يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
زيادة وقت الاسترداد وانخفاض إدارة LPS لدراسة آليات تحفيز عصب فاجوس في الاستجابات الالتهابية محدودة
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
الالتهاب هو استجابة موضعية للعدوى وتلف الأنسجة بوساطة البلاعم المنشطة والخلايا الوحيدة والخلايا المناعية الأخرى التي تطلق السيتوكينات ووسطاء الالتهاب الآخرين. لفترة طويلة ، تمت دراسة الآليات الخلطية والخلوية لدورها في تنظيم الاستجابة المناعية ، لكن التطورات الحديثة في مجال علم المناعة وعلم الأعصاب كشفت أيضا عن آليات عصبية محددة ذات إمكانات علاجية مثيرة للاهتمام. تم وصف ما يسمى بالمسار المضاد للالتهابات (CAP) للتحكم في الاستجابات المناعية الفطرية والالتهابات بطريقة قوية للغاية. في أوائل عام 2000 ، طور تريسي والمتعاونون تقنية تحفز العصب المبهم وتحاكي تأثير المسار. تعتمد المنهجية على التحفيز الكهربائي للعصب المبهم عند الجهد والتردد المنخفضين ، من أجل تجنب أي آثار جانبية للتحفيز المفرط ، مثل تحرير تقلب معدل ضربات القلب. تتوفر الآن أجهزة كهربائية للتحفيز ، مما يجعل من السهل إعداد المنهجية في المختبر. كان الهدف من هذا البحث هو التحقيق في المشاركة المحتملة للبروستاجلاندين في CAP. لسوء الحظ ، بناء على المحاولات السابقة ، فشلنا في استخدام البروتوكول الأصلي ، حيث كانت الاستجابة الالتهابية المستحثة إما عالية جدا أو لم تكن مناسبة لخصائص التمثيل الغذائي الأنزيمي. ظلت الإعدادات المختلفة لبروتوكول الجراحة الأصلي دون تغيير في الغالب ، ولكن تم تحسين الشروط المتعلقة بالتحريض الالتهابي والنقطة الزمنية قبل التضحية لتناسب أغراضنا (أي للتحقيق في تورط CAP في استجابات التهابية محدودة).
تتضمن النسخة المعدلة من البروتوكول الأصلي ، المعروضة هنا ، نطاقا زمنيا أطول بين تحفيز العصب المبهم وتحليله ، والذي يرتبط بتحريض أقل للاستجابات الالتهابية. بالإضافة إلى ذلك ، أثناء تقليل مستوى عديدات السكاريد الدهنية (LPS) للحقن ، صادفنا أيضا ملاحظات جديدة تتعلق بالخصائص الميكانيكية في الطحال.
المقدمة
توفر الحصانة الفطرية على السطر الأول الفوري للدفاع ضد العدوى والأمراض في مجموعة واسعة من الكائنات الحية. ليس فقط أنه يبدأ الاستجابة المناعية الأولية للقضاء على التهديد، ولكنه أيضا يلعب دورا محوريا في تفعيل وتثقيف حصانة التكيفية التي تنفذ الاستجابات المناعية الثانوية بطريقة الممرض محددة. ومدبرة التهاب مجموعة كبيرة من السيتوكينات و chemokines، والتي بدورها لديها القدرة على جذب الخلايا المناعية الأخرى إلى موقع الإصابة وللحث على علامات رئيسية من التهاب، مثل احمرار، تورم، ألم، وفقدان الوظيفة، والحمى . مدة وشدة الالتهاب تعتمد على عدة عوامل، ولكن حل الالتهاب واستعادة التوازن هو خطوة حاسمة لتجنب ظهور الأمراض الالتهابية المزمنة. وقد تكش....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تم تنفيذ جميع التجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية لرعاية واستخدام الحيوانات التي وافقت عليها لجنة الأخلاقيات المحلية في معهد كارولينسكا في ستوكهولم. التالي لجنة الأخلاقيات المحلية توجيهات الاتحاد الأوروبي بشأن رعاية الحيوان.
ملاحظة: التغييرات الرئيسية من البروتوكول الأصلي هي فترة النقاهة بعد الجراحة (6 ساعات مقابل 1 ساعة) ومستوى LPS حقن (2 ملغ / كغ مقابل 15 ملغ / كلغ). وبخلاف ذلك، لم يتم تغيير إعدادات مختلفة تتعلق الجراحة نفسها.
1. إعداد المواد اللازمة لتحفيز
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
مستوى TNFα وانترلوكين 1β (IL-1β) بعد زيادة الفاصل الزمني بعد الجراحة وتقليل جرعة من LPS
كما هو موضح سابقا، وذلك باستخدام بروتوكول الأصلي، وانخفاض VNS مستويات TNFα (169.3 ± 24.9 جزء من الغرام / ملغ في SHAM مقابل 39.7 ± 10.8 جزء من الغرام / ملغ في VNS، ف <0.001) وIL-1β (360.0 ± 40.21 الغرام / ملغ في SHAM مقابل 191.7 ± 27.2 جزء من الغرام / ملغ في VNS،.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
منذ اكتشافه في وقت مبكر 2000s، آليات CAP تم دراسة وافية. لدينا الآن صورة جيدة عن الطريق، وعلى وجه الخصوص، الجهاز المستهدف، والطحال، حيث NE، خلايا الذاكرة T، منظمة العمل ضد الجوع، والضامة العمل كفريق واحد فعال جدا إلى أسفل تنظيم وسطاء التهابات 2. ونحن أيضا نشرت مؤخرا بيانات على أهمية وجود نظام البروستاجلاندين وظيفية في الفئران، على وجه الخصوص، PGE 2، التي من الواضح أن عنصر إلزامي لإطلاق أدن تشافيز في الطحال بعد تفعيل CAP 3........
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
شكر وتقدير
تم دعم الدراسة من قبل مجلس البحوث السويدي ، وجمعية الروماتيزم السويدية ، ومؤسسات معهد كارولينسكا ، ومجلس مقاطعة ستوكهولم ، ومؤسسة والنبرغ ، ومؤسسة GV 80 عاما للبحث. يود المؤلفون أيضا أن يشكروا هانا أوكوت على تدقيق المخطوطة.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| الكمبيوتر | توشيبا | - | أي جهاز كمبيوتر متوافق بالفعل |
| نظام الحصول على البيانات MP-150 | Biopac | MP150WSW | |
| الاعتراف بالبرامج | Biopac | ||
| الفئران C57Bl / 6 | نهر | ||
| زجاجة أكسجين طبية | AGA | 107563 | |
| زجاجة هواء طبية | AGA | 108639 | |
| Vetflurane (1,000 مجم / جم) | Virbac | 137317 | |
| LPS | Sigma-Aldrich | L2630 | |
| Saline | Merck Millipore | 1024060080 | |
| PBS 10x | Sigma-Aldrich | P5493 | مخفف 10 مرات لتركيز المستخدم |
| حقنة (1 مل) | BD Plastipak | 303172 | |
| إبر 23 جم | دينار كويتي | 0.6 × 30 مم (أزرق) | |
| ملقط تشريح دقيق (منحني) | Sigma-Aldrich | F4142 | |
| مقص تشريح | Sigma-Aldrich | Z265969 | |
| خياطة جراحية 4-0 | Ethicon | G667G | |
| وحدة القتل الرحيم | Euthanex Smartbox | EA-32000 | |
| Cavilon No Sting Barrier Film | 3M Health Care | 3346N | |
| TH1 / TH2 9-Plex asssay ، مجموعة فائقة الحساسية | MesoScale Discovery | K15013C-1 | |
| جهاز القطب الكهربائي المحفز | Biopac Systems | STIMSOC | |
| Aesculap Isis ماكينة حلاقة | Agnthos | GT420 | |
| R70 | القوارض الغذائي من Lantmannen ، ستوكهولم ، السويد |
المراجع
- Nathan, C. Points of control in inflammation. Nature. 420 (6917), 846-852 (2002).
- Rosas Ballina, M., et al. Acetylcholine-synthesizing T cells relay neural signals in a vagus nerve circuit. Science. 334 (6052), 98-101 (2011).
- Le Maître, E., et al.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
الوسوم
