يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

مدخل لتعزيز التوافق وتكون الميالين في ظهري الجذر العقدة العصبية

8.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/54085

⸱

أغسطس 24, 2016

 , 
1Department of Chemical Engineering and Materials Science, Michigan State University, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology, Michigan State University

في هذه المقالة

ملخص

يصف هذا البروتوكول عزل الخلايا العصبية العقدية الجذرية الظهرية (DRG) المعزولة من الفئران وثقافة الخلايا العصبية DRG على نظام زراعة الخلايا الممتدة مسبقا لتعزيز محاذاة المحاور العصبية ، مع الزراعة المشتركة اللاحقة لخلايا شوان (SCs) لتعزيز تكوين النخاع.

الملخص

تجديد المحور العصبي هو عملية فوضوية ترجع إلى حد كبير إلى محاذاة المحاور العصبية غير المنظمة. لذلك ، من أجل وجود عدد كاف من المحاور المتجددة لجسر موقع الآفة ، يلزم إجراء محاذاة محورية منظمة بشكل صحيح. نظرا لأن إزالة الميالين بعد إصابة الأعصاب يضعف بشدة القدرة التوصيلية للمحاور الباقية ، فإن إعادة الميالين أمر بالغ الأهمية لنجاح عمل الأعصاب المتجددة. في السابق ، أظهرنا أن الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) محاذاة على سطح متباين الخواص المستحث قبل التمدد لأن الخلايا يمكن أن تشعر بصلابة فعالة أكبر في الاتجاه الممتد منها في الاتجاه العمودي. أظهرنا أيضا أن السطح متباين الخواص الناشئ عن سطح ميكانيكي ممتد مسبقا يؤثر بالمثل على المحاذاة ، وكذلك نمو وتكوين النخاع للمحاور. هنا ، نقدم بروتوكولا مفصلا لإعداد سطح متباين الخواص ممتد مسبقا ، وعزل وثقافة الخلايا العصبية العقدية الجذرية الظهرية (DRG) على سطح ممتد مسبقا ، ونظهر سلوك الميالين للثقافة المشتركة للخلايا العصبية DRG مع خلايا شوان (SCs) على سطح ممتد مسبقا.

المقدمة

في الإصابات العصبية، وغالبا ما يمنعون جذوعها الداني والقاصي العصبية من إعادة تنظيم مباشرة من كراسات العصبية نظرا لموقع الآفة 1-2. عادة، تتكون مساحات محور عصبي حزم أمر غاية والانحياز من المحاور، والتي تشكل شبكات معقدة من الاتصال. ومع ذلك، وتجديد الأعصاب هو عملية الفوضى بسبب سوء التنظيم محور عصبي محاذاة 3-4. لذلك، لتوليد عدد كاف من تجديد المحاور التي ردم موقع الآفة، فمن الضروري للحث على محاذاة محور عصبي منظمة تنظيما جيدا. بالإضافة إلى ذلك، إزالة الميالين يصاحب الإصابات العصبية بسبب موت الخلايا myelinating في موقع الإصابة. منذ إزالة الميالين يضعف بشدة قدرة موصلة للبقاء محاور وعلاجات تستهدف إزالة الميالين أو تشجيع عودة الميالين هامة للانتعاش وظيفية بعد إصابة العصب 5. وبالتالي فإن الهدف من هذا البروتوكول هو لتوضيح نهج الهندسية التي تعالج هاتين المسألتينتجديد الأعصاب.

وقد تم تطبيق تباين السطح، الذي يعرف بأنه الفرق، عند قياسها على طول محاور مختلفة، في الخصائص الفيزيائية أو الميكانيكية مادة، والتأثير على محاذاة الخلية، والنمو، والهجرة 6-7. بالإضافة إلى طبوغرافية، هناك طرق أخرى للحث على تباين. في وقت سابق، ونحن التحقيق تباين سطح الناجم عن ميكانيكي ثابت قبل تمتد من بولي ميثيل-siloxane (PDMS) الغشاء. نظرية "سوبر تشوه صغير المفروض على كبير" توقعت أن تصلب فعالة الخلايا تستشعر في الاتجاه امتدت يختلف عن اتجاه عمودي، وليس هذا الاختلاف في صلابة فعالة يرجع إلى السطح تباين 8. الخلايا الجذعية الوسيطة (اللجان الدائمة) مثقف على غشاء PDMS امتدت قبل قادرة على الشعور تباين عن طريق سحب بنشاط السطح ونتيجة لذلك، محاذاة في الاتجاه امتدت قبل 9. وبالمثل، وهو ع سطح متباينإيسينج من سطح امتدت قبل ميكانيكي يؤثر على المحاذاة، فضلا عن النمو وتكون الميالين من عقدة الجذر الظهري (DRG) محاور 10. نحن هنا نقدم بروتوكول لإحداث تباين السطح على ساكنة امتدت ما قبل الركيزة PDMS لتعزيز تجديد أكسون 10.

للحصول محاذاة المحور، ملامح الطوبوغرافية مع أنماط المطلوب، ذكرت لتوفير التوجيه الاتصال من خلال الألياف وقنوات 6،11-12 الانحياز، وقد تجلت لتسهيل محور عصبي محاذاة 11،13. ومع ذلك، ذكرت تقنيات لإحداث المواءمة محور عصبي من خلال الميزات الطوبوغرافية، مثل الألياف والقنوات والزخرفة، لم يتمكنوا من إطالة وزيادة سماكة من المحاور. في المقابل، تدريجيا الميكانيكية تمتد أدت إلى محاذاة محور عصبي في الاتجاه تمتد مع محاور أطول وأكثر سمكا التي زادت مع حجم امتداد 14. ومع ذلك، يتضمن جهاز بمحرك في الجسم الحي ليسعمليا. في المقابل، ثابت قبل امتدت-تباين الناجم أقل تعقيدا ويمكن إدراجها بسهولة أكبر إلى تصاميم سقالة المستقبلية للتطبيقات في الجسم الحي.

في هذا البروتوكول، ويستخدم نظام زراعة الخلايا امتدت قبل ساكنة للحث على تباين السطح دون ملامح الطوبوغرافية. ويتكون نظام ثقافة امتدت مسبقا من غشاء PDMS، إطار لمط ومرحلة تمتد، وعندها يتم إصلاح غشاء على الإطار ويتم تطبيق قوته تمتد محددة سلفا على مرحلة تمتد. ويتم رصد الخلايا العصبية DRG المعزولة حديثا مثقف على سطح امتدت قبل لمدة تصل إلى 21 يوما للمحاذاة محور عصبي وسمك. وفي وقت لاحق، خلايا شوان (المنبوذة) شارك في تربيتها مع ومراقبتها لتكون الميالين المحاور الانحياز. من خلال دمج ما قبل امتداد الناجم عن تباين سطح تمكنا من تعزيز خلية الانحياز التمايز ومحور عصبي الانحياز نمو اللجان الدائمة والخلايا العصبية DRG 9-10، على التوالي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

وقد وافق جميع الإجراءات لعزل الخلايا عن طريق لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسي في جامعة ولاية ميشيغان.

1. إعداد امتدت قبل سطح متباين الخواص

  1. خلط 10: حل 1 من قاعدة وكيل علاج ويصب الخليط في صحن زراعة الأنسجة (12 سم القطر). استخدام 4900 قاعدة ملغ و 490 ملغ وكيل علاج لمجموع خليط يشابك.
  2. الحفاظ على مزيج هلام في ظل فراغ لمدة 20 دقيقة لإزالة فقاعات الهواء.
  3. ضع الخليط جل في الفرن لعلاج بين عشية وضحاها في 60 درجة مئوية.
  4. بعد علاج غشاء PDMS، وعلاج السطح مع البلازما الأكسجين باستخدام نظام التنظيف / النقش البلازما لمدة 3 دقائق في 165 mTorr و 65 تدفق SCCM من O 2.
  5. قطع قطعة من غشاء مستطيلة (5 × 3.5 سم) من الطبق، في حين يجري تدرك الجانب الذي هو المعالجة الأوكسجين، تأكد يواجه الجانب المعالجة الأكسجين صعودا وإصلاح على إطار التمدد. وضع إطار على وتمتد المرحلة وتمتد بالتساوي من خلال تحويل مقبض الباب على مرحلة حتى يصل إلى 10٪ استطالة (أو بعض الدول الأخرى تمتد محددة سلفا، واستطالة يمكن قراءة مباشرة من مرحلة تمتد) في المحور الطويل 9. إصلاح تمتد من خلال تشديد الخناق على الإطار.
  6. إزالة الإطار من المرحلة. ضمان سطح غشاء جافة وخالية من الغبار، ثم ضع دائرة سيليكون على الغشاء يسمح الجانب زجة من غرفة إرفاق بإحكام إلى الغشاء.
    ملاحظة: غرفة سيليكون توفر أيضا للاحتفاظ المتوسطة الخلية على غشاء PDMS. يظهر تصميم الجهاز في الشكل 1.
  7. تعقيم السطح مع الأشعة فوق البنفسجية لمدة 10 دقيقة.
  8. إضافة 1 مل بولي-L-ليسين (PLL) (0.01٪ في الفوسفات مخزنة المالحة) إلى سطح PDMS داخل غرفة، في غضون 6 ساعة من العلاج البلازما واحتضان لمدة 2 ساعة على 37 درجة مئوية قبل البذر الخلايا العصبية DRG. وهذا يعزز مرفق الخلية.
لو "> 2. عزل DRG

  1. إعداد متوسط ​​النمو القياسي لالخلايا العصبية DRG.
  2. قبل العزلة، تعقيم المعدات العزلة والكواشف التصفية. إضافة 5 مل من العازلة العزل في بئر واحدة من لوحة 6 جيدا، ووضع لوحة على الجليد. إعداد 10 مل من المتوسط ​​التفكك عن طريق إضافة 1 مل من كولاجيناز ألف (500 U / مل) إلى 9 مل من 0.05٪ التربسين-EDTA (1 ملغ / مل)، تصفية حلول مع مرشح 0.22 ميكرون ومكان على الجليد.
  3. استخدام 10-12 5-7 الفئران سبراغ داولي القديمة أيام لعزل. رش الجراء مع 75٪ الأيزوبروبانول، والتضحية بقطع الرأس.
  4. قطع الجلد المغطي للنخاع الشوكي من الخلف وإزالة أي نوع من الأنسجة الزائدة حول العمود الفقري. تحت المكبر الجراحية مع الأضواء الجراحية على، وجعل شق الأولى من الرقبة ثم قطع واحد على طول العمود الفقري في كلا الجانبين مع مقص. فصل العمود الفقري من الجسم من الجراء وإزالة العضلات الزائدة. ثم، استخدم مقص لقطع على طول خط الطولز محور العمود الفقري واستخدام ملاقط لفتح العمود الفقري تماما واستخراج العمود الفقري cord.Remove غيض من ماصة لإنشاء أكبر الافتتاح لنقل DRGs مع العازلة العزلة في أنبوب 15 مل العقيمة.
  5. باستخدام زوج جيد من ملاقط، وإزالة العقدة من جيب العظام وجمع ما يقرب من 10-16 DRG من كلا الجانبين. تقليم جذور الأعصاب ونقل العقد إلى المخزن المؤقت العزلة الجليد الباردة.
  6. إزالة غيض من ماصة لإنشاء أكبر الافتتاح لنقل DRGs مع العازلة العزلة في أنبوب 15 مل العقيمة. بعد التفكك الكيميائي، الطرد المركزي العقد في 900 x ج و 4 درجات مئوية لمدة 5 دقائق.
  7. السماح للأنسجة تترسب في قاع الأنبوب وإزالة بلطف العازلة العزلة على رأس وإضافة 10 مل من المتوسط ​​التفكك داخل الأنبوب.
  8. احتضان الأنسجة تشريح في المتوسط ​​التفكك في 37 ° C حمام الماء لمدة 1 ساعة في حين هز أنبوب كل 5-10 دقيقة.
  9. بعدالتفكك الكيميائي، الطرد المركزي العقد في 900 x ج و 4 درجات مئوية لمدة 5 دقائق.
  10. إزالة طاف وإعادة تعليق بيليه في 10 مل وسائط النمو القياسية ودوامة.
  11. أجهزة الطرد المركزي لفصل الخلايا كما هو مبين في القسم 2.9 مرة أخرى.
  12. إزالة طاف، وإعادة تعليق-بيليه في 12 مل من وسائط النمو القياسية ودوامة.

3. ثقافة DRG على السطح امتدت ما قبل

  1. قبل البذر الخلايا، وإزالة الحلول PLL من الغرفة وشطف السطح PDMS مع الماء المعقم والهواء الجاف.
  2. بعد إعادة تعليق-الخلايا، والسماح للمجموعة تعليق 1 - 2 دقيقة للسماح للالحطام لتستقر في قاع الأنبوب. إضافة 1.5 مل من تعليق خلية في كل غرفة تمتد واحتضان عند 37 درجة مئوية في 5٪ CO 2.
  3. للقضاء على الخلايا الدبقية، في 1 يوم في المختبر (DIV)، إضافة 10 ميكرولتر (أو 15 ميكرولتر) مزيج من الفلورية 2 ديوكسي-يوريدين ويوريدين (FDU-U) soluti الأسهمعلى (انظر الجدول المواد) إلى كل بئر. بعد 7 ساعات، استبدل هذا المتوسطة مع نمو قياسي جديد ووضع الجهاز ثقافة امتدت قبل في حاضنة 37 درجة مئوية مع 5٪ CO 2.
  4. خلال فترة زراعة الخلايا (2-3 أسابيع)، وتغيير وسائل الاعلام كل يومين عن طريق استبدال نصف المتوسطة الذي يقضيه مع المتوسط ​​الطازجة. ملاحظة: بعد زراعة على أسطح امتدت وغير المتمدد لمدة 2 أسابيع، تضاف المنبوذة تنقيته إلى الغرفة وتربيتها لمدة أسبوع آخر (الخطوة 4.7).

4. المشارك الثقافة من خلايا شوان (المنبوذة) مع DRG الخلايا العصبية على سطح امتدت ما قبل

  1. عزل المنبوذة كما هو موضح من قبل مجموعة الدكتور كامبانا في السابق 15.
    1. لفترة وجيزة، عزل المنبوذة من الجرو العمر 1 يوم. جمع وفصل الأعصاب الوركي على حد سواء كيميائيا (التربسين-EDTA وكولاجيناز أ) وميكانيكيا (18 إبرة قياس / 10 مل حقنة) 15.
    2. البذور الخلايا نأت إلى بولي-D-ليسين (PDL) شاركATED T25 قارورة والثقافة في 37 درجة مئوية في 5٪ CO 2. في يوم 5، وتنقية الخلايا من خلال اختيار الأجسام المضادة باستخدام مكافحة خاصتك 1.1 الأجسام المضادة والأرنب المتممة وثقافة فرعية الخلايا النقاء لمرور 2 - 4. المتوسطة استخدام الثقافة التي تحتوي على Dulbecco لتعديل النسر متوسطة (DMEM)، و 10٪ مصل بقري جنيني (FBS) ، 1٪ البنسلين / الستربتوميسين (بنسلفانيا / بكتيريا)، 21 ميكروغرام / مل الأبقار النخامية استخراج (BPE)، و 4 ميكرومتر Forskolin.
  2. إزالة مستنبت من المنبوذة، وإضافة 5 مل 0.05٪ التربسين-EDTA في القارورة. احتضان الخلايا عند 37 درجة مئوية في 5٪ CO 2 ل2-3 دقيقة.
  3. تحقق الخلايا تحت المجهر الضوئي باستخدام الهدف 10X لمعرفة ما اذا كان رفع من القارورة، ثم يضاف 5 مل من مستنبت وتخلط مع الخلايا في قارورة.
  4. إضافة تعليق خلية إلى أنبوب الطرد المركزي 15 مل وأجهزة الطرد المركزي في 200 x ج و 20 درجة مئوية لمدة 5 دقائق.
  5. إزالة طاف و resuspend بيليه في 7 مل ميد النمو DRG القياسيةI ل.
  6. يستغرق 10 ميكرولتر من تعليق خلية في أنبوب microcentrifuge 0.5 مل، مع مزيج 10 ميكرولتر من التريبان الأزرق، ومن ثم حساب عدد الخلايا باستخدام عدادة الكريات تحت المجهر الضوئي باستخدام الهدف 10X. تمييع تعليق خلية إلى 5000 خلية لكل مل عن طريق إضافة وسائط النمو DRG.
  7. إزالة 0.5 مل من المتوسط ​​من ثقافة DRG في غرفة امتدت وإضافة 0.5 مل من تعليق SC للثقافة DRG.
  8. ثقافة الخلايا لمدة 1 الأسبوع عند 37 درجة مئوية وCO 2. تغيير 5٪ من وسائل الاعلام كل يومين عن طريق استبدال نصف المتوسطة الذي يقضيه مع متوسط ​​نمو قياسي جديد لDRG. بعد 1 أسبوع ثقافة مشتركة، عملية الخلايا المناعية 10.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

النظام امتدت ما قبل زراعة الخلايا الترويج DRG محوار محاذاة 10. ومثقف الخلايا العصبية DRG على السطوح قبل امتدت وغير المتمدد لمدة 12 يوما. كانت ملطخة محاور لβ-III تويولين لإثبات اتساقها الشكل 2 يقارن التوجه محور عصبي على ركائز PDMS قبل امتدت وغير المتمدد بعد 12 يوما من الثقافة. المحاور DRG محاذاة موازية لاتجاه امتدت، في حين أنها أظهرت محاذاة عشوائية وشكل شبكة مترابطة على الركيزة PDMS غير المتمدد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

للحث على محاذاة محوار على سطح امتدت مسبقا، هناك نوعان من الخطوات الحاسمة: 1) يجب أن يكون غشاء PDMS مسطحة وسمك متجانس. و2) يجب إزالة الخلايا الدبقية من DRG. بعد خلط PDMS وcrosslinker وعلاج في الفرن، يجب أن تبقى جل PDMS crosslinked على قمة مقاعد البدلاء شقة والتعامل معها بعناية لتجنب أي إمالة. وينبغي أن يتبع العلاج الأكسجين البلازما الغشاء PDMS في غضون 6 ساعة بواسطة PLL طلاء، منذ hydrophilicity من السطح (مطلوب لمرفق الخلية) بعد العلاج البلازما خفف على مر الزمن. منذ يتم تطبيق العلاج ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى أصحاب البلاغ أي تضارب في المصالح للإفصاح عنهم.

شكر وتقدير

فإن الكتاب أود أن أشكر اريك فاسكو لمساعدته في إعداد ركائز PDMS، الدكتور Shiyong وانغ في مختبر الدكتور مرسى ماتا في جامعة ميشيغان للحصول على اقتراحات مفيدة والتدريب من العزلة DRG، والدكتور مارك Tuszynski والدكتور دبليو ماري كامبانا في جامعة كاليفورنيا في سان دييغو للحصول على اقتراحات مفيدة وبروتوكول لعزل SC. وأيد هذه الدراسة في جزء من مؤسسة العلوم الوطنية (CBET 0941055 وCBET 1510895)، والمعهد الوطني للصحة (R21CA176854، R01GM089866، وR01EB014986).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
المتوسط العصبي القاعدي 1xGibcoBRL21103-049
مكمل B27 50xGibcoBRL17504-044
Glutamax-I 100xGibcoBRL35050-061
Albumax-IGibcoBRL11020-021
عامل نمو الأعصاب-7SInvitrogen13290-010
البنسلين الستربتومايسينGibcoBRL15140-122
0.05٪ Trypsin-EDTA / 1 ملي مولار EDTAGibcoBRL25300-054
Poly-L-LysineTrevigen3438-100-01< / a>
Poly-D-LysineSigmap-6407
Fluoro-2 deoxy-uridineSigmaF0503
أردينسيجماU3003
هانك s محلول الملح المتوازن (HBSS)Invitrogen14170-112العازلة العازلة
من النوع الأول كولاجينازورثينجتونLS004196
DMEMGibco11885
مصل الجنين البقري المعطلبالحرارة HycloneSH30080.03
BPECloneticsCC-4009
ForskolinCalbiochem344270
غرفة السيليكونGreiner bio-oneFlexiPERM ConA
نظام تنظيف / نقش البلازماMarch InstrumentsPX-250
Anti-Thy 1.1 الجسم المضادسيجما- ألدريتشM7898
الأرانب التكميليةسيجما- ألدريتشS-7764
وسطالنمو القياسيللحصول على 500 مل من Neurobasal Medium 1x ، أضف 10 مل من B-27 50x ، و 5 مل من Glutamax-I 100x ، و 2.5 مل من البنسلين / الستربتومايسين (Penn / Strep) ، و 1 مل من Albumax-I ، و 1 & mu ؛ ل من NGF - 7S (50 & mu ؛ جم / مل).
مخزون FDU UridineFDU 100 ملغ في 10 مل من ddH2< / sub>O (10 مجم / مل) ، مرشح في غطاء محرك السيارة ومقسمة إلى 500 & ل aliquots وتخزينها في -20 & C. Uridine 5 g في 166.7 مل من ddH2< / sub>O (33 ملغ / مل) ، مرشح في غطاء محرك السيارة ، يقسم في 200 مو ؛ ل aliquots وتخزينها في -20 & °C. خذ 61.5 مو ؛ لتر من FDU (10 ملغ/مل) و 20.5 مو ؛ ل من Uridine(33 ملغ/مل), وإضافة 4,918 & mu; ل من ddH2< / sub>O إلى تركيز المخزون النهائي ، ثم قسمها إلى 1 مل من الكميات وتخزينها عند -20 درجة مئوية.
محلول

المراجع

  1. Liu, C., et al. Layer-by-Layer Films for Biomedical Applications. , Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA. 525-546 (2015).
  2. Faweett, J. W., Keynes, R. J. Peripheral Nerve Regeneration. Annu Rev Neurosci. 13, 43-60 (1990).
  3. Li, Y., Field, P. M., Raisman, G. Repair of adult rat corticospinal tract by transplants of olfactory ensheathing cells. Science. 277, 2000-2002 (1997).
  4. Geller, H. M., Fawcett, J. W. Building a bridge: Engineering spinal cord repair. Exp Neurol. 174, 125-136 (2002).
  5. Totoiu, M. O., Keirstead, H. S. Spinal cord injury is accompanied by chronic progressive demyelination. J Comp Neurol. 486, 373-383 (2005).
  6. Chua, J. S., et al. Extending neurites sense the depth of the underlying topography during neuronal differentiation and contact guidance. Biomaterials. 35, 7750-7761 (2014).
  7. Dowell-Mesfin, N. M., et al. Topographically modified surfaces affect orientation and growth of hippocampal neurons. J Neural Eng. 1, 78-90 (2004).
  8. Baek, S., Gleason, R. L., Rajagopal, K. R., Humphrey, J. D. Theory of small on large: Potential utility in computations of fluid-solid interactions in arteries. Comput Method Appl M. 196, 3070-3078 (2007).
  9. Liu, C., et al. Effect of Static Pre-stretch Induced Surface Anisotropy on Orientation of Mesenchymal Stem Cells. Cell Mol Bioeng. 7, 106-121 (2014).
  10. Liu, C., et al. The impact of pre-stretch induced surface anisotropy on axon regeneration. Tissue Eng Part C Methods. , (2015).
  11. Berns, E. J., et al. Aligned neurite outgrowth and directed cell migration in self-assembled monodomain gels. Biomaterials. 35, 185-195 (2014).
  12. Kidambi, S., Lee, I., Chan, C. Primary neuron/astrocyte co-culture on polyelectrolyte multilayer films: A template for studying astrocyte-mediated oxidative stress in neurons. Adv Funct Mater. 18, 294-301 (2008).
  13. Xia, H., et al. Directed neurite growth of rat dorsal root ganglion neurons and increased colocalization with Schwann cells on aligned poly(methyl methacrylate) electrospun nanofibers. Brain Research. 1565, 18-27 (2014).
  14. Smith, D. H. Stretch growth of integrated axon tracts: Extremes and exploitations. Prog Neurobiol. 89, 231-239 (2009).
  15. Mantuano, E., Jo, M., Gonias, S. L., Campana, W. M. Low Density Lipoprotein Receptor-related Protein (LRP1) Regulates Rac1 and RhoA Reciprocally to Control Schwann Cell Adhesion and Migration. Journal of Biological Chemistry. 285, 14259-14266 (2010).
  16. Kim, B., ET, K. P., Papautsky, I. Long-term stability of plasma oxidized PDMS surfaces. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 7, 5013-5016 (2004).
  17. Lopera, S., Mansano, R. D. Plasma-Based Surface Modification of Polydimethylsiloxane for PDMS-PDMS Molding. ISRN Polymer Science. 2012, (2012).
  18. Chandra, G. Organosilicon Materials. , Springer. Berlin Heidelberg. (2013).
  19. Wu, M. H. Simple poly(dimethylsiloxane) surface modification to control cell adhesion. Surf Interface Anal. 41, 11-16 (2009).
  20. Moore, M. J., et al. Multiple-channel scaffolds to promote spinal cord axon regeneration. Biomaterials. 27, 419-429 (2006).
  21. Clarke, J. C., et al. Micropatterned methacrylate polymers direct spiral ganglion neurite and Schwann cell growth. Hearing Res. 278, 96-105 (2011).
  22. Pfister, B. J., et al. Development of transplantable nervous tissue constructs comprised of stretch-grown axons. J Neurosci Methods. 153, 95-103 (2006).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

سطح متباين الخواص ممدد مسبقاًتعزيز محاذاة المحاوير العصبيةالزراعة المشتركة لخلايا شوانتحليل سلوك تكوين النخاعينتمديد غشاء PDMSعزل عصبونات العقد الجذرية الظهريةبروتوكول زراعة الخلاياهندسة الأنسجة العصبيةدعم تجدد المحاوير العصبية
مدخل لتعزيز التوافق وتكون الميالين في ظهري الجذر العقدة العصبية
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.