يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تسمية خالية واحدة كشف الجزيئة عن طريق Microtoroid البصرية الرنين

9.3K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/53180

⸱

ديسمبر 29, 2015

في هذه المقالة

ملخص

لقد قمنا بتطوير نظام استشعار حيوي خال من الملصقات يعتمد على تقنية الرنان البصري المعروفة باسم مرنان الزائد البصري لقفل التردد (FLOWER) القادر على اكتشاف الجزيئات المفردة في المحلول. هنا يتم وصف وعرض الإجراءات الكامنة وراء هذا العمل.

الملخص

الكشف عن تركيزات صغيرة من الجزيئات وصولا الى حد جزيء واحد له تأثير على مجالات مثل الكشف المبكر عن المرض، والدراسات الأساسية على سلوك الجزيئات. تقنيات الكشف عن جزيء واحد تستخدم عادة تسميات مثل العلامات الفلورية أو النقاط الكمومية، ومع ذلك، والعلامات غير متوفرة دائما، وزيادة التكلفة والتعقيد، ويمكن التشويش على الأحداث التي تجري دراستها. ظهرت المرنانات البصرية كوسيلة واعدة للكشف عن جزيئات واحدة دون استخدام التسميات. حاليا أصغر الجسيمات الكشف عنها بواسطة المحسن plasmonically وعدم العارية نظام مرنان البصرية في حل هو 25 نانومتر البوليسترين المجال 1. قمنا بتطوير تقنية تعرف باسم التردد قفل البصرية يهمس زائل الرنان (زهرة) التي يمكن تجاوز هذا الحد وتحقيق الكشف عن جزيء واحد خالية من التسمية في محلول مائي 2. كما موازين قوة الإشارة مع حجم الجسيمات، يمثل عملنا ل> 100X تحسينهالإقليم الشمالي في إشارة إلى نسبة الضوضاء (SNR) على الدولة الراهنة للفن. هنا يتم عرض الإجراءات وراء FLOWER في محاولة لزيادة استخدامه في هذا المجال.

المقدمة

واحدة من التجارب الكشف عن جزيء مفيدة لتقليل كمية الحليلة المستخدمة في أجهزة الاستشعار، للكشف المبكر عن المرض، ودراسة الخصائص الأساسية للجزيئات 3. وعادة ما يتم إجراء مثل هذه التجارب باستخدام تسميات، ولكن التسميات ليست دائما ممكنة للحصول على بروتين معين، وزيادة التكاليف، ويمكن التشويش على الأحداث التي تجري دراستها، ويمكن أن تكون مزعجة، خاصة في الوقت الحقيقي في الموقع تجارب أو نقطة من- التشخيص الرعاية.

المعيار الذهبي الحالي لتسمية خالية biosensing هو سطح مأكل بالرنين 4، ولكن النظم التجارية مأكل سطح الرنين وعادة ما يكون الحد الأدنى نموذجي للك....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. الإعداد التجريبي وإعداد نموذج

  1. افتعال microtoroids باستخدام الطباعة الحجرية والحفر، وإجراء ذوبان كما هو موضح سابقا 6. افتعال microtoroids على رأس رقاقة السيليكون (رقاقة) التي عادة ما يكون قطرها كبير من 80-100 ميكرون، وقطرها صغير من 2 ميكرون.
  2. استرخاء ما يقرب من متر من الألياف البصرية أحادية النمط (125 ميكرون الكسوة، 4.3 ميكرون وضع قطر الميدان) من بكرة الألياف لها.
  3. في منتصف الجزء المساس بها من الألياف البصرية، تجريد شريحة صغيرة (....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

الجسيمات الأحداث ملزم يتم رؤيتها بوضوح عن التغيرات خطوة تشبه في الطول الموجي صدى من microtoroid على مر الزمن (الشكل 2A). وتظهر مرتفعات الخطوات كما رسم بياني في الشكل 2B. أرقام 2-4 تظهر آثار تمثيلية من الربط من exosomes (nanovesicles)، وحبات السيليكا 5 نانومتر، وبشرية واحدة انترلوكين 2 الجزيئات، على التوالي. حقيقة أن الأحداث خطوة تشبه النطاق مع حجم الجسيمات يظهر أن قد تم تنفيذ هذه التقنية بشكل صحيح. هذا يمكن تحليله.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

كما يربط جسيم، والطول الموجي صدى (λ) للزيادات حلقي. إذا unbinds جسيم، والطول الموجي صدى النقصان تبعا ل(أ الحدث خطوة لأسفل). يمكن تحديد قطرها الجسيمات (د) عن طريق رسوم بيانية للسعة كل خطوة الطول الموجي. يختلف ارتفاع كل خطوة الطول الموجي نظرا لاختلاف حجم الجسيمات ملزمة ونظرا لموقعها على microtoroid حيث يربط الجسيم. يحدث أقصى تغير في الطول الموجي صدى (الارتفاع الخطوة) عندما ربط الجزيئات عند خط الاستواء من حيث microtoroid المجال الكهربائي (E 0، كحد .......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.

شكر وتقدير

تم دعم هذا البحث جزئيا من خلال جائزة خدمة البحوث الوطنية (T32GM07616) من المعهد الوطني للعلوم الطبية العامة.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
ليزر قابل للضبطنيوبورتTLB-6300
وحدة تحكم ليزرنيوبورتTLB-6300-LN
وحدة تحكم التغذية المرتدة لقفل الترددToptica PhotonicsDigilock 110
جهاز استقبال ضوئي متوازنتلقائي نيوبورتموديل 2007
وحدة تحكم في الاستقطابفي الخط الضوئيات العامةPLC-003-S-90
بطاقة الحصول على البيانات 24 بتالأدوات الوطنيةNI-PCI-4461
المؤتلف البشري interleukin-2بيرس التكنولوجيا الحيويةR201520
20 نانومتر حبات البوليسترينالحرارية العلمية3020A
NanoCube XYZ Piezo StagePhysik InstrumenteP-611.3
الجدول البصرينيوبورتVH3660W-OPT
عدسة موضوعية لعمود التصويرNavitar Machine Vision1-60228
عمود التصوير (أنبوب المحول)Navitar Machine Vision1-60228
كاميرا CCD عالية الدقة لعمود التصويربصريات إدموند الصناعيةNT39244

المراجع

  1. Lu, T., et al. High sensitivity nanoparticle detection using optical microcavities. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 108, 5976-5979 (2011).
  2. Su, J., Goldberg, A. F. G., Stoltz, B. Label-free detecti....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

مرنان هامس متلاشٍ بصري ذو قفل تردديتكنولوجيا المرنان البصريالكشف عن الجسيمات النانويةتحليل طي البروتيندراسة حركية الارتباطالربط بالألياف البصريةتتبع الطول الموجي للرنين