مقالة منهجية

كاسباس 3 النشاط في الفئران اللوزة تقاس Spectrofluorometry بعد احتشاء عضلة القلب

15.6K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/53207

⸱

يناير 12, 2016

 ,  , 
1Centre de Recherche, Hospital du Sacre-Coeur de Montreal

في هذه المقالة

ملخص

احتشاء عضلة القلب (MI) لا يتبعه فقط ضعف وظائف القلب ولكن أيضا بموت الخلايا المبرمج في اللوزة ، وهي منطقة دماغية تشارك في العواقب السلوكية ل MI. يصف هذا البروتوكول كيفية تحفيز MI ، وجمع أنسجة اللوزة وقياس نشاط caspase-3 ، وهو علامة على موت الخلايا المبرمج ، فيه.

الملخص

احتشاء عضلة القلب (MI) لديه مثيرة متوسطة وطويلة الأجل عواقب على الصعيدين الفسيولوجية والسلوكية، ولكن الآليات التي تشارك لا تزال غير واضحة. وقد وضعت لدينا مختبر نموذج الفئران من متلازمة ما بعد-MI التي تعرض وظائف ضعف القلب، وفقدان الخلايا العصبية في الجهاز الحوفي، العجز المعرفي والسلوكي علامات الاكتئاب. على مستوى الخلايا العصبية، كاسباس 3 تفعيل يتوسط بعد MI موت الخلايا المبرمج في المناطق الحوفي مختلفة، مثل اللوزة - وتبلغ ذروتها في 3 أيام بعد MI. العاهات المعرفية والسلوكية تظهر 2-3 أسابيع بعد MI وهذه ترتبط إحصائيا مع تدابير كاسباس 3 النشاط. يستخدم بروتوكول صفها هنا للحث MI، جمع الأنسجة اللوزة وقياس كاسباس 3 النشاط باستخدام spectrofluorometry. للحث على MI، والمغطي الشريان التاجي تنازلي لمدة 40 دقيقة. بروتوكول لتقييم كاسباس 3 تفعيل يبدأ بعد 3 أيام MI: يتم التضحية الفئران واللوزة معزولة RAPIDLY من الدماغ. يتم تجميد العينات بسرعة في النيتروجين السائل والاحتفاظ بها في -80 درجة مئوية حتى التحليل الفعلي. وتستند هذه التقنية القيام بها لتقييم كاسباس 3 التنشيط على الانقسام ركيزة (DEVD-AMC) من خلال كاسباس 3، التي تصدر مجمع الفلورة التي يمكن أن تقاس spectrofluorometry. المنهجية الكمية واستنساخه ولكن المعدات المطلوبة مكلفة وإجراءات لقياس العينات هو مضيعة للوقت. ويمكن تطبيق هذه التقنية إلى الأنسجة الأخرى، مثل القلب والكلى. DEVD-AMC يمكن الاستعاضة عن ركائز أخرى لقياس نشاط caspases أخرى.

المقدمة

Caspases أو البروتياز الموجه اسبارتاتي سيستين التي تعتمد هي عائلة من الإنزيمات التي تشارك في مختلف العمليات التي التوازن 1. Caspases يمكن تصنيفها وفقا لدورهم في موت الخلايا المبرمج أو التهاب. ويشارك كاسباس 1، -4، -5 و-12 في التهاب في حين أن أولئك الذين يعملون في الخلايا يمكن أن يكون شبه تصنف على أنها caspases البادئ (كاسباس 8 و -9) وcaspases الجلاد (كاسباس 3، -6 -7 و ).

Caspases تلعب أدوارا مهمة في العديد من الأمراض، لا سيما في الاضطرابات التي موت الخلايا المبرمج يمكن أن يكون مبالغا فيه، كما لوحظ بعد احتشاء عضلة القلب (MI) أو نقص التروية الدماغية.

في نموذج الفئران من متلازمة ما بعد MI المستخدمة في المختبر، وثبت أن يتم تنشيط كاسباس 3 ليس فقط في عضلة القلب 2 ولكن أيضا في الجهاز الحوفي الذي تورط في السيطرة على المزاج والعواطف 3-6. وينظر أيضا أن يتم تنشيط كاسباس 3 في مناطق مختلفةمن الجهاز الحوفي، مثل اللوزة وقرن آمون، وهذا التنشيط قمم حوالي 3 أيام بعد إهانة الدماغية 4. ومن المثير للاهتمام، يرتبط كاسباس 3 النشاط مع مرحلة ما بعد MI الإعاقات السلوكية، والتوهين من خلال التدخلات الدوائية والغذائية يقلل من هذه الإصابات، مما يشير إلى احتمال وجود صلة بين كاسباس 3 وبعد MI الاكتئاب 7-12.

ويمكن قياس كاسباس 3 التنشيط من خلال تقنيات مختلفة. النشاف الغربي أيقن خصائص الأنزيمية للcaspases ويمكن الكشف عن الانزيمات النشطة فضلا عن أشكال المؤيدة للانزيم بهم. النشاف الغربي، ومع ذلك، هو شبه الكمي، ويمكن أن تضيع الاختلافات الصغيرة من خلال إشارة ضعيفة إلى الضوضاء نسب 13. ويستند أسلوب أفضل على الانقسام ركيزة (DEVD-AMC) من خلال كاسباس 3 التي تطلق مجمع الفلورة ويمكن أن يقاس spectrofluorometry. كاسباس 3 التنشيط هو علامة موثوقة من موت الخلايا المبرمج. قياس موت الخلايا المبرمج كاليفورنيان يكون غير مستقر بسبب النافذة وقت حدوثها قصير، والخلايا المجاورة يمكن أن phagocytize الهيئات أفكارك أو خلايا 14. موت الخلايا المبرمج يمكن تأكيد مزيدا من التقنيات الأخرى، مثل محطة deoxynucleotidyl ترانسفيراز وسم نهاية dUTP نيك (النفق) مقايسة، الذي يكشف تجزئة DNA الناتجة من أجهزة الطرد المركزي أفكارك الإشارات 6، أو نسبة من البروتينات الموالية / المضادة للأفكارك، مثل باكس / Bcl2 6.

البروتوكول

يتم التعامل مع الحيوانات في الامتثال للوائح لجنة رعاية الحيوان المحلية، وفقا للمبادئ التوجيهية للمجلس الكندي للرعاية الحيوان. ويعيش الفئران بشكل فردي تحت ظروف ثابتة (درجة حرارة 21-22 درجة مئوية والرطوبة من 40-50٪)، بما في ذلك دورة الظلام ضوء 12 ساعة، ابتداء من الساعة 08:00. الكريات تشاو وماء الصنبور هي بالمال وبالشهرة أيضا الإعلانية المتاحة في كل مراحل الدراسة. يسمح فترة التأقلم من 3 أيام بعد الولادة من قبل المورد قبل التجربة. ذكور فئران سبراج داولي يتراوح وزنها بين 300-800 جم وقد استخدمت بشكل روتيني مع هذا البروتوكول.

1. MI جراحة

  1. لحث التخدير مع الحقن داخل الصفاق الكيتامين 60 ملغ / كغ وزيلازين 10 ملغ / كغ. تأكيد التخدير المناسبة التي كتبها غياب رد الفعل عندما يتم مقروص الكفوف.
  2. يحلق موقع الجراحية. أنبوبا الفئران مع القصبة الهوائية أنابيب: القسطرة (16G 1.77 بوصة) ووضع الحيوان في موقف استلقاء الجانبي. وضع الحيوانات على وسادة التدفئة للحفاظ على درجة حرارة حوالي 37 درجة مئوية. توصيل أنابيب القصبة الهوائية لالأيزوفلورين 2٪.
  3. إعداد موقع الجراحية مع غلوكونات الكلورهيكسيدين وايزوبروبيل. أثناء الجراحة، واستخدام قفازات معقمة وأدوات معقمة. تطبيق مرهم للعين لكلتا العينين لمنع جفاف بينما تحت التخدير. وضع حقل معقمة على الحيوان والصكوك في مجال معقم آخر المقبل للحيوان.
  4. شق الجلد مع شفرة مشرط رقم 10. تقشر الأنسجة العضلية مع المشبك لوقف نزيف الدم. وضع الحيوان في موقف استلقاء بطني. فتح جدار الصدر مع المشبك وموقف لوقف نزيف الدم في الصدر ضام. فتح التامور مع المشبك لوقف نزيف الدم.
  5. لإنتاج التاجية الانسداد، حلقة 360 مم مدى 4-0 خياطة الحرير حول الشريان التاجي تنازلي، مرورا نسيج عضلة القلب متجاورة. إدراج كلا طرفي الخيط الحرير إلى 14G، 1.25 سم أنبوب بلاستيكي طويل.
  6. سحب طرفي الخيط الحرير والقيحح أنبوب انخفض مقابل الشريان لتسد به، لمدة 40 دقيقة. انسداد آمن من خلال تحامل على أنبوب بلاستيكي مع المشبك لوقف نزيف الدم.
  7. بعد 40 دقيقة، والإفراج عن انسداد طريق الإفراج عن المشبك لوقف نزيف الدم، تليها إزالة الأنبوب والحرير مرنة خياطة.
    ملاحظة: الفئران السيطرة الشام الخضوع لنفس الإجراء الجراحي ناقص انسداد الشريان التاجي.
  8. قبل أن يغلق جدار الصدر، ووضع قسطرة مرنة (18G، 4.5 سم) من خلال التجويف الصدري لسحب الهواء من الصدر مع حقنة 5 مل لمنع استرواح الصدر.
  9. انهيار الصدر تجويف مع 2-0 خياطة، غرزة العضلات مع 4-0 خياطة الحرير والجلد مع 3-0 خياطة الحرير.
  10. قبل أن يغلق عند نقطة الجلد الماضية، رسم مرة أخرى الهواء من الصدر مع 5 مل حقنة عن طريق القسطرة وضعت سابقا في تجويف الصدر.
  11. خياطة آخر نقطة الجلد. توقف التهوية الأيزوفلورين.
  12. مراقبة الصحوة الفئران. لا تترك حيوان غير المراقب حتى أنها ريجيند الوعي الكافي للحفاظ على الاستلقاء القصية.
  13. علاج الفئران كل ساعة 8 لمدة 24 ساعة مع مسكن (البوبرينورفين، 0.05 ملغ / كغ الملكية الفكرية) ومع مضاد حيوي (جرعة واحدة من duplocillin، 0.2 ملغم / كغم IP).
  14. بعد الجراحة، الفئران منزل على حدة حتى وقت التضحية، أي 3 أيام بعد MI.
  15. يتم التعبير عن حجم احتشاء، وذلك أساسا نخر، حيث أن نسبة الأنسجة محتشية في المنطقة للخطر من البطين الأيسر. هذا يمكن قياسها باستخدام triphenyltetrazolium تلوين 11.

2. اللوزة عزل

  1. وضع رئيس الحيوان لأول مرة في حقيبة على شكل مخروط، مع أنفها جاحظ من نهاية فتحة ضيقة. الفئران آمن لتجنب أي حركة. وضع رأسه على نحو ملائم على المقصلة، بين شفرات مقص. قطع رأس الحيوان.
  2. أبقى مكان رئيس فأر في طبق على الثلج المجروش. تنفيذ كافة الإجراءات لعزل الأنسجة على الثلج المجروش (4 درجات مئوية).
  3. قطع كورونا مفتوحةULL مع مقص، وفصل بعناية الأغماد العظام مع رينجرز العظام عن طريق سحب وتجنب تشويه الأنسجة تحتها.
  4. ضع شفرة مسطحة من ملعقة بين الجزء السفلي من الجمجمة والسطح البطني الخلفي من الدماغ وفصل بعناية الدماغ من الجمجمة عن طريق دفع بلطف نصل إلى الأمام على طول الجزء السفلي من الجمجمة حتى الدماغ يمكن رفع ببطء للخروج من الجمجمة. تجاهل الجمجمة.
  5. وضع الدماغ على السطح الظهري لها. تحديد ما تحت المهاد (هيكل أمام المخيخ) وقطع الدماغ coronally أمام نهايته الأمامية والخلفية وراء نهاية لها. تجاهل الأمامي والخلفي أجزاء من الدماغ إن لم يكن هناك حاجة لاستخدامات أخرى.
  6. تصور amygdalas شكل كرات صغيرة تحت الفص الصدغي، على المستوى الثنائي، بجوار منطقة ما تحت المهاد.
  7. الوجه شقة في المخ في نهاية الأمامية لها، السطح الظهري بعيدا عن المجرب.
  8. تبدأ مع الجانب الأيسر أو الأيمن من الدماغ. فصل نصفيالمجالات وثم القشرة من اللوزة متجاورة. قطع الطريق حوالي 8 ملم من هذه القشرة فضفاضة للسماح عزل اللوزة. قطع اللوزة مع مشرط.
  9. عزل جزء من basolateral اللوزة من جانبها centromedial عن طريق قطع على طول الدرز المظلمة التي تدير عبرها، نصف ونصف تقريبا. هذا الهيكل ليس دائما يسهل التعرف عليها.
  10. وضع subparts اللوزة في قارورة حددت منفصلة والحفاظ على الثلج المجروش.
  11. إجراء تشريح تكرار مع نصف الكرة الأرضية الآخر.
  12. تزج قارورة في النيتروجين السائل لمدة 1 دقيقة. الحفاظ على قارورة في الثلاجة -80 درجة مئوية لحين الحاجة إليها.

3. كاسباس 3 النشاط

  1. إعداد العازلة تحلل مع 0.32 M من السكروز، 1٪ تريتون-X-100، 10 ملي تريس، حمض الهيدروكلوريك، ودرجة الحموضة 8، 5 ملي من ثنائي أمين الإيثيلين رباعي حمض الخل، 2 ملم من dithiothreitol، 1 ملم من phenylmethylsulfonyl الفلورايد، 10 ميكروغرام / ميكرولتر من leupeptin ، 10 ميكروغرام / ميكرولتر من pepstatin A و 10 ميكروغرام / ميكرولتر من أبروتينين.
  2. إضافة 150 ميكرولتر من تحلل العازلة على كل عينة (5-10 ملغ). الحفاظ على الجليد. يصوتن كل عينة على الجليد لمدة 5 ثانية في كثافة القصوى (40 W). احتضان الأنسجة في تحلل العازلة على الجليد لمدة 30 دقيقة. دوامة كل عينة لمدة 5 دقائق.
  3. أداء دورات 3 تجميد / الذوبان بوضع عينات بالتناوب في النيتروجين السائل وعلى لوحة التدفئة حراريا التي تسيطر عليها وضعت في 37 ° C. الأنسجة أجهزة الطرد المركزي في 13000 ز (4 ° C) لمدة 10 دقيقة. إزالة بعناية طاف ونضع في أنبوب على الجليد.
  4. إعداد تركيزات البروتين القياسية بين 0 و 10 ميكروغرام / مل مع ألبومين المصل البقري. إعداد الفراغات مع العازلة فقط.
  5. إضافة 200 ميكرولتر من برادفورد كاشف لكل معيار. قراءة مستوى في 595 نانومتر. لمستويات البروتين، إضافة 5 ميكرولتر من عينة طاف إلى 795 ميكرولتر من الماء المقطر و 200 ميكرولتر من برادفورد كاشف. قراءة كل عينة في 595 نانومتر وقياس البروتين مع منحنى القياسية.
  6. إعداد رد فعل العازلة مع 50 ملي تريس، حمض الهيدروكلوريك، ودرجة الحموضة 7، 5 ملم من MgCl 2 </ دون>، 1 ملم من جلايكول الإثيلين حمض tetraacetic، 0.1٪ من 3 cholamidopropyl) dimethylammonio] -1-propanesulfonate و1 ملم من dithiothreitol.
  7. إضافة 25 ميكروغرام من البروتين لرد فعل العازلة وكاسباس 3 ركائز للحصول على عينات رد الفعل الإيجابية والسلبية. للحصول على عينات سلبية، إضافة العازلة رد فعل، 25 ميكروغرام من البروتين، 0.4 ميكرولتر من ايه سي DEVD-CHO 800 ميكرومتر و 0.8 ميكرولتر من ايه سي DEVD-AMC 10 ملم. للحصول على عينات إيجابية، إضافة 25 ميكروغرام من البروتين لرد فعل العازلة و 0.8 ميكرولتر من ايه سي DEVD-AMC 10 ملم. معالجة جميع العينات سلبية وإيجابية في ثلاث نسخ. أكمل الحجم النهائي من كل عينة تصل إلى 200 ميكرولتر بإضافة رد فعل العازلة.
  8. إنتاج ضوابط السلبية بإضافة 188.7 ميكرولتر من رد فعل العازلة إلى 0.5 ميكرولتر من ايه سي DEVD-CHO 800 ميكرومتر، 0.8 ميكرولتر ايه سي DEVD-AMC 10 ملم و 10 ميكرولتر من تحلل العازلة. لالضوابط الإيجابية، إضافة 189.2 ميكرولتر من رد فعل العازلة، 0.8 ميكرولتر من ايه سي DEVD-AMC 10 ملم و 10 ميكرولتر من تحلل العازلة.
  9. احتضان العينات والتحكم في الظلام لمدة 3 ساعة على 37 درجة مئوية.
  10. وقف رد فعل مع 600 الجلايسين ميكرولتر 0.4 M وهيدروكسيد الصوديوم 0.4 M (الرقم الهيدروجيني 10) في كل عينة والسيطرة عليها.
  11. تحديد مضان من قبل spectrofluorometry في الطول الموجي الإثارة من 365 نانومتر الطول الموجي وانبعاث 465 نانومتر. إضافة 2 مل من الماء المقطر إلى رد فعل في الزجاج كفيت. قراءة الضوابط وعينات لمدة 10 ثانية مع 1 نقطة في كل ثانية.
  12. تحديد نشاط معين في كل عينة: ((الإسفار العينات السلبية ناقص مضان من العينات الإيجابية) س حجم 2.8 مل) مقسوما على (الوقت من الحضانة 3 ساعة س كمية من البروتين 25 ملغ).

النتائج

تم عزل اللوزة في 8 صورية (السيطرة) و 8 الفئران MI بعد ثلاثة أيام من تحريض على بروتوكول نقص التروية / ضخه. وقد تم قياس كاسباس 3 النشاط في هذا النسيج باستخدام تألقي التي يمكن المشقوق من قبل كاسباس 3 النشطة والكشف عنها من قبل spectrofluorometry. أجريت القياسات الإيجابية والسلبية (انظر الخطوات 3.11، 3.12 و 3.16) في ثلاث نسخ وقياسها خلال 10 ثانية، مع 1 نقطة في كل ثانية. تم حساب الفروق بين الضوابط الإيجابية والسلبية وتم تعيين متوسط ​​الفروق لجميع الأنسجة صورية المنجزة خلال هذه التجربة على 100٪. تم تحجيمها النتائج من الفئران MI وفقا لهذا المرجع ويوضح الشكل 1 النتائج النهائية: أنه يدل على أعلى نشاط ملحوظ في الفئران MI مقارنة صورية (P <0.05).

figure-results-1
الشكل 1. كاسباس 3النشاط في اللوزة الفئران MI، كنسبة مئوية من متوسط ​​النشاط في الضوابط صورية، لتعيين 100٪ (8 فئران لكل مجموعة). * تشير كبيرا الاختلاف بين المجموعات (p <0.05). يتم التعبير عن البيانات كما يعني ± SEM.

المناقشة

تجربتنا مع هذا البروتوكول على مدى السنوات ال 10 الماضية أدت إلى تحديد القضايا المنهجية حرجة. أولا، تشريح الدماغ السريع في طبق بيتري على الثلج المجروش مهم للحفاظ على جودة الإعداد. ثانيا، يجب أن تتحقق أن صوتنة الأنسجة أقصر لاللوزة الدماغية مقارنة مع أنواع أخرى من الأنسجة، مثل القلب (10 ثانية) أو الكلى (20 ثانية). ثالثا، يجب توخي الحذر الشديد لخلط بعناية الركيزة قبل إضافتها إلى العينات. واجهنا إشارات متباينة عندما كان تسلسل خلط غير كافية. رابعا، ينبغي أن يكون هناك فقاعات موجودة في الخلية الكوارتز عند قراءة العينات. خلاف ذلك، يمكن أن تتغير الإشارة.

نحن إجراء تغيير في السنوات القليلة الماضية لزيادة استنساخ النتائج: زيادة حجم الركيزة لتجنب حجم أقل من 1 ميكرولتر. ومع ذلك، قد تحدث اختلافات صغيرة بين المقايسات المتعاقبة، وينبغي أن تستخدم ما لا يقل عن 3 عينات التحكم لتحكم عن الاختلافات. وبلغ متوسط ​​التدابير مضان من هذه الضوابط ويتم تعيين الوسيط عند 100٪. يتم تحويل التدابير مضان في عينات تجريبية في المئة من العينات السيطرة.

قيود آخر من التقنية هو وأنه ليس هناك سوى جزء من نسيج يستخدم، وبالتالي، يمكن الاستهانة كاسباس 3 النشاط. في الواقع، النافذة وقت موت الخلايا المبرمج قصيرة في أي خلية معينة، ويمكن أن تضيع على الرغم من أنه يحدث في المناطق المجاورة في وقت أخذ العينات 1،4،15. العكس هو الممكن أيضا: الخلايا يمكن أن تكون مكثفة وخاصة في أجزاء من الأنسجة، مما أدى إلى المبالغة في تقدير كاسباس 3 النشاط. من المستحسن استخدام الأنسجة المتبقية (اللوزة) لتقنيات تكميلية، مثل فحوصات TUNEL أو نسبة باكس / Bcl2 (انظر المقدمة).

Spectrofluorometry اثنين على الأقل من المزايا أكثر من النشاف الغربي. أولا، فإنه يقوم مباشرة البيانات الكمية. ثانيا، أنه يقيس الأنزيمية لctivity نفسها بدلا من البروتين أو RNA التعبير، والتي قد تكون غير ذات صلة، وأنه من المعروف أن بروتين تعبير يمكن زيادة دون أي تغيير في النشاط الأنزيمي. وعلاوة على ذلك، spectrofluorometry لا يمكن أن يؤديها على الأنسجة الأخرى أو مع مختلف أنواع الحيوانات ويمكن تعديلها لفرعية كاسباس أخرى، مع ركائز مختلفة، بحيث مقارنات آمنة ويمكن إجراء.

في الختام، يوضح هذا المستند استخدام spectrofluorometry لقياس كاسباس 3 النشاط في اللوزة، وتوفير الأدلة يحدث أن موت الخلايا المبرمج في هذه المنطقة من الجهاز الحوفي بعد 3 أيام MI.

الإفصاحات

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

شكر وتقدير

. وأيد هذا العمل من خلال منحة من العلوم الطبيعية والهندسة مجلس البحوث كندا كيم جيلبرت يحمل studentship من فون للبحوث كيبيك - سانتيه.

المواد

أداة تقنية الصناعي
قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الفوتون لمقياس الطيف(الآن Horiba)Ratiomaster M-40مع DeltaRAM   الوصول العشوائي أحادي اللون 
جهاز التنفسهارفارد683تهوية حيوانية
صغيرة زجاج زجاجيخلية دقة NSG3G10زجاج بصري (340-2,500 نانومتر) مسار 10 مم
SonicatorCole Parmer4710   سلسلة
مطياففاريانكاري 50 بيو

المراجع

  1. Denault, J. B., Salvesen, G. S. Caspases: keys in the ignition of cell death. Chemical Reviews. 102, 4489-4500 (2002).
  2. Boucher, M., et al. Post-ischemic cardioprotection by A2A adenosine receptors: dependent of phosphatidylinositol 3-kinase pathway. Journal of Cardiovascular Pharmacology. 43, 416-422 (2004).
  3. Kaloustian, S., et al. Celecoxib after the onset of reperfusion reduces apoptosis in the amygdala. Apoptosis. 12, 1945-1951 (2007).
  4. Kaloustian, S., et al. Apoptosis time course in the limbic system after myocardial infarction in the rat. Brain Research. 1216, 87-91 (2008).
  5. Rousseau, G., Bah, T. M., Godbout, R. Chapter 19, Post-Myocardial Infarction Depression. Novel Strategies in Ischemic Heart Disease . Lakshmanadoss, U. , 333-362 (2012).
  6. Wann, B. P., et al. Apoptosis detected in the amygdala following myocardial infarction in the rat. Biological Psychiatry. 59, 430-433 (2006).
  7. Arseneault-Breard, J., et al. Combination of Lactobacillus helveticus R0052 and Bifidobacterium longum R0175 reduces post-myocardial infarction depression symptoms and restores intestinal permeability in a rat model. British Journal of Nutrition. 107, 1793-1799 (2012).
  8. Bah, T. M., et al. Escitalopram reduces circulating pro-inflammatory cytokines and improves depressive behavior without affecting sleep in a rat model of post-cardiac infarct depression. Behavioural Brain Research. 225, 243-251 (2011).
  9. Bah, T. M., Kaloustian, S., Rousseau, G., Godbout, R. Pretreatment with pentoxifylline has antidepressant-like effects in a rat model of acute myocardial infarction. Behavioural Pharmacology. 22, 779-784 (2011).
  10. Gilbert, K., et al. Attenuation of post-myocardial infarction depression in rats by n-3 fatty acids or probiotics starting after the onset of reperfusion. British Journal of Nutrition. 109, 50-56 (2013).
  11. Gilbert, K., Bernier, J., Godbout, R., Rousseau, G. Resolvin D1, a metabolite of omega-3 polyunsaturated fatty acid, decreases post-myocardial infarct depression. Marine Drugs. 12, 5396-5407 (2014).
  12. Wann, B. P., et al. Behavioural signs of depression and apoptosis in the limbic system following myocardial infarction: effects of sertraline. Journal of Psychopharmacology. 23, Oxford, England. 451-459 (2009).
  13. Gorr, T. A., Vogel, J. Western blotting re-visited: critical perusal of under-appreciated technical issues. Proteomics: Clinical Applications. , (2015).
  14. McKernan, D. P., Dinan, T. G., Cryan, J. F. 'Killing the blues': a role for cellular suicide (apoptosis) in depression and the antidepressant response. Progress in Neurobiology. 88, 246-263 (2009).
  15. Green, D. R. Apoptotic pathways: paper wraps stone blunts scissors. Cell. 102, 1-4 (2000).

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

DEVD AMC
كاسباس 3 النشاط في الفئران اللوزة تقاس Spectrofluorometry بعد احتشاء عضلة القلب
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.