & مرات ؛ فتحة 3 مم Csk M / T 304 S / S | ||
| أقطاب إبرة تحت الجلد ؛ | العشب | F-E3M-72 | |
| إصلاح سريع | DeguDent GmbH | ||
| الصمام الثنائي الباعث للضوء | Nichia | NSPG300A | |
| Bioamplifier | CWE، Inc. | نظام BMA-400 | |
| CED | كامبريدج للتصميم الإلكتروني المحدود. | حقنة Power1401 | |
| هاميلتون | هاميلتون | 87930 | |
| Lysolecithin | Sigma | L4129 | |
| إيفان s blue | سيجما | E2129 |
المراجع
- Balcer, L. J. Clinical practice. Optic neuritis. N Engl J Med. 354 (12), 1273-1280 (2006).
- Lassmann, H. Multiple sclerosis as a neuronal disease. Waxman, S. G. , Elsevier. 153-164 (2005).
- Fahle, M., Bach, M.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
