تحليل الخلايا الدبقية الصغيرة والبلاعم المستمدة من الخلايا العصبية من الجهاز العصبي المركزي عن طريق التدفق الخلوي

Elodie Martin; Mohamed El-Behi; Bertrand Fontaine; Cecile Delarasse

doi:10.3791/55781

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

تحليل الخلايا الدبقية الصغيرة والبلاعم المستمدة من الخلايا العصبية من الجهاز العصبي المركزي عن طريق التدفق الخلوي

24K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/55781

⸱

يونيو 22, 2017

Elodie Martin¹^,²^,³ , Mohamed El-Behi¹^,²^,³ , Bertrand Fontaine¹^,²^,³^,⁴ , Cecile Delarasse¹^,²^,³

¹Inserm U 1227, CNRS UMR 7225, ²Sorbonne Universités, UPMC, University of Paris, ³Institut du Cerveau et de la Moelle épinière, ICM, ⁴AP-HP, Hôpital de la Pitié Salpêtrière;

في هذه المقالة

ملخص

يوفر هذا البروتوكول تحليلا للقطاعات السكانية البلاعم في الماوس الكبار الجهاز العصبي المركزي عن طريق التدفق الخلوي ومفيد لدراسة علامات متعددة التي أعربت عنها هذه الخلايا.

الملخص

وقد أظهرت دراسات عديدة دور الخلايا المناعية، وخاصة الضامة، في الجهاز العصبي المركزي (نس) الأمراض. هناك نوعان من البلاعم الرئيسية في الجهاز العصبي المركزي: (1) الخلايا الدبقية الصغيرة، والتي هي الضامة المقيمين من الجهاز العصبي المركزي وتستمد من أسلاف الكيس المحي خلال التطور الجنيني، و (2) الضامة المستمدة الوحيدات (مدم)، والتي يمكن أن تتسلل الجهاز العصبي المركزي أثناء المرض وتستمد من الأسلاف نخاع العظم. الأدوار من كل فرعية بلاعم تختلف اعتمادا على علم الأمراض التي تجري دراستها. وعلاوة على ذلك، لا يوجد توافق في الآراء حول علامات النسيجية أو المعايير المميزة المستخدمة لهذه المجموعات السكانية البلاعم. ومع ذلك، فإن تحليل ملامح التعبير من علامات CD11b و CD45 عن طريق التدفق الخلوي يسمح لنا لتمييز الخلايا الدبقية الصغيرة (CD11b ⁺ CD45 ^ميد ) من مدم (CD11b ⁺ CD45 ^عالية ). في هذا البروتوكول، وتبين لنا أن كثافة الطرد المركزي التدرجوتحليل التدفق الخلوي يمكن استخدامها لتوصيف هذه المجموعات السكانية الفرعية البلاعم نس، ودراسة عدة علامات من الفائدة التي أعربت عنها هذه الخلايا كما نشرنا مؤخرا. وهكذا، فإن هذه التقنية يمكن أن تزيد فهمنا لدور الضامة في نماذج الماوس من الأمراض العصبية ويمكن أيضا أن تستخدم لتقييم آثار المخدرات على هذه الخلايا.

المقدمة

الخلايا الدبقية الصغيرة هي الضامة المنسوجة الأنسجة المتضخم من الجهاز العصبي المركزي (نس). أنها تلعب دورين وظيفيين رئيسيين: الدفاع المناعي وصيانة التوازن الجهاز العصبي المركزي. على النقيض من مدم، التي تجدد باستمرار من الخلايا الجذعية المكونة للدم في نخاع العظام، والخلايا ميكروغليال التفريق بين الخلايا البدائية المكونة للدم السلف التي تنشأ في كيس المحي (يس) التي استعمرت الدماغ خلال التطور الجنيني ¹ ^، ² ^، ³ . في القوارض، عامل النسخ ميب يلعب دورا حاسما في تطوير جميع الخلايا النخاعية المستمدة من العظام والضامة، ولكن ل يس المستمدة الدبقية ال....