يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

نموذج الفئران من المعوية الإسكيمية-ضخه إصابة

20K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/53881

⸱

مايو 11, 2016

 ,  ,  ,  , 
1Trudeau Institute, 2Engelhardt Institute of Molecular Biology, 3Departments of Medicine and Infectious Diseases and Pathology, University of Florida

في هذه المقالة

ملخص

نحن هنا وصف الإجراء مفصل من الأمعاء نقص التروية ضخه في الفئران مما يؤدي إلى الإصابة استنساخه دون وفيات لتشجيع توحيد هذه التقنية عبر الميدان. ويمكن استخدام هذا النموذج من الأمعاء إصابة نقص التروية ضخه لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية للإصابة والتجدد.

الملخص

نقص تروية الأمعاء هو حالة تهدد الحياة المرتبطة مع مجموعة واسعة من الحالات الطبية بما في ذلك تصلب الشرايين والجلطة، انخفاض ضغط الدم، التهاب الأمعاء الناخر، زرع الأمعاء، والصدمات النفسية والالتهابات المزمنة. المعوية إصابة نقص التروية ضخه (الأشعة تحت الحمراء) هي نتيجة لنقص التروية المساريقي الحاد، والناجمة عن عدم كفاية تدفق الدم من خلال الأوعية المساريقي، مما أدى إلى تلف الأمعاء. يمكن ضخه نقص التروية التالية يزيد من تفاقم الضرر من الأمعاء. آليات إصابة الأشعة تحت الحمراء معقدة وغير مفهومة. ولذلك، نماذج حيوانية صغيرة تجريبية حاسمة لفهم الفيزيولوجيا المرضية لإصابة الأشعة تحت الحمراء وتطوير علاجات جديدة.

نحن هنا وصف نموذج الفأر من الإصابة الأشعة تحت الحمراء المعوية الحادة التي توفر اصابة استنساخه من الأمعاء الدقيقة دون وفيات. ويتحقق ذلك عن طريق إحداث نقص التروية في منطقة الدقاق القاصي قبل زمنيا occludinز الفروع الجانبية المحيطية والطرفية من الشريان المساريقي العلوي لمدة 60 دقيقة باستخدام مقاطع الاوعية الدموية الدقيقة. ضخه لمدة 1 ساعة، أو 2 ساعة بعد النتائج إصابة في إصابة استنساخه من الأمعاء فحص عن طريق التحليل النسيجي. الموقف الصحيح من لقطات الاوعية الدموية الدقيقة هو أمر حاسم لهذا الإجراء. وبالتالي يوفر مقطع الفيديو المرئي وصف تفصيلي خطوة بخطوة من هذه التقنية. ويمكن استخدام هذا النموذج من الإصابة الأشعة تحت الحمراء المعوية لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية للإصابة والتجدد.

المقدمة

الأمعاء حساس جدا لانقطاع تدفق الدم الذي يسبب نقص التروية والظهارية الضرر. ضخه بعد نقص التروية توفر إعادة الأوكسجين للأنسجة، ويمكن أن تزيد من تعزيز علم الأمراض. لذلك، يرتبط المعوية إصابة نقص التروية وضخه مع مجموعة واسعة من الأمراض، بما في ذلك التهاب الأمعاء الناخر، رفض المزروع في زرع الأمعاء الدقيقة، والمضاعفات من البطن جراحة الشريان الأبهر تمدد الأوعية الدموية، المجازة القلبية الرئوية، والتهاب 1،2 أمراض الأمعاء. المعوية الأشعة تحت الحمراء الإصابة، الجلطة المعوية خاصة الحاد، هو حالة تهدد الحياة مما أدى إلى معدلات الاعتلال والوفيات 3.

على الرغم من أن يساء فهمها، ويعتقد الأمعاء نقص التروية ضخه (IR) إصابة تترافق مع تغيرات في مجهريات الأمعاء وكذلك إنتاج أنواع الاكسجين التفاعلية والسيتوكينات الالتهابية وكيموكينات 1،4-6. وهذا يؤدي إلى تنشيط سواء فينيت والآليات المناعية التكيفية التي تعزز الالتهابات والأنسجة إصابة 1،7،8.

النماذج الحيوانية حاسمة لفهم آليات الإصابة الأشعة تحت الحمراء، كما أنها تسمح gain- سهلة والتجارب الجينية الخسارة من وظيفة. وقد وضعت عدة نماذج حيوانية من الأشعة تحت الحمراء التي تشمل انسداد الأوعية الدموية كاملة، وانخفاض التروية التدفق، ومجزأة انسداد الأوعية الدموية (تلخيصها في مراجعة شاملة جرت مؤخرا 9). نقص تروية الأمعاء الناجمة عن انسداد الأوعية الدموية كاملة من الشريان المساريقي (SMA) هو نموذج سهل ويشيع استخدامها من الأشعة تحت الحمراء في الحيوانات الكبيرة والقوارض 9-11. ومع ذلك، ومناطق مختلفة من الأمعاء لها وضعية مختلفة للإصابة. وبالإضافة إلى ذلك، ومجموعة متنوعة من التخدير، والمسكنات، وتقنيات انسداد الشريان، فضلا عن التضارب في مدة الإصابة الدماغية ونتيجة التعافي في درجات متفاوتة من الإصابة التباس فهمنا للبيولوجيا الأشعة تحت الحمراء عبر الى الدراسات متعددةالصورة. يوضح الجدول 1 هذه التناقضات في دراسات الأشعة تحت الحمراء الفئران. العائق الاكبر من استخدام مرات الدماغية أقصر (30-45 دقيقة) تستهدف نافذة الانتعاش التي تقوم عليها الخلافات تمييز بين الحالات والضوابط يمكن ملاحظتها. إصابة خفيفة لظهارة يمكن حل ساعة بعد ضخه، وبالتالي متخصصة قد تكون هناك حاجة المقاييس المرضية للعثور على الخلافات في الرد الظهارية. في المقابل، الضرر المفرط، كما رأينا من قبل 100 دقيقة من الإصابة الدماغية قد يؤدي إلى denudement كاملة من الظهارة، حيث رد لم يعد ممكنا، وزيادة معدل وفيات، والوقت الانتعاش. ولذلك، ونحن هنا وصف الإجراء مفصل من الأشعة تحت الحمراء المعوية في الفئران مما يؤدي إلى الإصابة استنساخه دون وفيات لتشجيع توحيد هذه التقنية عبر مجالنا. ويمكن استخدام هذا النموذج من الإصابة الأشعة تحت الحمراء المعوية لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية للإصابة والتجدد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

أجريت الدراسات على الحيوانات وفقا للمعهد الوطني للإرشادات الصحة وتمت الموافقة من قبل رعاية الحيوان المؤسسية واستخدام جنة معهد ترودو. واستخدمت الأسبوع 8-12 القديمة C57BL / 6 الفئران للدراسة.

1. التحضير للجراحة

  1. إعداد وتعقيم الأدوات الجراحية.
  2. إعداد نظام التخدير القائم على الأيزوفلورين مع مخروط الأنف، وسادة ساخنة. لا تجعل محموما على يقين سادة ساخنة (<39 درجة مئوية).
  3. تأكد من أن الأيزوفلورين الكسح الغاز اسطوانة يتم وضع بشكل صحيح لضمان منافذ العادم في الجزء السفلي من العلبة لا يتم حظر أو المغطي بأي شكل من الأشكال. وزن الغاز الكسح العلبة قبل الإجراء والوزن وثيقة على العلبة. تجاهل علبة عندما يتجاوز وزن علبة 50 غ من الوزن المتراكم (~ 12 ساعة).

2. التخدير

  1. تخدير الفأر مع 3٪ الأيزوفلورين في غرفة الاستقراء (1 لتر / دقيقةO 2).
    1. تقييم عمق التخدير عن طريق عدم القدرة على البقاء في وضع مستقيم، وفقدان حركة هادفة الطوعية، وفقدان المنعكس طرفة، استرخاء العضلات، وفقدان ردا على ارادي التحفيز (أخمص القدمين أو قرصة الذيل مع الضغط شركة).
    2. تقييم معدل التنفس ونمط من خلال مراقبة جدار الصدر وحركات البطن. تحت التخدير الأمثل، يجب أن يكون معدل التنفس ~ 55-65 نفسا في الدقيقة.
    3. إزالة الماوس من غرفة تحريض وبسرعة حلق منطقة البطن من الفأرة.
  2. لمنع جفاف القرنية، ووضع مرهم للعين لطيف في العينين.
  3. ضع الماوس على لوحة ساخنة وتوصيله عبر مخروط الأنف لنظام التخدير. يناسب التأكد من اللاتكس الأنف غشاء مخروط بحزم على رأسه من الفأرة وعدم وجود تسرب من الأيزوفلورين.
  4. تخفيض معدل الأيزوفلورين إلى 1.5٪، وحقن البوبرينورفين (0.1 ملغ / كلغ) والكيتامين (10 ملغ / كلغ) تحت الجلد لمنع الرياح حتى من الألم تتالي.
  5. مسح عشرالبريد الجلد من منطقة العملية مع مسحة القطن المعقم غارقة مع الحل الجراحي Betadine تليها 70٪ من الإيثانول.

3. جراحة

  1. جعل سم البطن خط منتصف 3-5 مع مقص التشغيل. منطقة العملية غطاء مع لوحة العقيمة غير ملتصقة مبللة بمحلول ملحي. عزل الأعور والدقاق وفضح الشريان المساريقي العلوي باستخدام قطعة قطن مبللة في محلول ملحي.
  2. لتسهيل كليب تطبيق، وجعل النكات صغيرة في مساريق المحيطة الشريان المساريقي العلوي باستخدام القزحية الجميلة scissors.To قيام بذلك، رفع بلطف الأمعاء مع ملقط خلع الملابس وقطع مساريق على كلا الجانبين من الشريان المساريقي العلوي في موقف كليب المطلوب (الشكل 1A). ثم، إضافة بضع قطرات من محلول ملحي معقم إلى منطقة موقف كليب المطلوبة قبل التقدم بطلب لقطات.
    ملاحظة: لإجراء الجراحة صورية، اتبع الإجراء الجراحي تصل إلى الخطوة 3.2. لا تنطبق مقاطع. بدلا من ذلك، والحفاظ على الأنسجة الرطبة التي كتبها s دافئ وأضافألين كما هو موضح في 3.6 لمدة 1 ساعة. بعد ذلك، انتقل إلى الخطوة 4.1،
  3. انسداد الفروع من الدرجة الأولى من الشريان المساريقي العلوي مع لقطات الاوعية الدموية الدقيقة (70 ز قوة) باستخدام مطبق مقطع لإنشاء منطقة 5-7 سم من الدقاق الدماغية المجاور لالأعور (الشكل 1B). على الرغم من أن موقف السفن محافظ، قد تكون هناك اختلافات طفيفة بين الفئران (انظر الأمثلة على الشكل 1). وبالتالي، 2 أو 3 مقاطع وعادة ما تطلب (انظر موقع لقطات على الشكل 1A، D، E، السهام السوداء).
    ملاحظة: استخدم مقاطع سفينة ذات جودة عالية. يمكن لقطات ارتفاع ضغط يتلف الاوعية ومنع تجديد في حين مقاطع الضغط المنخفض (<30 ز) قد لا تمنع تماما من تدفق الدم.
  4. منع تدفق الدم ضمانات من خلال الأمعاء باستخدام اثنين من لقطات الاوعية الدموية الدقيقة عبر الأوعية (40 ز قوة)، demarking المنطقة من الأمعاء الدماغية (الشكل 1). مطلوب انسداد الأوعية ضمانات لمنع تدفق الدم من الأوعية الدموية المجاورة (انظر موقع لقطات على الشكل 1A، D، E، السهام الخضراء).
  5. اختياري: إضافة محلول الهيبارين (6 USP وحدة / مل)، لمنع تخثر الدم. قطرة قطرة إضافة 0.5 مل من محلول الهيبارين إلى الأمعاء المعزولة.
  6. الرطب معقمة وسادة غير ملتصقة مناديل الحساسة بمحلول ملحي قبل تحسنت إلى 37 درجة مئوية، وتنطبق على منطقة العمليات الجراحية. تأكد من أن تقضي تبقى رطبة طوال فترة الإجراء.
  7. الحفاظ على نقص التروية لمدة 60 دقيقة باستخدام التخدير الأيزوفلورين 1-1.5٪ في جميع أنحاء. إذا تم تنفيذ الإجراء نقص التروية بشكل صحيح، فإن المنطقة الدماغية تتغير إلى اللون الأحمر النبيذ في اللون في حوالي 30 دقيقة. لاحظ أن الأوعية الدموية البعيدة إلى موقف كليب تتضخم خلال نقص التروية (الشكل 1، لوحات اليمين) مشيرا إلى انسداد ناجحة.
  8. تراقب عن كثب الماوس أثناء مرحلة نقص التروية. مواصلة تطبيق محلول ملحي لوحة غير ملتصقة تغطية الموقع لعملية جراحية.
  9. علامة حواف المنطقة الدماغية قبل pipetting 20 ميكرولتر من Gill`s 3 الهيماتوكسيلين على النسيج لتسهيل حصاد الأنسجة الدماغية والأنسجة السليمة المجاورة من نفس الماوس للمقارنة (الشكل 1E، اللوحة اليمنى).

4. ضخه المرحلة

  1. في نهاية نقص التروية إضافة بضع قطرات من المياه المالحة في المنطقة كليب وبلطف إزالة مقاطع الاوعية الدموية الدقيقة مع مقطع مطبق. ثم، ودفع بلطف الأمعاء إلى تجويف البطن باستخدام المياه المالحة مبلل نصائح القطن. إزالة وسادة غير ملتصقة وإغلاق جدار البطن والجلد باستخدام 9 مم الفولاذ المقاوم للصدأ مقاطع الجرح. إذا تم تنفيذ ضخه أطول من 3 ساعات، استخدم خياطة vicryl للامتصاص لإغلاق جدار البطن قبل تطبيق مقاطع الجرح على الجلد.
  2. الحفاظ على الفئران في قفص نظيفة ساخنة لالمبلغ المطلوب من الوقت (30 دقيقة، 60 دقيقة، 120 دقيقة، أو 180 دقيقة) للمرحلة ضخه.
  3. تحقق الحيوانات على الأقل كل 30 دقيقة لضمان الاستقرار.

الطبقة = "jove_title"> 5. التشريح وحصاد الأمعاء الدقيقة

  1. الموت ببطء الفئران عن طريق CO 2 جرعة زائدة تليها خلع عنق الرحم في الوقت المطلوب ضخه التالية.
  2. فتح تجويف البطن وجمع الأنسجة المعوية الدماغية لمزيد من التحليل. حصاد الأنسجة الطبيعية السليمة المجاورة للأنسجة المصابة باعتبارها الرقابة الداخلية لحساب أي رد فعل النظامية للإصابة.
    ملاحظة: هذه السيطرة هو أكثر ملاءمة من الشام تشغيل السيطرة على الفئران لصورية تعمل الفئران لا تخضع رد فعل النظامية الاصابة الناجمة عن الأشعة تحت الحمراء.
  3. تغسل محتوى الأمعاء باستخدام حقنة 30 مل مع إبرة أنبوب تغذية تعلق مليئة المالحة وثم قطع الأمعاء طوليا. إذا كنت بحاجة لعينة من الأمعاء لتحليل التعبير الجيني، وقطع جزء 1.5 ملم طوليا، واستخدام قطعة المتبقية للتحليل النسيجي.
  4. للتحليل النسيجي، وإعداد لفافة السويسرية باستخدام زوج من ملقط للفة intestالمعهد الوطني للإحصاء.
  5. للحفاظ على شكل تدحرجت، ضع قطعة من الأمعاء بين فوم خزعة في أشرطة الأنسجة (الشكل 2). وضع أشرطة في 10٪ مخزنة الفورمالين.
  6. إصلاح الأنسجة في الفورمالين لمدة 24 ساعة على الأقل. استبدال الفورمالين مع الايثانول 70٪ لمدة 24 ساعة إضافية. تخزين الأنسجة في 70٪ من الإيثانول إلى أجل غير مسمى في درجة حرارة الغرفة.
  7. تضمينها في البارافين، وقطع 5 ميكرون المقاطع وصمة عار مع الهيماتوكسيلين ويوزين باستخدام بروتوكول قياسي (الشكل 3).

6. تسجيل النقاط

  1. تسجيل إصابة نقص التروية ضخه الفئران كما تلخيصها في الجدول 2. اختيار طريقة التسجيل المناسب.
  2. اختياري: تقسيم مجال الرؤية إلى أربعة أقسام منذ شدة الإصابة تختلف في جميع أنحاء القسم.
  3. حساب متوسط ​​درجات كل قسم من عشرات الحصول عمياء.
  4. مقارنة درجة من النسيج المصاب بين الحالات والسيطرة وكذلك إلى thلم يصب ه الأنسجة باستخدام اختبار كروسكال واليس، تليها اختبار المقارنات المتعددة لدان.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

نحن الأمثل بروتوكول تجريبي لجراحة الأشعة تحت الحمراء للحصول على استنساخه إصابة الأشعة تحت الحمراء التي يسببها للالدقاق في الفئران. وأظهرت نتائج ممثلة في هذا القسم.

ويبين الشكل 1 أمثلة على موقف مقاطع الاوعية الدموية الدقيقة للحث على نقص التروية من الدقاق. وتشير السهام السوداء موقف مقاطع رئيسية تسد فروع الدرجة الأولى من الشريان المسا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تطوير نماذج الماوس الإصابة الأشعة تحت الحمراء المعوية قد تحسنت بشكل كبير في فهم آليات إصابة الأنسجة وساعد في تطوير الاستراتيجيات العلاجية المحتملة للحد من تلف الأنسجة 7،9،11،34. الخطوات الحاسمة لهذا البروتوكول هي تحديد المواقع المناسبة لقطات الاوعية الدموية الدقيقة، والتوقيت الصحيح لتقييم نقص التروية ونسيجية السليمة للإصابة الأشعة تحت الحمراء.

مدة التروية هو أمر حاسم لأضرار الظهارية لاحق. الوقت النموذج...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح

شكر وتقدير

وبدعم من مؤسسة العلوم الروسية هذا العمل، منح لا. 14-50-00060 وLLC RUSCHEMBIO. وأيد هذا العمل أيضا من قبل مؤسسة Crohn`s والتهاب القولون الأمريكية منح 294083 (لAVT)، والمعاهد الوطنية للصحة منح RO1 DK47700 (إلى CJ).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
وسادة ساخنةSunbeamE12107-819البديل: وسادة ساخنة علمية من Braintree
تخدير أبحاث سطح الطاولةVascoUCAP 0001-0000171البديل: Parkland Scientific ، V3000PS
Nose ConeParkland ScientificARES500
علبة زبال وخرطوشة بديلةParkland Scientific80000 ، 80120
الحث غرفةالجرافيتV711802
IsofluranePiramal HealthcareNDC 66794-013-10مادة خاضعة للرقابة ، اتصل ب IACUC
Animal clipper   ؛Oster Oster Golden A5 078005-050-003
مرهم العيونويبستر8804604
بوبرينورفينماكيسونمادةخاضعة للرقابة 562766 ، اتصل ب IACUC
Ketaset (الكيتامين حمض الهيدروكلوريك)PfizerNADA 45-290مادة خاضعة للرقابة ، اتصل بنصائح القطن IACUC
المنتجات الطبية البيوريتانية806-WCالأوتوكلاف قبل الاستخدام
بيتادينبوردو67618-150-17معقم بوفيدون اليود 10
Aspen46066-807-60اضبط درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام
حرارة القوارض بالأشعة تحت الحمراءBIOSEBBIO-IRB153
مقاطع الأوعية الدموية الدقيقة ، 70 جمRoboz Surgical   ؛RS5424 ، RS5435البديل: WPI 14121 ، لانسداد SMA
مقاطع الأوعية الدموية الدقيقة ، 40 جمRoboz Surgical   ؛RS6472البديل: WPI 14120 ، لانسداد الأوعية الجانبية
مشبك تطبيق ملقطPrecision Instruments14189البديل: Roboz #RS-5410 أو & nbsp; #RS-5440
جيل 3 هيماتوكسيلينثيرمو سيانتيفيك14-390-17
دبابيس جراحية ، منعكس 9 ممنقطة الخلية العلمية201-1000
تطبيق مشبكتلقائي بيكتون ديكنسون427630
وسادة رغوة بيوبسSimportM476-1
كاسيت مناديلفيشر للرعاية الصحية15182701Aغطاء وقاعدة تركيبة Histosette II
10٪ فورمالين مخزنفيشر Scientific245-684
مقص قزحية جراحيةأدوات الدقة العالمية501263-G SCالبديل: Roboz RS6816
مقص التشغيلPrecision Instruments501219-Gالبديل: Roboz RS6814
ملقط خلعالملابس Roboz الجراحي   ؛RS-5228 ، RS-8122البديل: World Precision Instruments 1519-G
Heparin ، خالي من السموم الداخلية ، 300 وحدة USP / قارورة ، 50 مجمSigma2106
مشبك الجرح الانعكاسي لإزالة الملقطRoboz Surgical  ؛RS-9263البديل: أدوات الدقة العالمية: 500347
الفئران C57BL / 6J الفئران   ؛جاكسون مختبرمخزون رقم 0664
ضمادات Telfa غير الملتصقة ، 3 × 4 ، معقمةCoviden1050
Fisherbrand Transferpipets Fischer Scientific13-711-5AMاستخدم الماصات لإضافة المحلول الملحي بالتنقيط
آلة منتجات محلول ملحي ٪ ميزان World World

المراجع

  1. Eltzschig, H. K., Eckle, T. Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation. Nat Med. 17, 1391-1401 (2011).
  2. Lenaerts, K., et al. New insights in intestinal ischemia-reperfusion injury: implications for intestinal transplantation. Curr Opin Organ Transplant. 18, 298-303 (2013).
  3. Yasuhara, H. Acute mesenteric ischemia: the challenge of gastroenterology. Surg Today. 35, 185-195 (2005).
  4. Perez-Chanona, E., Muhlbauer, M., Jobin, C. The microbiota protects against ischemia/reperfusion-induced intestinal injury through nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2 (NOD2) signaling. Am J Pathol. 184, 2965-2975 (2014).
  5. Lee, H., et al. Delineating the relationships among the formation of reactive oxygen species, cell membrane instability and innate autoimmunity in intestinal reperfusion injury. Mol Immunol. 58, 151-159 (2014).
  6. Yoshiya, K., et al. Depletion of gut commensal bacteria attenuates intestinal ischemia/reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 301, G1020-G1030 (2011).
  7. Wu, M. C., et al. The receptor for complement component C3a mediates protection from intestinal ischemia-reperfusion injuries by inhibiting neutrophil mobilization. Proc Natl Acad Sci U S A. 110, 9439-9444 (2013).
  8. Muhlbauer, M., Perez-Chanona, E., Jobin, C. Epithelial cell-specific MyD88 signaling mediates ischemia/reperfusion-induced intestinal injury independent of microbial status. Inflamm Bowel Dis. 19, 2857-2866 (2013).
  9. Gonzalez, L. M., Moeser, A. J., Blikslager, A. T. Animal models of ischemia-reperfusion-induced intestinal injury: progress and promise for translational research. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 308, G63-G75 (2015).
  10. Megison, S. M., Horton, J. W., Chao, H., Walker, P. B. A new model for intestinal ischemia in the rat. J Surg Res. 49, 168-173 (1990).
  11. Goldsmith, J. R., et al. Intestinal epithelial cell-derived mu-opioid signaling protects against ischemia reperfusion injury through PI3K signaling. Am J Pathol. 182, 776-785 (2013).
  12. Cuzzocrea, S., et al. Glycogen synthase kinase-3beta inhibition attenuates the development of ischaemia/reperfusion injury of the gut. Intensive Care Med. 33, 880-893 (2007).
  13. Farber, A., et al. A specific inhibitor of apoptosis decreases tissue injury after intestinal ischemia-reperfusion in mice. J Vasc Surg. 30, 752-760 (1999).
  14. Ben, D. F., et al. TLR4 mediates lung injury and inflammation in intestinal ischemia-reperfusion. J Surg Res. 174, 326-333 (2012).
  15. Watson, M. J., et al. Intestinal ischemia/reperfusion injury triggers activation of innate toll-like receptor 4 and adaptive chemokine programs. Transplant Proc. 40, 3339-3341 (2008).
  16. Watanabe, T., et al. Activation of the MyD88 signaling pathway inhibits ischemia-reperfusion injury in the small intestine. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 303, G324-G334 (2012).
  17. Murayama, T., et al. JNK (c-Jun NH2 terminal kinase) and p38 during ischemia reperfusion injury in the small intestine. Transplantation. 81, 1325-1330 (2006).
  18. Park, P. O., Haglund, U., Bulkley, G. B., Falt, K. The sequence of development of intestinal tissue injury after strangulation ischemia and reperfusion. Surgery. 107, 574-580 (1990).
  19. Jilling, T., Lu, J., Jackson, M., Caplan, M. S. Intestinal epithelial apoptosis initiates gross bowel necrosis in an experimental rat model of neonatal necrotizing enterocolitis. Pediatr Res. 55, 622-629 (2004).
  20. Aprahamian, C. J., Lorenz, R. G., Harmon, C. M., Dimmit, R. A. Toll-like receptor 2 is protective of ischemia-reperfusion-mediated small-bowel injury in a murine model. Pediatr Crit Care Med. 9, 105-109 (2008).
  21. Tatum, P. M., Harmon, C. M., Lorenz, R. G., Dimmitt, R. A. Toll-like receptor 4 is protective against neonatal murine ischemia-reperfusion intestinal injury. J Pediatr Surg. 45, 1246-1255 (2010).
  22. Fleming, S. D., et al. Anti-phospholipid antibodies restore mesenteric ischemia/reperfusion-induced injury in complement receptor 2/complement receptor 1-deficient mice. J. Immunol. 173, 7055-7061 (2004).
  23. Fleming, S. D., et al. Mice deficient in complement receptors 1 and 2 lack a tissue injury-inducing subset of the natural antibody repertoire. J. Immunol. 169, 2126-2133 (2002).
  24. Lapchak, P. H., et al. Platelets orchestrate remote tissue damage after mesenteric ischemia-reperfusion. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 302, G888-G897 (2012).
  25. Rehrig, S., et al. Complement inhibitor, complement receptor 1-related gene/protein y-Ig attenuates intestinal damage after the onset of mesenteric ischemia/reperfusion injury in mice. J. Immunol. 167, 5921-5927 (2001).
  26. Hoffman, S. M., Wang, H., Pope, M. R., Fleming, S. D. Helicobacter infection alters MyD88 and Trif signalling in response to intestinal ischaemia-reperfusion. Exp Physiol. 96, 104-113 (2011).
  27. Moses, T., Wagner, L., Fleming, S. D. TLR4-mediated Cox-2 expression increases intestinal ischemia/reperfusion-induced damage. J Leukoc Biol. 86, 971-980 (2009).
  28. Feinman, R., et al. HIF-1 mediates pathogenic inflammatory responses to intestinal ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 299, G833-G843 (2010).
  29. Lapchak, P. H., et al. The role of platelet factor 4 in local and remote tissue damage in a mouse model of mesenteric ischemia/reperfusion injury. PloS one. 7, e39934(2012).
  30. Wen, S. H., et al. Ischemic postconditioning during reperfusion attenuates intestinal injury and mucosal cell apoptosis by inhibiting JAK/STAT signaling activation. Shock. 38, 411-419 (2012).
  31. Wang, F., et al. Temporal variations of the ileal microbiota in intestinal ischemia and reperfusion. Shock. 39, 96-103 (2013).
  32. Zou, L., Attuwaybi, B., Kone, B. C. Effects of NF-kappa B inhibition on mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 284, G713-G721 (2003).
  33. Hassoun, H. T., et al. Alpha-melanocyte-stimulating hormone protects against mesenteric ischemia-reperfusion injury. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 282, G1059-G1068 (2002).
  34. Stallion, A., et al. Ischemia/reperfusion: a clinically relevant model of intestinal injury yielding systemic inflammation. J Pediatr Surg. 40, 470-477 (2005).
  35. Blikslager, A. T., Roberts, M. C., Rhoads, J. M., Argenzio, R. A. Is reperfusion injury an important cause of mucosal damage after porcine intestinal ischemia? Surgery. 121, 526-534 (1997).
  36. Barker, N., et al. Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5. Nature. 449, 1003-1007 (2007).
  37. Victoni, T., et al. Local and remote tissue injury upon intestinal ischemia and reperfusion depends on the TLR/MyD88 signaling pathway. Med Microbiol Immunol. 199, 35-42 (2010).
  38. Watanabe, T., et al. Toll-like receptor 2 mediates ischemia-reperfusion injury of the small intestine in adult mice. PloS one. 9, e110441(2014).
  39. Pope, M. R., Fleming, S. D. TLR2 modulates antibodies required for intestinal ischemia/reperfusion-induced damage and inflammation. J. Immunol. 194, 1190-1198 (2015).
  40. Leung, F. W., Su, K. C., Passaro, E. Jr, Guth, P. H. Regional differences in gut blood flow and mucosal damage in response to ischemia and reperfusion. Am J Physiol. 263, G301-G305 (1992).
  41. Chiu, C. J., McArdle, A. H., Brown, R., Scott, H. J., Gurd, F. N. Intestinal mucosal lesion in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic, and metabolic reappraisal. Arch Surg. 101, 478-483 (1970).
  42. Quaedackers, J. S., et al. An evaluation of methods for grading histologic injury following ischemia/reperfusion of the small bowel. Transplant Proc. 32, 1307-1310 (2000).
  43. Bianciardi, P., Scorza, R., Ghilardi, G., Samaja, M. Xanthine oxido-reductase activity in ischemic human and rat intestine. Free Radic Res. 38, 919-925 (2004).
  44. Yandza, T., et al. The pig as a preclinical model for intestinal ischemia-reperfusion and transplantation studies. J Surg Res. 178, 807-819 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

الشريان المساريقي العلويمشابك الأوعية الدقيقةالتحليل النسيجيصبغ الهيماتوكسيلين والإيوسينتقنية اللف السويسريتعبير عامل نخر الورم ألفاإنترلوكين-1 بيتاإنترلوكين-6كيموكين Cxcl2
نموذج الفئران من المعوية الإسكيمية-ضخه إصابة
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.