مقالة منهجية

آثار تعرض فورمالدهايد لنموذج الفئران الاستشرائية الناجمة عن معاملة الأطفال حديثي الولادة كبخاخات

DOI:

10.3791/55987

⸱

سبتمبر 27, 2017

 ,  ,  ,  ,  , 
1Neuroscience Research Institute & Department of Physiology, College of Medicine, Korea University, 2Department of Pharmaceutics and Biotechnology, College of Medical Engineering, Konyang University, 3Division of Biological Science and Technology, Science and Technology College, Yonsei University Wonju Campus

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف لنا هنا طرق لعلاج الأطفال حديثي الولادة كبخاخات للحث على الاستشرائية في الفئران والتعرض من فورمالدهايد المتبخرة للتحقيق في آثار استنشاق والفورمالديهايد في الاستشرائية.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هو الانتكاس مزمن حاك الاكزيما الاستشرائية ويسود العالم لا سيما في البلدان المتقدمة النمو. من المعروف التفاعلات المعقدة بين العوامل الوراثية والبيئية تلعب دوراً مهما في الفسيولوجيا المرضية لالتهاب الجلد الاستشرائي. ومع ذلك، لا نزال نفتقر صورة مفصلة عن الآلية المرضية لهذا المرض. وبالتالي، فمن أهمية لتطوير نماذج حيوانية مناسبة لتوضيح تطور الاستشرائية. وعلاوة على ذلك، التحقيق في تأثير العوامل البيئية مثل ملوثات الهواء على الاستشرائية يوسع الفهم لهذا المرض. وهنا يصف لنا وسيلة لحفز الاستشرائية في الفئران مع معاملة المواليد كبخاخات وبروتوكول للتعرض لتركيز ثابت من فورمالدهايد للفئران للكشف عن آثار على التنمية الاستشرائية في الرضع والمراهقين الفترات. هذه البروتوكولات قد طبقت بنجاح على عدة تجارب، ويمكن استخدامها للمواد الأخرى.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لاستجواب آثار استنشاق فورمالدهايد (اتحاد كرة القدم) على التقدم الاستشرائية (AD)، قمنا بوضع بروتوكول للإعلان التعريفي وتطوير دائرة تداول تقليدية للتعرض المزمن لاتحاد كرة القدم.

الإعلان مرض جلدي التهاب مزمن المنسوبة للتفاعلات المعقدة بين الاستعداد الوراثي والمشغلات البيئية1،2. مطلوب نموذج حيوان سليم لدراسة الإعلان في الحالة الإكلينيكية. وهذا الأكثر أهمية عند توضيح الآلية المرضية للإعلان تحت تأثير العوامل البيئية. وعلاوة على ذلك، أفضل التحقيق آثار المشغلات البيئية على تطور الإعلان، من الضروري الفصل بين العوامل البيئية الفردية وتقدير درجة التعرض.

لقد أظهرنا نموذج الفئران رواية الإعلانية الناجم عن معاملة الأطفال حديثي الولادة كبخاخات. هذا الإعلان النموذجي3 على بعض مزايا النماذج الإعلانية الأخرى مثل النماذج الإعلانية الناجمين عن طريق التوعية ابيكوتانيوس والنماذج الإعلانية المهندسة وراثيا، ونماذج الماوس العفوية للإعلان4. أولاً، يتطور هذا النموذج أعراض تشبه الإعلانية في سن 3 أسابيع، الذي يتوافق مع الرضع الإعلانية وهو أقدم من نماذج أخرى الماوس العفوية للإعلان مثل الماوس NC/نغا. في بعض الحالات، خلافا للنماذج الإعلانية المهندسة وراثيا، تهدأ أعراض النماذج الإعلانية والانتكاس عفويا على مدى فترة 20 أسبوعا. وعلاوة على ذلك، عملية الاستقراء من أعراض شبيهة بالإعلان في النموذج أسهل من أن نموذج التوعية ابيكوتانيوس، والذي أشبه بالاكزيما في منظور عملية الاستقراء.

وادخلنا البروتوكول الرواية لاتحاد كرة القدم من التعرض لنموذج حيوان باستخدام دائرة زجاج اكريليك و منظم الأوكسجين طبي التقليدي5 لدراسة آثار استنشاق اتحاد كرة القدم في وضع الإعلان في فترات الرضع والمراهقين. المنظم قد سمح لنا أن تعرض الحيوانات لتركيز الغاز عن طريق ضبط معدلات التدفق مستمر وتركز الحل. وأفادت الدراسات السابقة العديد من الطرق للتعرض لكرة القدم إلى نماذج حيوانية. شو et al. ووصف طريقة التعرض في كرة القدم الذي حل تم تطبيقها مباشرة على الجلد6. دراسة أخرى أجريت مؤخرا موجهة بروتوكول اتحاد كرة القدم الغاز التعرض باستخدام مولد مذيبات المتطايرة متخصصة، نموذج 49127. بالمقارنة مع أساليب الدراسات السابقة، أسلوب جديد مجهز بسهولة أكبر ويمكن تطبيقها لحلول أخرى بالإضافة إلى اتحاد كرة القدم.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وافق جميع الأساليب الموصوفة هنا عليها "رعاية الحيوان الدولية" واستخدام اللجنة (IACUC) من كوريا جامعة كلية للطب. 6 أسابيع بعد الولادة، ويمكن أن تحفز انثانساسيا المجربون وجمع عينات مختلفة مثل الجلد ومصل الجرذان.

1-تحريض الإعلانية "حديثي الولادة كبخاخات علاج"

  1. لإعداد 5 ملغ/مل الحل كبخاخات، إضافة 50 مغ من كبخاخات إلى 1 مل من توين 80 و 1 مل من الإيثانول 100% في أنبوب مخروطي 15 مل.
    2. إضافة
  2. 8 مل من المحلول الملحي العادي إلى الأنبوبة المخروطية. اهتز الأنبوب بقوة حتى لا طبقات فصل مرئية
  3. الحل كبخاخات (10 ميليلتر/g) بحقن الأنسجة تحت الجلد، على خط الوسط والمؤخرة من الرقبة من الفئران سبراغ داولي حديثي الولادة.
    1. التسليم كبخاخات بين ح 12 إلى 48 ساعة بعد الولادة (حرجة).
      ملاحظة: إذا تم تأجيل الحقن بأكثر من بضعة أيام، لن تطور التهاب الجلد أو أنها ستستمر لأسابيع قليلة فقط. إذا كان الحقن مبكرا جداً، الضائقة التنفسية يمكن أن تحدث بسبب الألم الشديد-
    2. لمنع الفئران حديثي الولادة من اعتقال الجهاز التنفسي بسبب حقن كبخاخات، دفع الصدر لحديثي الولادة تشجيع التنفس أو إبقاء الولدان في تشكيل غرفة أكسجين حتى يصبح التنفس العادي. حيث يمكن الآلام التي يسببها كبخاخات تثبيط التنفس، مشيراً إلى التخدير العام ويمكن أن تزداد سوءا ربما صعوبة التنفس. وهكذا، المجربون يجب عدم استخدام أنيسثيسيكس لزيادة البقاء على قيد الحياة فئران.

2. تقييم الحكة والتهاب الجلد في "نموذج الفئران" من الإعلان

  1. قياس حكة عن طريق العد عفوية السلوك الخدش
    1. البلاستيك تحضير الدوائر (20 سم × 30 سم × 20 سم) مزودة بمرآة للسماح بالتغطية الكاملة لعرض وثقوب للسماح للفئران للتنفس.
    2. تعيين إعداد وضبط كاميرا الفيديو رقمية بشكل صحيح لتسجيل مرآة آراء ووجهات نظر الجبهة من الفئران في وقت واحد.
    3. مكان الفئران في البلاستيك للدائرة وتغطية سقف قاعة بجسم ثقيل لمنع فتح-
    4. تسجيل التصرفات العفوية من الفئران ح 1 وإعادة تشغيل مقاطع الفيديو، وحساب عدد الخدش السلوكيات.
  2. تقييم الجلدية باستخدام نظام لتسجيل النقاط
    1. وضع الفئران في قاعة التعريفي.
    2. تحويل مقياس الأكسجين في التدفق إلى 2 لتر في الدقيقة معدل التدفق وضبط المبخر isoflurane إلى 3% للتخدير.
    3. تحديد مدى وشدة من التهاب في أذنيه وأجزاء أخرى من الفئران.
    4. تحديد حجم الوحدة لمدى آفات الجلد 0.25 سم 2 وشدة الآفات الجلدية ب التالي الجدول 1: مؤشر خطورة؛ ودرجة درجة التهاب الجلد بضرب مدى وشدة (انظر النتيجة التهاب الجلد في < فئة قوية = "إكسفيج" > 1B الرقم).

3. التعرض "كرة القدم الغازية" للحيوانات

  1. إعداد قاعة استنشاق
    1. إعداد شكل مربع زجاج اكريليك (55 سم × 40 سم × 35 سم) يحتوي على منافذ هما على طرفي نقيض.
    2. الحذر. لتوزيع الغاز فا، ضع مأخذ أعلى من المدخل وجعل حجم المنفذ أكبر من المدخل.
    3. الحذر. لقياس تركيز الغاز الداخلية، في جانب آخر من منافذ البيع، حفر ثلاثة ممرات الصغيرة، التي يمكن أن تكون مغلقة-
      4. أنابيب
    4. الاتصال بالمأخذ على حد سواء. ضع أنبوب منفذ إلى هود تداولها أو خارج المبنى لانبعاثات الغاز، وتوصيل أنبوب المآخذ الأخرى لمنظم الأوكسجين طبي-
    5. مكان قفص الفئران تقليدية داخل مربع زجاج اﻷكريليك.
    6. وضعت الفئران في القفص من أسبوع واحد بعد الولادة لمدة 5 أسابيع (ح 2 في اليوم و 5 أيام في الأسبوع).
    7. ختم المربع زجاج اﻷكريليك محكم ممكن للحيلولة دون تسرب للغاز-
      ملاحظة: لختم ضيق، ينبغي أن تتضمن غطاء الدائرة المطاطية. تطبيق الفيلم تتشبث التفاف الدائرة لختم ضيق.
  2. جيل لكرة القدم الغازية باستخدام منظم الأوكسجين طبي
    1. يذوب 5 غ من اتحاد كرة القدم في 1 لتر الماء-
    2. وضع حل اتحاد كرة القدم 0.5% في زجاجة المرطب من الجهة المنظمة للأوكسجين الطبي-
    3. بعد توصيل أنبوب مدخل للجهة المنظمة، قم بتشغيل المنظم وتعيين معدل التدفق إلى 5 لتر/دقيقة
    4. ضبط تركيز الحل ومعدل التدفق لتحديد تركيز الغاز في الدائرة-

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويرد في الشكل 1Aالتهاب الجلد الإعلانية مثل نموذج الفئران الإعلانية تعامل كبخاخات في 7 أسابيع عمر. ويبين السلوكيات الخدش قوية نموذج الفئران الإعلانية تعامل كبخاخات 1 فيديو. علاج الأطفال حديثي الولادة كبخاخات أثارت حساسية وخطورة الخدش السلوكيات في الفئران 3 أسابيع عمر، وأعراض تشبه الإعلانية استمرت لعدة أسابيع (الشكل 1، ج). وأن كان الدرجة أقل حدة، عانت بعض الفئران من التهاب الجلد النكس في 16 أسبوعا ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يمكن تكييفها لدراسة الفيزيولوجيا المرضية الإعلانية البروتوكول الموصوفة هنا لتنظيم دورات تعريفية لأعراض تشبه الإعلانية في الفئران واستخدامها كأداة لفحص لاختبار المخدرات. يمكن تطبيق هذا الصك للتعرض لكرة القدم الغازية للفئران التي تعامل كبخاخات لتقييم آثار التعرض لمختلف الغازات في نماذج حيوانية متنوعة.

نموذج الإعلانية كبخاخات علاج الأطفال حديثي الولادة يعتمد على إجراء بسيط أكثر من النماذج التاتبيه الأخرى مثل دنكب العلاج النموذجي9 وابيكوتانيوس التوعية النموذجي

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

هذا البحث وأيده "الصالح العام" & برنامج أبحاث السلامة عن طريق الوطنية بحوث مؤسسة من كوريا (جبهة الخلاص الوطني) الممولة من وزارة التعليم والعلوم والتكنولوجيا (جبهة الخلاص الوطني-2014M3C8A5030612)، وتدعمها تشونغ يانغ، تشأ يونغ الشمس، دكتوراه في الطب وجانغ مرحبا التذكارية سا يو جو الصندوق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
منظم الأكسجين الطبيYuyao Jiahua الصانع الطبيلن يؤثر على النتائج
لن تؤثر الشركة المصنعةللأنبوب
الشركة المصنعةغرفة الأكريليكTaejin
الشركة المصنعةللأكريلTaejin
لن تؤثر الشركة المصنعة158127 Sigma
تؤثر الشركة المصنعةلفيلم WrapeUniwrap
تؤثر الشركة المصنعةCapsaicinSigmaM2028
الشركة المصنعةل Tween 80SigmaP4780
لكاميرا الفيديو الرقميةSonyHDR-CX380y تؤثر على النتائج
تؤثر الشركة المصنعةللأدويةIsoflurane
على النتائج لن تؤثر للأكريليك على النتائج لن تؤثر على النتائج على النتائجلن على النتائج لن على النتائج لن تؤثر على النتائج لن تؤثر الشركة المصنعةلن JW على النتائج

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Geha, R. S. Allergy and hypersensitivity. Nature versus nurture in allergy and hypersensitivity. Curr Opin Immunol. 15 (6), 603-608 (2003).
  2. Novak, N., Bieber, T., Leung, D. Y. Immune mechanisms leading to atopic dermatitis. The J Allergy Clin Immunol. 112 (Suppl 6), S128-S139 (2003).
  3. Back, S. K., et al. Chronically relapsing pruritic dermatitis in the rats treated as neonate with capsaicin; a potential rat model of human atopic dermatitis. J Dermatol Sci. 67 (2), 111-119 (2012).
  4. Jin, H., He, R., Oyoshi, M., Geha, R. S. Animal models of atopic dermatitis. J Invest Dermatol. 129 (1), 31-40 (2009).
  5. Han, R. T., et al. Formaldehyde-Induced Aggravation of Pruritus and Dermatitis Is Associated with the Elevated Expression of Th1 Cytokines in a Rat Model of Atopic Dermatitis. PLOS ONE. 11 (12), e0168466(2016).
  6. Xu, B., Aoyama, K., Takeuchi, M., Matsushita, T., Takeuchi, T. Expression of cytokine mRNAs in mice cutaneously exposed to formaldehyde. Immunol Lett. 84 (1), 49-55 (2002).
  7. Kim, J. Y., Jeong, M. S., Park, K. Y., Seo, S. J. Aggravation of atopic dermatitis-like symptoms by consecutive low concentration of formaldehyde exposure in NC/Nga mice. Exp Dermatol. 22 (3), 219-221 (2013).
  8. Laske, N., Niggemann, B. Does the severity of atopic dermatitis correlate with serum IgE levels? Pediatr Allergy Immunol. 15 (1), 86-88 (2004).
  9. Fujii, Y., Takeuchi, H., Sakuma, S., Sengoku, T., Takakura, S. Characterization of a 2,4-dinitrochlorobenzene-induced chronic dermatitis model in rats. Skin Pharmacol Physiol. 22 (5), 240-247 (2009).
  10. Sugimoto, T., Xiao, C., Ichikawa, H. Neonatal primary neuronal death induced by capsaicin and axotomy involves an apoptotic mechanism. Brain Res. 807 (1-2), 147-154 (1998).
  11. Saito, A., et al. Characterization of skin inflammation induced by repeated exposure of toluene, xylene, and formaldehyde in mice. Environ Toxicol. 26 (3), 224-232 (2011).
  12. Jung, W. W., et al. Formaldehyde exposure induces airway inflammation by increasing eosinophil infiltrations through the regulation of reactive oxygen species production. Environ Toixcol Pharmacol. 24 (2), 174-182 (2007).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

conceito IgE IL 4 IL 13

مقالات ذات صلة