تطوير نموذج متوجا اللب مباشرة لتقييم اللب الجروح وتشكيل إصلاحي العاج في الفئران

Summary

نحن تصف طريقة خطوة بخطوة لأداء اللب المباشر متوجا على أسنان الفئران لتقييم التئام الجروح اللبي وتشكيل العاج الترميمي في الجسم الحي.

Abstract

لب الأسنان هو عضو حيوي في السن محمي بالكامل بالمينا والعاج. عندما يتعرض اللب بسبب إصابات مسببة للتسوس أو علاجي المنشأ ، غالبا ما يتم تغطيته بمواد متوافقة حيويا من أجل تسريع التئام الجروح اللبية. الهدف النهائي هو تجديد العاج التعويضي ، وهو حاجز مادي يعمل ك "ختم بيولوجي" ويحمي أنسجة اللب الأساسية. على الرغم من أن إجراء تغطية اللب المباشر هذا قد استخدم منذ فترة طويلة في طب الأسنان ، إلا أن الآلية الجزيئية الأساسية لالتئام الجروح اللبية وتكوين العاج التعويضي لا تزال غير مفهومة جيدا. للحث على العاج التعويضي ، تم إجراء تغطية اللب تجريبيا في الكبيرة ، ولكن أقل من ذلك في الفئران ، ويفترض أن يكون ذلك بسبب صغر أحجامها والصعوبات التقنية التي تلت ذلك. هنا ، نقدم طريقة مفصلة خطوة بخطوة لإجراء تغطية اللب في الفئران ، بما في ذلك تحضير تجويف يشبه الفئة الأولى ، ووضع مواد تغطية اللب ، وإجراء الترميم باستخدام مركب الأسنان. سيكون نموذج الفأر الذي يغطي اللب الخاص بنا مفيدا في التحقيق في الآليات الجزيئية الأساسية لالتئام الجروح اللبية في سياق العاج التعويضي في الجسم الحي من خلال تمكين استخدام الفئران المعدلة وراثيا أو بالضربة القاضية المتوفرة على نطاق واسع في مجتمع البحث.

Introduction

تسوس الأسنان هو أحد أكثر أمراض الفم انتشارا والسبب الرئيسي للتدخلات الجراحية للأسنان لدى جميع الأفراد تقريبا^1،2. يعتمد تشخيص التدخلات الجراحية وترميمات السن إلى حد كبير على استجابة اللب المناسبة والتئام الجروح بنجاح. في الواقع ، يؤدي تسوس الأسنان الذي يخترق بعمق المينا والعاج في كثير من الأحيان إلى تعرض أنسجة اللب الأساسية التي غالبا ما تكون "مغطاة بمواد طب الأسنان ، مثل هيدروكسيد الكالسيوم (Ca (OH) ₂) أو أسمنت سيليكات الكالسيوم الهيدروليكي (HCSCs) ، بما في ذلك مجاميع ثالث أكسيد المعادن (MTA). الهدف النهائي من إجراء تغطية اللب هذا هو تسريع التئام الجروح اللبية عن طريق تجديد العاج التعويضي ، وهو حاجز مادي يعمل ك "ختم بيولوجي" لحماية أنسجة اللب ا....

Protocol

تم شراء الفئران من مختبر جاكسون والاحتفاظ بها في الحظيرة خالية من مسببات الأمراض في شعبة جامعة كاليفورنيا في مختبر الطب الحيواني (DLAM). وأجريت التجارب وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية وافقت لجنة البحوث الحيوانية المستشار (ARC # 2016-037).

1. ماوس التخدير

1. استخدام البالغ من العمر ثمانية أسابيع الإناث الفئران C57 / BL6 (ن = 3).
2. تخدير الفئران باستخدام الكيتامين (80-120 ملغم / كغم من وزن الفأر) / زيلازين حلول (5 ملغم / كغم من وزن الفأر) وإدارة الب....

Results

هنا، أظهرنا الإجراءات خطوة بخطوة لأداء اللب متوجا على أسنان الفئران. أحد الجوانب الرئيسية من اللب السد في الفئران هو أن يكون الجهاز مناسبا. في هذا الصدد، وجود مجهر مع التكبير السلطة 10X من الضروري (الشكل 1A). لإنشاء إعداد الفئة I-تشبه في السن، كنا لدغ ¼ جولة في سرعة عالية الكهربائية قبضة في 200،000 دورة في الدقيقة (الشكل 1B). بدلا من ذلك، أي محركات أخرى، بما في ذلك تلك التي تستخدم الهواء المضغوط، ويمكن استخدامها لإ.......

Discussion

حاليا، هناك العديد من النماذج التجريبية المختلفة المتاحة للتحقق من صحة الآثار في الجسم الحي من مواد طب الأسنان، السقالات، أو عوامل النمو على التفرقة سني المنشأ من الخلايا الجذعية لب الأسنان (DPSCs) ^13. وتشمل هذه النماذج زرع خارج الرحم ذاتي من DPSCs إلى الجهاز، مثل كبسولة الكلى، أو زرع تحت الجلد في الفئران DPSCs المناعة مع السقالات ^14،15. ومع ذلك، فإن هذه الأساليب محدودة في هذا الشأن سني المنشأ على DPSCs لا يتم تنفيذ في البيئة اللب مثلي. من ناحية أخرى.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
BM-LED مجهر ستيريو	MEIJI Techno		Microscope
أوبتيما MCX-LED	Bien Air Dental	1700588-001	محرك محرك كهربائي
isoflurane	Henry schein صحة	NDC 11695-0500-2
1/4 جولة بر	Brasseler	001092T0
Endodontic K-file	Roydent	98947
ProRoot MTA	Dentsply	PROROOT5W	MTA
نقطة ورقية	هنري شاين	100-3941
Ultra-Etch	Ultradent Product Inc.		نقش حمض الفوسفوريك
OptiBond SoloPlus	Kerr	29669	المواد اللاصقة
Coltolux LED	Coltene / Whaledent Inc.	C7970100115	معالجة وحدة ضوء
التوصيف صبغة	بيسكو	T-14012	مركب قابل للتدفق
Skyscan	Breuker	1275	uCT ماسح
ضوئي ميكروم	ثيرمو	HM355S	ميكروتوم
هيماتوكسيلين -1	ثيرمو ساینتيك	7221
إيوسين-واي	حراري علمي	7111
Cytoseal 60	Thermo Scientific	8310-16	حل التركيب