يوضح هذا الفيديو نموذجا لدراسة تطور تضخم عضلي بعد جراحة التدخل الوريدي في الفئران.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يوضح هذا الفيديو نموذجا لدراسة تطور تضخم عضلي بعد جراحة التدخل الوريدي في الفئران.
التطعيم المجازي هو طريقة علاج راسخة لمرض الشريان التاجي. لا تزال سالكية الكسب غير المشروع هي كعب أخيل لترقيع الوريد الصافن. تعد النماذج البحثية لفشل الكسب غير المشروع المجازي ضرورية لفهم أفضل للعمليات البيولوجية المرضية والفيزيولوجية المرضية أثناء فقدان سالكية الكسب غير المشروع. تشبه النماذج الحيوانية الكبيرة ، مثل الخنازير أو الأغنام ، الهياكل التشريحية البشرية ولكنها تتطلب مرافق ومعدات خاصة. يصف هذا الفيديو نموذج تداخل وريد الفئران للتحقيق في فقدان سالكية الطعم الوريدي. الفئران غير مكلفة وسهلة التعامل معها. بالمقارنة مع نماذج الفئران ، فإن الحجم المناسب للفئران يسمح بقابلية تشغيل أفضل ويتيح الحصول على كمية كافية من المواد لمزيد من التحليل المتنوع. باختصار ، يتم حصاد الوريد الشرسوفي السفلي للفأر المتبرع واستخدامه لاستبدال جزء من الشريان الفخذي. يتم إجراء مفاغرة عن طريق غرز مفردة ومختومة بغراء الفيبرين. يمكن مراقبة سالكية الكسب غير المشروع بشكل غير جراحي باستخدام التصوير بالموجات فوق الصوتية على الوجهين. يتطور تضخم العضل الحقي ، وهو السبب الرئيسي لفقدان سالكية الكسب غير المشروع ، تدريجيا بمرور الوقت ويمكن حسابه من المقاطع العرضية النسيجية.
أمراض الشرايين التاجية ومضاعفاتها هي من بين الأسباب الرئيسية للوفاة في جميع أنحاء العالم. الاستراتيجيات العلاجية الحالية تركز على إعادة تأسيس تدفق الدم، إما عبر توسيع الأوعية ضاقت أو عن طريق إنشاء الالتفافية. وصفت التاجي تطعيم مجازة الشريان (التاجي) باستخدام طعم ذاتي الوريد لأول مرة في عام 1968 ونقحت على مر السنين. وبصرف النظر عن إعادة التوعي من الجزء الأمامي الأيسر النازل الشريان التاجي، وتستخدم القنوات الوريد الصافن الأكثر شيوعا 1. ومع ذلك، لا يزال الكسب غير المشروع المباح كعب أخيل الطعوم الوريد الصافن (SVG). بعد سنة واحدة لعملية جراحية، الكسب غير المشروع المباح هو 85٪، وانخفض إلى 61٪ بعد عشر سنوات 2،3. وبالتالي الكشف عن الآليات والأسباب المرضية من SVG فقدان المباح هو مهمة هامة.
يوضح هذا الفيديو الوريد نموذج مداخلة الفئران للتحقيق في الوريد فقدان الكسب غير المشروع. الأهداف العامة لهذه الطريقة هي لاستكشاف pathobiological الكامنةوالعمليات -physiological أثناء تطور المرض وتطوير نموذج مناسب لمكافحة المخدرات أو العلاجية اختبار الخيار. عن طريق زرع الوريد الشرسوفي السطحي في النظام الشرياني، وهذا نموذج يحاكي عن كثب السريرية من التاجي تطعيم مجازة الشريان. الصدمة الجراحية، نقص التروية، والإجهاد الجدار هي محفزات هامة للتغيرات الأوعية الدموية المرضية وتقليد في النموذج الذي وصفها.
تتوفر للتحقيق في الوريد الكسب غير المشروع خسارة المباح النماذج والأنواع المختلفة. نماذج حيوانية كبيرة، مثل الخنازير 4 والأغنام 5، 6 كلاب، والقرود 7، تشبه سفينة البشرية والهياكل التشريحية، وبالتالي تمكين الاستراتيجيات العلاجية المعقدة، مثل الدعامات تجاوز أو تقنيات جراحية جديدة، لفحصها 8. ومع ذلك، هناك حاجة المساكن الخاصة، والمعدات، والموظفين. وبالإضافة إلى ذلك، ارتفاع التكاليف والحاجة إلى التخدير أثناء الجراحة إضافية تعيق تطبيقها على نطاق أوسع بهم. خجميع الحيوانات، بما في ذلك الفئران، من السهل التعامل معها، لا تحتاج إلى مساكن خاصة، ولها تكاليف إدارتها. مقارنة نماذج الماوس 9،10، ونماذج الفئران لديها ميزة أفضل عمليات التشغيل وتقلب بالتالي أقل في النتيجة. الفئران هي من الناحية الفسيولوجية وراثيا أكثر مماثلة على البشر من الفئران 11،12. وبالإضافة إلى ذلك، فإن معظم الفئران من النوع البري تطوير فقط محدودة myointima 13، والتي تجعل نماذج الماوس عرضة لكتابة الأخطاء الثاني. الأنسجة الأوردة الماوس الرئيسية، مثل الوريد الأجوف السفلي، ويتكون فقط من عدد قليل من طبقات الخلايا ويجعل تقييم في وقت مبكر من الصعب 13. والعيب آخر هو كمية صغيرة من نسيج المتاحة لتحليلها لاحقا بعد الشفاء الكسب غير المشروع.
النموذج الذي وصفها في هذا الفيديو هو تكرار، وغير مكلفة، والسهل القيام بها، وأنه يمكن أن تنشأ بسرعة وبشكل موثوق. انها مناسبة خاصة لتقييم العوامل العلاجية التجريبية باهظة الثمن، مثل ناقلات فيروسيةللعلاج بالجينات، بطريقة اقتصادية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تلقى الحيوانات الرعاية الإنسانية وفقا لدليل لمبادئ الحيوانات المختبرية، من معهد الثروة الحيوانية مختبر أعد ونشر من قبل المعاهد الوطنية للصحة. تمت الموافقة على جميع البروتوكولات الحيوان من قبل السلطة المحلية المسؤولة ( "FÜR مبلغ الدفعة Gesundheit اوند Verbraucherschutz، Hansestadt (مكتب الصحة وحماية المستهلك) هامبورغ").
1. رعاية الحيوان
2. إعداد الجرذ المانحة
3. إعداد الجرذ مستلم
4. دوبلكس بالموجات فوق الصوتية
ملاحظة: استخدام التصوير فوق الصوتي duxplex لتصور تدفق الدم غير جراحية في الفئران (14).
5. التشريح المرضي
ملاحظة: الحصاد وصمة عار على السفينة مع تلطيخ ثلاثي الألوان ماسون لتحليل المورفومترية 15.
6. ضوء بارد التصوير (BLI)
وقد تعقب الكسب غير المشروع بعد العملية الجراحية على مر الزمن في الجسم الحي عن طريق قياس إشارة للإضاءة الحيوية 1: ملاحظة6.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
نموذج مداخلة الفئران الوريد هو مناسب لدراسة تطوير تضخم myointima والفشل الوريد الكسب غير المشروع. الحيوانات على التعافي بشكل جيد من الجراحة وتظهر حالة ممتازة البدنية بعد العملية. ويبين الشكل 1 الخطوات الجراحية الرئيسية. بعد شق الجلد على طول الخط الأربية، ويتم تحديد الوريد السطحي شرسوفي والشريان الفخذي (الشكل 1A). يجب أن يتم تنفيذ حصاد الكسب غير المشروع بعناية، دون الإضرار الكسب غير المشروع (الشكل 1B)، وهذا يمكن أن يؤدي إلى فشل الك...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
يوضح هذا الفيديو الوريد نموذج مداخلة الفئران للتحقيق في الوريد فقدان الكسب غير المشروع والسماح للتنقيب عن العمليات المرضية الكامنة واختبار الأدوية الجديدة أو الخيارات العلاجية.
التخدير هو جانب هام من العمليات الجراحية. ينصح نظام التخدير inhalative المستمر، وهذا هو وسيلة آمنة وسهلة، وخصوصا خلال عمليات طويلة. وهذا يمكن أن تكون ذات أهمية كبيرة خلال مرحلة التدريب، عندما تأخذ العملية أكثر من 1 ساعة.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
الكتاب أشكر كريستيان Pahrmann للحصول على المساعدة الفنية لها. وقد تم تمويل هذه الدراسة من قبل دويتشه ستيفتونغ الامناء Herzforschung (F / 28/14). وأيد DW من قبل جائزة السفر من الجمعية الدولية للالقلب وزراعة الرئة. تلقى الدفتيريا سلع أخرى كرونة التميز الراتب من شيء آخر-كرونر-فريزنيوس شتيفتونغ (2012_EKES.04). تلقى SS المنح البحثية من جمعية الألمانية للبحوث (DFG، DE2133 / 2-1، TD وSCHR992 / 3- 1، SCHR992 / 4-1، SS).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| جرذ LEW / Crl | نهر تشارلز | رقم المخزون 004 | |
| جرذ LEW-Tg (GT (ROSA) 26Sor- 1 luc) 11معهد Jmsk | لحيوانات المختبر ، جامعة كيوتو ، اليابان | NBPR رقم الفئران 0299 | http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/ |
| PFA 4٪ | علوم المجهر الإلكتروني | #157135S | 20٪ |
| ماكينة قص الشعر | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Forene | AbbVie | PZN 10182054 Art.Nr.: B506 | Isoflurane |
| المشبك الجراحي المجهري | أدوات العلوم | الدقيقة 18055-04 | Micro-Serrefine - |
| قضيب المشبك | أدوات العلوم الدقيقة | 18056-14 | |
| كريم إزالة الشعر | روفين مستحضرات التجميل | 27618 | |
| بوفيدون اليود | بيتادين بوردو فارما | NDC: 67618-152 | |
| 10-0 خياطة إيثيلون | إيثيكون | 2814G | |
| 5-0 خياطة البرولين | إيثيكون | EH7229H | |
| ريماديل | فايزر | 400684.00.00 | كاربروفين |
| نوفامينسلفون | النسبةفارم | PZN 03530402 | ميتاميزول |
| هيبارين | روتيكسميديكا | PZN: 3862340 | 25.000 آي / مل |
| زيلوكين 1٪ | AstraZeneca | PZN: 1137907 | Lidocain |
| EVICEL | J& J Med.Ethicon Biosur | PZN 7349697 Art. Nr.: EVK01DE | غراء الفيبرين |
| كلوريد الصوديوم 0.9٪ | B.Braun | PZN 06063042 الفن: رقم 3570160 | |
| Vevo 770 عالي الدقة in vivo < / em> نظام التصوير المصغر | التصوير بالموجات فوق الصوتية VisualSonics | على الوجهين | |
| Ecogel 100 جل الموجات فوق الصوتية | Eco-med | 30GB | |
| D-Luciferin Firefly ، ملح البوتاسيوم | Biosynth | L-8220 | |
| PBS درجة الحموضة 7.4 | Gibco | 10010023 | |
| Xenogen Ivis 200 | Perkin Elmer | تصوير التلألؤ البيولوجي | |
| Weigerts الحديد هيماتوكسيلين كيت | ميرك | 1.15973.0002 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| Resorcine-Fuchsine Weigert | Waldeck | 2.00E-30 | تلطيخ ثلاثي |
| الألوان حمض فوكسين | سيجما ألدريتش | F8129-25G | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| Ponceau S | حل Serva Electrophorese | 33427 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| حمض الموليبداتو فوسفوريك هيدرات | Merck | 1.00532.0100 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| برتقالي G | Waldeck | 1B-221 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| أخضر فاتح SF | Waldeck | 1B-211 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| حمض الخليك الجليدي | Sigma-Aldrich | 537020 | |
| 37٪ HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
| Xylene | Th. Geyer | 3410 | |
| Paraaffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
| الإيثانول المطلق | Th. Geyer | 2246 | |
| الإيثانول 96٪ | Th. Geyer | 2295 | |
| الإيثانول 70٪ | Th. Geyer | 2270 | |
| Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
| طبق تلطيخ | Ted Pella | 21075 | |
| مرهم العين والأنف Bepanthen | Bayer | 1578675 | مرهم العين |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.