نحن هنا نقدم وسيلة لقياس مستويات الدهون عضوي في الطور الثالث (L3) مرحلة اليرقات من ذبابة الفاكهة. هذه الطريقة يستغل كثافة منخفضة نسبيا من الأنسجة الدهنية للتمييز بين اليرقات مع مخازن الدهون المتغيرة. التحليل القائم على الطفو هو أداة قيمة لفحص السريع، واستنساخه، واقتصادية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
والأسلوب القائم على الطفو من تحديد مستويات الدهون في
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
ذبابة الفاكهة السوداء هو نظام تجريبي رئيسي في دراسة تنظيم الدهون. توجد حاليا العديد من التقنيات لقياس مستويات الدهون المخزنة في ذبابة الفاكهة ، ولكن معظمها باهظ الثمن و / أو شاق وله قيود واضحة. هنا ، نقدم طريقة لتحديد مستويات الدهون الكائنات الحية بسرعة وبتكلفة زهيدة في يرقات ذبابة الفاكهة L3. تعتمد هذه التقنية على الاختلافات في الكثافة بين الأنسجة الدهنية والخالية من الدهون وتسمح بالكشف السريع عن الدهون والأنماط الظاهرية الخالية من الدهون. لقد تحققنا من دقة هذه الطريقة بالمقارنة مع نسبة الدهون في الجسم كما هو محدد عن طريق استخراج الدهون المحايدة وكروماتوغرافيا الغاز إلى جانب قياس الطيف الكتلي (GCMS). علاوة على ذلك ، نحدد البروتوكولات التفصيلية لجمع اليرقات وتزامنها بالإضافة إلى الوصفات التجريبية ذات الصلة. تتغلب التقنية المعروضة أدناه على أوجه القصور الرئيسية في طرق قياس كمية الدهون الأكثر استخداما وتوفر طريقة قوية لفحص يرقات L3 بسرعة وحساسية بحثا عن الأنماط الظاهرية لتنظيم الدهون مع الحفاظ على سلامة اليرقات. هذا الاختبار له تطبيقات واسعة لدراسة التمثيل الغذائي وتنظيم الدهون باستخدام ذبابة الفاكهة.
المقدمة
وقد استخدمت ذبابة الفاكهة لأكثر من قرن في دراسة علم الوراثة وغيرها من المسائل البيولوجية الأساسية. في العقود القليلة الماضية، أصبح من الواضح أن ذبابة الفاكهة هو أداة قوية في دراسة العديد من الأمراض التي تصيب الإنسان. كما 70-80٪ من الجينات المرتبطة مع الأمراض التي تصيب الإنسان لها ortholog الطيران تحديده و1-4، تقدم ذبابة الفاكهة نظام بعد للترجمة مبسطة للدراسة الأمراض المعقدة. وقد استفاد الأيض بشكل خاص من هذه الدراسة. ليست فقط في علم الوراثة من عملية التمثيل الغذائي المحفوظة جيدا بين الذباب والبشر، ولكن الأجهزة المختصة وأنواع الخلايا هي أيضا مشابهة جدا 2،5. على سبيل المثال، الدهون في الجسم من مخازن الطيران على حد سواء triacylglycerides (TAG) والجليكوجين، وظائف مماثلة لتلك التي تقوم في الكبد الثدييات والدهنية البيضاء الأنسجة 6. عن طريق ذبابة الفاكهة كنموذج للسمنة الإنسان قد تحسنت بشكل كبير من فهمنا للدهنالتمثيل الغذائي وعلم الوراثة من السمنة 7. مرحلة اليرقات التنمية هي مفيدة بشكل خاص لدراسة فصل المواد المغذية إلى تخزين أو استخدام لأنها مخصصة لتغذية وتخزين الطاقة لاستخدامها خلال pupariation.
حاليا، هناك العديد من الأساليب الكمية المختلفة لتحديد مستويات التخزين الدهون في ذبابة الفاكهة. الطريقة الأكثر استخداما على نطاق واسع هو فحص اللونية إلى جانب (CCA) 8،9. وقد وضعت التقييم القطري المشترك لتحديد مستويات TAG في مصل الدم البشري وتعمل على فرضية أن الجلسرين تتحرر من العمود الفقري من الدهون الثلاثية سيخضع العديد من ردود الفعل، مما يؤدي في نهاية المطاف إلى رد فعل يقترن الأكسدة توليد منتج ملون. ثم يتم قياس امتصاص موجات محددة من الضوء لتحديد المبلغ الأولي من الجلسرين الحاضر. ومع ذلك، الجلسرين ويمكن أيضا أن تتحرر من أحادية وdiacylglycerides بالإضافة إلى TAG، وبالتالي قد لا تكون مقياسا دقيقا لياليtored الدهون في الجسم 9. وعلاوة على ذلك، صبغة عين الذباب الكبار سحق يمكن أن تتداخل مع بعض قراءات الامتصاصية وتعقيد النتائج 9،10. لذلك، CCA يجب أن يصاحب ويصادق عليها طبقة رقيقة اللوني (TLC)، والذي يسمح لفصل معظم الأسر الدهون التي يمكن quantitated من كثافة 10،11. ومع ذلك، بعض الطبقات الشحمية مثل الجامدة لا يمكن تحليلها ويجب أن يكون كميا بطريقة مختلفة (12). مطياف الكتلة (MS) هو وسيلة دقيقة ل quantitate جميع الطبقات من الدهون الخلوية الرئيسية 12،13. ومع ذلك، فإن إجراءات استخراج الدهون اللازمة لتحليل بواسطة MS على حد سواء وقتا طويلا (أكثر جني ما يقرب من يوم كامل) ومكلفة. هنا نقدم طريقة بديلة لتحديد بسرعة وبتكاليف زهيدة مستويات العضوي الدهون في اليرقات L3 من ذبابة الفاكهة.
الطريقة المعروضة أدناه يستغل الفرق في الكثافة بين الأنسجة الدهنية والأنسجة العجاف. اتحاد كرة القدم الثديياتر الأنسجة لديها كثافة من حوالي 0.9 جم / مل 14 بينما العضلات والهيكل العظمي كما كثافة 1.06 جم / مل 15. هذا الاختلاف يعني أن الحيوانات مع مخازن أعلى من الدهون سيكون أقل كثافة من الحيوانات مع مخازن أقل من الدهون، والتي سوف تسمح لهم تطفو أفضل في حل من كثافة ثابتة. هذه الخاصية تسمح لفحص سريع للغاية لعدد كبير من الحيوانات في حين يجري كل غير مكلفة وغير الغازية. وقد تم استخدام التحليل القائم على الطفو على حد سواء لتأكيد الظواهر من تغيير التنظيمية المعروفة من مستويات الدهون وكذلك لتحديد المنظمين وراثية وعصبية جديدة من السمنة 16،17.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. جمع البيض من الذباب مع تراكيب وراثية من الفائدة
ملاحظة: الصلبان المثالية تتكون من 150 الذباب البكر ولا يقل عن 75 من الذكور. يجب أن تتكون مجموعات الأسهم لا يقل عن 200 الذباب.
- إعداد لوحات العنب.
- إضافة 37.5 غرام أجار إلى 1.5 لتر من الماء المقطر في قارورة 4 لتر.
- الأوتوكلاف مزيج الماء / أجار لمدة 50 دقيقة في 121 درجة مئوية (250 درجة فهرنهايت).
- في حين أن المياه / مزيج أجار هو التعقيم، إضافة 50 غرام السكروز إلى 500 مل من عصير العنب ويحرك مع بقضيب على طبق من اثارة ساخنة حتى يذوب السكروز.
- إيقاف الحرارة ويستمر التحريك لتبريد عصير العنب / خليط السكروز إلى أقل من 70 درجة مئوية. اختبار درجة الحرارة الداخلية مع الحرارة الكحول.
- إضافة 3 ز ذبابة الفاكهة عامل مضاد للفطريات (على سبيل المثال، Tegosept) لتسخين عصير العنب / خليط السكروز ويحرك المزيج حتى يذوب.
- عندما تكون المياه / خليط أجار هو من الأوتوكلاف، والسماح للقارورة لتبرد لمسة من يحوم في بعض الأحيان.
- الجمع بين الماء / خليط أجار والعنب عصير / خليط السكروز ويقلب حتى تمتزج جيدا.
- استخدام ماصة المصلية لإضافة 8-10 مل من خليط العنب إلى غطاء لوحة بتري صغيرة (35 × 10 مم النمط). يسمح هذا المزيج على تتويج أعلى من ارتفاع الجدران غطاء لتشكيل شكل محدب.
- السماح لوحات العنب لتبرد لمدة 2 ساعة في درجة حرارة الغرفة ثم تخزينها في وعاء محكم في 4 درجة مئوية.
- تحضير عجينة الخميرة.
- إضافة 6 مل من محلول العازلة الفوسفات (PBS) إلى 4 ز الحية الخميرة المجففة نشطة في 50 مل أنبوب مخروطي الشكل وتخلط مع ملعقة حتى تصبح ناعمة.
- متجر الخميرة لصق في 4 درجة مئوية.
- إضافة وجبة بوظة صغيرة (حوالي 1/8 ملعقة شاي) من عجينة الخميرة في وسط لوحة العنب. السلس أسفل أي حواف خشنة مع ملعقة.
- وضع لوحات العنب في حاضنة حتى وصلت درجة الحرارة المحيطة.
- نقل الذباب من الاهتمام إلى لوحة غرفة جمع البيض ومكان العنب ثإيث الخميرة لصق التي تواجه الداخل على القمة. شريط لوحة العنب إلى غرفة جمع البيض لتجنب السماح لوحة تسقط. تأكد من كتابة المعلومات الوراثي والتاريخ مهمة على الجزء السفلي من لوحة العنب.
- إنقلب غرفة جمع البيض للسماح للالذباب لتضع بيضها على لوحة العنب.
- وضع مربع أو تغطية على المخادع جمع البيض ووضعها في حاضنة عند 25 درجة مئوية.
- السماح الذباب لتضع بيضها ل4-6 ساعة.
- إنهاء جمع بأخذ لوحة العنب من غرفة جمع البيض ونقل الذباب العودة الى زجاجة للغذاء. استخدام ملعقة لتمحو أي معجون الخميرة الزائدة من لوحة العنب. متجر لوحة العنب في طبق بتري أكبر في حاضنة ترطيب عند 25 درجة مئوية ل~ 24 ساعة.
2. نقل اليرقات إلى التجريبية للأغذية
- إعداد الطعام التجريبية.
ملاحظة: تستند هذه وصفة الطعام على الأسهم بلومينغتون مركز صفة 18. تغييرات هامةوتشمل كمية من الخميرة لتحسين القيمة الغذائية للطعام زيادة وفقا لتقييم توقيت تجول مرحلة (ما بين 112-120 ساعة بعد جمع البيض عند 25 درجة مئوية). في حين وجدنا هذه الوصفة مثالية للمحافظة على الصحة والتنمية اليرقات التجريبية لدينا، أي وصفة طعام مقبولة معايرة معين مع الضوابط الإيجابية والسلبية، والأمثلة التي يتم سردها في الخطوة 3.10.- قياس 1600 مل من الماء المقطر.
- مزيج 134 غ دقيق الذرة، 10.6 غرام ذبابة الفاكهة آجار من النوع الثاني، وبعض من الماء (~ 500 مل) في كوب 1 لتر. ويخلط لمدة 2 دقيقة مع خلاط اليد الآلية.
- خلط 70 جم الحية الخميرة النشطة الجافة، 18.4 غرام طحين الصويا، 84.8 غرام الشعير استخراج، وبعض من الماء (~ 500 مل) في كوب 1 L آخر. ويخلط لمدة 2 دقيقة مع خلاط اليد الآلية.
- دوامة كل كوب وتصب في قارورة 4 لتر. استخدام المياه المتبقية لشطف من الأكواب وإضافة إلى القارورة.
- قياس 140 مل شراب الذرة الخفيفة وإضافة إلى قارورة، مزيج من قبل دوامات.
- الأوتوكلاف لمدة 50 دقيقة في 121 درجة مئوية (250 درجة فهرنهايت) في إعداد السائل.
- بعد التعقيم، صب الطعام في كوب 4 لتر والسماح لتبرد. مساعدة عملية التبريد عن طريق مزج مع يد خلاط الآلية.
- مرة واحدة في قارورة قد بردت يكفي للمس، إضافة 8.8 مل حمض البروبيونيك و 16.8 مل ذبابة الفاكهة المضادة للفطريات حل كيل / الإيثانول. اخلط جيدا. (جعل الحل وكيل ذبابة الفاكهة مضاد للفطريات عن طريق إضافة 380 غرام ذبابة الفاكهة عامل مضاد للفطريات إلى 1 L 200 الإيثانول دليل واثارة على طبق من الحارة حتى يذوب، والتأكد من الحل لا تتجاوز 70 درجة مئوية).
- صب الطعام في قوارير حتى الطعام ما يقرب من 1 بوصة العميق والسماح لتبرد على RT لمدة 2-3 ساعة. المكونات قارورة وتخزينها في حاضنة عند 25 درجة مئوية. استخدام في غضون اسبوع.
- يغرق ملعقة عدة مرات في الطبقة العليا من القارورة من المواد الغذائية ليسجل ذلك. وهذا سوف يساعد على اليرقات إلى الجحر والأعلاف.
- 22-24 ساعة بعد جمع البيض لديهاالعضوية، واستخدام الفرشاة الصغيرة لجمع 50 الأولى الطور (L1) يرقات من نفس الحجم التقريبي. وضع اليرقات في الغذاء التجريبي. تنظيف الفرشاة على مختبر مسح وضمان عدم وجود اليرقات المتبقية على الفرشاة قبل الاستمرار في التركيب الوراثي آخر.
- ضع قارورة من اليرقات في حاضنة عند 25 درجة مئوية، والسماح لتطوير.
3. تحديد مستويات الدهون في يرقات
- إعداد الحلول.
- إعداد 1 لتر 10X الأسهم برنامج تلفزيوني.
- إضافة 80 جم كلوريد الصوديوم، 2 غرام بوكل، 14.4 غ نا 2 هبو 4، و 2.4 ز KH 2 PO 4-800 مل من الماء في كوب 2 لتر تحتوي على بقضيب. يقلب مع عدم وجود الحرارة حتى يتم دمج جميع الأملاح. جلب الرقم الهيدروجيني إلى 7.4. زيادة حجم إلى 1 لتر من الماء.
- إعداد 2 لتر برنامج تلفزيوني 1X. إضافة 200 مل من محلول 10X الأسهم PBS إلى 1800 مل من الماء.
- استخدام هذا المخزون من برنامج تلفزيوني 1X لجعل 20٪ ث / ت السكروز.
- إعداد 1 لتر 10X الأسهم برنامج تلفزيوني.
- إزالة قارورة من اليرقات منحاضنة مرة واحدة هناك 20-40 اليرقات تجول حتى الجانبين من القارورة (عادة في اليوم الخامس بعد جمع البيض). تسجيل تاريخ ووقت الفحص، فضلا عن عدد من التيه اليرقات.
- يعد حل التجريبية بإضافة 11.5 مل PBS و 9 مل السكروز 20٪ إلى 50 مل أنبوب مخروطي الشكل.
- إضافة 20٪ سكروز إلى القارورة حتى يتم 0،5-1 بوصة من أعلى القارورة.
- استخدام ملعقة لاثارة بلطف صعودا في الطبقة العليا من الغذاء ليرقات الحرة التي ما زالت تختبئ في الطعام. فإن جميع اليرقات تطفو على السطح من الحل السكروز.
- استخدام ملقط لنقل بلطف اليرقات إلى تركيز السكروز الأولي من الخطوة 3.3.
- استخدام ملعقة لاثارة بلطف اليرقات في هذا الحل.
- غطاء الأنبوب المخروطي وإنقلب عدة مرات لمزيج دقيق الحل.
- إرفع قبعة أنبوب مخروطي الشكل ودوامة لخلق دوامة طيف.
- السماح لليرقات ليستقر، إما تطفو إلى أعلى من الحل أو الاشتراكيةnking إلى أسفل. الانتظار 2-5 دقائق ليرقات ليستقر.
ملاحظة: إذا كان لا يزال هناك اليرقات التي ليست بالتأكيد إما عائمة أو غرق، واختيار خط لاستخدامها كنقطة قطع لتسمية اليرقات إما العوام أو ثقالة. تطبيق هذا المعيار نفسه لجميع المورثات. نحن نستخدم زاوية في الجزء السفلي من أنبوب مخروطي الشكل لدينا حدود. ADP أو sir2 17 يرقات متحولة يمكن استخدامها كعنصر تحكم إيجابية وlsd2 يمكن استخدام 19 المسوخ كعنصر تحكم السلبية للمعايرة من الفحص. - تسجيل عدد من اليرقات العائمة وتركيز محدد اختبارها.
- إضافة 1 مل 20٪ سكروز إلى حل تجريبي لزيادة كثافته.
- كرر الخطوات من 3،7-3،10. تسجيل عدد من اليرقات العائمة وهذا التركيز الجديد.
- مواصلة الخطوات 3.12 و 3.13 حتى لا يقل عن 95٪ من اليرقات تطفو.
- استخدام ملقط لجمع كل اليرقات في طبق تشريح مليئة برنامج تلفزيوني.
- طب التوليداليرقات erve تحت المجهر وملاحظة إذا كان هناك أي يرقات صغيرة، قبل الشرانق، الشرانق، أو أي اختلافات أخرى بين المورثات.
ملاحظة: من الناحية المثالية، يجب أن تظهر جميع اليرقات متجانسة وفي هذه المرحلة التنموية نفسها. وقد لاحظنا فقط قياسات الدهون متسقة في ظل هذه الظروف. - تسجيل عدد من اليرقات.
- باستخدام ملقط، نقل 10 اليرقات إلى مختبر مسح لتجف. تسمية أنبوب microcentrifuge ووضع 10 اليرقات في أنبوب.
- فلاش تجميد اليرقات في النيتروجين السائل. تخزين أنبوب في -20 درجة مئوية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
يمثل الشكل 1 مثال على كيفية الفحص القائمة على الطفو يمكن الكشف عن كل من ارتفاع وانخفاض مخازن الدهون في اليرقات التلاعب بها وراثيا. الشكل 1A يدل على أن الإثارة أو إسكات مجموعة فرعية معينة من الخلايا العصبية (E347) في الدماغ اليرقات يدفع الدهون أقل وأعلى مخازن على التوالي. تم استخدام نفس تحكم الخلفية الوراثية في كلتا الحالتين الشكل يوفر 1B مثال عن كيفية ويؤيد هذا النمط الظاهري الحصول...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
هناك العديد من التقنيات التي تم تطويرها لقياس مستويات الدهون 8-10. ومع ذلك، كل من هذه الأساليب يأتي مع بعض العوائق الرئيسية التي تتم معالجتها بواسطة الفحص القائمة على الطفو المبينة أعلاه. أولا، هذا الاختبار هو سريع للغاية. اختبار التدرج التركيز الكامل لا تستغرق أكثر من 30 - 60 دقيقة. هذا هو تحسن كبير على معظم التقنيات المستخدمة حاليا. على سبيل المثال، دهن الكميات التي كتبها MS يأخذ 7-9 ساعة لعزل الدهون وعدة ساعات أخرى لتحليلها. هذا هو رادعا قويا عن...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.
شكر وتقدير
K.E.H. تم دعمه من خلال منحة التدريب في البيولوجيا الجزيئية NIH-T32-GM08730. تم دعم هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة ، منحة NIDDK 5K01DK095932 وجائزة AHA 12BGIA11930014 إلى TR.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| باكتو أجار | VWR | 214030 | |
| ويلش الأصلي 100٪ عصير العنب السكروز | |||
| فيشر | S512 | ||
| Tegosept | Genesee Scientific | 20-259 | |
| الإيثانول | 200 دليل | ||
| خميرة بيكر | Fleichmann's | ||
| Yellow وجبة الذرة | كويكر | المخصب | |
| ذبابة الفاكهة أجار النوع الثاني | Apex | 66-104 | |
| دقيق الصويا | ADM المكونات المتخصصة | 062-100 | |
| مستخلص الشعير | بريس | 5748 | |
| شراب الذرة الخفيف | حمض كارو | ||
| بروبيونيك | VWR | U330-09 | |
| كلوريد الصوديوم | فيشر | 50147491 | |
| فوسفات البوتاسيوم أحادي القاعدة | سيجما | P5655-100G | |
| فوسفات الصوديوم اللامائي | فيشر | S3933 | |
| كلوريد البوتاسيوم | فيشر | P330-500 | |
| 35 × 10 مم صفيحة بتري | فيشر | 08-757-100A | |
| 50 مل | فيشر | 50-869-569 |
المراجع
- Bier, E. Drosophila, the golden bug, emerges as a tool for human genetics. Nat Rev Genet. 6, 9-23 (2005).
- Liu, Z., Huang, X. Lipid metabolism in Drosophila development and disease Using Drosophila System to Study Lipid Metabolism Lipids Function in Drosophila Early Development. Acta Biochim Biophys Sin. 45 (1), 44-50 (2013).
- Ruden, D. M., Lu, X. Evolutionary conservation of metabolism explains howDrosophila nutrigenomics can help us understand human nutrigenomics. Genes Nutr. 1 (2), 75-84 (2006).
- Wolf, M. J., Rockman, H. A. Drosophila, genetic screens, and cardiac function. Circ. Res. 109, 794-806 (2011).
- Trinh, I., Boulianne, G. L. Modeling obesity and its associated disorders in Drosophila. Physiology (Bethesda). 28 (2), 117-124 (2013).
- Azeez, O. I., Meintjes, R., Chamunorwa, J. P. Fat body, fat pad and adipose tissues in invertebrates and vertebrates: the nexus. Lipids Health Dis. 13, 71(2014).
- Dourlen, P., Sujkowski, A., Wessells, R., Mollereau, B. Fatty acid transport proteins in disease: New insights from invertebrate models. Prog. Lipid Res. 60, 30-40 (2015).
- Hildebrandt, A., Bickmeyer, I., Kühnlein, R. P. Reliable Drosophila body fat quantification by a coupled colorimetric assay. PLoS One. 6 (9), e23796(2011).
- Tennessen, J. M., Barry, W. E., Cox, J., Thummel, C. S. Methods for studying metabolism in Drosophila. Methods. 68, 105-115 (2014).
- Al-Anzi, B., Zinn, K. Colorimetric measurement of triglycerides cannot provide an accurate measure of stored fat content in Drosophila. PLoS One. 5 (8), e12353(2010).
- Thanh, N. T. K., Stevenson, G., Obatoml, D., Bach, P. Determination of Lipids in Animal Tissues by High-Performance Thin-Layer Chromatography with Densitometry. J. Planar Chromatogr. 13, 375-381 (2000).
- Borrull, A., Lopez-Martinez, G., Poblet, M., Cordero-Otero, R., Rozes, N. A simple method for the separation and quantification of neutral lipid species using GC-MS. Eur. J. Lipid Sci. Technol. 117, 274-280 (2015).
- Shui, G., et al. Toward one step analysis of cellular lipidomes using liquid chromatography coupled with mass spectrometry: application to Saccharomyces cerevisiae and Schizosaccharomyces pombe lipidomics. Mol. Biosyst. 6, 1008-1017 (2010).
- Farvid, M. S., Ng, T. W. K., Chan, D. C., Barrett, P. H. R., Watts, G. F. Association of adiponectin and resistin with adipose tissue compartments, insulin resistance and dyslipidaemia. Diabetes. Obes. Metab. 7 (4), 406-413 (2005).
- Urbanchek, M. G., Picken, E. B., Kalliainen, L. K., Kuzon, W. M. Specific force deficit in skeletal muscles of old rats is partially explained by the existence of denervated muscle fibers. J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 56A (5), B191-B197 (2001).
- Mosher, J., et al. Coordination between Drosophila Arc1 and a specific population of brain neurons regulates organismal fat. Dev. Biol. 405 (2), 280-290 (2015).
- Reis, T., van Gilst, M. R., Hariharan, I. K. A buoyancy-based screen of drosophila larvae for fat- storage mutants reveals a role for Sir2 in coupling fat Storage to Nutrient Availability. PLoS Genet. 6 (11), e1001206(2010).
- Current Bloomington Recipe for Drosophila Medium. , Bloomington Drosophila Stock Center at Indiana University. Available from: http://flystocks.bio.indiana.edu/Fly_Work/media-recipes/bloomfood.htm (2014).
- Teixeira, L., Rabouille, C., Rørth, P., Ephrussi, A., Vanzo, N. F. Drosophila Perilipin/ADRP homologue Lsd2 regulates lipid metabolism. Mech. Dev. 120 (9), 1071-1081 (2003).
- Perez, C. L., Van Gilst, M. R. A 13C Isotope Labeling Strategy Reveals the Influence of Insulin Signaling on Lipogenesis in C. elegans. Cell Metab. 8, 266-274 (2008).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
