مقالة منهجية

إعداد Thermoresponsive ذات البنية النانومترية السطوح للهندسة الأنسجة

7.9K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/53465

⸱

مارس 1, 2016

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Physics, Tokyo University of Science, 2Institute of Advanced Biomedical Engineering and Science, Tokyo Women's Medical University

في هذه المقالة

ملخص

تم تصنيع أسطح الجزر البحرية ذات الحجم النانوي المكونة من بوليمرات جماعية مستجيبة للحرارة بطريقة Langmuir-Schaefer للتحكم في التصاق الخلايا التلقائية وانفصالها. تم تصور كل من تحضير السطح والتصاق وانفصال الخلايا على السطح.

الملخص

< p class = 'jove_content'> تم تصنيع الأسطح الثابتة المستجيبة للحرارة (N-isopropylacrylamide) (PIPAAm) للتحكم في التصاق الخلايا وانفصالها بطريقة Langmuir-Schaefer. تم تصنيع البوليمرات المشتركة للكتلة البرمائية المكونة من البوليسترين و PIPAAm (St-IPAAms) عن طريق البلمرة الجذرية لنقل سلسلة الإضافة والتجزئة القابلة للانعكاس (RAFT). تم إسقاط محلول الكلوروفورم من جزيئات St-IPAAm برفق في جهاز حوض Langmuir ، وتم تحريك كلا الحواجز من الجهاز أفقيا لضغط الفيلم لتنظيم كثافته. بعد ذلك ، تم نقل فيلم St-IPAAm Langmuir أفقيا إلى ركيزة زجاجية معدلة بالماء بواسطة جهاز مثبت على السطح. كشفت صور الفحص المجهري للقوة الذرية بوضوح عن هياكل جزر بحرية نانوية على السطح. تم تعديل قوة ومعدل وجودة التصاق الخلية وانفصالها على السطح المحضر من خلال التغيرات في درجة الحرارة عبر نطاق درجة حرارة المحلول الحرج الأدنى لجزيئات PIPAAm. بالإضافة إلى ذلك ، تم استرداد بنية خلية ثنائية الأبعاد (ورقة الخلية) بنجاح على الأسطح المحسنة. قد تكون أسطح PIPAAm الفريدة هذه مفيدة للتحكم في قوة التصاق الخلايا وانفصالها.

المقدمة

وقد جذبت الأسطح ذات البنية النانومترية في الآونة الأخيرة اهتماما كبيرا نظرا لمختلف تطبيقاتها المحتملة، بما في ذلك الزخرفة، زراعة الخلايا، والتنظيف، وتحويل السطح. على سبيل المثال، الأسطح superhydrophobic مستوحاة من البنية النانوية لأوراق اللوتس والأسطح استجابة أخرى قادرة على الاستجابة للمؤثرات الخارجية 1-4.

الفيلم انجميور هي واحدة من الطلاء البوليمر الأكثر دراسة على نطاق واسع. يتم تشكيل فيلم انجميور من خلال إسقاط جزيئات محبة للجهتين على واجهة بين الهواء والماء 5-8. الفيلم يمكن بعد ذلك نقل على سطح صلب عن طريق الامتزاز الفيزيائي أو الكيميائي، والتشكل الجزيئي على سطح صلب يمكن السيطرة عليها باستخدام وسائل نقل الرأسي والأفقي 9-12. كثافة الفيلم انجميور يمكن أن ينظم على وجه التحديد عن طريق ضغط واجهة بين الهواء والماء. في الآونة الأخيرة، وقد أثبتت هذه الطريقة فعالة أيضا لافتعال nanoscaled متطوره البحر جزيرةوفاق من خلال الاستفادة من بوليمرات كتلة محبة للجهتين. ويفترض أن النانو تتكون من مجموعة أساسية من شرائح مسعور وقذيفة من شرائح ماء 13-17. وبالإضافة إلى ذلك، فقد تم ضبط عدد من النانو على سطح عن طريق التحكم في المساحة لكل جزيء (A م) من البوليمرات كتلة في الواجهة.

فقد ركزنا على الأصل، فريدة من نوعها نهج هندسة الأنسجة خالية من سقالة والهندسة ورقة خلية، وذلك باستخدام سطح ثقافة تستجيب للحرارة. وقد تم تطبيق هذه التكنولوجيا المتقدمة لعلاجات التجدد لمختلف الأجهزة 18. كانت ملفقة سطح ثقافة تستجيب للحرارة عن طريق تطعيم بولي (N -isopropylacrylamide) (PIPAAm)، وهو جزيء استجابة درجات الحرارة، على سطح 19-27. PIPAAm وبوليمرات المعرض في درجة حرارة أقل حل الحرجة (LCST) في الأوساط المائية في درجات حرارة قريبة من 32 درجة مئوية. كما عرضت سطح ثقافة alternati استجابة درجات الحرارة على بين للا مائية وhydrophilicity. عند 37 درجة مئوية، وأصبح سطح المطعمة PIPAAm-مسعور، والخلايا تعلق بسهولة وانتشرت على سطح فضلا عن البوليسترين زراعة الأنسجة التقليدية. عندما تم تخفيض درجة الحرارة إلى 20 درجة مئوية، وأصبح سطح ماء، وخلايا منفصلة بشكل عفوي من السطح. لذلك، يمكن أن تحصد خلايا متكدسة مثقف على السطح عبارة عن ورقة سليمة عن طريق تغيير درجة الحرارة. تم عرض هذه الخصائص التصاق الخلايا ومفرزة أيضا سطح ملفقة من قبل طلاء فيلم انجميور للتظاهر مختبر 26 و 27. كانت ملفقة فيلم انجميور من بوليمرات كتلة تتكون من البوليسترين (P (القديس)) وPIPAAm (سانت IPAAm). الفيلم انجميور مع وم معينة يمكن نقلها أفقيا إلى الركيزة الزجاج تعديل hydrophobically. وبالإضافة إلى ذلك، تم تقييم التصاق الخلايا على والابتعاد عن سطح استعداد ردا على درجات الحرارة.

_content "> هنا، نحن تصف بروتوكولات لصنع فيلم انجميور النانوية المؤلفة من بوليمرات كتلة محبة للجهتين الحرارية استجابة على ركيزة الزجاج. لدينا وسيلة يمكن أن توفر تقنية تصنيع فعالة لnanofilms العضوية في مختلف مجالات العلوم السطح ويمكن أن يسهل أكثر السيطرة الفعالة على التصاق الخلايا على ومفرزة عفوية من السطح.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. توليف Polystyrene- كتلة -poly (N -isopropylacrylamide) من خلال خطوتين عكسية إضافة-تجزئة سلسلة نقل (الطوافة) البلمرة الجذرية

  1. حل الستايرين (153.6 ميلي مول)، 4-cyano-4- (ethylsulfanylthiocarbonyl) حمض sulfanylpentanoic (ECT؛ 0.2 ملمول)، و4،4'-Azobis (حمض 4-cyanovaleric) (ACVA، 0.04 ملمول) في 40 مل من 1 4-ديوكسان. تجميد الحل في النيتروجين السائل تحت فراغ لمدة 15-20 دقيقة لإزالة الأنواع المتفاعلة وتدريجيا ذوبان الجليد في RT. تأكد من أن الحل هو إذابة تماما ويكرر هذا التجميد مضخة ذوبان الجليد التفريغ دورة ثلاث مرات.
  2. الحصول على البوليسترين (PST) (MW: 13،500) كعامل الطوافة الكلي عن طريق البلمرة عند 70 درجة مئوية لمدة 15 ساعة في حمام الزيت.
  3. راسب PST وكيل الطوافة الكلي مع 800 مل من الأثير، وجاف في الخلاء.
  4. حل IPAAm مونومر (4.32 ملمول)، PST وكيل الطوافة الكلي (0.022 ملمول)، وACVA (0.004 ملمول) في 4 مل من 1،4-ديوكسان.
  5. إزالةالأوكسجين في الحل عن طريق دورات التفريغ تجميد مضخة ذوبان الجليد كما ذكر في الخطوة 1.1.
  6. إجراء البلمرة عند 70 درجة مئوية لمدة 15 ساعة في حمام الزيت بعد التفريغ. الحصول على توليفها سانت IPAAm جزيء (MW: 32800) في نفس الطريقة كما في توقيت المحيط الهادي وكيل الطوافة الكلي.

2. إعداد Silanized مسعور تعديل ركائز الزجاج

  1. غسل ركائز الزجاج (24 ملم × 50 ملم) مع وجود فائض من الأسيتون والإيثانول ويصوتن لمدة 5 دقائق لإزالة الملوثات السطحية.
  2. تجفيف ركائز في الفرن على 65 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. ثم استخدام البلازما الأكسجين (400 W، 3 دقيقة) لتنشيط السطوح من ركائز في RT.
  3. تزج ركائز في التولوين التي تحتوي على 1٪ hexyltrimethoxysilane بين عشية وضحاها في RT لsilanize الركيزة.
  4. غسل ركائز silanized في التولوين وتزج في الأسيتون لمدة 30 دقيقة لإزالة عوامل غير المتفاعل.
  5. ركائز يصلب لمدة 2 ساعة على 110 درجة مئوية إلى شل بدقة الصورةوجهك.
  6. قطع ركائز silanized من قطع الزجاج إلى 25 ملم × 24 ملم لتناسب أطباق زراعة الخلايا (طبق حجم: φ35 مم).

3. إعداد انجميور أفلام والسطحية نقل السينمائي

  1. ضع أداة فيلم انجميور في مجلس الوزراء لمنع تراكم الغبار.
  2. غسل حوض انجميور (الحجم: 580 مم × 145 مم) والحواجز مع الماء المقطر والايثانول لإزالة الملوثات.
  3. تجفيف الحوض الصغير والحواجز عن طريق المسح بمنشفة lintless. ثم ملء الحوض مع حوالي 110 مل من الماء المقطر، ووضع حواجز على جانبي الحوض. لاحظ أن الماء المقطر ينبغي أن يضاف من دون إراقة في الخطوات التالية 3،5-3،13.
  4. تسخين Wilhelmy لوحة البلاتين (محيط: 39.24 ملم) لرصد التوتر السطحي مع الموقد الغازي حتى يتحول لوحة حمراء ثم يغسل بالماء المقطر لإزالة الملوثات. تعليق لوحة Wilhelmy على سلك المرفقةصك أرض الضغط قياس.
  5. صفر صك أرض الضغط قياس وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة. ضغط واجهة بين الهواء والماء في الحوض الصغير من قبل حواجز على جانبي الحوض الصغير حتى يصل إلى واجهة حوالي 50 سم 2 من دون أي قطرات من البوليمر.
  6. نضح الملوثات صغيرة حتى ضغط السطح ما يقرب من 0 م ن / م.
  7. إعادة وضع الحواجز على كلا الجانبين، وإضافة الماء المقطر لتعويض النقص من الماء المقطر من الخطوة 3.6.
  8. حل 5 ملغ من جزيء سانت IPAAm توليفها في 5 مل من محلول تطوير الكلوروفورم.
    ملاحظة: ثنائي كلورو ميثان أو يمكن أيضا التولوين أن تستخدم المذيبات.
  9. إسقاط بلطف 27 ميكرولتر من سانت IPAAm يذوب في الكلوروفورم على الحوض باستخدام محقنة مكروية أو micropipette.
  10. بعد انتظار لمدة 5 دقائق للسماح التبخر الكامل من كلوروفورم، نقل كل الحواجز أفقيا لضغط molecu سانت IPAAmلو في واجهة. الحفاظ على معدل ضغط من الحواجز عند 0.5 ملم / ثانية حتى المنطقة المستهدفة من 50 يتم التوصل سم 2.
    ملاحظة: معدل ضغط السريع يسبب عيوب في الفيلم انجميور.
  11. قياس ضغط سطح الأيسوثرم (π) -A م مع لوحة Wilhelmy البلاتين تعلق على صك أرض الضغط قياس ضغط أثناء وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.
  12. بعد أن بلغ حجم المنطقة المستهدفة، والحفاظ على السطح لمدة 5 دقائق للسماح للجزيئات سانت IPAAm للاسترخاء. الجزيئات لا تصل إلى التوازن مباشرة بعد ضغط.
  13. نقل الفيلم انجميور إلى الركيزة الزجاج تعديل hydrophobically باستخدام جهاز نقل لمدة 5 دقائق ليمتص بقوة الفيلم. إصلاح الركيزة الزجاج مسعور في نفس الوقت على الجهاز. وصل الجهاز إلى مرحلة التوافق والتحرك عموديا.
  14. رفع الركيزة أفقيا مع جهاز نقل وجافة لمدة 1 يوم في desiccatoص.

4. زراعة الخلايا وتحسين التصاق الخلية ومفرزة على سطح انجميور الفيلم المحول

  1. لإعداد تعليق خلية والثقافة البقري الشريان السباتي الخلايا البطانية (BAECs) لالتقاء الثلث عند 37 درجة مئوية في 5٪ CO 2 و 95٪ جوية على زراعة الأنسجة البوليسترين (برنامج التعاون الفني) مع Dulbecco لتعديل النسر متوسطة (DMEM) تحتوي على 10٪ الجنين مصل بقري (FBS) و 100 U / البنسلين مل.
  2. بعد الوصول إلى نقطة التقاء، علاج BAECs مع 3 مل من 0.25٪ التربسين-EDTA لمدة 3 دقائق عند 37 درجة مئوية في 5٪ CO 2 و 95٪ الجوية.
  3. تنشيط التربسين-EDTA بإضافة 10 مل من DMEM تحتوي على 10٪ FBS، وجمع تعليق خلية إلى 50 مل أنبوب مخروطي الشكل.
  4. أجهزة الطرد المركزي في 120 x ج لمدة 5 دقائق، ونضح طاف. إعادة تعليق الخلايا مع 10 مل من DMEM.
  5. وضع الأسطح سانت IPAAm تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية على مقاعد البدلاء النظيفة للتعقيم لمدة 5 دقائق.
  6. البذور وم استردLLS على سانت-IPAAm أسطح بتركيز 1.0 × 10 4 خلية / سم 2 تحصى من قبل عدادة الكريات يمكن التخلص منها ومراقبة الخلايا على الأسطح بواسطة المجهر مجهزة حاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ CO 2 و 95٪ الهواء.
    ملاحظة: تعقيم الأسطح سانت IPAAm بواسطة الأشعة فوق البنفسجية مجهزة على مقاعد البدلاء النظيفة.
  7. الصور سجل الوقت الفاصل بين BAECs تمسكا ما يقرب من 24.5 ساعة على 37 درجة مئوية عن طريق المجهر المرحلة على النقيض مع التكبير 10x. بعد BAEC التصاق، سجل مفرزة من BAECs من سطح سانت IPAAm عند 20 درجة مئوية لمدة ما يقرب من 3.5 ساعة.

5. خلية ورقة تلفيق على السطوح نقل الفيلم انجميور

  1. BAECs الثقافة تستخدم بنفس الطريقة الموضحة في القسم 4.
  2. البذور ما مجموعه 1.0 × 10 5 خلية / سم 2 على الأسطح سانت IPAAm واحتضان لمدة 3 أيام في 37 درجة مئوية في 5٪ CO 2. متموجة BAECs فصل عفويا عند 20 درجة مئوية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

تم توليفها بوليمرات كتلة تتكون من البوليسترين والبولي (N -isopropylacrylamide) (سانت IPAAms) مع الأوزان الجزيئية الخاصة التي الطوافة البلمرة الراديكالية. وقد أعد العلاج بالصدمات الكهربائية كعامل سلسلة نقل كما هو موضح في معاذ وآخرون. 28. تم توليفها جزيئين سانت IPAAm من أطوال مختلفة في سلسلة PIPAAm، وتميزت البوليمرات كتلة التي حصلت عليها 1 H الرنين النووي المغناطيسي (NMR) واللوني هلام تخلل (المؤتمر الشعبي العام...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

كانت ملفقة سطح تستجيب للحرارة من خلال طريقة انجميور-شايفر، وكان الأمثل لخصائص سطح لالتصاق الخلية / انفصال ورقة خلية الانتعاش. عند استخدام هذه الطريقة لتصنيع الأسطح، عدة خطوات حاسمة. في التركيب الجزيئي للجزيئات سانت IPAAm له تأثير كبير على البنية السطحية واستقرار السطح، وبالتالي، على التصاق الخلايا وانفصال. على وجه الخصوص، يجب أن يكون جزيئات سانت IPAAm توزيع الوزن الجزيئي الضيق. في أسلوبنا، وتوليفها جزيئين سانت IPAAm ذات أطوال مختلفة في سلسلة PIPAAm بواسطة الطوافة البلمرة، مما يتيح...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ساهم جميع المؤلفين بالتساوي في كتابة المخطوطة ووافقوا على النسخة النهائية. يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.

شكر وتقدير

تم دعم هذه الدراسة ماليا من قبل مشروع إنشاء مراكز الابتكار لبرنامج البحوث المتقدمة متعددة التخصصات لتطوير أنظمة الابتكار "مركز هندسة أنسجة الصفائح الخلوية (CSTEC)" التابع لوزارة التعليم والثقافة والرياضة والعلوم والتكنولوجيا (MEXT) ، اليابان.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
N< / em>-isopropylacrylamideKohjinلا يوجد رقم كتالوج
Azobis (4-cyanovaleric acid)Wako Pure Chemicals016-19332
StyreneSigma-AldrichS4972
1،3،5-trioxaneSigma-AldrichT81108
1،4-DioxaneWako Pure Chemicals045-24491
DMEMSigma D6429
PBSNakarai11482-15
StreptomycinGIBCO BRL15140-163
PenicillinGIBCO BRL15140-122
Trypsin-EDTASigmaT4174
FBSJapan BioserumJBS-11501
BAECsScience Reserch Resources BankJCRB0099
غطاء نظاراتماتسونامي لصناعة الزجاجC024501
AFM NanoScope VVeeco
1< / SUP>H NMR INOVA 400Varian ، بالو ألتو
ATR / FT-IR NICOLET 6700Thermo Scientific
GPC HLC-8320GPCTosoh
TSKgel Super AW2500 ، AW3000 ، AW4000Tosoh
Langmuir-Blodgett Deposition Troughs KSV InstrumentsKN 2002KSV NIWA Midium الحوض الصغير
نيكون ECLIPSE TE2000-Uنيكون
Health

المراجع

  1. Bae, Y. H., Kwon, I. C., Pai, C. M., Kim, S. W. Controlled release of macromolecules from electrical and chemical stimuli-responsive hydrogels. Makromol. Chem., Macromol. Symp. 70-71 (1), 173-181 (1993).
  2. Fu, Q., et al. Reversible control of free energy and topography of nanostructured surfaces. J. Am. Chem. Soc. 126 (29), 8904-8905 (2004).
  3. Nykanen, A., et al. Phase behavior and temperature-responsive molecular filters based on self-assembly of polystyrene-block-poly(N-isopropylacrylamide)-block-polystyrene. Macromolecules. 40 (16), 5827-5834 (2007).
  4. Sun, T., et al. Reversible switching between superhydrophilicity and superhydrophobicity. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 43 (3), 357-360 (2004).
  5. Shuler, R. L., Zisman, W. A. A Study of the behavior of Polyoxyethylene at the air-water interface by wave damping and other methods. J. Phys. Chem. 74 (7), 1523-1534 (1970).
  6. Kawaguchi, M., Sauer, B. B., Yu, H. Polymeric monolayer dynamics at the air/water interface by surface light scattering. Macromolecules. 22 (4), 1735-1743 (1989).
  7. Saito, W., Kawaguchi, M., Kato, T., Imae, T. Spreading solvent and temperature effects on interfacial properties of Poly (N-isopropylacrylamide) films at the air-water interface. Langmuir. 7463 (11), 5947-5950 (1996).
  8. Jheng, K. T., Hsu, W. P. Molecular weight effect of PMMA on its miscibility with PS-b-PEO at the air/water interface. J. App. Polym. Sci. 125 (3), 1986-1992 (2012).
  9. Biesalski, M. A., Knaebel, A., Tu, R., Tirrell, M. Cell adhesion on a polymerized peptide-amphiphile monolayer. Biomaterials. 27 (8), 1259-1269 (2006).
  10. Da Silva, A. M. P. S. G., Lopes, S. I. C., Brogueira, P., Prazeres, T. J. V., Beija, M., Martinho, J. M. G. Thermo-responsiveness of poly(N,N-diethylacrylamide) polymers at the air-water interface: The effect of a hydrophobic block. Journal of colloid interface sci. 327 (1), 129-137 (2008).
  11. Wang, S. Q., Zhu, Y. X. Facile method to prepare smooth and homogeneous polymer brush surfaces of varied brush thickness and grafting density. Langmuir. 25 (23), 13448-13455 (2009).
  12. Estillore, N. C., Park, J. Y., Advincula, R. C. Langmuir−Schaefer (LS) macroinitiator film control on the grafting of a thermosensitive polymer brush via surface initiated-ATRP. Macromolecules. 43 (16), 6588-6598 (2010).
  13. Seo, Y. S., et al. Nanowire and mesh conformations of diblock copolymer blends at the air/water interface. Nano Lett. 4 (3), 483-486 (2004).
  14. Lu, Q., Bazuin, C. G. Solvent-assisted formation of nanostrand networks from supramolecular diblock copolymer/surfactant complexes at the air/water interface. Nano lett. 5 (7), 1309-1314 (2005).
  15. Nagano, S., Matsushita, Y., Ohnuma, Y., Shinma, S., Seki, T. Formation of a highly ordered dot array of surface micelles of a block copolymer via liquid crystal-hybridized self-assembly. Langmuir. 22 (12), 5233-5236 (2006).
  16. Perepichka, I. I., Borozenko, K., Badia, A., Bazuin, C. G. Pressure-induced order transition in nanodot-forming diblock. J. Am. Chem. Soc. 133 (493), 19702-19705 (2011).
  17. Wang, X. L., Ma, X. Y., Zang, D. Y. Aggregation behavior of polystyrene-b-poly(acrylicacid) at the air-water interface. Soft Matter. 9 (2), 443-453 (2013).
  18. Yamato, M., Okano, T. Cell sheet engineering. Mater. Today. 7 (5), 42-47 (2004).
  19. Rollason, G., Daviest, J. E., Sefton, M. V. Preliminary report on cell culture on a thermally reversible copolymer. Biomaterials. 14 (2), 153-155 (1993).
  20. Park, Y. S., Ito, Y., Imanishi, Y. Permeation control through porous membranes immobilized with thermosensitive polymer. Langmuir. 14 (4), 910-914 (1998).
  21. Kwon, O. H., Kikuchi, A., Yamato, M., Okano, T. Accelerated cell sheet recovery by co-grafting of PEG with PIPAAm onto porous cell culture membranes. Biomaterials. 24 (7), 1223-1232 (2003).
  22. Kikuchi, A., Okano, T. Nanostructured designs of biomedical materials: applications of cell sheet engineering to functional regenerative tissues and organs. J. Control. Release. 101 (1-3), 69-84 (2005).
  23. Fukumori, K., et al. Characterization of ultra-thin temperature-responsive polymer layer and its polymer thickness dependency on cell attachment/detachment properties. Macromol. biosci. 10 (10), 1117-1129 (2010).
  24. Takahashi, H., Nakayama, M., Yamato, M., Okano, T. Controlled chain length and graft density of thermoresponsive polymer brushes for optimizing cell sheet harvest. Biomacromolecules. 11 (8), 1991-1999 (2010).
  25. Nakayama, M., Yamada, N., Kumashiro, Y., Kanazawa, H., Yamato, M., Okano, T. Thermoresponsive poly(N-isopropylacrylamide)-based block copolymer coating for optimizing cell sheet fabrication. Macromol. Biosci. 12 (6), 751-760 (2012).
  26. Sakuma, M., et al. Control of cell adhesion and detachment on Langmuir-Schaefer surface composed of dodecyl-terminated thermo-responsive polymers. J. Biomater. Sci., Polym. Ed. 25 (5), 431-443 (2014).
  27. Sakuma, M., et al. Thermoresponsive nanostructured surfaces generated by the Langmuir-Schaefer method are suitable for cell sheet fabrication. Biomacromolecules. 15 (11), 4160-4167 (2014).
  28. Moad, G., Chong, Y. K., Postma, A., Rizzardo, E., Thang, S. H. Advances in RAFT polymerization: the synthesis of polymers with defined end-groups. Polymer. 46 (19), 8458-8468 (2005).
  29. Nishida, K., et al. Corneal Reconstruction with Tissue-Engineered Cell Sheets Composed of Autologous Oral Mucosal Epithelium. N. Engl. J. Med. 351 (12), 1187-1196 (2004).
  30. Ohki, T., et al. Prevention of esophageal stricture after endoscopic submucosal dissection using tissue-engineered cell sheets. Gastroenterology. 143 (3), 582-588 (2012).
  31. Sawa, Y., et al. Tissue engineered myoblast sheets improved cardiac function sufficiently to discontinue LVAS in a patient with DCM: report of a case. Surg. Today. 42 (2), 181-184 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة