تحريض استجابة التهابية في الثقافات الابتدائية الكبدية من الفئران

Brian Czaya; Saurav Singh; Christopher Yanucil; Karla Schramm; Christian Faul; Alexander Grabner

doi:10.3791/55319

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تحريض استجابة التهابية في الثقافات الابتدائية الكبدية من الفئران

9.9K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/55319

⸱

مارس 10, 2017

Brian Czaya^*¹^,² , Saurav Singh^*¹^,² , Christopher Yanucil¹^,² , Karla Schramm¹^,² , Christian Faul¹^,² , Alexander Grabner¹

¹Katz Family Drug Discovery Center and Division of Nephrology and Hypertension, Department of Medicine, University of Miami Leonard M. Miller School of Medicine, ²Department of Cell Biology and Anatomy, University of Miami Leonard M. Miller School of Medicine

^* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

هنا، وتبين لنا نهجا الأنزيمية لعزل خلايا الكبد الأولية من الفئران الكبار، ونحن تصف الكمي لاستجابة التهابية باستخدام ELISA وفي الوقت الحقيقي PCR.

الملخص

الكبد يلعب دورا حاسما في تنظيم الالتهابات. في أمراض الكلى المزمنة على وجه الخصوص، حيث يتفاعل الكبد ردا على الوسط اليوريمي، الاكسدة، endotoxemia وإزالة انخفضت تعميم السيتوكينات proinflammatory من خلال إنتاج عدد كبير من المواد المتفاعلة في المرحلة الحادة. أدوات تجريبية لدراسة التهاب والدور الأساسي لخلايا الكبد هي أساسية لفهم التنظيم ومساهمة السيتوكينات الكبد إلى مرحلة الاستجابة الحادة النظامية وسيناريو لفترات طويلة الموالية للالتهابات، وخصوصا في بيئة معقدة مثل مرض الكلى المزمن. منذ دراسة آليات معقدة من التهاب في الجسم الحي لا تزال صعبة، والموارد كثيفة، وعادة ما يتطلب استخدام الحيوانات المعدلة وراثيا، وتقدم خلايا الكبد معزولة الأولية أداة قوية لاكتساب رؤى الآلية في الاستجابة المرحلة الحادة الكبدية. لأن هذا في المختبر تقنية ملامح التكاليف المعتدلة، وإعادة عاليةالطاقة الانتاجية والمعرفة التقنية المشتركة، يمكن للخلايا الكبد معزولة الأولية أن تستخدم أيضا بسهولة كنهج الفرز. هنا، نحن تصف طريقة القائم على الأنزيمية لعزل خلايا الكبد الفئران الأولية، وصفنا تقييم استجابة التهابية في هذه الخلايا باستخدام ELISA والكمي في الوقت الحقيقي PCR.

المقدمة

مرض الكلى المزمن (CKD) يمكن تعريفها بأنها حالة من الالتهاب الحاد والمزمن ^1. في المرضى الذين يعانون من كد، ومستويات المصل من هرمون الليفية عامل النمو phosphaturic 23 (FGF23) يرتفع تدريجيا من أجل الحفاظ على الفوسفات في الدم التوازن ^2. وترتبط زيادة مستويات FGF23 المصل بشكل مستقل مع معدلات الاعتلال والوفيات القلب والأوعية الدموية لدى المرضى الذين بدأوا العلاج غسيل الكلى ^{^3،} ^4. وعلاوة على ذلك، أظهرت العديد من الدراسات السريرية وجود علاقة قوية بين مستويات FGF23 مرتفعة ومستويات مصل البروتين سي التفاعلي (CRP)، انترلوكين 6 (IL-6) وو....