تعد نماذج السكتة الدماغية الخثارية أدوات حيوية لتحسين علاج إعادة القناة. نبلغ هنا عن نموذج السكتة الدماغية الخثارية في الفئران يعتمد على إهانة نقص التأكسج الدماغي العابرة (tHI) ، والتي تؤدي إلى تجلط الدم والاحتشاء ، وتستجيب بشكل إيجابي لانحلال الفيبرين بوساطة منشط البلازمينوجين للأنسجة (tPA) في نافذة علاجية مشابهة لتلك الموجودة في مرضى السكتة الدماغية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
A السكتة الدماغية نموذج الخثاري بناء على عابر الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
وقد عانى البحوث السكتة الدماغية العديد من النكسات في ترجمة العلاجات اعصاب في الممارسة السريرية. في المقابل، فإن العلاج في العالم الحقيقي (TPA الجلطات) نادرا ما تنتج فوائد في النماذج التجريبية الميكانيكية المستندة إلى انسداد، التي تهيمن على أبحاث السكتة الدماغية قبل السريرية. هذا الانقسام بين مقاعد البدلاء، والسرير يوحي الحاجة إلى استخدام نماذج سكتة متجاوبة في مجال البحوث السكتة الدماغية قبل السريرية. تحقيقا لهذه الغاية، واخترع نموذجا السكتة الدماغية الخثاري بسيطة وسكتة التفاعلي وصفها هنا. ويتكون هذا النموذج من انسداد عابرة من جانب واحد مشترك الشريان السباتي والتسليم من 7.5٪ من الأكسجين من خلال القناع عن وجهه في فئران بالغة لمدة 30 دقيقة، مع الحفاظ على درجة حرارة الجسم في الحيوان 37.5 ± 0.5 ° C. على الرغم من أن ربط عكسها من الشريان السباتي من جانب واحد أو نقص الأكسجة قمعت كل تدفق الدم إلى المخ عابر فقط، والجمع بين كل من الشتائم تسبب العجز ضخه، الفيبرين وترسب الصفائح الدموية، وinfar كبير دائمط م في الأراضي التي يتم توفيرها من الشريان الدماغي المتوسطة. الأهم من ذلك، قدمت حقن المؤتلف سكتة عند 0.5، 1، أو 4 ساعات بعد ثي (10 ملغ / كلغ) الوريد ذيل الحد تعتمد على الوقت من معدل الوفيات واحتشاء الحجم. هذا النموذج السكتة الدماغية الجديد هو بسيط، ويمكن أن تكون موحدة في جميع أنحاء مختبرات لمقارنة النتائج التجريبية. وعلاوة على ذلك، فإنه يدفع الجلطة دون قطع القحف أو إدخال الصمات شكلت مسبقا. ونظرا لهذه المزايا الفريدة، ونموذج ثي هو إضافة مفيدة إلى مرجع للبحوث السكتة الدماغية قبل السريرية.
المقدمة
الجلطات وإعادة الاستقناء هي العلاج الأكثر فعالية من السكتة الدماغية الحادة في الممارسة السريرية 1. بعد، تم تنفيذ معظم الأبحاث العصبية قبل السريرية في نموذج عابر ميكانيكي عرقلة (داخل اللمعة خياطة المتوسطة انسداد الشريان الدماغي) التي تنتج التعافي السريع من تدفق الدم إلى المخ على إزالة انسداد الأوعية الدموية ويظهر قليل من دون فوائد قبل سكتة الجلطات. وقد أشير إلى أن اختيار مشكوك فيها من نماذج السكتة الدماغية ساهم، جزئيا على الأقل، إلى صعوبة في ترجمة علاج الأعصاب لمرضى 2،3. وبالتالي، هناك دعوة متزايدة لتوظيف نماذج الانسداد التجلطي السكتة الدماغية سكتة متجاوبة في مجال البحوث قبل السريرية، ولكن لديها مثل هذه الن....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) من جامعة إيموري ويتبع المعاهد الوطنية للصحة المبدأ التوجيهي للرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.
1. إعداد
- إعداد السرير الجراحي على لوحة ظاهرة الاحتباس اتصال مع مضخة الحرارة عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة على الأقل قبل الجراحة. وضع لفة الرقبة باستخدام برميل من 3 مل حقنة على السرير الجراحي. تحضير غاز التخدير مع 2٪ الأيزوفلورين في الهواء الطبي.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم استخدام ثنائي الأبعاد التصوير رقطة الليزر المقابل (LSCI) 16 لمقارنة التغيرات في تدفق الدم الدماغي (البرازيلي) من خلال 30 دقيقة عابرة انسداد الشريان السباتي من جانب واحد (tCCAO)، والتعرض 30 دقيقة لنقص الأكسجة (7.5٪ أكسجين)، و 30 دقيقة من جانب واحد السباتي ربط ظل نقص الأكسجة (ثي). وكشفت هذه التجربة التي tCCAO تحت normoxia قمعها الاتحاد البرازيلي على الشريان السباتي ligated نصف الكرة إلى ~ 50٪ من قيمة خط الأساس، الذي تعافى بسرعة إلى فوق 85٪ بعد الافراج عن انسداد الشريان.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
السكتة الدماغية هي مسألة صحية رئيسية من تزايد أهمية لأي مجتمع مع شيخوخة السكان. على الصعيد العالمي، والسكتة الدماغية هي ثاني سبب رئيسي للوفاة ما يقدر ب 5.9 مليون الأحداث القاتلة في عام 2010، أي ما يعادل 11.1٪ من مجموع الوفيات 18. السكتة الدماغية هي أيضا السبب الرئيسي الثالث للالمصححة باحتساب مدد العجز سنوات العمر (سنوات العمر) خسر على الصعيد العالمي في عام 2010، حيث ارتفعت من المركز الخامس في عام 1990 (19). وهذه البيانات الوبائية تبرز الحاجة إلى علاجات أكثر ف.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
شكر وتقدير
تم دعم هذه الدراسة من قبل منحة المعاهد الوطنية للصحة NS074559 (إلى CK.). نشكر جميع المتعاونين الذين ساهموا في مقالاتنا البحثية التي يستند إليها تقرير المنهجية الحالي.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الفئران الذكور البالغة | تشارلز ريفر | C57BL / 6 ؛ | 10-13 أسبوعا (22-30 جم) |
| نظام تخدير حيواني مختبر متنقل | VetEquip 901807 | التخدير | |
| الهواء الطبي (المضغوط) | Airgas | UN1002 | التخدير |
| Isoflurane | Piramal Healthcare | NDC 66794-013-25 | التخدير |
| متعدد المحطات مختبر التخدير الحيواني نظام | الجراحة | V703501 | نقص الأكسجة |
| 7.5٪ O2< / sub> متوازنة بنسبة 92.5٪ N2< / sub> خزان | Airgas | UN1956 | نقص الأكسجة |
| نظام التحكم في درجة الحرارة مع مصباح التدفئة ؛ | كول بارمر | EW-89000-10 | أجهزة التحكم في درجة الحرارة |
| مسبار المستقيم | كول بارمر | NCI-00141PG | أجهزة التحكم في درجة الحرارة تشريح |
| المجهر | أوليمبوس | الإعداد الجراحي | SZ40 |
| مضخة حرارية مع وسادة الاحترار | Gaymar | الإعداد الجراحي | TP700 |
| ملقط منحني ناعم (مسننة) | FST | 11370-31 | أداة جراحية |
| ملقط منحني ناعم (ناعم) | FST | 11373-12 | أداة جراحية |
| مقص صغير | FST | 15000-03 | أداة جراحية |
| حاملات إبرة صغيرة | FST | 12060-01 | أداة جراحية |
| Halsted-Mosquito hemostats | FST | 13008-12 | أداة جراحية |
| 5-0 خياطة الحرير | هارفارد 624143 | اللوازم الجراحية | |
| 4-0 خياطة النايلون أحادية الشعيرات | LOOK | 766B | المستلزمات الجراحية |
| غراء الأنسجة | مختبرات | أبوت NC9855218 | اللوازم الجراحية |
| مرهم Puralube Vet | Fisher | NC0138063 | منع جفاف العين |
| MoorFLPI-2 جهاز تصوير تدفق الدم | Moor | 780-nm مصدر ليزر | Laser Speckle Contrast |
| Imaging Mannitol | Sigma | M4125 | in vivo< / i> TTC |
| 2،3،5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) | Sigma | T8877 | in vivo< / i> TTC |
| Vibratome | Stoelting | 51425 | قسم الدماغ ل in vivo TTC |
| المجهر الرقمي | Dino-Lite | AM2111 | تصوير الدماغ |
| مركب O.C.T | ساكورا فينيتيك | 4583 | |
| الماعز المضاد للأرانب Alexa Fluro 488 | Invitrogen | A11008 | الكيمياء المناعية |
| Cryostat | Vibratome | ultrapro 5000 | قسم الدماغ ل IHC |
| Evans blue | Sigma | E2129 | الكشف عن الأوعية الدموية |
| علوم المجهر الإلكتروني | التروية 5000 | قسم الدماغ لعلم الأنسجة | |
| أفرتين (2 ، 2 ، 2-Tribromoethanol) | Sigma | T48402 | القتل الرحيم |
| المجهر الفلوري | أوليمبوس | DP73 | |
| Meloxicam SR | ZooPharm | NSAID تسكين |
المراجع
- Broderick, J. P., Hacke, W. Treatment of acute ischemic stroke: Part I: recanalization strategies. Circulation. 106 (12), 1563-1569 (2002).
- Hossmann, K. A. Pathophysiological basis of translational stroke research. Folia Neuropathol. 47 (3), 213-227 (20....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
