الشعيرات الدموية المغذية الفحص يقيس كمية الطعام في<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

ملخص

اختبار CApillary FEeder (CAFE) هو طريقة بسيطة وصديقة للميزانية وموثوقة للغاية للتحقيق في الآليات الكامنة وراء تناول الطعام. يستخدم مع الكائن الحي النموذجي الجيني متعدد الاستخدامات ذبابة الفاكهة السوداء ، ويوفر وسيلة قوية لاكتساب رؤى جديدة حول الآليات التنظيمية لتناول الطعام.

الملخص

بالنسبة لمعظم ، تعتبر التغذية سلوكا أساسيا لضمان البقاء على قيد الحياة ، وتؤثر على النمو والحركة والصحة والتكاثر. وبالتالي فإن تناول النوع والكمية المناسبين من الطعام له تأثير كبير على نوعية الحياة. تركز الأبحاث حول سلوك التغذية على العمليات الأساسية التي تضمن التغذية الفعلية وتكشف عن دور العوامل التي تنظم توازن الطاقة الداخلية والقواعد العصبية لاتخاذ القرار. الكائن الحي النموذجي ذبابة الفاكهة السوداء ، مع مجموعة كبيرة ومتنوعة من الأدوات التي يمكن تتبعها وراثيا لوضع العلامات على الخلايا العصبية المفردة ومعالجتها ، يسمح برسم خرائط للشبكات العصبية وتحديد شلالات الإشارات الجزيئية المشاركة في تنظيم تناول الطعام. يوضح هذا التقرير اختبار CApillary FEeder (CAFE) ويوضح كيفية قياس تناول الطعام في مجموعة من الذباب لفترات زمنية تتراوح من ساعات إلى أيام. يتكون هذا الاختبار سهل الاستخدام من شعيرات دموية زجاجية مملوءة بالطعام السائل الذي يمكن للذباب الوصول إليه والتغذية عليه بحرية. يتم تحديد استهلاك الغذاء في الفحص بدقة باستخدام أدوات قياس بسيطة. نصف هنا خطوة بخطوة الطريقة من الإعداد إلى التنفيذ الناجح لمقايسة CAFE ، ونقدم أمثلة عملية لتحليل تناول الطعام لمجموعة من الذباب في ظل ظروف خاضعة للرقابة. يتم توجيه القارئ من خلال القيود المحتملة للفحص ، ويتم تقييم مزايا وعيوب الطريقة مقارنة بمقايسات التغذية الأخرى في D. melanogaster.

المقدمة

الأكل ضروري. ومع ذلك، رفع القيود عن تناول الطعام مما يؤدي إلى اضطرابات الأكل مثل الشره المرضي، وفقدان الشهية أو الاتجاه العام إلى وجبة دسمة يفرض تكاليف على الأفراد والمجتمع ^{1، 2، 3.} الهدف من هذا البحث هو الكشف عن الآليات التنظيمية لتناول الطعام، وتوفير استراتيجية للتحايل على تشكيل اضطراب. وقد وفرت العديد من الدراسات باستخدام الكائنات نموذج الثدييات رؤى جديدة من الدوائر ودور نظم الإنذار في اضطرابات الأكل ^{4، 5، 6.} ومع ذلك، لدينا معرفة الأسس العصبية والجزيئية الكامنة وراء هذه الاضطرابات لا تزال بعيدة عن الاكتمال. في السنوات الأخيرة، وذبابة الفاكهة ذبابة الفاكهة أصبح نظام نموذجا قيما للكشف رؤى الآلية الأساسية في تنظيم metabolisم ^{7، 8، 9.} تأسست الشعرية المغذية (CAFE) فحص لذبابة الفاكهة في مختبر سيمور بنزر في عام 2007 مستوحاة من العمل في وقت سابق من قبل DETHIER في الذبابة ^{10 و 11.} جعل فحص CAFE من الممكن قياس مباشرة تناول الطعام في ذبابة الفاكهة. في هذا النظام الاختبار السلوكي، الذباب تتغذى على المواد الغذائية السائلة الواردة في الشعيرات الدموية الزجاج متدرجة وضعها داخل القارورة. تراجع الغضروف المفصلي الشعرية يشير فقدان حل الغذائية عن طريق التبخر والاستهلاك الغذائي. تحديد سعر التبخر التي كتبها قارورة دون الذباب يسمح للتقدير دقيق لتناول الطعام.

فحص CAFE هو واحد من عدة نماذج سلوكية تستخدم لقياس التغذية في ذبابة الفاكهة ويجب على الباحثين اختيار الأنسب لالمحددة لهاسؤال. قرار استخدام فحص معين يجب النظر في النقاط التالية: طبيعة الطعام المقدم؛ في حالة التغذية. قياس كمية أو امتصاص العناصر الغذائية والتحقيق استهلاك الغذاء أو الاستجابة للطعام.

فحص CAFE كما هو موضح في هذا التقرير هو المثالي لتناول الطعام التالية من مصدر المواد الغذائية السائلة في ظل حالة التغذية في وضع مستقيم. بدلا من تناول الطعام يمكن قياسها لمجموعة ذبابة على مصدر الغذاء الملون في قارورة أو على طبق من ذهب. والذباب قتل عادة أو تخدير بعد الرضاعة ويتم تحديد كمية من الصبغة تناولها من قبل الطيف أو الفحص البصري من البطن الملون. الذباب تبدأ في إفراز المواد الغذائية تناولها سوى 30 دقيقة بعد تناول وبالتالي هذا النهج من الصعب استخدام لتحليل التغذية أطول مستمرة السلوكيات ^{12، 13.}

في المقابل يتم الاحتفاظ الذباب على حالها عند صبغ امتصاصيتم استخدام الصورة مع استشفاف المشعة وسجل استهلاكها من النظائر المشعة في عداد التلألؤ ^{14 و 15.} امتصاص radiolabel من قبل الجهاز الهضمي ذبابة يجعل طويلة الأجل قياس امتصاص الغذاء ممكن، ولكن قد يؤدي إلى التقليل من استهلاك بسبب جزيئات غير استيعابها وتفرز التتبع. وثمة نهج آخر لقياس استجابة في الغذاء في ذبابة الفاكهة هو الرد خرطوم تمديد (PER)، والذي يحدث عادة لتناول الطعام ^(16). يقيس هذا الأسلوب الأنيق الاستجابة الأولية لحافز الطعام ولكن لا يسجل كمية السعرات. يتم ضبط الاستهلاك الغذائي حيوي أثناء الرضاعة باستخدام عدة إشارات ردود الفعل بعد الهضمية التي تعتبر بالغة الأهمية لتنظيم التغذية ^{17 و 18.} وقد بذلت عدة محاولات في السنوات الأخيرة لجمع البيانات شبه أتمتة في مقايسة PER ^{19، 20.} يتم الكشف عن PER عن طريق لوحة كهربائية أو مجموعة من الأقطاب الكهربائية وتحسب عن طريق الكمبيوتر. الجمع بين فحص PER مع امتصاص النظائر المشعة كشف أن هذا الاختبار محدودة بسبب انخفاض الحساسية للكشف عن الاختلافات التغذية كمية ^18. الفحص اليدوي التغذية (MAFE) ^21، والتي يتم تغذيتها ذبابة يدويا مع الزجاج الشعرية، وقد وضعت مؤخرا لقياس امتصاص المواد الغذائية في ذبابة يجمد واحد. فحص MAFE يلغي التدخلات من البحث عن الطعام والتغذية بدء ولديه قرار وقت ثانية، وبدء PER ويمكن رصد استهلاك المواد الغذائية بشكل مستقل في الفحص. ومع ذلك، فإن الطريقة التي تجميد الطاير يؤثر على جوانب معينة من السلوك التغذية (مثل الحركة، والتحفيز) لا تزال بحاجة إلى التحقيق. للاستعراضات المقارنة ممتازة من فحوصات مختلفة لقياس استهلاك الغذاء في ذبابة الفاكهة ليlanogaster ولمساعدة الباحثين في العثور على واحدة الأنسب، انظر التقارير التي ديشباندي وماركس ^{13، 22.}

فحص CAFE يتجنب بعض من مساوئ فحوصات أخرى المذكورة أعلاه، ويجمع بين سهولة الاستخدام مع قياس موثوق من تناول الطعام. هنا، يتم تقديم وصفا مفصلا لفحص CAFE ونظهر تعديل الإعداد بسيطة للحد من تبخر. وأظهرت نتائج ممثلة بما في ذلك اختيار لفحص اثنين من المواد الغذائية (على المدى القصير والطويل) وامتصاص السكروز من الذباب. في مناقشة قارنا طريقة موضح لدينا مع طرق بديلة لأداء الفحص CAFE، وتسليط الضوء على أوجه القصور المحتملة.

البروتوكول

1. الفحص CAFE

ملاحظة: يتكون الاختبار من ثلاثة عناصر هي: قارورة التجريبية، غطاء معين والشعيرات الدموية الدقيقة. ويستخدم مربع من البلاستيك مع غطاء لنقل قنينات مستعدة وللسيطرة على الرطوبة بشكل أكثر كفاءة.

1. استخدام ذبابة الفاكهة البلاستيكية ثقافة البطن قارورة (اختياري 8 سم ارتفاع، 3.3 سم القطر) كما أنبوب للفحص.
2. ختم قارورة مع غطاء زجاجي المصنعة التي تحتوي على الدائري O (أرقام 1A، 1B). الحمل عن طريق الذباب التنصت أو مع أنبوب النفخ من خلال فتح غطاء المركزي (0.9 سم القطر)، والذي يسمح أيضا لتدوير الهواء وإمدادات المياه، وإغلاق الفتحة مع كدر الاسفنج. ست فتحات المخروطية أصغر (0.4 سم قطرها العلوي، 0.3 سم القطر الداخلي) تحيط حفرة المركزي وتناسب نصائح ماصة من 2-20 حجم ميكرولتر لعقد الشعيرات الدموية في المكان. (انظر الشكلين التكميلية للاطلاع على التفاصيل الفنية للغطاء.)
   ملاحظة: استخداممن سدادة الإسفنج مع فتحات للالشعيرات الدموية بدلا من الغطاء مصنوعة خصيصا المستخدمة في مخطوطة لدينا هو ممكن. لدينا غطاء مخصصة يسمح التداول الآمن للقارورة مستعدة التقليل من خطر الشعيرات الدموية التي تقع أسفل.
3. لتقديم المواد الغذائية السائلة، استخدم 5 microcapillaries ميكرولتر مع 1 علامات ميكرولتر. ضع الشعيرات الدموية في فتحات المخروطية في غطاء عن طريق قطع الجزء العلوي من 2-20 ميكرولتر ماصة وإدراج معلومات سرية إلى الحفرة (الشكل 1B، مع وضع علامة الحافة الحمراء). لمنع الذباب من الهرب، إدراج تقطيعه 2-20 ميكرولتر ماصة في نفس الافتتاح.
4. للتعامل مع بأمان متعددة قارورة مستعدة، ووضعها في علبة بلاستيكية مع ترصيع الشبكية (الشكل 2A).

2. إعداد الذباب

1. إبعاد الذباب على الغذاء القياسية عند 25 درجة مئوية والرطوبة النسبية 60٪ و/ 12 ساعة دورة ضوء الظلام 12 ساعة.
2. للسيطرة على ظروف التكاثر، وإدخال 35 الإناث البكر لد 15 من الذكور لكل مجموعة التجريبية في قارورة الثقافة البلاستيكية (9.8 سم ارتفاع، 4.8 سم القطر) تحتوي على 50 مل تطير الغذاء. السماح الذباب لتضع بيضها لأول 3 أيام، ثم نقل الكبار الذباب إلى قارورة المواد الغذائية الطازجة والسماح لهم وضع البيض لمدة يومين آخرين. بعد هذا تكرار نقل مرة أخرى. الذباب الكبار نبذ بعد 2 ايام اخرى.
3. كما تناول الطعام يعتمد على حجم ذبابة، وتحديد الوزن من مجموعة من 100 الذباب من قبل التخدير 2- إلى الكبار من العمر 3 يوما الذباب باستخدام وسادة ذبابة CO ₂ وجمع بينهما في أنبوب من البلاستيك 1.5 مل وقياس مع معيار نطاق المختبر. تحديد الوزن الرطب للأربع مجموعات على الأقل ذبابة مستقلة مرتبة حسب الجنس (الجدول 1). استخدام الوزن لحساب ميكرولتر الاستهلاك الغذائي في ذبابة ملغ. استخدام القيمة لتحديد كمية الطعام الذي يغذي ذبابة واحدة في التجربة وضبط عدد من الشعيرات الدموية مليئة المواد الغذائية وفقا لذلك لتجنب تفريغ الشعيرات الدموية عن طريق تغذية.
   1. ل3 ساعات فحص، واستخدام20 الذباب واثنين من الشعيرات الدموية شغلها. لتجربة طويلة الأجل (> 3 ساعات ويصل إلى 9 أيام)، استخدم مجموعة من ثمانية الذباب مع العرض من أربعة الشعيرات الدموية شغل (لا يمكن الحصول على نتائج موثوقة مع أقل من ثمانية الذباب في ظل ظروف وصفها).
4. الذباب منفصلة إلى مجموعات (8 أو 20 الذباب) بعد قياس الوزن تحت التعرض CO _2. نقل المجموعة إلى قارورة الغذائية الجديدة (التي تحتوي على 15 مل الغذاء القياسية) للسماح للانتعاش من CO ₂ التخدير لمدة 48 ساعة قبل التجربة. استخدام الذباب البالغ من العمر 6-اليوم-4- لللمقايسة CAFE.
5. كما تتغذى الذباب غير المتعطشة النوع البري بشكل هامشي فقط ^{19 و 21،} قبل تجويع الذباب للتجارب التغذية 3 ساعات. لا يلزم الصوم عندما يتم رصد استهلاك الغذاء على مدى عدة أيام. للصيام، ونقل الذباب من 16 إلى 20 ساعة قبل الاختبار عن طريق النقر عليها بلطف إلى قارورة تحتوي فقط على قطر ورقة مطوية مرشح 45 ملم مبلل مع ~ 0.5 مل ده₂ O (انقر نقرا مزدوجا الماء المقطر)، وعلى مقربة مع توصيل غطاء CAFE الفحص.

3. إعداد الأغذية السائلة

1. إعداد 3 M (10٪، ث / ت) حل سهم السكروز عن طريق ملء 102.6 غرام السكروز (C ₁₂ H ₂₂ O ₁₁₎ إلى 100 مل ده ₂ O. ماصة 3 ميكرولتر، 33 ميكرولتر، 333 ميكرولتر و 3.3 مل و 6.6 مل من محلول المخزون إلى أنبوب بلاستيكي 15 مل. إضافة 2 مل من لون الطعام (للأحمر: قرمزي [E124]؛ فعلى الأزرق: نيلي اللون القرمزي [E132]) وملء إلى 10 مل مع DDH ₂ O. تركيزات الناتجة 0.001، 0.01، 0.1، 1، و 2 M السكروز .
   ملاحظة: إن صبغة الطعام يسمح تصور الغضروف المفصلي أكثر سهولة. لكن الصبغة قد يكون لها تأثير على تناول الطعام. لتجنب التحيز بسبب الصبغة الاستغناء عن صبغة الطعام أو عشوائية استخدام الأصباغ على عينات من المواد الغذائية خلال التجربة والجماعات.
2. لاختبار ماصة تفضيل الكحول 333 ميكرولتر من محلول المخزون 3 M السكروز في أنبوب بلاستيكي 15 مل.إضافة 1.5 مل (2.3 مل) من 100٪ ETOH (الإيثانول) وإضافة ده ₂ O ما يصل إلى 10 مل أن تسفر عن 15٪ (0.25 ملم) وبنسبة 23٪ (0.39 ملم) حلول العمل.
3. الحفاظ حلول السهم عند -20 درجة مئوية، وحلول العمل في 4 درجات مئوية. استخدام في غضون أسبوع 1.
4. تعبئة ما يصل إلى 10 الشعيرات الدموية في نفس الوقت مع حل الغذائية الملونة، بالقوة الشعرية. إدراج نهايات الشعيرات الدموية في محلول السكروز (عقد الشعيرات الدموية في زاوية 45 درجة إلى الحل). تتوقف إذا السائل يصل أعلى (5 ميكرولتر) علامة الشعرية، وإزالة حل الزائد في الخارج والداخل مع المناديل الورقية.

4. الجمعية والمسرحية والشعرية الفحص الطاعم

1. إذا لم يكن هناك حاجة إلى الصيام، ونقل الذباب التجريبية للفحص عن طريق النقر أو عن طريق ضربة الأنابيب. تأكد من تضمين ثلاث قوارير السيطرة من دون الذباب لقياس التبخر.
2. إزالة بعناية طرف ماصة (2-20 حجم ميكرولتر) التي تم إغلاق واحد من فتح والخارجيع، وإدراج ملء كوب الشعرية، من أسفل إلى نهاية البداية. تأمين الشعرية عن طريق وضع طرف ماصة الظهر بجانب الشعرية. إذا كان يتم اختبار العديد من الحلول الغذائية، كرر هذا الإجراء وفقا لذلك.
3. ضع الشعرية ينتهي داخل كل قارورة على نفس المستوى لتجنب التحيز التي يمكن أن تحدث إذا كانت موجودة في مصادر الغذاء على ارتفاعات مختلفة (3-4 سم من غطاء)؛ الحفاظ على مسافة لورقة الترشيح لمنع الشعرية من تسرب عن طريق لمس عن طريق الخطأ ورقة الترشيح أو اللزوجة مختلفة من مصادر الغذاء.
4. تسمية الطرف العلوي من السائل الملون باستخدام علامة من ركلة جزاء (علامة _{البداية).} لضمان ويمكن تحديد الشعيرات الدموية المختلفة، تسمية منهم على حدة باستخدام لون أو شريط التعليمات البرمجية.
5. وضع عدة فحوصات CAFE أعدت داخل مربع من البلاستيك مع البطانة الشبكية ونقل مربع (الشكل 2A) إلى وضع آمن تحت ظروف المختبر أو في temperature-، CLIM الخفيف والرطوبة التي تسيطر عليهاأكل غرفة (معلمات: 25 ° C، 60٪ الرطوبة النسبية، 12 ساعة / 12 ساعة دورة ضوء الظلام) للفترة التجريبية (على سبيل المثال 3 ساعات أو أيام).
6. كما يجف ورق الترشيح أسفل ما إذا كان يتم إجراء فحص على مدى عدة أيام، وتطبيق المياه العذبة كل 24 ساعة عبر كدر الإسفنج (100 ميكرولتر) للحفاظ على ثابت الرطوبة داخل الفحص. استخدام أربع عبوات منفصلة (8 سم ارتفاع، 3.3 سم القطر) مليئة 30 مل ده ₂ O كأجهزة الرطوبة ووضعها بجانب فحوصات CAFE في مربع من البلاستيك. استخدام غطاء للصندوق من البلاستيك لخلق الرطوبة بيئة تسيطر عليها أثناء التجربة (الشكل 2A).
   ملاحظة: التباين الكبير يحدث تحت ظروف المختبر. ومع ذلك، فمن الممكن لإجراء فحص CAFE في درجة حرارة الغرفة (على سبيل المثال، في أحد الفصول). استخدام جهاز الترطيب (ورق الترشيح، مع أو من دون كدر اسفنجة رطبة، وشغل قوارير المياه وغطاء للصندوق من البلاستيك) وشجعت غاية لتقليل التبخر ( الشكل 2B).
7. استبدال الشعيرات الدموية بأخرى مملوءة حديثا للتجارب طويلة المدى كل 24 ساعة. جعل علما من الذباب الميت قبل كل فاصل زمني ح 24 واستخدام عدد من الذباب حية لحساب معدل الاستهلاك الطيران للفترة التالية. تجاهل الشعرية القديمة بعد قياس تدهور الغضروف المفصلي (انظر 5.1).
   ملاحظة: أثناء تجربة 3 ساعات نحن بالكاد نرى أي الذباب الميت. خلال دراسة 4 أيام نجد عادة 1-3 الذباب الميت.
8. في نهاية الفحص أو قبل استبدال الشعرية، بمناسبة الغضروف المفصلي أقل من الشعرية (علامة _{النهاية)} مع القلم علامة في حين أن الفحص CAFE لا يزال في وضع مستقيم. تجاهل البيانات إذا علامة _نهاية ليست تحت علامة الأولية (علامة _{البداية).} لا تقم بإزالة الغطاء، لأن هذا قد يغير الغضروف المفصلي.
9. بعناية إزالة الشعيرات الدموية من الفحص وتخزينها لجمع البيانات. تحقق مما إذا وصل السائل داخل الشعيرات الدموية في الطرف الأدنى إن لم يكن discarد البيانات، كما كان الطعام ليس في متناول الذباب. جمع كل الشعيرات الدموية في قارورة كمجموعة. إدراج نصائح ماصة تقطيعه إلى جميع الفتحات لمنع الذباب من الهرب. تفكيك الإعداد وغسل قارورة، أغطية وسدادات الإسفنج في حمام الصابون وبين عشية وضحاها جاف في درجة حرارة الغرفة لاستخدامها مرة أخرى.
   ملاحظة: الذباب يمكن تحليلها بعد الفحص. تأكيد امتصاص المواد الغذائية عن طريق العين أو تحت المجهر تشريح.
10. كرر التجارب مع نفس المورثات على الأقل في ثلاث أيام مختلفة.

5. جمع وتحليل البيانات

1. قياس المسافة بين علامة _{بداية ونهاية} علامة على شعري باستخدام الفرجار أو مسطرة. لنقل البيانات مباشرة إلى جدول بيانات، واستخدام USB (الناقل التسلسلي العالمي) متصلة الفرجار الرقمية (الشكل 1E). تجاهل الشعيرات الدموية بعد القياس.
2. حساب حجم الشعرية لحساب امتصاص الغذاء أو التبخر. على سبيل المثال، والنظر في سقفillary التي هي 73 مم طويل ويحتوي على 5 ميكرولتر من محلول الغذاء. انخفاض 14.6 ملم في الغضروف المفصلي يعكس الإقبال على 1 حل ميكرولتر. حساب امتصاص المواد الغذائية التي تستخدم الصيغة التالية:
   امتصاص المواد الغذائية (ميكرولتر) = المسافة قياس (مم) / 14.6 ملم
3. استبعاد تأثير التبخر في تناول الطعام، وحساب يعني تبخر في قارورة الثلاث لمراقبة (على الأقل) دون الذباب. طرح هذه القيمة المتوسطة من القيمة التي تم الحصول عليها للاستهلاك الغذائي عن طريق الذباب.
4. استخدام الصيغة التالية لتحديد الاستهلاك الكلي في الطيران:
   استهلاك المواد الغذائية (ميكرولتر) = (الغذاء امتصاص [ميكرولتر] - الخسارة بالبخر [ميكرولتر]) / إجمالي عدد الذباب في القارورة. على المدى الطويل تجارب استخدام عدد من الذباب على قيد الحياة قبل بداية فترة 24 ساعة.
5. لمراعاة الفروق في حجم الجسم، مثل بين الذكور والإناث الذباب، وتطبيع استهلاك المواد الغذائية إلى وزن الجسم (ميكرولتر الغذاء / ذبابة ملغ).
6. استخدام البرامج الإحصائية لتحليل البيانات. للقاعدةالبيانات الموزعة حليف، -tests T استخدام الطالب لتحديد الاختلافات بين الجماعات ذبابة اثنين، واستخدام ANOVA (تحليل التباين) مع اللاحق توكي كريمر اختبارات لأكثر من مجموعتين. في حالة الاختيار، تحليل الاختلافات من اختيار عشوائي باستخدام اللامعلمية عينة واحدة علامة الاختبار.

النتائج

وتستخدم الذباب من النمط الجيني ث ¹¹¹⁸ لشرح كيفية يتم تنفيذ الفحص. وتستخدم المسوخ ث ¹¹¹⁸ عادة لتوليد خطوط المعدلة وراثيا وللسيطرة على الخلفية الوراثية الجينات المحورة ملحوظ مع الجين الأبيض. عادة، لإجراء التجارب السلوكية، وbackcrossed جميع خطوط المعدلة وراثيا لمدة خمسة أجيال نفس الرصيد ث ^1118، والذي يستخدم كعنصر تحكم التجريبية. وتبين لنا تجارب مختلفة: مقارنة بين الخسارة التبخر من أج...

المناقشة

ويصف التقرير فحص CAFE بطريقة خطوة بخطوة، مع التركيز على الإعداد التقني والأداء الناجح في المختبر. نظرا لبساطته، ويمكن أيضا أن هذا الاختبار أن تستخدم تربويا كتجربة المدرسة. وتبين الأمثلة التي مقايسة يسمح التحقيق في الاستشعار عن الطعام، وتفضيل والاستهلاك في ذبابة الفاكهة على مدى فترات زمنية قصيرة وطويلة (ساعات إلى أيام). وقد استخدم الفحص CAFE على نطاق واسع في مجال التحقيق في المواضيع بما في ذلك المواد الغذائية واستهلاك المخدرات، والإدمان، توازن الطاقة والسيطرة العصبية التغذ...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
قوارير (تربية)قوارير	Greiner Bio-One	960177	www.greinerbioone.com
(فحص CAFE)ورشة	فحص Greiner Bio-One	217101	www.greinerbioone.com
Lid-CAFE		–	–
صندوق بلاستيكي ، غطاء منخفض الجدار	Plastime	353	www.plastime.it
لورشة عمل الصندوق البلاستيكي		&ndash ؛	–
الشعيرات الدموية	BLAUBRAND	المرجع 7087 07	www.brand.de
نصائح الماصة	Greiner Bio-One	771290	www.greinerbioone.com
دوائر ورق الترشيح	Whatman	10 311 804	www.sigmaaldrich.com
D (+) -السكروز	AppliChem	57-50-1	www.applichem.com
الإيثانول المطلق	VWR Chemicals	20،821،330	www.vwr.com
لون الطعام (أحمر ، E124)	Backfun	10027	www.backfun.de
لون الطعام (أزرق ، E133) Backfun		10030
www.backfun.de محلول الصابون (CVK 8) CVH		103220	www.cvh.de
الفرجار الرقمي	GARANT	412,616	www.hoffmann-group.com
قارورة (تربية) الارتفاع			9.8 سم ، القطر 4.8 سم & nbsp ؛
قوارير (فحص CAFE)			ارتفاع 8 سم ، قطر 3.3 سم
مقايسة			تم إنتاجها في ورشة جامعية ، الرسم الفني المزود الرجاء النقر هنا لتنزيل هذا الملف.< / a>
صندوق بلاستيكي ، جدار			تم تصميم ترصيع الشبكة البلاستيكية خصيصا ل 8 × 10 مواضع قارورة   ؛
غطاء الصندوق			البلاستيكي الأبعاد (37 × 29 × 18 سم)
الشعيرات الدموية			DIN ISO 7550 المعيار,  IVD-guideline 98/79 EG ، نهايات أطراف ماصة
			قطع ماصات الدائرة الخارجية وفقا للغطاء
دوائر			بقطر 45 مم تعمل بشكل جيد إذا تم طيها للقوارير المستخدمة
D (+) -السكروز			غير ضار
بالإيثانول المطلق			سائل شديد الاشتعال
وبخار لون الطعام (أحمر ، E124)			لون الطعام غير مذكور
(أزرق ، E133)			محلول صابون غير مذكور
(CVK 8)			صابون محايد الرائحة
الفرجار
طعام			قياسي (20 لترا)
أجار			160 جرام
خميرة			299.33 جرام
دقيق			1,200 جم
دبس			السكر 1.6 لتر
		البروبيونيك	57.3 مل
نيباجين 30٪			160 مل

Lid-CAFE منخفض مصقولة يتم ورق الترشيح الرقمي ذباب البيرة الذرة حمض