مقالة منهجية

سريع في الموقع التهجين باستخدام قليل النوكليوتيد تحقيقات على مسبوقة لامتصاص العرق دماغ الفئران مع السيروتونين متلازمة

DOI:

10.3791/53165

⸱

سبتمبر 23, 2015

 ,  ,  , 
1Ross University School of Veterinary Medicine, 2Charles E. Schmidt College of Medicine, Florida Atlantic University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف هذا البروتوكول طريقة تهجين سريعة ومبسطة في الموقع مثالية للدماغ المسبوق ببارافورمالدهايد ، وبالتالي تقليل الحاجة إلى خطوات معقدة مطولة أثناء استخدام الأنسجة المجمدة الطازجة. يتم التحقق من صحة الطريقة باستخدام تحديد جين مستقبلات السيروتونين 5-HT2A htr2a في الفئران.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
قد تتسبب سمية < p class = 'jove_content'>3،4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA ؛ إكستاسي) في حدوث تغييرات خاصة بالمنطقة في التعبير عن mRNA هرين السيروتونين بسبب متلازمة السيروتونين الحادة (5-هيدروكسي تريبتامين؛ 5-HT). يمكن اختبار هذه الفرضية باستخدام التهجين في الموقع للكشف عن جين مستقبلات السيروتونين 5-HT2A htr2a. في الماضي ، كانت مثل هذه الإجراءات ، باستخدام الريبوبروب المشع ، صعبة بسبب سير العمل المعقد الذي يحتاج إلى عدة أيام لتنفيذه والصعوبة الإضافية المتمثلة في أن هذه التقنية تتطلب استخدام أنسجة مجمدة طازجة يتم الاحتفاظ بها في بيئة خالية من RNase. في الآونة الأخيرة ، أدى تطوير مجسات قليلة النوكليوتيدات القصيرة إلى تبسيط إجراءات التهجين في الموقع وسمح باستخدام أقسام الدماغ المسبوقة ببارافورمالدهايد ، والتي تتوفر على نطاق واسع في المختبرات. هنا ، نصف بروتوكولا مفصلا باستخدام مجسات قليل النوكليوتيدات غير المشعة على أنسجة المخ المسبوقة. تشمل مجسات التهجين المستخدمة في هذه الدراسة dapB (ترميز جيني بكتيري لاختزال ثنائي هيدروديبيكولينات) ، و ppiB (ترميز جيني للتدبير المنزلي لببتيديل بروليل إيزوميراز B) ، و htr2a (ترميز جين السيروتونين لمستقبلات 5-HT2A). هذه الطريقة بسيطة نسبيا ورخيصة وقابلة للتكرار وتتطلب أقل من يومين لإكمالها.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

متلازمة السيروتونين (5-هيدروكسي تريبتامين؛ 5-HT) هي اضطراب عصبي حاد تسببه الأدوية المعززة ل 5-HT مثل مضادات الاكتئاب1 ، بينما تحدث أيضا في حالات استخدام MDMA لأغراضترفيهية 2. الآليات الجزيئية المسؤولة عن تقلبات المزاج والتعلم ونقص الذاكرة التي تحدث بالاقتران مع المتلازمة الحادة ليست مفهومة جيدا3،4. التهجين في الموقع هو أداة بحث قوية تسمح باكتشاف وقياس كمية mRNAs محددة يتم التعبير عنها على مستوى الخلية الواحدة. الطريقة التقليدية لإجراء التهجين في الموقع هي استخدام مسبار ريبوجي ذو علامة مشعة يقوم على تهجين الجين محل الاهتمام على وجه التحديد. ومع ذلك ، فإن العيب الرئيسي هو أن الطريقة تتطلب خطوات تحضير وتهجين معقدة وتستغرق وقتا طويلا ، بالإضافة إلى الوصول إلى الأنسجة المجمدة الطازجة التي يتم الاحتفاظ بها في بيئة خالية من RNase5،6.

< p class = 'jove_content'> تم تطوير مجسات قليل النوكليوتيدات مؤخرا لتهجين شظايا الحمض النووي الريبي الأقصر من تلك المطلوبة للريبوبروبس7. علاوة على ذلك ، تنتج المجسات إشارة خلفية منخفضة دون التضحية بالخصوصية8. يمكن استخدام تقنية المسبار المطورة حديثا في التهجين الموضعي على أنسجة المخ المسبقة ببارافورمالدهايد المتوفرة بشكل شائع في المختبرات الكيميائية المناعية.

هنا ، نصف بروتوكولا للتهجين في الموقع باستخدام مجسات قليل النوكليوتيدات على دماغ الفئران المسبوقة ببارافورمالدهايد ونقارن النتائج مع تلك التي لوحظت في دماغ مجمد جديد5،6. يستخدم هذا البروتوكول لاختبار الفرضية القائلة بأن تعاطي مخدرات MDMA يسبب تغيرات في جين مستقبلات 5-HT 2A htr2a mRNA في الدماغ. بدأنا الإجراء بعلاج MDMA متبوعا بنضح أنسجة بارافورمالدهيد للحيوان ، والتهجين في الموقع لمسبار thr2a ، وتحليل البيانات. لاحظ أن dapB (الترميز الجيني البكتيري لاختزال ثنائي هيدروديبيكولينات) يستخدم كعنصر تحكم سلبي ، و ppiB (ترميز جيني التدبير المنزلي لببتيديل بروليل إيزوميراز B) كعنصر تحكم إيجابي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على إجراءات استخدام الحيوانات المبينة أدناه من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) في جامعة روس الطب البيطري وجامعة فلوريدا أتلانتيك. على الرغم من أن تقنيات معقمة وقفازات مطلوبة، وبيئة خالية من ريبونوكلياز ليست ضرورية أثناء استخدام هذا البروتوكول.

1. إعداد

  1. إعداد الأنسجة وباجتزاء
    1. تعيين الفئران بشكل عشوائي إلى ثلاث مجموعات: الطازجة / المالحة (SAL؛ 0.9٪ كلوريد الصوديوم)، مسبوقة / SAL ومسبوقة / 3،4-ميثيلين (MDMA، وانظر التفاصيل في الجدول 1).
    2. إدارة ثلاث جرعات من 1 مل / كغ SAL و 10 ملغ / كغ MDMA البريتونى، على التوالي، للجماعات SAL وMDMA في 2 فاصل ساعة. تسمح الحيوانات من أجل البقاء على العلاج لمدة 6 أيام.
    3. في يوم 7، إدارة 100 ملغم / كغم من الكيتامين في مزيج من 5 ملغ / كغ زيلازين البريتونى إلى الفئران لالتخدير العميق (أي فقدان طرفة القرنية وتاايل قرصة ردود الفعل).
    4. لمجموعة جديدة / SAL، قطع رأس بسرعة الفئران وإزالة المخ لاختبار الدماغ الطازجة (انظر التفاصيل في المرجع 5).
    5. بالنسبة للفئات / MDMA مسبوقة / SAL ومسبوقة، اجراء خفض على طول القص حوالي 10 -12 سم ثم فضح نهاية عظمة القص.
    6. عقد نهاية القص مع مرقئ وقطع الحجاب الحاجز أفقيا على كلا الجانبين مع مقص حاد ومن ثم خفض إلى أعلى عبر الأضلاع وبالتوازي مع الرئتين.
    7. بيد واحدة، وعقد غيض بطني من القلب مع ملقط صغير. مع جهة أخرى، تخترق البطين الأيسر مع 18 G حقنة إبرة (لاحظ الجانب محول الإبرة متصل بخرطوم السليكون على شكل Y إلى SAL وامتصاص العرق الحاويات المثلجة ومضخات تحوي؛ انظر المرجع 9).
    8. بدوره على مضخة SAL على مستوى متوسط ​​من معدل التدفق (~ 5 مل / دقيقة) وثقب الأذين الأيمن مع ملقط للسماح للهروب من عودة تنظيم التأمينulation. الحفاظ على SAL نضح لمدة 30 دقيقة.
    9. بدوره على مضخة لامتصاص العرق على المستوى المتوسط ​​والسماح 4٪ لامتصاص العرق المثلج ليروي هذا الحيوان لمدة 30 دقيقة.
    10. إزالة أداة نضح وقطع رأس الحيوان. جعل خلفي أمامي قطع طريق خط الوسط من الجمجمة، ثم رفرف الجمجمة لفضح تجويف الجمجمة 10.
    11. إزالة الدماغ مع ملعقة من تجويف الجمجمة ووضع الدماغ في 50 مل أنبوب الطرد المركزي التي تحتوي على 25 مل من 4٪ لامتصاص العرق. إبقاء الدماغ داخل أنبوب يحتوي على امتصاص العرق في 4 درجة مئوية الثلاجة لمدة 24 ساعة.
    12. تحريك الدماغ في أنبوب 50 مل الطرد المركزي التي تحتوي على 25 مل من 30٪ محلول السكروز في 4 درجة مئوية لمدة 3 أيام. وأخيرا، تخزين الدماغ داخل أكياس بلاستيكية في -80 ° C حتى الاستخدام.
    13. جبل الدماغ على تشاك مع وسائل الاعلام التضمين وتجميد وسائل الإعلام التضمين التي تحتوي على الدماغ في ناظم البرد في درجة حرارة -26 درجة مئوية ل. قطع جمدت جديدةن المخ إلى 20 ميكرون أقسام وامتصاص العرق-مسبوقة الدماغ إلى أقسام 10 ميكرون. نقل المقطع إلى شرائح المجهر RT عن طريق لمس انتقل إلى القسم.
    14. الهواء الجاف في RT لمدة 4 ساعة. تخزين الشرائح القسم في كيس مختوم ضيق في -80 ° C حتى الاستخدام.
  2. جفاف
    1. تأخذ الشرائح من -80 ° C الفريزر وتعيين أقسام في واحدة من ثلاثة اختبارات: ht2a، ppiB (مراقبة إيجابية) أو dapB (مراقبة سلبية)؛ علامة وأقسام التسمية مع الكرة من ركلة جزاء (لا تستخدم قلم رصاص). غمر الشرائح في 100٪ كحول في RT لمدة 5 دقائق. تجفيف الشرائح لمدة 5 دقائق في غطاء الدخان.
  3. المعالجة
    1. ماصة 20 ميكرولتر من كاشف المعالجة 1 (تثبيط إنزيم الفوسفاتيز القلوية) للأقسام على الشرائح. ضع الشرائح على السكك الحديدية رف في علبة الرطوبة (لاحظ أن علبة ومغطاة بغطاء للحفاظ على رطوبة عالية لمنع التبخر من solutio رد فعلن).
    2. يهز بلطف علبة الرطوبة على شاكر الأفقي على سرعة منخفضة لمدة 10 دقيقة. تغسل الشرائح مرتين بالماء المقطر المزدوج ([ده 2 O) لمدة 2 دقيقة. غمر الشريحة في كوب 200 مل تحتوي على 150 مل من كاشف المعالجة 2 (كسر الروابط عبر الناجم عن امتصاص العرق التثبيت). تغلي الشرائح ليصبح المجموع 5 دقائق عند 100 درجة مئوية (استعادة الناجم عن الحرارة هيكل RNA 11).
    3. تغسل الشرائح مرتين مع ده 2 O لمدة 2 دقيقة. ضع الشرائح في 100٪ الكحول لمدة 5 دقائق. تجفيف الشرائح لمدة 5 دقائق في غطاء الدخان. استخدام قلم مسعور لرسم دائرة حول المنطقة المحددة في قسم الأنسجة (على سبيل المثال، والهياكل غير القشرية، بما في ذلك المهاد وتحت المهاد كما هو مبين في الشكل 2).
    4. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف المعالجة-3 (الزيادات في اختراق التحقيق) إلى كل المنطقة المختارة، وتغطية صينية الرطوبة مع غطاء. وضع صينية في الفرن التهجينمجهزة شاكر الأفقي وتعيين درجة حرارة الفرن عند 40 درجة مئوية. يهز بلطف علبة لمدة 30 دقيقة. تغسل الشرائح مرتين مع ده 2 O لمدة 2 دقيقة.

2. التهجين والتضخيم

  1. ماصة 10 ميكرولتر من htr2a، ppiB وdapB الكواشف التحقيق، على التوالي، في مناطق مختارة. تغطية صينية الرطوبة مع غطاء لمنع تبخر الكاشف. هز بلطف على شاكر الأفقي وضعت في سرعة منخفضة. احتضان الشرائح في 40 درجة مئوية في الفرن لمدة 2 ساعة.
  2. تغسل الشرائح مرتين مع العازلة غسل لمدة 2 دقيقة. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف التضخيم-1 على كل المنطقة المحددة، ويهز واحتضان الشرائح في 40 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
  3. تغسل الشرائح مرتين مع العازلة غسل لمدة 2 دقيقة. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف التضخيم-2 على كل المنطقة المحددة، ويهز واحتضان الشرائح في 40 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.
  4. تغسل الشرائح مرتين ثإيث العازلة الغسيل لمدة 2 دقيقة. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف التضخيم-3 على كل المنطقة المحددة، ويهز واحتضان الشرائح في 40 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
  5. تغسل الشرائح مرتين مع العازلة غسل لمدة 2 دقيقة. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف التضخيم-4 على كل المنطقة المحددة، ويهز واحتضان الشرائح في 40 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.
  6. تغسل الشرائح مرتين مع العازلة غسل لمدة 2 دقيقة. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف التضخيم-5 على كل المنطقة المحددة، ويهز واحتضان الشرائح في RT لمدة 30 دقيقة.
  7. تغسل الشرائح مرتين مع العازلة غسل لمدة 2 دقيقة. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف التضخيم-6 على كل المنطقة المحددة، ويهز واحتضان الشرائح في RT لمدة 15 دقيقة. تغسل الشرائح مرتين مع العازلة غسل لمدة 2 دقيقة.

3. كشف الإشارة

  1. ماصة 10 ميكرولتر من كاشف الأحمر إلى كل المنطقة المحددة (لاحظ أن كاشف هو خليط من الأحمر-B والأحمر-A بنسبة 1:60 وينبغي استخدام طmmediately). ضع الشريحة في علبة الرطوبة على شاكر الأفقي في RT ويهز بلطف على سرعة منخفضة لمدة 10 دقيقة.
  2. تغسل الشرائح مرتين مع (ده 2 O) لمدة 10 دقيقة. تجفيف الشرائح في 60 درجة مئوية في الفرن لمدة 15 دقيقة. ضع الشرائح في الزيلين تحت غطاء الدخان لمدة 5 دقائق. ماصة 20 ميكرولتر من القائم الزيلين وسائل الاعلام المتزايدة على كل المنطقة المختارة، وتغطي مع ساترة.

4. التقاط الصور

  1. اتخاذ microphotographs الرقمي للمناطق مختارة (على سبيل المثال، ما تحت المهاد، أرقام 1 و 3) مع التكبير من 4 × 20 × العدسات وموضوعية. حفظ ملف الصورة.

5. صورة تحليل الجسيمات

  1. سحب وإسقاط ملف الصورة في إطار يماغيج الرئيسي. انتقل إلى شريط القوائم واختيار "صورة"، بجانب تحديد "نوع" من القائمة المنسدلة، وحدد "8 بت".
  2. اختر 'ضبط'، ثم اختر 'منتدى المجالس الرومانسيةeshold "لفتح مربع الحوار. ضبط انخفاض قيمة شريط في مربع الحوار بحيث تتم إزالة الخلفية غير المرغوب فيها. انتقل إلى شريط القوائم واختيار "تحليل"، ثم حدد "تحليل الجزيئات" لفتح مربع الحوار الثاني.
  3. تعيين حجم الجسيمات في 10، و من ثم 'عرض الخطوط العريضة "وحدد" عرض النتائج "و" صناديق تلخيص ". وأخيرا، انقر فوق "موافق" لعرض البيانات الجسيمات في مربعات الحوار.

6. جدول حساب

  1. إدخال البيانات في ورقة اكسل ويبلغ متوسط ​​أعداد الجزيئات في مجموعة SAL كأساس. حساب مستوى نسبة كل قسم وجعل الرسم البياني وفقا لذلك (الشكل 4).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

باستخدام المجسات قليل النوكليوتيد RNA (<25 الإقليم الشمالي)، ويمكن الكشف عن التهجين كنقاط حمراء في خلايا المخ تحت المهاد البصري أعدت من العقول المجمدة-مسبوقة لامتصاص العرق والعذبة. جزيئات htr2a مرنا موجودة في بعض الخلايا (المشار إليها السهام الصلبة)، ولكن ليس غيرها (الأسهم المفتوحة). لاحظنا أن ليس هناك فرق بين-مسبوقة لامتصاص العرق والأنسجة المجمدة الطازجة (الشكل 1). A التهجين الناجح يمكن تقييمها أولا بالعين المجردة (الشكل 2). وجدنا أن ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

أحد الاهتمامات الرئيسية لاختبار التهجين الموضعي هو اختيار التقنيات المناسبة المستخدمة للحفاظ على الحمض النووي الريبي بسبب إنزيمات RNase. من المعروف أن هذه الإنزيمات موجودة على نطاق واسع في الخلايا والبيئة التي يمكن أن تؤثر على النتائج. ومع ذلك ، يمكن تمييز نشاط الإنزيم بسرعة عن طريق وضع الأنسجة في محلول الثلج الجاف / الكحول5،12. على الرغم من أن الحفظ السريع أمر بالغ الأهمية للتهجين باستخدام مسبار الريبوكليوتيدات13 ، إلا أنه لا يعرف سوى القليل عن الظروف التجريبية لمجسات قليل النوكليوتيدات. ف...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تعلن الكتاب أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وأيد هذه الدراسة من منحة المعاهد الوطنية للصحة (R15DA029863)، وجامعة فلوريدا أتلانتيك منحة بحثية الجامعية (M30014) وجامعة روس الطب البيطري منحة بحثية. ونود أن نشكر المعهد الوطني لتعاطي المخدرات (روكفيل، MD) عن توفير (±) 3،4-ميثيلين (± MDMA) لهذا العمل.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
مسبار التحكم السلبي RNAscope-DapBتشخيص الخلايا المتقدم ، INC310098
RNAscope Pretreat 4الخلايا المتقدم ، INC320046
RNAscope 2.0 HD Reagent Kit -Red Advanced Cell Diagnosis ، INC310036
RNAscope Probe - Rn-Ppibالخلايا المتقدم ، INC313921
Rat Htr2aتشخيص الخلايا المتقدم ، INC300031
CryostatLeicaCM 1850
شاكر أفقيVWR88032-088
فرن تهجينThermo Fisher Scientific222000
Superfrost Plus مجهر شريحةفيشر Scientific12-550-15
قلم مسعورناقلاتH-4000
مجهرأوليمبوسبروفيس AX70
تشخيص تشخيص

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Muzyk, A. J., Jakel, R. J., Preud'homme, X. Serotonin syndrome after a massive overdose of controlled-release paroxetine. Psychosomatics. 51, 437-442 (2010).
  2. Davies, O., Batajoo-Shrestha, B., Sosa-Popoteur, J., Olibrice, M. Full recovery after severe serotonin syndrome, severe rhabdomyolysis, multi-organ failure and disseminated intravascular coagulopathy from MDMA. Heart Lung. 43, 117-119 (2014).
  3. Bosch, O. G., et al. Verbal memory deficits are correlated with prefrontal hypometabolism in 18FDG PET of recreational MDMA users. PLoS On. 8, e61234(2013).
  4. Smithies, V., Broadbear, J., Verdejo-Garcia, A., Conduit, R. Dysfunctional overnight memory consolidation in ecstasy users. J Psychopharmaco. 28, 751-762 (2014).
  5. Winzer-Serhan, U. H., Broide, R. S., Chen, Y., Leslie, F. M. Highly sensitive radioactive in situ hybridization using full length hydrolyzed riboprobes to detect α2 adrenoceptor subtype mRNAs in adult and developing rat brain. Brain Res Brain Res Proto. 3, 229-241 (1999).
  6. Zoeller, R. T., Fletcher, D. L., Butnariu, O., Lowry, C. A., Moore, F. L. N-ethylmaleimide (NEM) can significantly improve in situ hybridization results using 35S-labeled oligodeoxynucleotide or complementary RNA probes. J Histochem Cytoche. 45, 1035-1041 (1997).
  7. Wang, F., et al. RNAscope: a novel in situ RNA analysis platform for formalin-fixed, paraffin-embedded tissues. J Mol Diag. 14, 22-29 (2012).
  8. Wang, H., et al. RNAscope for in situ detection of transcriptionally active human papillomavirus in head and neck squamous cell carcinoma. J Vis E. , (2014).
  9. Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. Whole animal perfusion fixation for rodents. J Vis E. , (2012).
  10. Mishra, A., et al. Imaging pericytes and capillary diameter in brain slices and isolated retinae. Nat Proto. 9, 323-336 (2014).
  11. Shi, S. R., Cote, R. J., Taylor, C. R. Antigen retrieval techniques: current perspectives. J Histochem Cytoche. 49, 931-937 (2001).
  12. Qin, Y., Heine, V. M., Karst, H., Lucassen, P. J., Joels, M. Gene expression patterns in rat dentate granule cells: comparison between fresh and fixed tissue. J Neurosci Method. 131, 205-211 (2003).
  13. Carter, B. S., Fletcher, J. S., Thompson, R. C. Analysis of messenger RNA expression by in situ hybridization using RNA probes synthesized via in vitro transcription. Method. 52, 322-331 (2010).
  14. Mijnster, M. J., et al. Regional and cellular distribution of serotonin 5-hydroxytryptamine2a receptor mRNA in the nucleus accumbens, olfactory tubercle, and caudate putamen of the rat. J Comp Neuro. 389, 1-11 (1997).
  15. Li, Q., et al. Brain region-specific alterations of 5-HT2A and 5-HT2C receptors in serotonin transporter knockout mice. J Neuroche. 84, 1256-1265 (2003).
  16. Horner, K. A., Gilbert, Y. E., Noble, E. S. Differential regulation of 5-HT2A receptor mRNA expression following withdrawal from a chronic escalating dose regimen of D-amphetamine. Brain Re. 1390, 10-20 (2011).
  17. Mocci, G., Jimenez-Sanchez, L., Adell, A., Cortes, R., Artigas, F. Expression of 5-HT2A receptors in prefrontal cortex pyramidal neurons projecting to nucleus accumbens. Potential relevance for atypical antipsychotic action. Neuropharmacolog. 79, 49-58 (2014).
  18. Reneman, L., et al. The acute and chronic effects of MDMA ('Ecstasy') on cortical 5-HT2A receptors in rat and human. 26, 387-396 (2002).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

HTR2A Image J RNA

مقالات ذات صلة