يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

إنشاء ثقافة الأولية المستمدة من المريض الأنسجة اللينة كابوزي

13.9K مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/56767

⸱

أبريل 11, 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Osteoncology and Rare Tumors Center, Istituto Scientifico Romagnolo per lo Studio e la Cura dei Tumori (IRST) IRCCS, 2Pathology Unit, Morgagni-Pierantoni Hospital, 3Unit of Surgery and Advanced Oncologic Therapies, Morgagni-Pierantoni Hospital

في هذه المقالة

ملخص

ويركز البروتوكول التالي على إنشاء ثقافة الأولية المستمدة من المريض الأنسجة اللينة كابوزي (STS). هذا النموذج يمكن أن تساعدنا على فهم أفضل لخلفية الجزيئية والشخصية الدوائية لهذه الأورام الخبيثة النادرة، ويمكن أن تمثل نقطة انطلاق لإجراء مزيد من البحوث التي تهدف إلى تحسين إدارة STS.

الملخص

الأنسجة اللينة الطويلا (STS) تمثل طائفة من الأورام الخبيثة غير متجانسة مع صعوبة التشخيص والتصنيف، والإدارة. حتى الآن، تم التعرف على أنواع فرعية غذائها أكثر من 50 من هذه الأورام الصلبة نادرة. وهكذا، نظراً لتنوع استثنائي وانخفاض معدل الإصابة، فهمنا لعلم الأحياء من هذه الأورام لا يزال محدودا. وتمثل الثقافات المستمدة من المريض منصة مثالية لدراسة STS الفيزيولوجيا المرضية والصيدلة. وهكذا وضعنا نموذجا الإكلينيكية بشرية من STS بدءاً من عينات الورم حصادها من المرضى الذين يخضعون للاستئصال الجراحي. التي تم الحصول عليها من العينات الجراحية بالهضم كولاجيناز الثقافات الخلية STS المستمدة من المريض ومعزولة عن طريق الترشيح. كانت عد الخلايا والمصنف، وترك لمدة 14 يوما في ثقافات أحادي الطبقة القياسية وثم معالجتها بواسطة تحليل المتلقين للمعلومات. قبل القيام بالتحليلات الجزيئية أو الصيدلانية، أكد إنشاء ثقافات STS الأولية عن طريق تقييم ميزات سيتومورفولوجيك، وعندما تكون متاحة، علامات المناعي. ويمثل هذا الأسلوب أداة مفيدة 1) لدراسة التاريخ الطبيعي لهذه الأورام الخبيثة استكشفت سيئة و 2) لاختبار تأثيرات العقاقير المختلفة في محاولة لمعرفة المزيد عن تلك آليات العمل.

المقدمة

الطويلا الأنسجة الرخوة (STS) وتشمل طائفة آفات غير متجانسة من أصل الوسيطة في حساب 1% من جميع الأورام الصلبة1،2، وتصنيف "منظمة الصحة العالمية" الجديدة تقر بوجود أكثر من 50 3من أنواع فرعية مختلفة. ومن بين هذه هيستوتيبيس الأكثر شيوعاً هي ساركومه adipocyte أو ليبوساركوما و leiomyosarcoma، تستأثر ب 15 في المائة و 11 في المائة من جميع البالغين STS، على التوالي4،5. على الرغم من أن يمكن تطوير STS في أجزاء مختلفة من الجسم، بالحدود القصوى و retroperitoneum هي المواقع الأكثر شيوعاً، والتي تحدث في 60% و 20% من الحالات، على التوالي6.

هو حجر الزاوية في علاج المرض المترجمة الاستئصال الجراحي على نطاق واسع، بينما فوائد العلاج الكيميائي adjuvant ونيوادجوفانت لا تزال غير واضحة، وتعتبر فقط في حالات مختارة7. في إعداد المنتشر، العلاج الكيميائي هو معيار العناية، لكن يظهر نتائج محدودة8. فهم أفضل للبيولوجيا الجزيئية من STS سيساعد على تحسين التشخيص التفضيلية الحالية وتحسين العلاجات المتاحة، وتحديد أهداف جديدة للعلاج.

وقد أجريت بحوث السرطان داخل هذا السياق، لسنوات عديدة باستخدام خلية مخلدة خطوط9. هي عادة مثقف في أحادي الطبقة قياسي يدعم هذه النماذج التجريبية أو مزروع في القوارض العوز إلى إنشاء نماذج في فيفو إكسينوجرافت10. تمثل الخطوط خلية مخلدة يمكن التحكم فيها وسهلة لتخزين مواد التي يمكن أن يؤديها على عدد كاف من تجارب بحثية. هي، في الواقع، الأقل كلفة والأكثر استخداماً أداة في الدراسات الإكلينيكية11.

ومع ذلك، نماذج سرطان الخلية-خط أساس لها أيضا بعض القيود والثقافة مثلاً لفترات طويلة في ظل نظام أحادي الطبقة جنبا إلى جنب مع عدد متزايد من الممرات يستحث المظهرية والانجراف الجينية، صنع خلايا أقل احتمالاً أن الخص الورم الرئيسية ميزات. وعلاوة على ذلك، تفشل الثقافات خط الخلية لإنتاج خلية إلى التفاعل والحديث المتبادل جزيء مما يشير إلى أن تقليد السلوك البيولوجي للأورام وتميز وورم المكروية. هذه القضايا تشكل الأساس للفجوة القائمة بين النتائج السريرية والاكلينيكية12.

وفي ضوء ما ورد أعلاه، ازداد الاهتمام بالثقافات الأولية المستمدة من المريض13. في الواقع، ختان الأنسجة الخبيثة والعادي يقلل من خطر فقدان سرطان الخلية النمط الظاهري وعدم التجانس، مما يتيح انطلاق المواد التي أكثر تمثيلاً لورم المكروية. وعلاوة على ذلك، استخدام عينات الورم الطازجة المحصودة من المرضى الذين يخضعون للعمليات الجراحية استئصال يتيح لنا للتحقيق في واحد من الأورام ومقارنة آفات مختلفة من نفس الجزء من جسم المريض14. للأسباب المذكورة أعلاه، تقدم الثقافات الخلية المستمدة من الأنسجة مادة قيمة لدراسة الأورام الفيزيولوجيا المرضية والصيدلة15،16،17، لا سيما في STS في خطوط الخلايا ساركومه المتاحة تجارياً التي هي محدودة18. وبالتالي نحن الأمثل طريقة لإنشاء ثقافة خلية الابتدائية STS المستمدة من المريض بدءاً من الورم جراحيا قصت الأنسجة13،،من1920. لدينا أسلوب يتكون من تصنيف الورم العينة إلى أجزاء صغيرة من أنسجة متبوعاً بتفكك النسيج الانزيمية بين عشية وضحاها الحصول على تعليق خلية مفردة. في اليوم التالي، توقفت عملية الهضم الأنزيمي بإضافة وسائل الإعلام ثقافة جديدة وتعليق التي تم الحصول عليها تم تصفيته لإزالة شظايا الأنسجة والخلية-المجاميع، والمواد الزائدة المصفوفة أو الحطام. وأخيراً، جزء خلايا السرطانية المعزولة سيتوسبينيد على الشرائح الزجاجية، ثابتة وتخزينها لتحليل المتلقين للمعلومات الرامية إلى تأكيد إنشاء ثقافة STS الأولية سيتومورفولوجيكال والمناعي والتقييم الخلوية الوراثية الجزيئية (مثل السمك في تحليل التضخيم MDM2 يمثل تشخيص التفاضلية القياسية ليبوساركوما جيدا متمايزة وليبوساركوما ديديفيرينتياتيد) 4-الخلايا المتبقية هي المصنفة إلى ثقافة أحادي الطبقة قياسية للدراسات التنميط والدوائي التعبير الجيني. جميع التجارب التي تتم باستخدام منخفض ممر الثقافات الأولية لتجنب اختيار سوبكلونيس السرطان محددة، وتحليلها من قبل الطبيب الشرعي ساركومه ذوي خبرة. وهكذا أنشأنا بشرية الكامل STS السابقين فيفو نموذج13،،من1920. هذا تنوعاً عاليا، وسهلة للتعامل مع نموذج يمكن أن يمثل أداة مفيدة لأنواع مختلفة من البحوث الإكلينيكية، مثل تحديد واسمات جزيئية جديدة للتشخيص والتشخيص أو للحصول على فهم أعمق لنشاط وآليات عمل موحدة وجديدة من العقاقير المستخدمة في إدارة STS.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

خلايا STS يتم عزل من ورم قداس جراحيا اقتطعت من المرضى مع STS. البروتوكول وافقت عليه "اللجنة المحلية للأخلاقيات" وتتم وفقا للمبادئ التوجيهية "الممارسة السريرية الجيدة" و "إعلان هلسنكي". وأعطى جميع المرضى الموافقة الخطية على المشاركة في الدراسة. تحليلها من قبل الطبيب الشرعي ساركومه ذوي خبرة العينات الجراحية ومعالجة في غضون 3 ساعات جراحة.

1-الورم جمع العينات وتجهيزها:

  1. جمع عينات الورم بمساعدة أخصائي ساركومه في حاوية بول معقم 100 مل مع 50 مل من دميم الجلوكوز منخفضة متوسطة مختومة مع فيلم بارافين.
  2. تخزين العينات في 4 درجات مئوية لمدة أقصاها 3 ح بعد استئصال الورم.
  3. تنفيذ كافة الخطوات التالية تحت غطاء زراعة الأنسجة عقيمة.
    1. تعقيم هود مع الإيثانول 70% وارتداء قفازات معقمة.
    2. تعقيم الملقط اينوكس الصلب مع 70% إيثانول (استخدم شاش معقم).
    3. إزالة الفيلم البارافين من الحاوية البول وتجاهل.
    4. أغسل الخارجي للحاوية البول مع الإيثانول 70%.
    5. افتح طبق بتري مربعة.
    6. فتح حاوية البول ونقل العينات ورم في طبق بتري مربعة استخدام الملقط المعقم اينوكس الصلب.
  4. تغسل العينات الورم مع برنامج تلفزيوني مرتين.
  5. فتح مشرط جراحة معقمة.
    1. ناعما اجاد عينات الورم أربا3 1-2 مم.
    2. جمع ربع مجموع العينة في أنبوب 2 مل.
    3. أضف 1 مل كاشف تريزول (شراء) للأنبوب وتجمد فورا في-80 درجة مئوية (سيتم استخدام العينة في تحليل المتلقين للمعلومات لتقييم التعبير الجيني STS).
  6. جمع بقية المواد تمزيقه ناعما ورم في أنبوب 15 مل.
    1. إضافة 4 مل كولاجيناز النوع الأول من الحل (نوع كولاجيناز أنا يتم حله في برنامج تلفزيوني، بتركيز 4 ميكروغرام/مل).
    2. تمييع كولاجيناز النوع الأول من الحل مع 4 مل وسائط الثقافة العالية دميم (التركيز النهائي من نوع كولاجيناز 2 ميكروغرام/مل).
    3. أغلق أنبوب 15 مل وختم مع الفيلم البارافين.
    4. وضع أنبوب 15 مل شاكر متداول في حاضنة في 37 درجة مئوية في ظروف التحريك لمدة 15 دقيقة لتنشيط الهضم.
    5. وبعد 15 دقيقة تخزين الأنبوب في شاكر المتداول تحت إثارة الأوضاع في درجة حرارة الغرفة بين عشية وضحاها.
  7. وفي اليوم التالي وضع أنبوب 15 مل تحت غطاء محرك السيارة العقيمة.
  8. تصفية تعليق خلية بلطف من خلال عامل تصفية عقيمة 100 ميكرومتر تعلق على الجزء العلوي من أنبوب 50 مل.
  9. يجب غسل الفلتر مع دميم وسائل الإعلام ثقافة عالية وتستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين والجلوتامين 1% و 1% البنسلين/ستربتوميسين.
  10. تجاهل عامل التصفية عقيمة 100 ميكرومتر، إغلاق أنبوب 50 مل وأجهزة الطرد المركزي في 225 x ز لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة.
  11. تجاهل المادة طافية بعكس الأنبوب.
  12. إعادة تعليق الخلايا مع 1-2 مل دميم عالية الثقافة الإعلامية تستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين والجلوتامين 1% و 1% البنسلين/ستربتوميسين.
    ملاحظة: الحجم يعتمد على حجم الورم العينة المجهزة.
  13. عد الخلايا بدائرة نويباور.
    1. تمييع عينة 1:2 في تريبان الأزرق واستخدم 10 ميليلتر من إضعاف لعد الخلايا.
    2. الاعتماد على الأقل مرتين وحساب متوسط replicates معرفة متوسط إجمالي عدد الخلايا التي تم جمعها.
  14. لوحة الخلايا في ثقافة أحادي الطبقة قياسية في كثافة 80,000 الخلايا/سم2.
    ملاحظة: تتضمن عناصر التحكم دائماً في التجارب. أداء replicates التقنية على الأقل 3 لكل شرط. أداء replicates البيولوجي 2 على الأقل. للصيدلة السريرية والتعبير الجيني وبروتين تعبير تحاليل، تجارب ينبغي أن يتم مع عدد قليل من الممرات الثقافة في غضون 30-45 يوما من الخلية البذر لتجنب فقدان السرطان تعمل الخلية.
  15. إعداد عينة الخلوية.
    1. جمع الخلايا 100,000 في 200 ميليلتر من دميم وسائل الإعلام ثقافة عالية وتستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين والجلوتامين 1% و 1% البنسلين/ستربتوميسين.
    2. ماصة الحل (200 ميليلتر ماصة) إلى قمع المتاح مجهزة بمرشح ومزودة بشريحة زجاجية.
    3. فتح في سيتوسينتريفوجي وتدرج العينات.
    4. تشغيل في سيتوسينتريفوجي في 18.6 g x لمدة 20 دقيقة.
    5. تجاهل القمع مزودة بعامل التصفية.
    6. تحديد الشرائح في الأسيتون لمدة 10 دقائق تليها كلوروفورم لمدة 5 دقائق.
    7. تخزين الشرائح عند-20 درجة مئوية.
      ملاحظة: ذوبان الجليد وهيدرات العينات قبل التلوين وأداء تلطيخ اتباع إرشادات الشركة المصنعة. إعداد replicates التقنية 3 على الأقل.

2-STS خلية الثقافات:

  1. تغيير الوسائط مرة واحدة في أسبوع (دميم عالية الثقافة الإعلامية تستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين، الجلوتامين 1% و 1% البنسلين/ستربتوميسين).
    1. تجاهل المتوسطة الثقافة باستخدام ماصة ميليلتر 200 1,000.
    2. إضافة جديدة متوسطة جديدة باستخدام ماصة ميليلتر 200 1,000.
    3. مرور الخلية:
      1. فصل الخلايا عند الالتقاء هو حوالي 90%:
        ملاحظة: ينبغي أن يقوم STS خلية ثقافة التضخيم مرة واحدة في أسبوع على أساس شروط الثقافة.
      2. تجاهل المتوسطة وتغسل ببرنامج تلفزيوني وإضافة 2-3 مل التربسين 1 x في برنامج تلفزيوني
        ملاحظة: حجم التربسين المستخدمة يعتمد على كمية الخلايا المزروعة التي تم الحصول عليها.
      3. احتضان خلايا لمدة 3-5 دقيقة عند 37 درجة مئوية.
      4. جمع الخلايا المنفصلة من لوحة باستخدام ماصة ميليلتر 200 1,000.
      5. "الماصة؛" الخلايا المنفصلة في أنبوب 15 مل وإضافة 4 مل من دميم وسائل الإعلام ثقافة عالية وتستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين والجلوتامين 1% 1% البنسلين/ستربتوميسين لوقف رد الفعل الأنزيمي.
      6. الطرد المركزي في 225 x ز لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة.
      7. تجاهل المادة طافية.
      8. إعادة تعليق بيليه الخلية بإضافة 1 مل من دميم وسائل الإعلام ثقافة عالية وتستكمل مع 10% مصل بقرى الجنين والجلوتامين 1% و 1% البنسلين/ستربتوميسين.
      9. بذور الخلايا الموجودة في لوحة ثقافة جديدة أو قارورة مع وحدة تخزين نهائي وفقا لإرشادات الشركة المصنعة.
        ملاحظة: عدم انقسام خلايا أكثر من 1:3.

3-المصب التحليلات:

ملاحظة: مجموعة متنوعة من تجارب مختلفة يمكن أن يتم استخدام هذا النموذج (انظر أدناه). ولذلك، من المهم أن تقرر خلال مرحلة التصميم للدراسة التحليلات التي سيتم تنفيذ ذلك يمكن إعداد عدد كاف من العينات و replicates.

  1. فحوصات الانتشار مثل بروميد 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium MTT
  2. نك أبوبتوتيك فحوصات مثل المحطة الطرفية ديوكسينوكليوتيديل ترانسفيراز (TdT) نهاية الوسم المقايسة (TUNEL)
  3. التحليل المناعي
  4. تحليل التعبير الجيني
  5. تحليل لطخة غربية
  6. تحليل أليسا
  7. خلية تنشيط fluorescence الفرز التحليل (نظام مراقبة الأصول الميدانية)
  8. نموذج إكسينوجرافت في فيفو

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

لقد قمنا بتصميم طريقة بسيطة للحصول على إنشاء ثقافة الأولية المستمدة من المريض الأنسجة اللينة كابوزي وتقرير هنا مثالاً على النتائج التي تم الحصول عليها في أحد هيستوتيبي STS محددة13. البروتوكول كان يستخدم لإنشاء ثقافات الأولية من هيستوتيبيس STS مختلفة بما في ذلك ليبوساركوما جيدا متمايزة، ديديفيرينتياتيد ليبوساركوما، ليبوساركوما ميكسويد، ليبوساركوما بليومورفيك، ميكسوفيبروساركوما، متمايز بليومورفيك الليفي السرقوم ورم خبيث، وفريق دعم المعلومات الجغرافية، ورباطي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

نماذج محددة تحديداً جيدا السريرية ضرورية لتوضيح الخلفية الجزيئية للأورام، والتنبؤ بسوء التشخيص، وتطوير استراتيجيات علاجية جديدة لمرضى السرطان. هذا مهم بشكل خاص لاورام نادرة مثل STS التي تغاير عالية من حيث التشكل، والسلوك العدواني المحتملة، والسريرية التحديات فهمنا للبيولوجيا STS وإدارة المريض21. وعلاوة على ذلك، يحد من خطوط الخلايا ساركومه التجارية القليلة المتوفرة التحقيقات الإكلينيكية في هذه المجموعة من الأورام الوسيطة18. وهكذا تمثل السابقين فيفو نماذج موردا قيماً...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

الكتاب قد لا يوجد تضارب في الكشف عن.

شكر وتقدير

المؤلف يود أن يشكر تيرني Gráinne للمساعدة التحريرية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
DMEM ارتفاع الجلوكوزEuroCloneECB7501L
مصل الأبقار الجنينEuroCloneECS0180D
الجلوتامينجيبكو25030-024
محلول مائي بارافورمالدهيد 4٪ ،علوم المجهر الإلكترونيEM 157-4-100
بنسلين ستربتومايسينجيبكو15140122
كاشف TriazolAmbion Life-Technologies15596018
TrypsinEuroCloneECB3052D
من الدرجة

المراجع

  1. Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. CA Cancer J Clin. 66 (1), 7-30 (2016).
  2. Linch, M., Miah, A. B., Thway, K., Judson, I. R., Benson, C. Systemic treatment of soft-tissue sarcoma gold standard and novel therapies. Nat Rev Clin Oncol. 11 (4), 187-202 (2014).
  3. Fletcher, C. D. The evolving classification of soft tissue tumours - an update based on the new 2013 WHO classification. Histopathology. 64 (1), 2-11 (2014).
  4. De Vita, A., et al. Current classification, treatment options, and new perspectives in the management of adipocytic sarcomas. Onco Targets Ther. 9 (12), 6233-6246 (2016).
  5. Recine, F., et al. Update on the role of trabectedin in the treatment of intractable soft tissue sarcomas. Onco Targets Ther. 10, 1155-1164 (2017).
  6. Ducimetière, F., et al. Incidence of sarcoma histotypes and molecular subtypes in a prospective epidemiological study with central pathology review and molecular testing. PLoS One. 6 (8), 20294(2011).
  7. Nussbaum, D. P., et al. Preoperative or postoperative radiotherapy versus surgery alone for retroperitoneal sarcoma: a case-control, propensity score-matched analysis of a nationwide clinical oncology database. Lancet Oncol. 17 (7), 966-975 (2016).
  8. The ESMO/European Sarcoma Network Working Group. Soft tissue and visceral sarcomas: ESMO clinical practice guidelines for diagnosis, treatment and follow-up. Ann Oncol. 25, Suppl 3 102-112 (2014).
  9. Paul, J. The Cancer Cell in Vitro: A Review. Cancer Research. 22, 431-440 (1962).
  10. Morton, C. L., Houghton, P. J. Establishment of human tumor xenografts in immunodeficient mice. Nat Protoc. 2 (2), 247-250 (2007).
  11. Centenera, M. M., Raj, G. V., Knudsen, K. E., Tilley, W. D., Butler, L. M. Ex vivo culture of human prostate tissue and drug development. Nat Rev Urol. 10 (8), 483-487 (2013).
  12. Vannucci, L. Stroma as an Active Player in the Development of the Tumor Microenvironment. Cancer Microenviron. 8 (3), 159-166 (2015).
  13. De Vita, A., et al. Activity of Eribulin in a Primary Culture of Well-Differentiated/Dedifferentiated Adipocytic Sarcoma. Molecules. 3 (12), 1662(2016).
  14. Failli, A., et al. The challenge of culturing human colorectal tumor cells: establishment of a cell culture model by the comparison of different methodological approaches. Tumori. 95 (3), 343-347 (2009).
  15. Steinstraesser, L., et al. Establishment of a primary human sarcoma model in athymic nude mice. Hum. Cell. 23, 50-57 (2010).
  16. Raouf, A., Sun, Y. J. In vitro methods to culture primary human breast epithelial cells. Methods Mol. Biol. 946, 363-381 (2013).
  17. Daigeler, A. Heterogeneous in vitro effects of doxorubicin on gene expression in primary human liposarcoma cultures. BMC Cancer. 29, 313(2008).
  18. Pan, X., Yoshida, A., Kawai, A., Kondo, T. Current status of publicly available sarcoma cell lines for use in proteomic studies. Expert Rev Proteomics. 13 (2), 227-240 (2016).
  19. Liverani, C., et al. Innovative approaches to establish and characterize primary cultures: an ex vivo. 3D system and the zebrafish model. Biol Open. 15 (2), 309(2017).
  20. De Vita, A., et al. Myxofibrosarcoma primary cultures: molecular and pharmacological profile. Ther Adv Med Oncol. 9 (12), 755-767 (2017).
  21. Blay, J. Y., Ray-Coquard, I. Sarcoma in 2016: Evolving biological understanding and treatment of sarcomas. Nat Rev Clin Oncol. 14 (2), 78-80 (2017).
  22. Dairkee, S. H., Deng, G., Stampfer, M. R., Waldman, F. M., Smith, H. S. Selective cell culture of primary breast carcinoma. Cancer Res. 55 (12), 2516-2519 (1995).
  23. Kar, R., Sharma, C., Sen, S., Jain, S. K., Gupta, S. D., Singh, N. Response of primary culture of human ovarian cancer cells to chemotherapy: In vitro individualized therapy. J Cancer Res Ther. 12 (2), 1050-1055 (2016).
  24. Ravi, A., et al. Proliferation and Tumorigenesis of a Murine Sarcoma Cell Line in the Absence of DICER1. Cancer Cell. 21 (6), 848-855 (2012).
  25. Zhong, X. Y., et al. Effect of vegf gene knockdown on growth of the murine sarcoma cell line MS-K. Cells. 16 (6), 625-638 (2011).
  26. Kidani, T., Yasuda, R., Miyawaki, J., Oshima, Y., Miura, H., Masuno, H. Bisphenol A Inhibits Cell Proliferation and Reduces the Motile Potential of Murine LM8 Osteosarcoma Cells. Anticancer Res. 37 (4), 1711-1722 (2017).
  27. Sugiyasu, K., et al. Radio-sensitization of the murine osteosarcoma cell line LM8 with parthenolide, a naturalinhibitor of NF-κB. Oncol Lett. 2 (3), 407-412 (2011).
  28. Daigeler, A., et al. Heterogeneous in vitro effects of doxorubicin on gene expression in primary human liposarcoma cultures. BMC Cancer. 29 (8), 313(2008).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

MDM2
إنشاء ثقافة الأولية المستمدة من المريض الأنسجة اللينة كابوزي
اتصل بنا
أوصِ بها للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

2026 © حقوق الطبع والنشر MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.