يوضح هذا المقال نموذج مورين لدراسة وضع تضخم ميوينتيمال (MH) بعد إصابة البالون الابهري.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
يوضح هذا المقال نموذج مورين لدراسة وضع تضخم ميوينتيمال (MH) بعد إصابة البالون الابهري.
من الضروري استخدام نماذج حيوانية لفهم أفضل لمتولي حسن، أحد الأسباب الرئيسية لتضيق الشرايين. في هذه المقالة، نبدي نموذج تعرية بالون مورين، وقابلة للمقارنة مع نماذج إصابة السفينة الراسخة في الحيوانات الكبيرة. نموذج تعرية الشريان الاورطي بالقسطرة البالونية يقلد الإعداد السريرية، ويؤدي إلى تغييرات مماثلة في باثوبيولوجيكال والفسيولوجية. بإيجاز، بعد إجراء شق أفقي في أبدوميناليس الشريان الاورطي، قسطرة بالون سيتم إدراجها في السفينة، وتضخم، وعرض ريتروجراديلي. تضخم البالون سيؤدي إلى إصابة البطانية والذي من السفينة. بعد إزالة القسطرة، سيتم إغلاق شق الابهري مع غرز واحد. النموذج الموضح في هذه المقالة استنساخه، من السهل القيام به، ويمكن أن تنشأ بسرعة وبشكل موثوق. ومناسبة خاصة لتقييم تكلفة العوامل العلاجية التجريبية، التي يمكن تطبيقها بطريقة اقتصادية. باستخدام الماوس خروج المغلوب سلالات مختلفة، يمكن تقييم تأثير جينات مختلفة في التنمية MH.
وقد تضيق الشرايين في الشرايين التاجية والطرفية لها أثر كبير على معدلات الاعتلال والوفيات بين المرضى1. هو إحدى الآليات المرضية الكامنة وراء تضخم ميوينتيما (MH)، التي تتسم بزيادة الانتشار والهجرة وتوليف البروتين المصفوفة خارج الخلية من الخلايا (SMC) العضلات الملساء والأوعية الدموية2. SMC تقع في طبقة وسائط الإعلام من السفينة وتهاجر إلى التحفيز على سطح التجويف. وتشمل عوامل النمو، السيتوكينات، وخلية خلية الاتصال، الدهون، عناصر المصفوفة خارج الخلية، والقص الميكانيكية إشارات محفزة وتمتد القوات3،4،،من56. الإصابات الناجمة عن الجدار السفينة، مرضية أو علاجية المنشأ، تتسبب الخلايا البطانية وتلف الخلايا العضلية الملساء وتحفيز ردود الفعل الملتهبة، ويؤدي بالتالي إلى MH7.
نماذج حيوانية مختلفة متاحة حاليا لدراسة إصابات الشرايين وتضخم ميوينتيما. الحيوانات الكبيرة مثل الخنازير أو الكلاب لديها ميزة مشاركة الشريان مماثلة وتشريح الشرايين التاجية مع البشر، وهي مناسبة خاصة للتحقيق في أساليب وإجراءات وأجهزة قسطرة8دراسات. بيد النماذج خنزير يكون العيب من أعلى ثرومبوجينيسيتي9،10، بينما الكلاب لا تملك إلا استجابة معتدل للسفينة إصابة11. وبالإضافة إلى ذلك، تتطلب كافة نماذج حيوانية كبيرة المساكن الخاصة والمعدات والموظفين، التي ترتبط بارتفاع التكاليف ولا تتوفر دائماً في مؤسسة. وتشمل نماذج حيوانية صغيرة الجرذان والفئران. مقارنة بالجرذان، الفئران لها مزايا انخفاض التكلفة ووجود مجموعة متنوعة من ضرب نماذج. يمكن أن يكون النموذج المبين في هذا الفيديو جنبا إلى جنب مع الذين-/--الفئران التي تتغذى على اتباع نظام غذائي غربي لتقليد عن كثب وضع قسطرة في سفن تصلب الشرايين12السريرية. النماذج السابقة الناجمة عن إصابة الأوعية الدموية عبر أسلاك إصابة13أو جفاف السوائل14، ربيع15أو الكفة إصابة16. نظراً لطبيعة الضرر الذي سوف تؤثر بشكل كبير على التنمية والدستور من MH، استخدام قسطرة بالون للحث على إصابة السفينة هو أفضل طريقة لمحاكاة الإعداد السريرية.
في هذا المقال يصف لنا طريقة جديدة لحمل MH مع قسطرة بالون في الفئران. يسمح استخدام قسطرة البالون (1.2 مم × 6 مم) مع منفذ RX (الشكل 1A) كشط طبقة إينتيمال، وفي الوقت نفسه، تحريض الذي السفينة. كل من هذه العوامل مشغلات هامة لتطوير MH. وقت الملاحظة لهذا النموذج هو17من 28 يوما.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الحيوانات تلقي الرعاية الإنسانية امتثالا لدليل "المبادئ الحيوانات المختبرية"، أعد المعهد "مختبر الموارد الحيوانية"، ونشرت من قبل "المعاهد الوطنية للصحة". كافة البروتوكولات الحيوان بموافقة السلطة المحلية المسؤولة ('' Amt für Gesundheit und فيربراوتشيرشوتز، هانزستات (مكتب للصحة وحماية المستهلك) هامبورغ '').
1. إعداد قسطرة
ملاحظة: تشير إلى جدول المواد للحصول على معلومات فيما يتعلق بالقسطرة.
2. إعداد الماوس
3-التشريح المرضى
4-الفلورة الفحص المجهري
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
تعرية بالون نموذج مناسب لدراسة تطور MH في الفئران. الحيوانات التعافي تماما من الجراحة وإظهار حالة بدنية ممتازة بعد انتهاء عملية. قمنا بإنشاء هذا النموذج في الفئران 50 مع أقل من معدل الوفاة 3% بسبب العملية الجراحية. 1B الأرقام ج- إظهار الخطوات الجراحية الرئيسية. بعد شق جلد على طول لينيا ألبا، تحديد أبدوميناليس الشريان الاورطي. وضع المشابك ميكروسورجيكال (الشكل 1B). جعل شق صغير في منتصف الشريان الا...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
هذا المقال يوضح نموذج مورين لدراسة وضع تضخم ميوينتيمال ويتيح استكشاف العمليات المرضية الكامنة، واختبار أدوية جديدة أو الخيارات العلاجية.
أن الخطوة الأكثر أهمية في هذا البروتوكول هو تعرية للشريان الاورطي. ينبغي إيلاء عناية خاصة أثناء هذه الخطوة تعرية المفرط يؤدي إلى تشكيل الأوعية الدموية وفشل النموذج. من ناحية أخرى، إذا كان يتم إجراء تعرية غير كاف، ستضع ميوينتيما قليلة جداً. ولذلك، كثافة الخطوة تعرية حاسمة بالنسبة لنتائج ونجاح هذا النموذج الحيواني.
وفيما يتعلق بالعمل...
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
يشكر المؤلفون بهرمان كريستيان للمساعدة التقنية لها.
وأيد جاف مؤسسة القاضي ماكس. T.D. تلقي المنح من مؤسسة كرنر آخر (2012_EKES.04) والألمانية الأوقيانوغرافية (DE2133/2-1_. س. س. وتلقى المنح البحثية من الأوقيانوغرافية الألمانية (DFG؛ SCHR992/3-1، SCHR992/4-1).
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| 10-0 خياطة إثيلون | إيثيكون | 2814G | |
| 3 مل حقنة | BD طبية | 309658 | |
| 37٪ حمض الهيدروكلوريك | سيجما ألدريتش | H1758 | |
| 5-0 خياطة البرولين | إيثيكون | EH7229H | |
| 6-0 خياطة البرولين | إيثيكون | 8706H | |
| حمض فوكسين | سيجما ألدريتش | F8129-25G | |
| محلول استرجاع المستضد | Dako | S1699 | |
| Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| مرهم العين والأنف | Bayer | 1578675 | مرهم العين |
| محلول البيتادين | Betadine Purdue Pharma | NDC: 67618-152 | |
| C57BL / 6J | رقم المخزون 000664 | ||
| قضيب المشبك | أدوات العلوم | الدقيقة 18056-14 | JAW DIMS: 4 × 0.75 مم الطول: 13 ملم |
| كولاجين 3 | abcam | ab7778 | الجسم المضاد |
| DAPI | Thermo Fischer | D1306 | |
| الحمار المضاد للماعز IgG AF555 | Invitrogen | A21432 | الجسم المضاد الثانوي |
| الحمار المضاد للأرانب IgG AF488 | Invitrogen | A21206 | الجسم المضاد الثانوي |
| الحمار المضاد للأرانب IgG AF488 | Invitrogen | A11055 | الثانوي الأجسام المضادة |
| الحمار المضادة للأرانب IgG AF555 | Invitrogen | A31572 | الجسم المضاد الثانوي |
| الإيثانول 70٪ | Th. Geyer | 2270 | |
| الإيثانول 96٪ | Th. Geyer | 2295 | |
| الإيثانول المطلق | Th. Geyer | 2246 | |
| FAP | abcam | ab28246 | ملقط الأجسام المضادة |
| أدوات العلوم | الدقيقة11251-20 | ||
| ملقط قياسي | أدوات العلوم الدقيقة | 11023-10 | |
| حمض الخليك الجليدي | سيجما ألدريتش | 537020 | |
| ماكينة قص الشعر | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
| Heparin | Rotexmedica | PZN 3862340 | 25.000 IE / مل |
| طقم كي بدرجة حرارة عالية | Bovie | 18010-00 | |
| Image-iT FX Signal Enhancer | Invitrogen | I36933 | حل حجب |
| أخضر فاتح SF | Waldeck | 1B-211 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| المشبك الجراحي | الدقيق أدوات العلوم الدقيقة | 18055-04 | Micro-Serrefine - 4 مم |
| MINI TREK قسطرة توسيع الشريان التاجي 1.20 مم × 6 مم / Rapid-Exchange | Abbott | 1012268-06U | |
| هيدرات حمض الموليبداتوفوسفوريك | ميرك | 1.00532.0100 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| كلوريد الصوديوم 0،9٪ | B.Braun | PZN 06063042 الفن: 3570160 | |
| حامل إبرة | أدوات العلوم الدقيقة | 12075-14 | |
| Novaminsulfon | Ratioproom | PZN 03530402 | Metamizole |
| Orange G | Waldeck | 1B-221 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| Paraaffin | Leica biosystems | المرجع 39602004 | |
| PBS درجة الحموضة 7,4 | Gibco | 10010023 | |
| PFA 4٪ | علوم المجهر الإلكتروني | #157135S | |
| محلول Ponceau S | Serva Electrophoresis | 33427 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| مخفف الأجسام المضادة الأولية | Dako | S3022 | |
| إطالة حل تركيب الذهب | Thermo Fischer | P36930 | حل تركيب للشرائح الملطخة بالتألق المناعي قابل |
| للاستبدال بطرف ناعم | Bovie | H101 | |
| Resorcin-Fuchsin Weigert | Waldeck | 2E-30 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | كاربروفين |
| أدوات العلوم الدقيقة | 14028-10 | ||
| مقص أدوات العلوم | الدقيقة على غرار Vannas15000-03 | ||
| مخفف الأجسام المضادة الثانوية | Dako | S0809 | |
| لاصق سريع المفعول MINIS 3x1g | UHU | 45370 | Cyanoacrylate |
| Slide | Rack Ted Pella | 21057 | |
| SM22 | abcam | ab10135 | الأجسام المضادة |
| SMA abcam | ab21027 | تلطيخ الأجسام المضادة | |
| تيد بيلا | 21075 | ||
| المجهر الجراحي | Leica | M651 | |
| Tabotamp الرجفان | الليفي Ethicon | 431962 | الشريط |
| 3M | 1527-1 | ||
| U-100 حقنة الأنسولين | BD 324825 | ||
| موسع الأوعية | الدموية أدوات العلوم الدقيقة | 18603-14 | |
| Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
| Weigerts الحديد هيماتوكسيلين كيت | ميرك | 1.15973.0002 | تلطيخ ثلاثي الألوان |
| زيلين | Th. Geyer | 3410 |
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.