يصف هذا البروتوكول نموذج فأر قسطرة مركزي للأمراض الخطيرة لفترات طويلة. نحن نجمع بين طريقة ربط الرأس والثقب للحث على الإنتان مع استخدام خط وريدي مركزي للسوائل والأدوية وإعطاء المغذيات لتقليد البيئة السريرية البشرية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يصف هذا البروتوكول نموذج فأر قسطرة مركزي للأمراض الخطيرة لفترات طويلة. نحن نجمع بين طريقة ربط الرأس والثقب للحث على الإنتان مع استخدام خط وريدي مركزي للسوائل والأدوية وإعطاء المغذيات لتقليد البيئة السريرية البشرية.
يصف هذا البروتوكول نموذج الفأر مقسطر مركزيا من الأمراض الخطيرة لفترة طويلة. نحن تجمع بين ربط الأعور وطريقة ثقب للحث على الإنتان مع استخدام خط وريدي مركزي للسوائل، والمخدرات، وإدارة المواد الغذائية لتقليد إعداد سريرية البشري. المرضى المصابين بأمراض خطيرة تتطلب الدعم الطبي المكثف من أجل البقاء على قيد الحياة. في حين أن الغالبية العظمى من المرضى سوف يتعافى في غضون أيام قليلة، على بعد حوالى ربع المرضى الذين يحتاجون إلى العناية المركزة لفترة طويلة وهم عرضة للوفاة من غير حل الفشل العديد من أجهزة الجسم. وعلاوة على ذلك، هو مدموغ مرحلة طويلة من الأمراض الخطيرة التي ضعف عميق في العضلات، والغدد الصماء والتمثيل الغذائي التغييرات، التي تقوم حاليا فهم المرضية غير كامل. نموذج حيواني الأكثر استخداما على نطاق واسع في الأبحاث الرعاية الحرجة هو الأعور ربط وثقب نموذج للحث على الإنتان. هذا هو نموذج يمكن استنساخه جدا، مع التغيرات الالتهابية والدورة الدموية الحادة مشابهة لسبتمبر البشريجهاز الأمن والمخابرات، الذي يهدف إلى دراسة المرحلة الحادة من المرض الحرجة. ومع ذلك، هو مدموغ هذا النموذج من قبل الفتك عالية، والذي يختلف عن الوضع البشري السريري، وليس وضعت لدراسة مرحلة طويلة من الأمراض الخطيرة. ولذلك، فإننا تكييف تقنية عن طريق وضع القسطرة الوريدية المركزية في حبل الوريد مما يسمح لنا لإدارة الرعاية الداعمة ذات الصلة سريريا، لمحاكاة الحالة السريرية البشري من الأمراض الخطيرة على نحو أفضل. يتطلب هذا نموذج الفأر إجراء العمليات الجراحية واسعة والعناية المركزة اليومية للحيوانات، ولكنه يؤدي إلى نموذج ذي الصلة من المرحلة الحادة وطويلة من الأمراض الخطيرة.
الأمراض الخطيرة هو حالة المرض الذي يعوق وظيفة أجهزة الجسم واحد أو أكثر لدرجة أن المريض سوف يموت، ما لم يدار الدعم الطبي المكثف. في حين أن السبب الأولي للقبول في وحدة العناية المركزة (ICU) يمكن أن تختلف، بدءا من الصدمة، والجراحة معقدة، والحروق، وتفاقم المرض إلى تعفن الدم، وجميع المرضى ذوي الحالات الحرجة يعانون من تلف الخلايا، والناجمة عن نقص انسياب الدم، نقص الأكسجة والتهاب الزائدة وغيرها ، الأمر الذي يؤدي إلى فشل الجهاز. معظم المرضى البقاء على قيد الحياة إهانة الحادة، ولكن لجزء مهم من المرضى لا تسترد فورا وبحاجة إلى رعاية مكثفة لفترات طويلة. هم في خطر كبير للموت بسبب عدم حل الفشل العديد من أجهزة الجسم. وعلاوة على ذلك، هو مدموغ مرحلة طويلة من الأمراض الخطيرة التي ضعف عميق في العضلات والغدد الصماء والأيض التغيير، والتي تقوم حاليا فهم المرضية غير كامل.
العديد صوتستخدم نماذج odent في إعداد البحوث الرعاية الحرجة. على نموذجين تستخدم في الغالب هي إدارة خارجية من lipopolysaccharide في (LPS) وربط الأعور وثقب (CLP). والمتقدمة على حد سواء نماذج لمحاكاة المرحلة الحادة من تعفن الدم، الذي يعرف بأنه ضعف الجهاز تهدد الحياة الناجمة عن استجابة المضيف dysregulated للإصابة، واحدة من الأسباب الرئيسية للقبول في وحدة العناية المركزة في جميع أنحاء العالم 1، 2. نموذج LPS له مساوئ عديدة كما أنها لا تؤثر إلا بشكل عابر الإفراج عن السيتوكينات وحالة الدورة الدموية للحيوان 3. على عكس البشر والقوارض هي أيضا مقاومة خاصة إلى الذيفان الداخلي واستخدام "الجرعات العالية" من الذيفان الداخلي ضروري لإنتاج انخفاض ضغط الدم ومعدل الوفيات، وبموجب هذا مما يزيد المخاوف من صحة هذه الطريقة 4 و 5. نموذج آخر، ربط الأعور ونموذج ثقب (CLP)يتميز ربط لجزء من الأعور تليها ثقب الإبرة من خلال وعبر. يؤدي هذا الإجراء إصابة في البطن متعدد المكروبات مع تلف الأنسجة، تليها النبات من البكتيريا في حجرة الدم. وهذا يؤدي الى الاستجابة الالتهابية الجهازية وتطوير تعفن الدم. وقد تم الاعتراف طراز CLP على نطاق واسع على أنها نموذج حيواني من الأمراض الخطيرة الحاد الذي يستنسخ الملامح الرئيسية للتعفن الدم: hyperinflammation، توسع الأوعية، انخفاض ضغط الدم وزيادة النتاج القلبي 6 و 7. ومع ذلك، وهذا النموذج لا يسمح دراسة الفشل غير حل العديد من الأعضاء، تلف العضلات، والغدد الصماء والتمثيل الغذائي التغييرات، التي تمثل نموذجا لمرحلة طويلة من الأمراض الخطيرة. وعلاوة على ذلك، في الآونة الأخيرة قد شكك في صحة نماذج الماوس لمرض خطير، لأن النتائج من نماذج الماوس لا يمكن دائما أن تترجم إلى وضع الإنسان 8و 9 و 10. قد يكون هناك تفسير الممكن أن الرعاية الداعمة التي يتم توفيرها لانتقادية سوء المرضى من البشر تختلف جوهريا عن الرعاية التي يتم توفيرها على الفئران صحية حرجة.
لذلك، لتشبه الإعداد البشري بشكل وثيق وللسماح بالتحقيق في مرحلة طويلة من الأمراض الخطيرة، قمنا بتطوير نموذج الفأر الذي يحاكي العناية المركزة الحادة على النحو الوارد للإنسان، مثل حقن المحاليل الوريدية واسعة والعلاج بالمضادات الحيوية، والتي تسمح لل لإدارة الرعاية الداعمة من أجل البقاء على قيد الحياة في مرحلة طويلة من الأمراض الخطيرة، مثل الدعم الغذائي. لهذا الغرض، ونحن تكييف نموذج الفأر من تعفن الدم الناجم عن CLP، كونها المعيار الذهبي للتعفن الدم، ووضع خط وريدي مركزي والتي تمكن الإدارة من السوائل والتغذية والأدوية.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وتمت الموافقة على البروتوكول من قبل جامعة لوفين مجلس المراجعة الأخلاقية للبحوث الحيوان.
1. إعداد خط وريدي

الشكل 1: بناء خط وريدي. وتقوم تمتد أنابيب MRE إلى القطر الصغير وتوصيله عبر أنابيب البولي ايثيلين لجهاز القوارض قطب إعداد خطوط الوريدية. انظر الجدول رقم 1 للحصول على تعليمات لأطوال أجزاء مختلفة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
| عنوان تفسيري | الطول | الصوت |
| 1) لور كعب إبرة 22G | ||
| 2) PE50 - البولي إثيلين 0.023 "س 0.038" | 5 سم | 13 ميكرولتر |
| 3) PE10 - البولي إثيلين 0.011 "س 0.024" | 50 سم | 30 ميكرولتر |
| 4) القوارض دوار 20 G | ||
| 5) PE-10 | 15 سم | 9 ميكرولتر |
| 6) PE-50 (موصل) | 5 سم | 13 ميكرولتر |
| 7) امتدت MRE025 نصيحة microrenathane 0.025 "س 0.012" | 30 سم | 27 ميكرولتر |
| المجموع الكلي | 105 سم | 92 ميكرولتر |
الجدول 1: بناء خط وريدي. يوفر هذا الجدول أسطورة عن الشكل 1.
2. التخدير ومعالجة ما قبل الجراحة
الطبقة = "jove_title"> 3. التنسيب لسكنى القسطرة المزمنة
4. الأعور من ربط والبزل
العلاج 5. ما بعد الجراحة والإنعاش السائل
6. العناية المركزة
7. نهاية التجربة
وينبغي السعي الموافقة والتوصيات على مستوى شدة النموذجية والمبادئ التوجيهية والسياسات بالنسبة لنهايات الإنسان من المجلس المحلي المؤسسي الأخلاقي مراجعة للبحوث الحيوان: ملاحظة.
ملاحظة: في حالة وجود خط وريدي لا يعمل مثل القسطرة المحظورة، تمركز القسطرة، ومشاكل في ضخ حقنة، يتم استبعاد الحيوان من الدراسة والموت الرحيم.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وقدمت C57BL / 6 الفئران بأمراض خطيرة كما هو موضح أعلاه. أجرينا تجربتين لتقييم البقاء على قيد الحياة بعد CLP حتى نقطتين الوقت: البقاء على قيد الحياة حتى اليوم 5 (ن = 15) والبقاء على قيد الحياة حتى اليوم 7 (ن = 22) بعد CLP. كانت منحنيات البقاء على قيد الحياة من تجارب اثنين لا تختلف كثيرا (مقارنة حتى يوم 5)، مما يدل على استنساخ الإعداد التجريبية. تم العثور على قيد الحياة غير الحيوانات الموت أو الموت الرحيم بسبب الوصول إلى النهاية الإنسان. ربط 50٪ من ا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
وضعنا أكثر أهمية سريريا نموذج الفأر من الأمراض الخطيرة، من خلال الجمع بين ربط وثقب الأعور طريقة للحث على الإنتان مع استخدام خط وريدي مركزي للسوائل، والمخدرات، وإدارة المواد الغذائية. هذا الإعداد التجريبية غير قابلة للتكرار، ويسمح لدراسة مرحلة طويلة من الأمراض الخطيرة والنتائج في معدل وفيات مستقر، ومحاكاة بهذا الوضع السريري الإنسان 1.
وقد تم الاعتراف ربط الأعور وثقب على نطاق واسع على أنها ن...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
GVdB ، عبر جامعة لوفين (KU Leuven) ، يتلقى دعما بحثيا هيكليا طويل الأجل من برنامج Methusalem الممول من الحكومة الفلمنكية (METH08 / 07) ويحمل منحة متقدمة من مجلس البحوث الأوروبي AdvG-2012-321670 من برنامج الأفكار التابع لبرنامج الإطار السابع للاتحاد الأوروبي. حصلت SET على زمالة مساعد باحث من مؤسسة الأبحاث في فلاندرز (FWO).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| بوبرينورفين | إيكوفار | بيطري 0.3 مجم / مل | |
| C57BL / 6 ؛ | مختبرات Janvier | C57BL / 6JRj | |
| الغرويات | Fresenius Kabi | Volulyte 6٪ | |
| crystalloids | Baxter | Plasmalyte a viaflo | |
| Ethilon 3.0 | Ethicon | F3211 | |
| Imipenem | MSD | Tienam 500 ؛ مسحوق ملغ لسائل الحقن | |
| Isoflurane | Eurovet | Iso-vet | |
| Ketamine | Eurovet | Nimatek 100 مجم / مل | |
| LocTite Super glue3 جميع البلاستيك ؛ | Rectavit | 119818 | |
| Mersilk 3.0 | Ethicon | L192 | |
| Mersilk 5.0 | Ethicon | F682 | |
| Microrenathane .025 "OD x .012" ID | Bioseb | MRE-025 | |
| olimel N7E | Baxter | ||
| PE10 - بولي إيثيلين .011 بوصة × .024 بوصة ؛ | Instech Solomon | BTPE-10 | |
| PE-50 الأنابيب .023 "x.038" Instech | Solomon | BTPE-50 | |
| Rodent Swivel 20 G | Bioseb | RS-20G & nbsp ؛ | |
| Ropivacaï ne | Astrazenica | Naropin 2 ملغ / مل | |
| زيلازين | VMD | زيلازين هيدروكلوريد 2٪ |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.