التصور إكسون ثالاموكورتيكال المتفرعة والمشبك تشكيل في كوكولتوريس أورجانوتيبيك

Naoyuki Matsumoto; Nobuhiko Yamamoto

doi:10.3791/56553

مقالة منهجية

التصور إكسون ثالاموكورتيكال المتفرعة والمشبك تشكيل في كوكولتوريس أورجانوتيبيك

DOI:

10.3791/56553

⸱

مارس 28, 2018

Naoyuki Matsumoto¹^,² , Nobuhiko Yamamoto²

¹Department of Medical Neuroscience, Graduate School of Medical Sciences, Kanazawa University, ²Neuroscience Laboratories, Graduate School of Frontier Biosciences, Osaka University

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ويصف هذا البروتوكول طريقة لتصوير المتزامن ثالاموكورتيكال إكسون المتفرعة والمشبك تكوين في كوكولتوريس أورجانوتيبيك المهاد وقشرة الدماغ. محاور عصبية ثالاموكورتيكال الفردية وعلى محطات presynaptic هي تصور بتقنية انهانسر خلية مفردة مع دسريد وسينابتوفيسين معلم التجارة والنقل.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تشكيل المتفرعة والمشبك إكسون هي العمليات الحاسمة لإنشاء دوائر الخلايا العصبية الدقيقة. خلال التنمية، وتشكل محاور عصبية حسية ثالاموكورتيكال (TC) فروع ونقاط الاشتباك العصبي في طبقات معينة من قشرة الدماغ. على الرغم من المكانية علاقة متبادلة واضحة بين تشكيل محور عصبي المتفرعة والمشبك، هو غير مفهومة العلاقة السببية بينهما. لمعالجة هذه المسألة، ونحن مؤخرا بوضع طريقة لتصوير المتزامن لتشكيل محاور عصبية TC الفردية في كوكولتوريس أورجانوتيبيك المتفرعة والمشبك.

ويصف هذا البروتوكول أسلوب الذي يتكون من مجموعة من كوكولتوري أورجانوتيبيك وانهانسر. كوكولتوريس أورجانوتيبيك من قشرة الدماغ والمهاد يسهل التلاعب بالجينات ومراقبة العمليات محواري، الحفاظ على هياكل مميزة مثل تكوين الصفحي. والبلازميدات مميزة اثنين ترميز دسريد ومعلم اجفب سينابتوفيسين (ليرة سورية-اجفب) تم transfected شارك في عدد صغير من الخلايا العصبية ثالاميك بأسلوب انهانسر. هذه الطريقة سمحت لنا بتصور مورفولوجيس محواري الفردية TC الخلايا العصبية ومواقعهم بريسينابتيك في وقت واحد. كما مكن الأسلوب المراقبة الطويلة الأمد التي كشفت عن العلاقة السببية بين تشكيل محور عصبي المتفرعة والمشبك.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الإسقاط ثالاموكورتيكال (TC) في الدماغ الثدييات نظام مناسب للتحقيق في إرشادات إكسون واستهداف الآليات. خلال التنمية، وتنمو الحواس TC محاور عصبية في لوحة القشرية، وفروع النموذج ونهايات تفضيلي في طبقة الرابع الابتدائي المناطق الحسية في قشرة الدماغ¹^،². حتى بعد إقامة اتصالات أساسية، يتم تشكيلها محواري العرش ومحطات متشابك تبعاً للتغيرات البيئية³^،⁴. ومع ذلك، غير هو مفهومة كيف يتم تبديل مورفولوجيا إكسون TC بشكل حيوي. أحد الأسباب الرئيسية هو عدم وجود أسلوب كافية لمراقبة التغيرات الهيكلية على مستوى خلية واحدة. على الرغم من أن التطورات الأخيرة في الفحص المجهري، مثل الفحص المجهري اثنين-فوتون، السماح للمراقبة المباشرة لمعيشة الخلايا العصبية القشرية في فيفو، هناك قيود لا تزال التقنية للالتقاط الإجمالي TC المسارات⁵^، ⁶-ولذلك، أساليب في المختبر لتصوير مباشر من محاور عصبية TC سيوفر أدوات قوية لتحليلات الهيكلية لتشكيل محور عصبي المتفرعة والمشبك.

مجموعتنا للمرة الأولى إنشاء أسلوب ثقافة شريحة ثابتة مع نفاذية الأغشية⁷. باستخدام هذا الأسلوب، كان كوكولتوريد شريحة القشرية الفئران مع كتلة ثالاميك حسية، وقد لخص الصفيحة الخاصة TC اتصالات في هذا⁷^،كوكولتوريس أورجانوتيبيك⁸. كذلك وسم متفرق مع بروتين فلوري سمح لنا بمراقبة نمو إكسون TC وفرع تشكيل⁹^،^،من¹⁰¹¹. في الآونة الأخيرة، قمنا بتطوير طريقة جديدة لتصوير المتزامن التفريع والمشبك تشكيل محاور عصبية TC الفردية في أورجانوتيبيك كوكولتوريس¹². تصور TC محاور عصبية ومواقع بريسينابتيك في نفس الوقت، كانت دسريد ومعلم اجفب سينابتوفيسين (ليرة سورية-اجفب) transfected شارك في عدد صغير من الخلايا العصبية ثالاميك انهانسر كوكولتوري أورجانوتيبيك. الأسلوب الحالي يسهل تحليل الخصائص المورفولوجية لمحاور عصبية TC ويسمح بالمراقبة الطويلة الأجل، التي يمكن أن تستخدم لإظهار العلاقة السببية بين تشكيل محور عصبي المتفرعة والمشبك.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

جميع التجارب التي أجريت وفقا للمبادئ التوجيهية التي وضعتها لجان رعاية الحيوان من جامعة أوساكا وجمعية علم الأعصاب اليابان.

1-أورجانوتيبيك كوكولتوريس من قشرة الدماغ والمهاد

ملاحظة: للإجراءات المفصلة، الرجوع إلى الأصل المنشورات⁷^،^،من⁸¹³. وينبغي إجراء جميع الإجراءات تحت ظروف معقمة. وتستخدم الفئران سبراغ داولي (SD) للثقافات العصبية.

الأعمال التحضيرية كواشف
ملاحظة: وحدات التخزين من الكواشف التالية لأحد الفئران الدماغ.
1. تحضير 10 × معدلة N2 الملحق ¹³: الأنسولين (50 ميكروغرام/مل)، البروجسترون (200 nM)، الهيدروكورتيزون (200 nM)، سيلينيت الصوديوم (300 نانومتر)، ترانسفيرين (1 ملغ/مل)، بوتريسسيني (1 ملم)، والسكر (60 ملغ/مل)
2. تحضير المحتوية على مصل الثقافة المتوسطة (10 مل): 85% DMEM/F12، 10% x 10 تعديل N2 الملحق، 5% مصل بقرى الجنين (FBS)
3. تحضير المصل خالية الثقافة المتوسطة (20 مل): 90% DMEM/F12، 10% x 10 تعديل N2 الملحق
4. إعداد الفئران الذيل الكولاجين الحل (0.5 مل). وباختصار، تأخذ الألياف العطاء من ذيل جرذ تحت ظروف معقمة واحتضانها في حل حامض الخليك بين عشية وضحاها. بعد الطرد المركزي، جمع المادة طافية (بضعة ملغ/مل) وتخزينها في ثلاجة¹³.
إعداد أطباق الثقافة
1. مكان إدراج غشاء إلى 35 مم طبق بيتري.
2. إضافة 40-50 ميكروليتر من الفئران الذيل الكولاجين حل للغشاء، ونشر الحل الكولاجين حول المركز.
3. الهواء الجاف للغشاء تماما في هيئة نظيفة.
4. وضع 1.5-2 مل مستنبت المحتوية على مصل في الطبق، حيث أن الغشاء يتم استيعابه بالمتوسط.
5. ضع الصحن الثقافة في حاضنة (37 درجة مئوية والهواء 95% هوميديفيد 5% CO₂) قبل الطلاء.
إعداد شرائح القشرية
1. تعقيم كل الأدوات الجراحية مع الإيثانول 70% لمدة 10 دقائق أو أطول.
2. تشريح الدماغ كله بسرعة من يوم الولادة (ف) 2 الجرذ تحت التخدير المثلج (منغمسين في رقاقات الثلج لبضع دقائق).
3. مكان الدماغ إلى 100 مم طبق بتري يحتوي على 100 مل من البرد هانكس متوازنة الحل الملح.
4. إزالة الأمر بيا من الدماغ مع الملقط غرامة، وقطع شرائح القشرية (300-400 ميكرومتر سمك) من القشرة البصرية وسوماتوسينسوري مع مقص ميكروسورجيكال (للاطلاع على التفاصيل، انظر الشكل 1).
  ملاحظة: وتقدر حجم الشبكات تحت مجهر تقريبا سمك شرائح القشرية.
  ملاحظة: وبدلاً من ذلك، يمكن إجراء شرائح القشرية مع فيبرتوم تحت ظروف معقمة.
5. نقل بضع شرائح القشرية على إدراج غشاء مع ماصة بلاستيك القابل للتصرف.
6. ضبط مواقف الشرائح قرب المركز لإدراج الثقافة مع ماصة باستور مصقول النار (لمزيد من التفاصيل، انظر⁸^،¹³) وإزالة الزائدة المتوسطة من الإدراج.
  ملاحظة: ضبط مستوى المتوسط قليلاً تحت سطح الشرائح الشرائح من تلقي إمدادات كافية من الغاز والمتوسطة على السواء. وهذا أمر حاسم لبقاء الخلية.
7. المحافظة على الشرائح في المتوسط الثقافة المحتوية على مصل في 37 درجة مئوية في بيئة هوميديفيد 95% الهواء و 5% CO₂، والثقافة وحدها لمدة يوم واحد قبل أن يتم أخذ كتلة ثالاميك ووضع بجوار ذلك.
إعداد كتل ثالاميك
1. تعقيم كل الأدوات الجراحية مع الإيثانول 70% لمدة 10 دقائق أو أطول.
2. تخدير الفئران حوامل (الجنينية يوم 15) عن طريق الحقن داخل من بينتوباربيتال (50 مغ/كغ) التي تحتوي على مخدر.
3. تشريح الجنين كل من قرون الرحم، ووضع الأجنة في 100 مم طبق بتري يحتوي على 100 مل من محلول ملح متوازن الباردة هانكس.
4. تحت مجهر، إزالة الدماغ من كل جنين وقص كتل ثالاميك التي تحتوي أساسا على نواة يتناول المعقدة والجانبية (حوالي 0.5 ملم × 3) فينتروباسال⁷ باستخدام مقص ميكروسورجيكال (انظر الشكل 1).
الثقافة والمحافظة على كوكولتوريس أورجانوتيبيك
1. استخدام ماصة باستور، وضع كتلة ثالاميك بجوار سطح البطين الشريحة القشرية التي وضعت على تصفية الأغشية.
2. الحفاظ على كوكولتوريس في الأجلين المتوسط والثقافة التي تحتوي على مصل في 37 درجة مئوية في بيئة هوميديفيد 95% الجوية و شركة 5%₂.
3. تبادل نصف المتوسط مع المتوسط ثقافة خالية من المصل بعد يومين في الثقافة. وبعد ذلك، تبادل المتوسطة كل 2-3 أيام.
  ملاحظة: يجب التحقق من مستوى المتوسط بعد تبادل المتوسطة، كما أنه من المهم لبقاء الخلية.

2-انهانسر

وينبغي إجراء جميع الإجراءات تحت ظروف معقمة.

ملاحظة: أداء انهانسر يوم واحد بعد إعداد كتل ثالاميك لمنع انفصال كتل.

البلازميدات
1. جعل مزيج البلازميدات كما يلي: بكاجس-دسريد 2 ميكروغرام/ميكروليتر؛ بكاج-ليرة سورية-اجفب 3، 5 ميكروغرام/ميكروليتر.
  ملاحظة: تنقية والبلازميدات كلا استخدام مجموعة ماكسيبريب خالية من الذيفان وتذوب في حل هانكس ملح متوازن.
إعداد المعدات انهانسر
يجب أن تكون متصلاً الأجهزة الكهربائية مثل مشجعا وعازل كما هو مبين في الشكل 2.
1. قم بتوصيل مشجعا في المعزل ثنائية الطور.
2. الاتصال قطب كهربائي (سلك فضة قطرها 0.2 مم) إلى محطة سلبية للمعزل.
3. الاتصال قطب كهربائي (سلك فضة قطرها 1 مم) في سلسلة إلى مقاوم Ω 100 ومحطة إيجابية للمعزل.
4. قم بتوصيل مكبر للصوت للذبذبات لرصد ما إذا كان يتم تمرير تيارات كهربائية عبر المقاوم طريق قياس الجهد مع مكبر للصوت.
إعداد الماصات الزجاجية
ملاحظة: تستخدم نوعين من الماصات الزجاجية لقذف الحل بلازميد والتطبيق للنبضات الكهربائية.
1. جعل الماصات من الزجاج الشعيرات الدموية مع ساحبة كهربائي.
2. كسر التلميح ماصة قذف (يجب أن يكون القطر نصيحة 20-50 ميكرومتر).
3. طحن وتلميع غيض ماصة قطب كهربائي مع الصنفرة متبوعاً بالنار وتلميع (يجب أن يكون القطر الداخلي 50-200 ميكرومتر).
  ملاحظة: ينبغي أن يكون تلميح قطب كهربائي مسطحة وناعمة، كما أنها تمس مباشرة الأنسجة.
الداخلي انهانسر
1. الاتصال الماصات قذف وقطب كهربائي المتلاعبين.
2. إدراج ماصة قطب كهربائي سلك فضة (0.2 مم).
3. إرفاق ماصة قذف بحقنه 1 مل مع أنبوب بلاستيكي.
4. تناول > 5 ميكروليتر الحل بلازميد إلى ماصة قذف بشفط المحاقن.
5. وضع كوكولتوري في مرحلة انهانسر، وإدراج مسرى قطره 1 مم في المتوسط الثقافة.
6. ضع ماصة قذف على اكسبلانت ثالاميك.
7. دفع المحاقن يدوياً بعد التلميح يمس سطح كتلة ثالاميك.
  ملاحظة: حول ميكروليتر 0.5 بلازميد عادة ما تستخدم حل كل كتلة ثالاميك واحد.
8. ضع ماصة القطب على كتلة ثالاميك فورا بعد سحب ماصة الإخراج.
9. توصيل النبضات الكهربائية (50-400 μA، القطارات 3 إلى 5 نبضات مربعة 200 1 المدة مرض التصلب العصبي المتعدد في 200 هرتز). رصد السعة وعدد القطارات على الذبذبات.
  ملاحظة: السعة للتيارات الكهربائية يعتمد على القطر الداخلي ماصة مسرى¹³.
10. سحب ماصة القطب والعودة الطبق إلى الحاضنة.
الملاحظة المجهرية
1. وضعت الطبق الثقافة في مرحلة مجهرية مجهر [كنفوكل] تستقيم مزودة بمجموعتين من تصفية اجفب (الإثارة، 488 نانومتر؛ والانبعاثات، 515 نانومتر) ودسريد (الإثارة، 514 نانومتر؛ والانبعاثات، 565 نانومتر).
2. التقاط صور لمقاطع 10-25 بصري في أحجام ميكرومتر-الخطوة 1-7 مع عدسة هدف مسافة طويلة-عامل X 20. تحديد محاور عصبية مسماة يمكن تمييزها على حدة التي تعبر عن كل من دسريد واجفب ليرة سورية.
  ملاحظة: منطقة الملاحظ حوالي 0.7 x 0.7 مم (المقابلة إلى 1024 × 1024 بكسل، أي، بيكسل ميكرومترات 0.68).
3. التقاط الصور كل 24 ساعة للتصوير اليومي. إكمال داخل 10 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، والعودة الثقافات للحاضنة. للتصوير بمرور الوقت الفاصل الزمني القصير، تبقى الثقافة في دائرة ثقافة، التي تحافظ البيئة من هوميديفيد 95% الهواء و 5% CO₂ في 37 درجة مئوية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ووصف التجربة هنا يهدف إلى الكشف عن العلاقة بين تشكيل المتفرعة والمشبك إكسون TC. في نفس الوقت تصور مسارات محواري وموقعا من مواقع presynaptic، واحد أو عدد قليل من الخلايا ثالاميك في كوكولتوريس أورجانوتيبيك تم transfected مع اثنين والبلازميدات ترميز اجفب ليرة سورية ودسريد باستخدام انهانسر. خلال الأسبوع الثاني في الثقافة، كانت المسمى محاور عصبية TC منفردة يمكن تمييزها بوضوح قبل دسريد (الشكل 3). واختيرت محاور عصبية التي عرضت دسريد واجفب ليرة سورية فقط للمراقبة. مح...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

البروتوكول الحالي أيضا أداة قوية لدراسة الجوانب الإنمائية لتزايد محاور عصبية أخرى غير إسقاط ح¹¹. على سبيل المثال، يسمح الجمع بين الثقافة شريحة القشرية وتقنية انهانسر تصور مورفولوجيا محواري الفردية من الخلايا العصبية القشرية وطويلة الأجل الملاحظة⁹^،¹⁸.

باستخدام البروتوكول الحالي، يمكن أيضا أن تحلل أدوار الجينات مثيرة للاهتمام في تشكيل محور عصبي المتفرعة والمشبك بالتعبير المشارك من البروتينات الفلورية والجينات الفا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ونشكر أيضا اليد غابرييل لقراءة نقدية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
DMEM/F12	GIBCO	11320-033
محلول الملح المتوازن هانكس (HBSS)	نيسوي	5905
مصل الأبقار الجنينية (FBS)	Thermo Scientific	SH30396-03	هيكلون
الأنسولين	سيجما	I6634
البروجسترون	سيجما	P8783
هيدروكورتيزون	سيجما & نب سب.	H0888
سيلينيت الصوديوم	واكو نقي الصناعات الكيماوية	192-10843
Transferrin	سيجما	T1147
بوتريسين	سيجما	P5780
جلوكوز	واكو الصناعات الكيماوية النقية	16806-25
أطباق بتري 35 ملم	فالكون	351008
Millicell-CM إدراج	ميليبور	PICMORG50
100 مم أطباق بتري	BIO-BIK	I-90-20	طقم بتري طبق بتري
HiPure Plasmid Maxiprep	Kit Invitrogen	K210006
ماصات بلاستيكية معقمة يمكن التخلص منها	202-IS	ماصات نقل معقمة
		G-1.2	القطر الداخلي ، 1.2 مم
سلك فضي: 0.2 و 1 مم ؛	Nilaco	AG-401265 (القطر ، 0.2 مم) ، AG-401485 (القطر ، 1.0 مم)
1 مل حقنة	Terumo	SS-01T
المحفز ؛	A.M.P.I	ماستر 8
عازل ثنائي الطور	باك للإلكترونيات	BSI-2
مكبر للصوت	أنظمة AM	نموذج 1800
راسم الذبذبات	هيتاشي	VC-6723
مناور	Narishige	SM-15
Micromanipulator	Narishige	MO-10
مجهر مجسم	أوليمبوس	SZ40
العالمي	Olympus	SZ-STU2
	أوليمبوس	LG-PS2 ، LG-DI ، مجتذب القطب الكهربائي HLL301
؛	مجهر Narishige	PC-10
مجهر متحد البؤر	نيكون	الكسوف الرقمي C1 ليزر
x20 الهدف	نيكون	ELWD 20x / 0.45
غرفة الثقافة	Tokai Hit	UK A16-U
Sprague-Dawley (SD) الفئران	اليابان SLC و Nihon-Dobutsu
مقص الجراحة المجهرية	Natsume	ميغابايت -54-1

زجاجية شعرية: OD 1.2 مم Narishige ؛حامل نظام إضاءة

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kageyama, G. H., Robertson, R. T. Development of geniculocortical projections to visual cortex in rat: evidence early ingrowth and synaptogenesis. J. Comp. Neurol. 335 (1), 123-148 (1993).
Lopez-Bendito, G., Molnar, Z. Thalamocortical development: how are we going to get there. Nat. Rev. Neurosci. 4 (4), 276-289 (2003).
Espinosa, J. S., Stryker, M. P. Development and plasticity of the primary visual cortex. Neuron. 75 (2), 230-249 (2012).
Portera-Cailliau, C., Weimer, R. M., De Paola, V., Caroni, P., Svoboda, K. Diverse modes of axon elaboration in the developing neocortex. PLoS Biol. 3 (8), 272(2005).
Holtmaat, A., Svoboda, K. Experience-dependent structural synaptic plasticity in the mammalian brain. Nat. Rev. Neurosci. 10 (9), 647-658 (2009).
Bhatt, D. H., Zhang, S., Gan, W. B. Dendritic spine dynamics. Annu Rev Physiol. 71, 261-282 (2009).
Yamamoto, N., Kurotani, T., Toyama, K. Neural connections between the lateral geniculate nucleus and visual cortex in vitro. Science. 245 (4914), 192-194 (1989).
Yamamoto, N., Yamada, K., Kurotani, T., Toyama, K. Laminar specificity of extrinsic cortical connections studied in coculture preparations. Neuron. 9 (2), 217-228 (1992).
Uesaka, N., Hirai, S., Maruyama, T., Ruthazer, E. S., Yamamoto, N. Activity dependence of cortical axon branch formation: a morphological and electrophysiological study using organotypic slice cultures. J. Neurosci. 25 (1), 1-9 (2005).
Uesaka, N., Hayano, Y., Yamada, A., Yamamoto, N. Interplay between laminar specificity and activity-dependent mechanisms of thalamocortical axon branching. J. Neurosci. 27 (19), 5215-5223 (2007).
Uesaka, N., Nishiwaki, M., Yamamoto, N. Single cell electroporation method for axon tracing in cultured slices. Dev. Growth Differ. 50 (6), 475-477 (2008).
Matsumoto, N., Hoshiko, M., Sugo, N., Fukazawa, Y., Yamamoto, N. Synapse-dependent and independent mechanisms of thalamocortical axon branching are regulated by neuronal activity. Dev Neurobiol. 76 (3), 323-336 (2016).
Matsumoto, N., Sasaki, K., Yamamoto, N. Electroporation Method for Mammalian CNS Neurons in Organotypic Slice Cultures. Electroporation Methods in Neuroscience. , 159-168 (2015).
Molnar, Z., Blakemore, C. Lack of regional specificity for connections formed between thalamus and cortex in coculture. Nature. 351 (6326), 475-477 (1991).
Bolz, J., Novak, N., Staiger, V. Formation of specific afferent connections in organotypic slice cultures from rat visual cortex cocultured with lateral geniculate nucleus. J. Neurosci. 12 (8), 3054-3070 (1992).
Yamamoto, N., et al. Inhibitory mechanism by polysialic acid for lamina-specific branch formation of thalamocortical axons. J. Neurosci. 20 (24), 9145-9151 (2000).
Yamamoto, N., et al. Characterization of factors regulating lamina-specific growth of thalamocortical axons. J Neurobiol. 42 (1), 56-68 (2000).
Ohnami, S., et al. Role of RhoA in activity-dependent cortical axon branching. J. Neurosci. 28 (37), 9117-9121 (2008).
Yamada, A., et al. Role of pre- and postsynaptic activity in thalamocortical axon branching. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (16), 7562-7567 (2010).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

DsRed Syp EGFP

التصور إكسون ثالاموكورتيكال المتفرعة والمشبك تشكيل في كوكولتوريس أورجانوتيبيك

في هذه المقالة

ملخص

الملخص

المقدمة

البروتوكول

النتائج

المناقشة

الإفصاحات

شكر وتقدير

المواد

المراجع

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

مقالات ذات صلة